Mtp53对肿瘤免疫的调控及其在免疫治疗中的应用

p53是人体重要的肿瘤抑制因子,研究发现,p53在近一半的肿瘤中均发生了突变。突变p53(mtp53)发挥着促进肿瘤的作用,在肿瘤免疫中扮演着关键角色。研究证明,mtp53通过多种机制参与机体肿瘤免疫过程中的诸多环节。本文介绍了mtp53的结构和功能,并进一步探讨了mtp53对肿瘤免疫分子机制的调控,重点阐释了mtp53在促进肿瘤免疫逃逸、促进机体氧化应激、调控肿瘤相关炎症信号网络和肿瘤浸润免疫细胞募集以及分化4个方面的分子机制。最后,本文总结了mtp53对肺癌、三阴性乳腺癌和结直肠癌免疫微环境的影响,以及mtp53在癌症PD-1/PD-L1抑制剂治疗中的应用进展,以期为表达mtp53癌症的免疫治疗提供合适的方向和选择。

碳离子束辐射诱变水稻基因突变嵌合体的分子特征

嵌合体是辐射诱变M1代普遍存在的现象,然而,有关水稻的嵌合体突变效应及变异遗传机制尚不清楚。本研究采用靶向捕获测序技术获得碳离子束辐照后的OsNramp5突变嵌合体,并利用10kb液相芯片检测该嵌合体的M1代及突变M2代基因组的SNP/InDel发生及变异遗传分离特征。结果表明:水稻M1代嵌合体中检测到的OsNramp5基因突变位点未遗传至M2代,即在M1代体细胞检测到的突变位点未进入生殖细胞遗传;另外,在M1基因组突变类型中,转换是颠换的2倍,虽然超过一半变异位点遗传至M2代,但很少位点来自基因功能编码区。本研究揭示了碳离子束辐照诱变的体细胞M1代嵌合体的基因组变异特征及其在M2代的遗传特征,为研究碳离子束辐照后的嵌合体突变效应机制和选择诱变育种程序提供参考。

大菊品种花期和主要观赏性状的变异及相关性分析

以菊花(Chrysanthemum×morifolium Ramat.)大菊品种自然群体及7个杂交群体为实验材料,分析比较了不同品种开花期和7个主要观赏性状的变异特点及其相关性,为筛选杂交亲本和选育早花优良品种提供依据。结果显示:大菊自然群体的8个性状中,除开花期外,其余性状变异系数均高于15%;相关性分析结果表明,开花期和封顶叶片数之间呈显著负相关;开花持续期与开花期呈极显著负相关,与舌状花轮数呈极显著正相关。杂交群体的8个性状中,除开花期外,变异系数均高于15%,但各杂交群体的开花期性状变异系数明显高于自然群体;杂交群体Ⅲ和Ⅴ的瓣型与花色更为丰富,且花期也较早。相关性分析结果表明,开花期和瓣型、舌状花轮数、封顶叶片数之间均呈极显著负相关,和花色之间呈显著负相关;开花持续期和舌状花轮数、舌状花数量之间呈极显著正相关,和瓣型之间呈极显著负相关,和花色之间呈显著负相关;开花期和开花持续期之间呈极显著正相关。研究结果表明,通过有性杂交可以获得开花期变异更广泛的子代植株,从而筛选开花期更早的大菊新品种。

香蕉提取物对霍山石斛试管苗壮苗的影响

研究了不同香蕉品种的提取物及其添加方式和质量分数对霍山石斛试管苗壮苗的影响,并对香蕉上清液的可溶性糖质量浓度进行了检测.结果表明:当1/2MS附加质量分数为20%菲律宾香蕉上清液时,对霍山石斛试管苗壮苗的促进作用最佳,而且试管苗可溶性糖质量浓度也最高,附加海南香蕉时促进作用次之,广东芝麻香蕉作用效果最差,这与三种香蕉品种可溶性糖质量浓度高低的检测结果相一致.

利用微卫星标记分析家鸡的群体遗传变异

作者选用 10对微卫星引物分析了 8个家鸡品种 (系 )及两个杂交群体的遗传变异、群体内杂合度 ,并用计算出的遗传距离对 10个家鸡群体进行了UPGMA聚类分析 .试验结果表明 ,微卫星标记具有丰富的多态性 ,所有微卫星的PCR扩增结果全部能重复 .所用 10个微卫星标记平均每对引物可检测 5.4个等位基因 ;微卫星标记可以准确反映 10个试验家鸡群体的真实杂合度 .

陆地棉免打顶对株高和主要经济性状的影响

以陆地棉矮化免打顶突变体及其野生型为材料,运用形态学和统计学方法,对其株高、主茎节间长和主要经济性状进行比较。结果表明,在出苗至现蕾初期,突变体和野生型Ⅰ植株的株高无明显差异,现蕾期后,突变体与野生型Ⅰ的株高差异逐渐明显,且差异显著,但主茎节间数无显著差异;突变体与野生型Ⅰ的籽棉产量和皮棉产量差异极显著,与野生型Ⅱ差异不显著,突变体与野生型Ⅰ、Ⅱ的纤维长度和强度的差异显著。从总体上看,本试验的突变体品系能够满足棉花生产需要。

黄海带鱼、小带鱼RAPD和线粒体16S rRNA基因序列变异分析

对黄海带鱼、小带鱼各12个个体进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,对比多态位点比例、遗传多态度以及遗传距离,并构建Neighbor-joining系统树;通过PCR扩增出线粒体16SrRNA基因,纯化后直接测序,利用生物信息学方法进行序列分析和核苷酸变异比较,结合GenBank上大西洋叉尾带鱼同源序列构建UPGMA系统树.分析结果表明:(1)RAPD技术研究黄海带鱼和小带鱼的遗传多样性具有较高的灵敏度和检出率,带鱼的多态比例和遗传多态度均较小带鱼的低;(2)线粒体16S rRNA基因序列在分析这两物种遗传变异时表现出保守和变异的双重特性,种内变异极小而种间较大;(3)5个随机引物扩增出种特异的RAPD带,可作为种间分子鉴定标记;(4)研究证实带鱼和小带鱼是不同属的两个种,从而在基因水平上支持了Nelson分类系统的观点.

紫外线对果蝇生长发育和表型变异的影响

对紫外线照射黄身果蝇进行了研究，结果表明：紫外线照射能够极显著地降低果蝇的寿命，使果蝇成蝇的存活时间比对照组降低66．31％～83．96％；能够抑制果蝇的产卵量。并降低卵的成活率；影响子代的个体发育，使子二代个体重量减少12．08％．紫外线照射还能影响当代或子代的行为性状。引起果蝇子代的表型变化．随着照射时间的延长和照射频率的增加，其伤害作用明显增加．

铁皮石斛不同繁殖代数遗传稳定性RAPD的研究

研究铁皮石斛单蒴果种子内不同无性繁殖代数的遗传稳定性.利用从100个随机引物筛选出23个稳定性较好的10碱基引物,对来自单蒴果的7代无性繁殖种苗进行RAPD检测.发现7代无性繁殖的组培苗内代代之间遗传距离很小,但代数相差越大其遗传距离就越大,在0～0.043 5范围内.其中在1～3代未探查到变异,但从第4代始,有部分引物RAPD带型发生变化,但变化甚微.23个稳定引物只探查到了7个变异位点.铁皮石斛组培过程中种内存在一定的变异,但变异甚微,所以建立铁皮石斛稳定的无性快繁体系是切实可行的.

鸡Myogenin基因单核苷酸多态检测及群体遗传分析

肌纤维在决定肌肉生长和肉质方面起主要作用,并受到MyoD基因家族的调控。该家族基因编码螺旋-环-螺旋蛋白。以鸡Myogenin基因为候选基因,通过PCR-SSCP分析该基因5′调控区的变异。结果表明,在鸡Myogenin基因5′调控区存在3处SNPs,这些SNPs产生的不同基因型及等位基因在7个品种鸡间分布存在极显著的差异(P<0.001)。推测该基因的变异对鸡生长发育可能有一定的影响。

黄瓜正常品种及一个芽黄突变体的核型分析

对黄瓜(Cucumis sativus L.)6个正常品种和1个芽黄突变体的根尖细胞染色体进行计数,并对其核型进行了分析。结果表明,正常黄瓜与芽黄突变体黄瓜的染色体数目均为2n=14,属于二倍体植物,染色体基数为7。芽黄突变体的染色体核型公式与正常黄瓜品种长春密刺(C.sativus cv.Changchunmici)、津研4号(C.sativus cv.Jinyan No.4)、津优2号(C.sativus cv.Jinyou No.2)、津优3号(C.sativus cv.Jinyou No.3)、农城3号(C.sativus cv.Nongcheng No.3)、新泰密刺(C.sativus cv.Xintaimici)的染色体核型公式一致,均为2n=14=12m+2sm;核型不对称系数为55.49%～57.45%,核型类型均为1A型,属对称核型。在系统演化上,黄瓜可能属于较原始的种类。通过对不同黄瓜材料间的染色体长度进行方差分析,结果P>0.05,说明在染色体水平上芽黄突变体与正常的黄瓜几乎没有区别。

豆豉纤溶酶的定向进化

为提高豆豉纤溶酶的药用价值,通过易错PCR方法对来源于Bacillus subtilis DC-12的豆豉纤溶酶DFE基因进行突变并构建突变体文库,利用底物H-D-Val-Leu-Lys-pNA对突变体文库进行筛选.通过3轮易错PCR最终获得催化效率提高的突变酶mDFE3.序列分析表明突变酶mDFE3基因发生了6处碱基突变,其中4处突变发生氨基酸取代,2处为同义突变;通过swiss-model repository模拟突变酶mDFE3的结构,显示3个突变氨基酸位于回环结构上,1个位于α螺旋上;酶动力学测定结果表明突变酶mDFE3的Km值由0.58mmol/L降低至0.45mmol/L,突变酶mDFE3的催化效率(kcat)是野生型的2.57倍.

层状岩质边坡失稳的燕尾突变模型

根据层状岩质边坡含软弱夹层失稳的特点,建立了边坡地质力学模型,应用非线性科学理论中的突变理论建立了完善的边坡失稳燕尾突变模型。研究得出内外环境参数的变化改变系统控制变量的取值。边坡势函数形式发生变化,边坡在演化过程中可能处于稳定状态,也可能处于失稳状态,其稳定性取决于边坡岩体的内在和外界因素。计算了边坡处于失稳状态下系统所释放出的能量。研究结果加深了对滑坡成因的认识,论证了应用突变理论研究边坡失稳现象的可行性。

唐菖蒲电子束诱变作用同功酶及SDS-PAGE分析

为了探讨电子束对唐菖蒲诱变育种的可行性和不同剂量的电子束对唐菖蒲的影响;用能量为3MeV的不同剂量电子束辐照唐菖蒲"江山美人"和"超级"球茎,对不同处理植株的过氧化物酶、酯酶、淀粉酶和过氧化氢酶4种同功酶及SDS-PAGE的变化进行了研究。结果表明:同功酶及SDS-PAGE与对照相比均发生了明显的变化,随着辐照剂量的改变,出现了多种变异形式,变化与形态学变化相一致,但品种间存在较大差异。基于同功酶及SDS-PAGE谱带带型,数据分析使用SPSS11.5,采用单匹配相似系数组内连结分层聚类,分别得到了2品种的聚类树状图,图中显示,"江山美人"被分成了3个组:其中2组分别为200Gy处理材料和240Gy处理材料,另一组包含了小于等于160Gy剂量处理材料及对照;"超级"被分成了3个组:其中2组分别为对照和240Gy处理材料,另一组包含了小于等于200Gy的各处理材料。由聚类分析可以看出"江山美人"比"超级"有更强的电子束耐受性。试验表明,电子束辐照对植株能诱导明显的变异,试验为快中子诱变机理的进一步研究打下基础。

电子束辐照对唐菖蒲M1代花粉母细胞的影响

为探讨电子束对花粉母细胞的影响,用不同剂量的3 MeV电子束辐照唐菖蒲"超级"球茎,对其M1代的花粉母细胞进行减数分裂观察及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。结果表明:唐菖蒲减数分裂时出现遗传损伤,产生的染色体畸变类型包括滞后染色体、染色体桥、游离染色体、染色体不均等分离和微核等;在四分孢子期,则有较多三分孢子和多分孢子形成;小孢子的形状和大小有差异,主要表现为小孢子的体积变小。花粉母细胞染色体畸变类型及频率的统计表明,畸变类型以游离染色体和微核为主。SDS-PAGE分析观测到,电子束辐照能明显改变M1代花粉的蛋白表达,低剂量辐照即可产生明显作用,在不同辐照剂量下分别观测到特殊蛋白表达条带,剂量大于160 Gy时,蛋白表达条带较低剂量辐照时有所减少。研究结果表明,电子束辐照诱变可作为唐菖蒲育种的一个有效手段。

时相温度梯度凝胶电泳在线粒体基因突变检测中的应用

目的 评价时相温度梯度凝胶电泳技术 (TTGE)在肿瘤患者线粒体基因同质性和异质性突变检测中的应用。方法 对117例肿瘤组织和配对正常组织的全线粒体基因进行PCR扩增和TTGE突变筛选分析 ,对TTGE显示在肿瘤和配对正常组织中具有不同类型电泳带型变化的片段进行测序。结果 TTGE在总共 36 5 4片段中发现 16 0个体细胞性线粒体基因突变片段 ,经与直接测序结果比较 ,TTGE检测体细胞性突变的敏感性和特异性分别达 96 2 7%和 94 0 5 %。结论 TTGE是筛选线粒体基因体细胞性同质性突变和各种比例异质性突变的一种敏感方法。

酿酒酵母海藻糖合成酶基因的克隆和在大肠杆菌中的表达

用ＰＣＲ方法克隆了１．５ｋｂ的酿酒酵母Ｓａｃｃｈｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ海藻糖合成酶基因ＴＰＳ１，将该片段连接到ｐＵＣ１９载体，通过转化分别引入海藻糖合成酶基因缺失和缺陷的大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＦＦ４１６９和ＦＦ４１６９和ＦＦ４０５０。对转化株的质粒ＤＮＡ酶切分析表明均含有１．５ｋｂＰＣＲ克隆片段。生长曲线实难证明，带有克隆片段的转化株在含０．５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ的高渗透压基础培养基中生长良好；用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）结合蒸发光散射（ＥＬＳＤ）技术测定细胞内海藻糖实验证明转化株能够合成海藻糖。

蛇床种内变异的RAPD分析

目的 :从DNA分子水平上探讨不同地区产蛇床的种内变异。方法 :用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析 9个产地的蛇床基因组DNA多态性 ,并构建树状聚类图。结果 :从 2 0个 10bp随机引物中筛选出 12个有效引物 ,共扩增出 75条DNA带 ,其中 6 4条表现出多态性。结论 :地理分布距离越小 ,蛇床的遗传差异越小 ,反之越大 ,但生态环境对蛇床遗传变异的作用也不可忽视。

原生质体诱变选育透明质酸菌株及发酵条件的优化

采用N 甲基 N′ 硝基 N 亚硝基胍(NTG)诱变原生质体,选育了一株产透明质酸的兽疫链球菌(Streptococcuszooepidemicus)H 35.并经过发酵条件的优化,确定了溶菌酶作用的最佳条件是0.6mg/mL溶菌酶高渗溶液,30℃水浴下酶解20min;H 35的最佳发酵条件是葡萄糖4.0%、酵母膏2.0%、NaCl0.2%、KH2PO40.2%、MgSO4·7H2O0.06%、初始pH7.0、35℃,200r/min、培养18h.发酵液中透明质酸的含量从最初的0.47g/L提高到优化后的1.43g/L.

N^+离子注入诱变选育耐酸性α-淀粉酶高产菌株

本工作研究低能N+离子注入中温α-淀粉酶产生菌BF7658的诱变方法。经不同注量的N+离子注入实验后,得出N+离子最佳注量为1×1016 cm-2,并筛选获得1株耐酸性α-淀粉酶产量较高的枯草芽孢杆菌突变株。该突变株所产α-淀粉酶的酶活可达207U/mL,遗传稳定性较好。