自噬对雄性哺乳动物生殖的影响

自噬是细胞内蛋白质和细胞器降解与循环利用的一种分解代谢过程,参与细胞增殖与分化等各种生物学过程。大量研究表明,自噬与雄性生殖密切相关,特别是精子发生和睾酮分泌,但自噬对雄性生殖是保护还是损伤,以及相关的分子机制仍不清楚。梳理总结了自噬在精子生成和睾酮分泌过程中的作用,并分析了药物诱导自噬对雄性生殖的影响,为自噬相关疾病的治疗,特别是男性不育领域的研究提供了一定的借鉴与见解。

褪黑素对急性铅中毒小鼠卵母细胞体外成熟质量的影响

为探究褪黑素(melatonin)对铅中毒小鼠卵母细胞质量的的影响,以6~8周龄体况相近的ICR雌鼠卵母细胞为研究对象,将其分为5组,分别为生理盐水对照组及4个铅中毒组,并在铅中毒组的卵母细胞体外成熟培养液中分别添加浓度为0、10^(-5)、10^(-7)、10-9mol·L^(-1)的褪黑素,根据第1极体排出率作为体外成熟的标志,筛选出最佳的褪黑素浓度,再检测活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、三磷酸腺苷(ATP)水平,最后通过细胞凋亡试验分析褪黑素对铅中毒卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:体外添加1×10^(-7)mol·L^(-1)的褪黑素能显著降低铅中毒小鼠的ROS水平和早期细胞凋亡率,显著提高第1极体排出率及GSH、ATP含量。综上,在培养液中添加1×10^(-7)mol·L^(-1)的褪黑素能在体外成熟过程中显著改善铅中毒雌鼠卵母细胞的质量。

西施舌精子发生过程的超微结构观察

利用透射电镜研究西施舌精子的发生和结构 ,揭示了从精原细胞逐渐发育为精子过程中细胞形态结构的变化和细胞器的演变规律。精细胞的分化分为 6期 ,主要包括 :核形态由扁圆到圆再到椭圆形 ;核染色质以颗粒状形式凝集 ;高尔基体分泌的前顶体颗粒聚合发育为前顶体囊 ,参与顶体的形成 ;线粒体逐渐融合与发达 ;中心体的移动及鞭毛的形成 ;胞质的逐步减少。成熟精子为原生型 ,由头部、中段和尾部组成。顶体圆锥状 ,高密度的顶体物质集中分布于基部四周 ,呈灯罩状 ;亚顶体腔呈尖锥状 ,内含密度较低的均匀物。细胞核近椭圆形。中段由 4个椭圆形的线粒体和 2个相互垂直的中心粒组成。尾部鞭毛为典型的“9+2”型结构。

锁阳多糖对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢与运动能力的影响

探讨锁阳多糖对运动训练大鼠血睾酮、物质代谢和运动能力的影响,为锁阳多糖在运动医学中的应用提供实验依据.选取SD雄性大鼠40只,体重180～220 g,随机分为安静对照组8只(A组)、运动训练组(B组)16只、运动+锁阳多糖16(C组)只.在最后一次训练后,B和C组分别分成B1、B2和C1、C2两组:B1、C1不进行力竭运动训练组,B2组和C2组进行力竭运动,测定其运动至力竭的时间.A组B1组和C1组在安静状态下同时取材,测定血睾酮等生物化学指标.结果显示:与安静对照组相比,运动训练使大鼠血睾酮含量均有所下降,皮质酮含量上升,运动变化幅度大于运动+锁阳多糖组,运动训练组大鼠血睾酮含量下降29.96%(P<0.01)、皮质酮含量上升25.48%(P<0.01)及T/C值下降44.12%(P<0.01);运动+锁阳多糖组大鼠血睾酮含量下降1.86%(P>0.05)、皮质酮含量上升3.46%(P>0.05)及T/C值下降5.88%(P<0.05).与运动训练组大鼠比较,运动+锁阳多糖组大鼠血睾酮含量上升40.12%(P<0.01)、皮质酮含量下降17.55%(P<0.01)及T/C值上并68.42%(P<0.01);运动+锁阳多糖组大鼠肝糖原、肌糖原的含量高于运动训练组,分别比运动训练组大鼠高30.30%(P<0.01)和27.27%(P<0.05).与运动训练组比较,运动+锁阳多糖组大鼠血尿素含量下降20.55%(P<0.05),肌酐含量高于运动训练组5.33%(P<0.05),血红蛋白(haemoglobin,Hb)含量上升28.72%(P<0.05).运动+锁阳多糖组大鼠运动至力竭的时间比运动训练组延长了27.24%(P<0.05).表明锁阳多糖可以提高运动训练大鼠血睾酮含量,增加糖原、肌糖原贮备,减少蛋白质降解,延长大鼠跑台至力竭时间,具有抗疲劳作用.

嘉庚蛸精子发生的超微结构

应用透射电镜技术研究嘉庚蛸精子发生过程中各阶段细胞的形态、细胞器及细胞核的动态结构变化。精原细胞呈椭圆形,细胞质少、核大,有线粒体、高尔基体等细胞器;初级精母细胞呈圆形或卵圆形,线粒体多,索条状内质网发达,高尔基体常集中分布,中心粒形成;次级精母细胞呈圆形、椭圆形或不规则形,线粒体嵴发达、基质丰富,高尔基囊泡积累电子致密物,中心粒发出的“9+2”轴丝结构形成。精细胞分化过程分为6个时期,主要特点为:①核内染色质凝集经颗粒化、纤维化及片层化,最后,形成高电子密度的均质结构;与此相应,核形态由椭圆形、变成长椭圆形、再变成细长柱状,核后端最后向前凹入形成核内沟;精子核的形态建成为染色质的凝集与核周微管加压协同作用的结果。②高尔基囊泡积累电子致密物、融合发育成顶体囊,逐渐延长演变成钻头形的顶体。③线粒体向核后端迁移,形成精子尾部的线粒体鞘。

绒山羊曲细精管生殖细胞的长期培养和精子发生过程的观察

哺乳动物精子发生过程是生殖生物学的重要研究课题之一.为了开展对山羊精子发生过程的研究,我们首次建立了绒山羊睾丸生殖细胞原代培养方法.原代生殖细胞和支持细胞(Sertolicells)由绒山羊睾丸曲细精管组织块产生,在体外共培养超过三个月.在共培养期间,观察到绒山羊的精原干细胞分化为精母细胞和精子细胞的形态变化过程.这一方法的建立为山羊精子发生过程的研究和应用打下了基础.实验结果显示,在没有添加任何生长因子的条件下,绒山羊睾丸生殖细胞长期增生分化,不断产生精子细胞.这一结果暗示了组织块和共生的支持细胞为生殖细胞的增生和分化提供了营养因子和调节因子.生成的游离精子细胞最后全部死亡,暗示这一共培养体系不能提供变态过程所需因子.

精子发生过程中组蛋白甲基化和乙酰化

精子发生(Spermatogenesis)这一高度复杂的独特分化过程包括精原细胞发育为精母细胞、单倍体精细胞的形成和精子成熟,并以阶段特异性和睾丸特异性基因的表达、有丝分裂和减数分裂以及组蛋白向鱼精蛋白的转变为特征。表观遗传修饰在减数分裂重组、联会复合物的形成、姊妹染色体的结合、减数分裂后精子的变态、基因表达阻遏和异染色质形成过程中发挥着重要作用。其中具有一定组成形式、起抑制作用和/或激活作用的组蛋白甲基化和乙酰化标记,不仅保证了正确的染色体配对和二价染色体的成功分离,并且精确调节减数分裂特异性基因的适时表达。精子发生过程中组蛋白甲基化和/或乙酰化错误会直接影响表观遗传修饰的建立和维持,导致生精细胞异常甚至引发不育。文章旨在对精子发生过程中组蛋白甲基化和乙酰化表观遗传修饰的动态变化及其相关酶的调节机制进行综述,为进一步研究精子发生的表观遗传调控,预防男性不育疾病的发生提供基础资料。

虾夷扇贝人工诱导雌核发育精子遗传失活及紫外线照射对精子形态结构影响的研究

在 1698μWcm 2 s 1的紫外线照射强度下 ,虾夷扇贝雌核单倍体的最佳诱导时间为 60s。从早期胚胎存活率可以观察到Hertwig效应的存在。随着照射时间增加 ,受精率明显下降 ,而受精卵在到达D形幼虫期之前便停止发育。扫描电镜显示 ,随着紫外线照射强度的增加 ,精子顶体和鞭毛结构趋向于受到更大程度的破坏 ,直到完全失去顶体和鞭毛。并指出这可能是造成受精率降低的主要原因。

卵丘细胞及胞外基质诱发中国仓鼠精子顶体反应

为了探讨中国仓鼠（ＣＨＡ）卵丘细胞及其胞外基质（ＣＯＭ）和细胞外基质（ＥＣＭ）对精子获能、顶体反应（ＡＲ）和受精能力的作用，以及ＣＯＭ中何种因子影响上述受精环节，分别采用阿利新蓝８ＧＸ法和放射免疫法（ＲＩＡ）测定ＣＯＭ中糖胺多糖（ＧＡＧ）总量和孕酮（Ｐ４）含量，并以精子穿卵试验（ＳＰＡ）评价精子的受精能力。结果表明：ＣＨＡ精子在ＣＯＭ中ＡＲ率随获能培养时间的延长而增加，呈时间依赖关系。ＥＣＭ是诱发ＣＨＡ精子ＡＲ的主要部位。它含Ｐ４、透明质酸（ＨＡ）和肝素（ＨＥ）等。它们均可引起ＣＨＡ体外获能精子发生ＡＲ，ＡＲ率随Ｐ４和ＧＡＧ剂量而增加，并存在着明显的量效关系。Ｐ４不能引起未获能精子发生ＡＲ，据此，它可以作为一种评价精子是否获能的探针。此外，Ｐ４还可明显地提高ＣＨＡ精子穿卵能力。由此可得出结论，ＥＣＭ中Ｐ４和ＧＡＧ是引起ＣＨＡ精子获能。

棉铃虫(Helicoverpa armigera)幼虫性特征和精子的发生

以棉铃虫精巢为材料,气干法制片,Giemsa染色,研究了棉铃虫精巢的形态变化和精子发生的动态过程。结果表明:棉铃虫的精巢自预蛹期开始会发生融合现象;雄性棉铃虫染色体数目为n=31。还发现雌性幼虫的腹部有4个腺体,可以作为幼虫的性别特征。

牛精子膜SA-30在获能与顶体反应后的定位变化

为了认识精子膜抗原在受精中的作用，利用ＣｏｎＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲合层析，结合ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤的方法，分离出牛精子膜上与ＣｏｎＡ结合的一种分子量约３０ｋＤ的糖蛋白，称为ＳＡ－３０（ｓｐｅｒｍａｎｔｉｇｅｎ－３０）。用ＳＡ－３０免疫新西兰兔制备抗血清，并经硫酸铵粗提，ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ纯化，获得了ＳＡ－３０抗体（ＩｇＧ）。用纯化的抗体对获能前、获能后及顶体反应后的牛精子进行了免疫细胞化学标记。结果表明：获能前ＳＡ－３０位于顶体前区和尾部的质膜上；获能后ＳＡ－３０的定位及标记强度无明显变化；诱导顶体反应后，顶体区的标记减为弱阳性。实验结果提示。

虎斑乌贼喷墨卵与正常卵的比较

为了探明虎斑乌贼喷墨卵对孵化及胚胎发育的影响,采用单因子实验研究了喷墨卵与正常卵的孵化率、培育周期、孵化周期、初孵幼体体质量,并比较了剥膜喷墨卵、剥膜正常卵、喷墨卵、正常卵4种类型卵的幼体生长和存活率。结果显示,虎斑乌贼喷墨卵和正常卵的孵化率无显著差异,喷墨卵的孵化率为90.1%±1.5%,正常卵的孵化率为87.9%±0.7%;两种卵的初孵幼体体质量也无显著差异,喷墨卵的初孵幼体体质量为(0.18±0.01)g,正常卵的初孵幼体体质量为(0.17±0.01)g;两种卵的培育周期、孵化周期均无显著差异,喷墨卵的培育周期为(34.67±0.89)d,孵化周期为(14.33±0.44)d,而正常卵的培育周期为(35.33±0.44)d,孵化周期为(14.67±0.67)d。而剥膜喷墨卵、剥膜正常卵、喷墨卵、正常卵4种类型卵的幼体存活率差异显著,剥膜喷墨卵和剥膜正常卵的存活率明显小于喷墨卵和正常卵,而剥膜喷墨卵和剥膜正常卵之间、喷墨卵和正常卵之间的存活率无显著差异;4种类型的幼体日均增长量和增重量差异显著,剥膜喷墨卵和剥膜正常卵的幼体日均增长量和增重量明显小于喷墨卵和正常卵,而剥膜喷墨卵和剥膜正常卵之间、喷墨卵和正常卵之间的幼体日均增长量和增重量无显著差异。

中华鳖卵子发生与卵黄形成特征

动物卵子形成及卵黄发生的研究多集中于鱼类和两栖类，而对其他动物的实验报道则比较少。不同种类的动物，其卵子发生的形态变化过程存在较大差异。关于爬行动物卵子形成的研究，有鳞目的蜥蜴类和蛇类已有报道，但对龟鳖目卵黄发生的过程描述则很少。

精子发生过程中基因表达转录水平的调控

哺乳动物精子发生于睾丸的生精小管,是一个高度复杂的细胞分裂和分化过程,涉及到错综复杂的基因表达调控过程,包括转录和转录后水平的调控,其中任何一个环节出错都可能导致雄性不育。因此,揭示精子发生过程中的分子调控机理,对发现新的男性避孕方法及治疗不育症有重要意义。文章重点综述了近年有关雄激素及其受体、雌激素及其受体、转录因子和染色质相关因子在精子发生转录水平调控的研究进展。

鱼类性别决定及分化相关基因研究进展

综述了Sox、DMRT、芳香化酶、FTZ-F1、FOXL2、Pod1、GSDF、Fanconi anemia/BRCA等一些与鱼类性别决定及分化相关的基因的研究动态与进展。旨在为系统研究鱼类性别决定机制提供参考。

小鼠卵细胞质内显微注入单精子受精的实验研究

为了探讨提高小鼠卵细胞质内单精子注入受精率的方法，选取鼠龄１２～１４周的健康昆明白小鼠作为精子和卵子的供体，采用ＩＣＳＩ技术，以受精后二细胞卵裂的形成率为指标，了解不同采卵时间、不同微注射针参数及不同培养液对细胞质内单精子注入的影响。结果表明，ｈＣＧ注射后１８～１９ｈ采卵，用针尖内径为４～５μｍ、斜面角度为３５～４０度的微注射针进行ＩＣＳＩ操作，受精后卵子置ＣＺＢ中培养可获得较多的２细胞胚，卵裂率明显高于其余各组（２８．１０％），有高度显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结果提示：恰当的采卵时间。

太湖新银鱼卵巢发育不同阶段个体生化组成和能量密度研究

对丹江口水库太湖新银鱼雌鱼性腺发育不同阶段个体的生化组成和能量密度变化进行研究,以分析性腺发育的物质和能量来源。卵巢8—11月间基本处于Ⅱ期,之后迅速发育;1—3月主要为Ⅳ期或Ⅴ期,4月开始以Ⅵ期个体为主。卵巢发育的Ⅱ期和Ⅲ期,太湖新银鱼全鱼中的生化组成和能量密度随卵巢发育而显著增高。当发育至Ⅳ期时,全鱼和去性腺鱼体中的干物质、粗脂肪、粗灰分相对含量和能量密度仍明显增加,而粗蛋白相对含量在全鱼当中有所减少。由Ⅳ期发育到Ⅴ期时,全鱼中的各生化组成无明显变化,能量密度显著增加;去性腺鱼体中的粗蛋白相对含量显著增加,粗脂肪显著减少,其他生化组成和能量密度无明显变化。产后Ⅵ期,全鱼中的粗脂肪、粗灰分相对含量和能量密度显著下降,干物质和粗蛋白相对含量则显著上升。性腺发育成熟前(Ⅳ期前),去性腺鱼体中的总能量和粗蛋白绝对含量明显增加,而性腺中能量和粗蛋白绝对含量增加不明显,粗脂肪含量的增加明显。由Ⅳ期发育到Ⅴ期时,全鱼中的总能量、粗蛋白和粗脂肪绝对含量均略有增加,主要是由于性腺中能量、粗蛋白和粗脂肪含量的增加,而去性腺鱼体中能量、粗蛋白和粗脂肪绝对含量均明显减少。产后Ⅵ期全鱼中的总能量、粗蛋白和粗脂肪绝对含量均急剧降低。上述结果初步表明太湖新银鱼卵巢发育成熟前在鱼体中储存物质和能量,在卵巢发育成熟时这些储存的物质和能量可能向卵巢转移,成为卵巢发育成熟的主要物质和能量来源。

复方二至天癸颗粒对IVF准备周期子宫内膜Galectin-3的影响研究

目的:观察复方二至天癸颗粒对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)准备周期子宫内膜半乳糖凝集素-3(Galectin-3)表达的影响,从而改善子宫内膜容受性,提高妊娠率的可能机制。方法:按随机数字表法将进入体外受精-胚胎移植(IVF-ET)准备周期的不孕患者分为2组,治疗组31例,对照组31例,分别予复方二至天癸颗粒、复方六味地黄颗粒预处理2个周期,并在第二周期月经第21天,吸取内膜组织少许,检测Galectin-3;同时分别对2组患者肾气阴两虚证候积分变化、临床妊娠率进行评定。结果:2组患者肾虚症候均有改善,治疗组改善更加明显(P<O.05);2组子宫内膜Galectin-3表达比较,治疗组大于对照组(P<O.05);临床妊娠率比较,治疗组大于对照组(P<0.05)。结论:复方二至天癸颗粒提高IVF周期患者临床妊娠率,可能与提高Galectin-3在子宫内膜中的表达,抑制子宫内膜免疫及改善其容受性有关。

番木瓜的大孢子发生与胚囊发育

以番木瓜为材料,采用石蜡切片法研究其大孢子发生和胚囊发育.番木瓜胚珠倒生、具长珠柄、着生在侧膜胎座上,大孢子发育属于蓼型.胚囊发育属蓼型的变异,反足细胞在形成的早期就已退化.成熟的胚囊是五核的,由近珠孔端的卵细胞和2个助细胞以及2个中央极核组成.两性株胚囊在开花前已发育成熟,雄株偶尔开出的两性花胚囊发育相对滞后.

温度对许氏平鲉性腺分化的影响及其机制

本研究以许氏平鲉为实验对象,设置3组不同温度,即高温组(24℃)、对照组(20℃)和低温组(16℃),利用组织切片技术、酶联免疫法(ELISA)和实时荧光定量PCR(q RT-PCR)等技术探究温度对许氏平鲉性腺分化的影响及其潜在机制。结果显示,在40 dpb时,24℃下性腺发育最快,16℃下最慢,24℃、20℃和16℃下雌性率分别为70.0%、42.9%和33.3%。24℃和20℃下,E2在较高水平持续时间较长,T水平在30~35 dpb时急剧降低,16℃下的E2水平迅速下降,35 dpb时T仍处于较高水平,说明在性腺分化期间,温度较高时,E2水平较高,T水平较低,性腺偏雌性发育;反之,性腺偏雄性发育。在24℃下,35~40 dpb时的cyp19a1a mRNA的表达显著上调,可能与高温导致性腺分化偏雌性发育有关;在16℃下,30~50 dpb时ERβ2 mRNA的表达显著下调,说明ERβ2的表达被抑制可能与性腺偏雄性发育有关;24℃和20℃下,foxl2 mRNA的表达在25~35 dpb时处于较高水平,而低温组在30 dpb时表达水平开始上升,说明foxl2在性腺分化早期的高表达水平可能与卵巢分化的速率有关;在30~50 dpb,sox3、sox9和dmrt1的表达水平变化总趋势基本一致,说明三者之间的表达有一定的联系,可能与精巢的分化速率有关。