Western blot检测蛋白表达的方法改进及初步应用

目的 探讨Western blotting 增强化学发光法 (ECL )在分析细胞周期调控蛋白表达中的应用。方法 采用K562细胞 ,制备细胞核 ,对电泳、封闭、结合、检测等关键步骤进行了实验条件的摸索和改进 ,并对我室研究苦参碱诱导K562细胞分化机制的细胞周期蛋白的表达进行了分析。结果 3 0 μg核蛋白质即可检测到K562细胞中 ,均有不同程度的CyclinE、Cdk2、CyclinD1、Cdk5表达。结论 Western blotting ECL法特异性强、灵敏度高 ,是分析蛋白质表达较为理想的方法。