人体内有机氯农药残留对生殖内分泌的影响研究

目的研究有机氯农药人体内残留对生殖内分泌的影响。方法测定产妇静脉血中有机氯农药残留水平,分组研究其对产妇静脉血和脐带血中激素、胎盘和脐带组织中相关基因mRNA表达水平的影响。结果(1)产妇静脉血促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)和脐带血FSH、黄体生成激素(LH)、E2随着体内有机氯农药残留水平的升高而增高,存在明显的剂量-效应关系;而静脉血LH和脐带血中孕酮随着体内残留水平的升高而下降,也存在明显的剂量-效应关系(P<0.01)。(2)胎盘组织α雌激素受体(αER)、β内啡肽(βEP)、促性腺激素释放激素(GnRH)和脐带组织αER、βEP基因的表达水平也随着有机氯农药体内残留水平的升高而增高,存在明显的剂量-效应关系(P<0.01)。(3)既往不良妊娠结局次数随着体内有机氯农药残留水平的升高而有增加趋势,各残留组与对照组比较差异均有显著性,但高残留组低于中残留组(P<0.01);婴儿平均出生体重各残留组均高于对照组,高残留组与对照组之间差异无显著性,而低、中残留组与对照组比较差异有显著性(P<0.05),且低残留组>中残留组>高残留组。结论有机氯农药体内代谢产物具有干扰内分泌功能,产生生殖和发育毒性作用,在总六六六的残留水平明显高于总DDT的混合暴露作用下,表现为拟雌激素作用为主。

苯并芘诱导人胚肺成纤维细胞cyclinD1、CDK4和E2F-1/4的表达改变

目的建立苯并芘诱导的具有转化细胞部分特征的人胚肺成纤维细胞（T-HELF）模型,并观察T-HELF细胞中cyclin D1、CDK4和E2F-1/4蛋白表达的改变.方法以200、100、50、25、5、1μmol/L的苯并芘处理人胚肺成纤维细胞（HELF）24小时,用噻唑蓝（MTT）比色法测定苯并芘的细胞毒性.根据MTT结果确定以100和200μmol/L苯并芘给HELF细胞染毒3次,染毒结束后培养6周观察细胞的形态变化,培养12周后观察其形态变化及软琼脂中细胞克隆的生长.用流式细胞仪检测T-HELF细胞周期的变化,用Western blot检测T-HELF细胞中cyclin D1、CDK4和E2F-1/4蛋白表达的改变.结果MTT结果显示苯并芘浓度在25～200μmol/L之间时,细胞存活率为78%～80%.苯并芘200μmol/L组染毒4周后细胞死亡.100μmol/L组染毒结束后培养6周,观察到细胞变大,核增大或多核;12周后,在软琼脂中可以生长为细胞克隆,说明HELF细胞具有了转化细胞的部分特征.T-HELF细胞在无血清培养时,细胞周期没有停滞.用Western blot检测发现和正常HELF细胞相比T-HELF细胞的cyclin D1表达明显增加,CDK4、E2F-1和E2F-4的表达没有明显变化.结论建立了苯并芘诱导的具有转化细胞部分特征的人胚肺成纤维细胞模型,可用于苯并芘致癌的分子机制研究.无血清培养时,T-HELF细胞周期没有停滞,和正常HELF细胞相比T-HELF细胞cyclin D1表达明显增加,cyclin D1可能与T-HELF细胞的快速增殖有关.

邻苯二甲酸二丁酯对斑马鱼胚胎发育毒性的研究

目的对成年斑马鱼进行邻苯二甲酸二丁酯(DBP)急性染毒,观察其胚胎发育过程,探索DBP对其胚胎发育的影响。方法选取健康成年斑马鱼80条,雌雄各半,适应性分开饲养1个月后,分别分成4组,给予1250μg/L和625μg/L DBP经水染毒,同时设溶剂(0.01%丙酮)对照组和空白对照组。染毒7天后,按雌雄1∶1的比例交配,在倒置显微镜下观察整个胚胎发育过程,并计算受精率、72h死亡率、仔鱼72h孵化率及出生体重和身长。结果各组的2h受精率的大小如下:空白对照组>丙酮对照组>625μg/L DBP染毒组>1250μg/L DBP染毒组,分别为98.09%、95.76%、95.31%和94.42%。而各组的72h死亡率分别为18.29%、23.34%、49.45%和72.41%,72h孵化率分别为96.43%、82.37%、48.11%和26.79%。染毒组的死亡率高于非染毒组,孵化率低于非染毒组。与正常组和丙酮对照组相比,1250μg/L和625μg/L DBP染毒组胚胎发育明显迟缓,仔鱼身长明显变短,并有统计学差异。暴露剂量越大,身长越短。结论625μg/L以上剂量的DBP染毒能导致斑马鱼胚胎发育迟缓。

羊胎盘活细胞素微量元素和氨基酸组成的分析

通过ICP和HPLC对羊胎盘活细胞素的微量元素和氨基酸组成进行了定量分析 ,证明它含有 14种微量元素 ,其中 8种是人体必需的微量元素 ;含有 16种氨基酸 ,其中必需氨基酸 7种 ,约占总氨基酸的 33 .5 % .表明羊胎盘活细胞素的有效成分种类齐全 ,含量高 ,具有良好的营养价值 ,值得进一步开发应用 .

大蒜素诱导人胃癌SGC-7901细胞M期阻滞及其机制研究

目的:探讨大蒜素诱导人胃癌SGC-7901细胞M期阻滞作用及其机制。方法:以MTT比色法检测人胃癌细胞系SGC-7901细胞的增殖抑制率;采用免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜检测等技术,比较药物处理前后M期细胞占总细胞数百分比的变化,观察细胞微管结构及细胞周期蛋白B1(cyclin B1)在胞内分布的变化,并做荧光定量分析cyclin B1在用药前后量的改变。结果:大蒜素抑制SGC-7901细胞的24h IC50为7.2μg/ml,72h IC50为20μg/ml;经大蒜素处理后,M期细胞占总细胞数的30.61%,明显高于对照组的4.69%(P<0.05)。经大蒜素处理后细胞变小变圆,微管结构消失,胞质模糊;而对照组细胞形态正常,微管结构清晰完整。经大蒜素处理后,胞质中cyclin B1表达升高,并向核内聚集,cyclin B1荧光定量明显高于对照组(P<0.01)。结论:大蒜素可以促进微管解聚,可以提高促成熟因子(MPF)的重要成份cyclin B1在细胞内的表达并促进其向核内转移,使细胞周期阻滞于M期。大蒜素可以作为一种新的作用于M期的抗肿瘤药物应用于临床。

双酚A对植入后大鼠、小鼠胚胎致畸性的体外实验研究

为揭示双酚A(BPA)的发育毒性及其可能的作用机制 ,采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8 5日龄BalB C小鼠胚胎和 9 5日龄大鼠胚胎分别与含BPA的大鼠即刻离心血清共培养 48h(BPA终浓度为 0、40、60、80、10 0mg L) ,观察双酚A对小鼠和大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果显示 ,随着BPA剂量的增加胚胎在体外的生长发育受影响越严重 ,呈现出明显的剂量 -效应及剂量 -反应关系。≥ 60mg L的BPA可诱发小鼠及大鼠胚胎的卵黄囊生长和血管分化不良、生长迟缓及形态分化异常 ,严重者出现体位异常、神经系统、鳃弓发育异常及小眼、小肢芽等畸形。提示在较高剂量下 ,BPA对体外培养的大鼠和小鼠胚胎具有一定的毒性作用 。

母亲和新生儿GSTM1、GSTT1和细胞色素P_(450)1A1基因多态性与早产易感性关系

目的探讨母亲和新生儿GSTM1、GSTT1基因以及细胞色素P4501A1基因多态性对早产的影响。方法采用病例-对照调查方法,应用多重PCR和限制性内切酶PCR(RFLP-PCR)技术对早产母亲和对照母亲以及早产新生儿和对照新生儿GSTM1、GSTT1基因和CYP1A1基因MSPI位点多态性分别进行检测。结果GSTM1、GSTT1基因和CYP1A1基因MSPI位点多态性在早产母亲和对照母亲组中没有显著性差异(P>0.05);以上基因在早产新生儿和对照新生儿组中也没有显著性差异(P>0.05)。GSTM1与GSTT1联合基因型在母亲和新生儿的病例与对照组中也没有显著性差异(P>0.05);GSTT1缺失型和CYP1A1变异型联合基因在早产母亲组与对照母亲组中有显著性差异(χ2=4.683,P<0.05,OR=2.440)。结论携带GSTT1缺失型基因以及CYP1A1变异型基因的母亲,其发生早产的危险性增大。

氟对雄性大鼠下丘脑-垂体-性腺轴内分泌干扰作用的实验研究

目的探讨氟对雄性大鼠下丘脑-垂体-性腺轴生殖内分泌干扰作用。方法选用4～5周龄雄性Wister大鼠36只,体重60～70g。随机分为Ⅰ高氟组(水氟100mg/L)、Ⅱ低氟组(水氟30mg/l)、Ⅲ对照组(纯净水)。8周后处死动物,做精子质量分析,并用放免法测定血清下丘脑、垂体、性腺三个层面生殖激素水平。结果与对照组比较,高氟组动物体重、睾丸及附睾重量均明显下降(P<0.05),低氟组动物体重、睾丸及附睾重量均明显升高(P<0.05);高氟组、低氟组动物右侧睾丸、附睾脏器系数均呈现下降趋势,但差别无统计学意义(P>0.05)。高氟组和低氟组与对照组比较精子密度、精子活率明显下降(P<0.05);高氟组亦明显低于低氟组(P<0.05)。与对照组比较,高氟组精子畸形率明显升高(P<0.05);低氟组精子畸形率有上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。对畸形精子进行分析,发现三组动物精子畸形类型有所不同,高氟组体部及混合畸形比例明显升高(P<0.05)。畸形指数高氟组为1.56,低氟组为1.42。大鼠血清促性腺激素释放激素(GnRH)浓度均值高氟组、低氟组均明显高于对照组(P<0.05);高氟组亦明显高于低氟组(P<0.05)。卵泡刺激素(FSH)浓度均值高氟组、低氟组均明显高于对照组(P<0.05);高氟组亦明显高于低氟组(P<0.05)。间质细胞刺激素(ICSH)浓度均值高氟组、低氟组分别低于对照组,但差异无显著性(P>0.05)。ICSH/FSH比值高氟组、低氟组均明显低于对照组(P<0.05);高氟组亦明显低于低氟组(P<0.05)。血清睾酮(T)均值高氟组明显低于对照组(P<0.05);亦明显低于低氟组(P<0.05)。血清雌二醇(E2)高氟组、低氟组均高于对照组(P<0.05);高氟组亦明显高于低氟组(P<0.05)。T/ICSH比值高氟组、低氟组均明显低于对照组(P<0.05);高氟组亦低于低氟组(P<0.05)。结论氟对雄性大鼠生殖系统的影响作用部位可能不在下丘脑;氟可能影响垂体分泌ICSH功能;T/ICSH更能反映睾丸间质细胞功能的早期变化。氟能影响下丘脑-垂体-性腺轴各层面血清生殖激素水平,因而具有生殖内分泌干扰作用。

人参皂甙Rb1对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的 探讨人参皂甙Rb1对体外培养小鼠胚胎的发育毒性及其毒作用机制。方法 采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8 .5日龄的ICR小鼠胚胎在含有不同浓度人参皂甙Rb1的大鼠即刻离心血清中旋转培养 4 8小时 (Rb1终浓度分别为 0、5、15、30、4 0、5 0 μg ml) ,观察人参皂甙Rb1对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果 随着人参皂甙Rb1浓度的增加 ,反映胚胎生长发育的指标得分和总形态学得分均降低 ;浓度≥ 15 μg ml时 ,卵黄囊生长受抑制 ,血管分化不良 ;浓度较高时 ,可诱发胚胎畸形 ,包括脑部发育异常、体位未翻转、心包腔扩大等 ,严重者可见腹凸。结论 在较高浓度时 ,人参皂甙Rb1对体外培养的小鼠胚胎有一定的毒性作用 ,其中对卵黄囊胎盘结构和功能的影响可能是其发育毒作用的机制之一。

邻苯二甲酸二丁酯宫内和哺乳期染毒对F_1代雄性大鼠的生殖发育毒性

目的 观察邻苯二甲酸二丁酯 (DBP)对F1代仔鼠的发育状况及性成熟期雄性仔鼠生殖系统损害情况 ,并期望得到现有文献中缺如的DBP对F1代仔鼠生殖发育毒性的最大无作用剂量 (NOAEL)。方法 选择在宫内暴露期和哺乳期 (受孕第 2天至仔鼠 2 1天断奶 ) ,通过灌胃方式给母鼠染毒 (DBP终浓度分别为 0、5 0、2 5 0和 5 0 0mg (kg·d) ,观察对仔鼠的影响。结果 DBP对母鼠无明显影响 ,中高剂量组 [2 5 0、5 0 0mg (kg·d) ]对F1代雄性仔鼠的出生体重、每窝活产数、体重增长及雄性仔鼠肛殖距有明显影响 ,对性成熟期雄性仔鼠生殖系统损害尤为严重 ,可观察到小睾丸、附睾发育不全甚至缺失、睾丸未降等现象 ,附睾尾精子参数和睾丸精子头计数及附睾、肝、肾、前列腺的脏器系数明显降低 ,而与激素合成相关的垂体系数却略有上升。低剂量组未观察到有害影响。结论 雄性生殖系统是DBP作用的主要靶器官 ,幼年敏感期所受的损害部分不可逆 ,并得到DBP经口染毒对F1代仔鼠生殖发育毒性的NOAEL为 5 0mg (kg·d)。据此 ,进一步提出DBP经口摄入的参考剂量 (RfD)为 5 0 0 μg (kg·d)。

纳米级与微米级二氧化硅粉尘对小鼠胚胎毒性的比较研究

目的比较研究纳米级(nm-)与微米级二氧化硅粉尘(μm-SiO2)对小鼠胚胎的影响,并观察胚胎Connexin32(Cx32)和Cx40基因有无点突变改变。方法5个实验组(零剂量粉尘组、μm-SiO250mg/m3组、μm-SiO2200mg/m3组、nm-SiO250mg/m3组、nm-SiO2200mg/m3组)共25只雌性小鼠,妊娠0日(E0)至E17日连续呼吸道染尘,观察妊娠期间母鼠体重变化,E18日取出胚胎,观察胚胎发育情况,并采用常规聚合酶链式反应(PCR)、聚合酶链式反应-单链构像多态性(PCR-SSCP)技术对胚胎的Cx32和Cx40基因进行点突变检测。结果E18日,各染尘组的母鼠体重均显著低于对照组;各染尘组的胚胎数、活胎数、胚胎体重显著低于对照组,nm-SiO2200mg/m3组活胎数显著低于nm-SiO250mg/m3组和μm-SiO2200mg/m3组,nm-SiO2200mg/m3组胚胎体重显著低于μm-SiO2200mg/m3组;nm-SiO2200mg/m3组死胎率和吸收胎率均显著高于对照组。Cx32和Cx40基因经检测未发现有突变者。结论SiO2粉尘具有小鼠胚胎毒性,微米级粒子粒径改变为纳米级后,毒性作用增强,且纳米级SiO2粉尘对小鼠胚胎有致死作用。两种粒径的二氧化硅粉体均未发现有致Cx32和Cx40基因点突变。

三代繁殖低硒和低硒低碘大鼠动物模型的建立

目的 建立三代繁殖低硒大鼠动物模型 ,为了进一步系统研究低硒对大鼠脑神经智能、心血管、骨软骨、免疫器官 ,生长发育以及生育、衰老的影响提供研究用动物模型。方法 利用低硒酵母为主要原料人工配制半合成饲料喂养大鼠并连续繁殖到第三代 ,历时一年半。原代动物选用健康断乳后封闭群SD大鼠6 0只 ,体重平均值为 (5 0± 5 )g。作为F0代 ,五组大鼠分别为 1 合成饲料对照组 (硒水平 0 1～ 0 3μg g,碘水平≥ 0 2 μg g) ,2低硒一组 (硒水平 0 0 2 μg g,碘水平≥ 0 2 μg g) ,3 低硒二组 (硒水平 0 0 0 5 μg g ,碘水平≥0 2 μg g) ,4 低碘组 (硒水平 0 1～ 0 3μg g ,碘水平 0 0 4 μg g) ,5 低硒低碘组 (硒水平 0 0 1μg g ,碘水平0 0 4 μg g) ;雌雄分笼饲养。F1、F2、F3的分组为 :取消低硒二组 ,低硒低碘组饲料中硒水平同单纯低硒组、碘水平同单纯低碘组 ,余同原代。雌雄分笼饲养。每代大鼠检测血清硒水平、全血GPX活性 ,血清总T3、T4、TSH水平 ,同时对各代仔鼠生长发育期体重、分娩数、新生鼠存活数等进行了观察。结果 发现人工半合成低硒饲料可持续保持大鼠低硒状态 ,使血清硒值在三代繁殖大鼠中维持低水平 ;全血GPX活性保持低水平 ;低硒大鼠分娩数、新生仔鼠存活率下降 ,体重减?

染氟大鼠血清雌二醇水平与生精细胞端粒酶逆转录酶表达关系的研究

目的了解氟中毒大鼠雌激素水平与生精细胞端粒酶表达的关系。方法将30只雄性SD大鼠随机分为对照组、低剂量染毒组、高剂量染毒组,分别按0、10和20mg/kg体重的染毒剂量隔日腹腔注射氟化钠(NaF)溶液39天后,用放射免疫法测定大鼠血清中雌二醇含量,用原位杂交法检测端粒酶逆转录酶(TERT)表达情况。同时镜检成熟精子质量和睾丸组织病理学改变。结果染毒各组大鼠血清雌二醇含量低于对照组(P<0·05);且随着染毒剂量的增加,雌二醇含量逐渐降低。染毒各组大鼠生精细胞TERT阳性表达率分别低于对照组(P<0·05);且随着染毒剂量的增加,TERT阳性表达率逐渐降低。各染毒组大鼠精子数量和精子存活率低于对照组(P<0·05);精子畸形率高于对照组(P<0·05);随着染毒剂量的增加,精子数量、精子存活率降低(P<0·05),精子畸形率升高(P<0·05)。各染毒组大鼠血清雌二醇含量与生精细胞TERT表达率均呈正相关,低剂量染毒组r=0·941,P<0·01;高剂量染毒组r=0·929,P<0·01。结论NaF很可能是通过雌激素/雌激素受体-端粒酶逆转录酶-精子途径对生殖系统造成损害的,各染毒组大鼠血清雌激素含量与生精细胞TERT表达率呈显著正相关。

PKC对小鼠受精卵发育的调控作用

为研究 TPA及 PKC的反义寡核苷酸对 1 -细胞期鼠受精卵发育的影响 ,采用免疫细胞化学法标记 PKC(α及 β亚型 ) ,并用激光扫描共聚焦显微镜测定卵内 PKC荧光强度 ;同时利用显微注射法注射 PKC的反义寡核苷酸 ,观察其对受精卵分裂的影响 . 1 0 0 μg/ L TPA对 1 -细胞期受精卵的发育具有完全抑制作用 .TPA处理 1 2 h后 ,对照组受精卵停留在 1 -细胞期 ,而未经 TPA处理的1 -细胞期卵可以分裂到 2 -细胞期 .共焦激光显示实验组与对照组相比 ,PKC(α、β亚型 )荧光强度均有下降 (P<0 .0 1 ) .显微注射 PKC antisenseα及 antisenseβ的受精卵 ,分别只有 1 4 .2 %和 3.33%的卵可以发育到 2 -细胞期 .与对照组 (注射 M2培养液 )差异显著 (P<0 .0 1 ) .结果表明 ,(1 ) TPA长期处理 1 -细胞期受精卵 ,抑制 1 -细胞期卵分裂到 2 -细胞期 ;(2 ) PKC的反义寡核苷酸 (α及β亚型 )可以抑制小鼠 1

叶酸对体外胎鼠神经干细胞增殖分化的影响

目的探讨叶酸对体外培养的胚胎大鼠神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法采用无血清悬浮培养方法分离培养NSCs,光镜下观察不同时间点各组NSCs形态变化,并采用MTT法、生长曲线法检测叶酸对细胞增殖和功能的影响。培养6天后用含5%胎牛血清的培养基进行分化培养,于分化第7天用免疫荧光技术做Nestin/BrdU双标染色,共聚焦显微镜下观察,每组随机选择8个非重叠视野,计数做统计处理。结果MTT结果显示,两叶酸干预组NSCs增殖较对照组快(P<0.05),分化后免疫荧光双标试验中,两叶酸干预组NSCs增殖率高于正常对照组,且差异有显著性(P<0.05)。结论叶酸可以在一定程度上增强NSCs的增殖能力,促进NSCs的生长与分化。

人牛精浆蛋白相关新基因的cDNA克隆、定位和表达

为了研究牛精浆 (bovineseminalplasma ,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用 ,寻找BSP蛋白相关新基因 .采用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆了一个BSP蛋白相关基因的cDNA序列 .应用辐射杂种细胞系 (RH)技术进行了基因染色体定位 .通过RT PCR检测了该基因在人体各组织中的表达情况 .并将该基因编码的蛋白进行了原核表达 .新基因的cDNA长度为 10 5 2bp ,其开放阅读框架 (ORF)编码了一个含 2 2 3个氨基酸残基的蛋白质 ,氨基酸序列中含有 4个纤连蛋白Ⅱ结构域 ,与BSP蛋白在结构上具有一定的相似性 ,称其为人BSP相关蛋白 (humanBSP relatedproteins ,HBRP) .该基因定位于染色体 19q13,在大肠杆菌中表达为 5 2kD的融合蛋白 .研究结果提示 ,应用RACE方法克隆了一种新的人类与BSP蛋白相关的基因 ,推测其编码蛋白是与BSP蛋白功能相关的结合蛋白 ,通过基因重组技术大量获得表达蛋白 ,对进一步研究新蛋白的生物学功能具有重要的意义 .

纳米颗粒物对大鼠妊娠结局及其子代近期记忆的影响

目的目的探讨不同化学成分的纳米颗粒物对大鼠妊娠结局及其子代发育的影响。方法将受孕大鼠随机分为4组(纳米碳、纳米氧化锌、纳米碳锌复合颗粒及牛血清对照组),采用气管滴注染毒方式,剂量为7.5mg/kg bw,每天一次,连续5天。待孕鼠自然分娩,记录妊娠率、生产仔鼠数、仔鼠4天存活率及仔鼠行为神经等发育状况。结果纳米氧化锌、碳锌复合颗粒染毒组孕鼠妊娠率分别为57.2%和66.7%,均低于对照组及纳米碳组的100.0%;各组所生产仔鼠均数无显著差异;在哺乳期纳米氧化锌组仔鼠第4、7和21天体重均显著高于其他实验组。水迷宫结果显示,纳米碳锌复合颗粒组在第二、第三潜伏期潜伏时间较其他各组明显增加,纳米碳、纳米氧化锌组的潜伏时间与对照组相比差异无显著性。平面翻正反射、空中翻正反射实验结果与对照组相比差别无显著性。结论该实验条件下,纳米氧化锌对大鼠的生殖有一定的毒性作用,对仔鼠的生长发育有一定的促进作用;纳米碳锌复合颗粒对子代近期记忆有负面影响。

同型半胱氨酸对体外培养大鼠胚胎生长发育的影响

采用着床后体外全胚胎培养方法 ,观察同型半胱氨酸 (homocysteine,HCY)对大鼠胚胎生长发育的影响。将孕 9.5日龄大鼠胚胎移植于 HCY终浓度为 0、0 .15、1.5、2 .0、4.0、6 .0、8.0、10 .0 mm ol/L的全胚胎培养基中 ,于体外培养 48小时 ,观察 HCY对胚胎发育和器官形态分化的影响。结果显示 :HCY可影响大鼠胚胎在体外的生长发育 ,并呈现剂量 -效应关系 ;随着 HCY浓度的增加 ,卵黄囊体积减小、表面皱缩、血管减少及分化程度降低 ;胚胎生长发育迟缓并逐渐加重 ;同时伴有形态分化异常 ,出现多种畸形 ,主要畸形部位为神经系统和心脏等。上述结果提示 :HCY可能对胚胎有直接致畸作用 ,亦可能通过引起卵黄囊功能障碍而导致发育毒性。

妊娠兔胎盘细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的动态变化

以新西兰雌兔为动物模型 ,研究妊娠期间胎盘细胞凋亡及其凋亡调控蛋白Bcl 2和Bax表达的动态变化 .基因组DNA凝胶电泳实验检测到妊娠中期和晚期胎盘基因组DNA中出现典型的凋亡特征———DNA梯带 ,而且DNA断裂值在妊娠早、中、晚期分别为 :0 14、 0 4 9和 1 4 3,与妊娠早期相比 ,妊娠中、晚期胎盘基因组DNA断裂值有显著性增加 .TUNEL实验和活化caspase 3的免疫定位实验表明 ,在妊娠早期胎盘中存在细胞凋亡 ,而且在各妊娠期中细胞凋亡主要发生于合体滋养层 .免疫印迹法分析表明 ,Bcl 2和Bax随妊娠的进行其表达量明显增加 ,Bax∶Bcl 2比值在妊娠早、中、晚期分别为 :0 89,0 91和 1 2 5 ,呈增加趋势 .实验结果说明 ,在兔正常妊娠中 ,胎盘合体滋养层细胞发生凋亡 ,且随妊娠的进行 ,凋亡细胞数量增多 ,胎盘细胞凋亡主要与细胞中Bax∶Bcl 2的比例相关 .

p,p’-DDE和β-BHC联合染毒对孕小鼠生殖及其胎仔发育的影响

目的研究p,p＇-DDE和β-BHC联合染毒对孕小鼠生殖和胎仔发育的影响.方法对孕12～14天小鼠每天联合灌胃不同剂量的p,p＇-DDE和β-BHC（各1、5、10mg/kg bw）,并设植物油溶剂对照组,采用磁性分离酶联免疫法检测孕鼠血清雌二醇（E2）和孕酮（P）含量,RT-PCR检测小鼠胎盘组织中雌激素受体（α-ER）、促性腺激素释放激素（GnRH）和β-内啡肽（β-EP）mRNA表达水平.结果①生殖影响：随染毒剂量加大母鼠子宫剥离重和子宫腔内液增加,子宫着床数减少,胎仔肛殖距和雌雄比增加,孕鼠血清中雌二醇和孕酮水平上升,胎盘组织α-ER和GnRH mRNA表达上调而β-EP mRNA表达下调,且均呈现剂量依赖性关系,差异有显著性（P＜0.05）.②发育影响：随染毒剂量增加孕鼠体重增长减少,肝脏的脏器系数增加,活胎数下降,不良妊娠结局（死胎、吸收胎和畸形数）增多,雌胎数所占比例加大,均呈剂量效应关系,差异有显著性（P＜0.05）.结论p,p＇-DDE和β-BHC可干扰孕小鼠生殖功能,导致生殖和发育障碍,造成雌雄比例失衡.