多酚对过氧自由基氧化花生球蛋白的干预效应

为了对花生蛋白的加工贮藏提供参考,探究了多酚对过氧自由基氧化花生球蛋白的影响。通过2,2′-偶氮二异丁基脒二盐酸盐建立花生球蛋白氧化体系,采用不同浓度的阿魏酸、绿原酸、儿茶素对氧化体系进行干预,分析多酚对氧化花生球蛋白羰基、游离氨基、巯基、溶解度、浊度和内源荧光光谱的影响,并对各指标进行了相关性分析。结果表明:不同浓度的3种多酚干预后,花生球蛋白的羰基含量不同程度地降低,游离氨基、巯基含量上升,最大内源荧光波长发生红移,浊度增大,溶解度总体变化较小;相关性热图分析说明蛋白质的功能性与其氧化程度相关。综上,适量的多酚可抑制过氧自由基对花生球蛋白的氧化,且3种多酚对氧化体系的干预效果不同,其中绿原酸抑制花生球蛋白氧化的能力最好。

竹醋液抗氧化性能研究

通过色质联用方法分析了竹醋液的成分,用连苯三酚法测定了加入竹醋液前后猪油过氧化值的变化,研究了竹醋液的抗氧化性能。实验表明竹醋液由80多种成分组成,具有良好的清除超氧阴离子自由基的能力。竹醋液作为抗氧化剂在猪油中的最佳添加量为每公斤猪油加入5g竹醋液;按每公斤猪油分别加入4g竹醋液与4g茶多酚进行抗氧化能力比较,发现两者具有相似的抗氧化能力。由此得出竹醋液具有良好的抗氧化性。

鸡卵黄免疫球蛋白Y的性质

用ＥＬＩＳＡ技术研究了鸡卵黄免疫球蛋白Ｙ（ＩｇＹ）对温度、酸碱度、胃蛋白酶、胰蛋白酶及反复冻融的稳定性。结果表明：ＩｇＹ具有良好的热稳定性，对酸碱具有一定的耐受力，对胃蛋白酶具有良好的抵抗能力（ｐＨ＞４）。对胰蛋白酶非常敏感，经１ｈ酶解处理，ＩｇＹ的结合活性完全丧失。ＩｇＹ具有很好的耐反复冻融的特性，即使经过５次反复冻融，其抗原结合活性也几乎未受损失。

嗜水气单胞菌灭活疫苗浸泡后鳜IgM基因表达量和抗体效价的变化

应用荧光定量PCR技术,研究了嗜水气单胞菌疫苗浸泡免疫后,鳜(Siniperca chuatsi)鳃、皮肤、脾脏和头肾中IgM基因表达量变化,同时应用ELISA检测皮肤黏液和血清中抗体滴度变化。结果显示:最早检测到IgMmRNA转录水平上调的是皮肤和鳃(第4天),而脾脏和头肾在第7天才达到高峰。IgM基因在头肾和脾脏中表达量较高(高峰值分别达到16.3和23.8),皮肤和鳃中的表达量较小(高峰值分别为4.3和8.6)。抗体效价方面,皮肤黏液中抗体滴度峰值出现时间较早(第7天),但抗体从开始形成到消失持续时间较短(28 d);血清中抗体滴度峰值出现时间较迟(第21天),但持续较长(42 d)。结果表明:浸泡免疫能够引发鳜机体和局部均出现免疫应答。从抗体滴度和IgM基因表达量方面考虑,系统免疫组织均高于黏膜免疫组织,表明前者是合成IgM的主要场所。从时间上比较,对抗原刺激最早做出应答的是皮肤黏膜和鳃,其后系统免疫才表现应答作用,这表明了局部黏膜能够在抗原入侵的早期起到抵制作用。

八棱丝瓜籽核糖体失活蛋白的分离纯化及其生化性质

通过盐溶液抽提、硫酸铵分级沉淀、CM 5 2纤维素阳离子交换层析、反相毛细管液相色谱 (re verse phasecapillaryliquidchromatography ,RP CLC)等步骤 ,从八棱丝瓜籽中分离到 2种单链核糖体失活蛋白luffaculin 1和luffaculin 2 .在SDS PAGE和IEF上均显示为单一条带 ,表观分子量均为 2 8kD ,其等电点分别为 8 86 (luffaculin 1)和 9 0 5 (luffaculin 2 ) .实验表明 ,它们具有RNAN 糖苷酶活性 .蛋白质合成抑制活性测试表明 ,它们对蛋白质合成具较强的抑制作用 .体外抑制肿瘤细胞生长活性检测表明 ,luffaculin 1和luffaculin 2对人白血病细胞株K5 6 2有较强的毒性 ,IC50 分别为 1 1×10 -6mol L和 2 0× 10 -7mol L .

高压下牛乳IgG的变性及稳定化作用

高压下（200～700MPa）牛乳IgG的变性及稳定化研究表明：随着蔗糖浓度的提高，IgG在高压下的稳定性增大，并伴随IgG最大发射波长的蓝移和荧光强度的降低。蔗糖对IgG在高压下的稳定化作用是由于其增加了IgG分子内部疏水交互作用，从而稳定了其三级结构。

草鱼的两种新型免疫球蛋白基因IgZ-2和IgM-IgZ

在草鱼中新发现的两种免疫球蛋白重链的cDNA和基因组序列,其中的一种IgZ命名为IgZ-2,以区别于已报道的IgZ,另一种只有两个恒定区,一个恒定区与IgM相似而另一个与IgZ相似,这一特征与已报道的鲤的IgM-IgZ相似,故同样称为IgM-IgZ。分泌型IgZ-2的cDNA序列包含1889bp,编码539个氨基酸,其3'编码区包含267bp,但缺乏5'非编码区及部分可变区序列。分泌型IgM-IgZ的cDNA全长为1316bp,编码361个氨基酸,其5'非编码区包含3bp,3'非编码区包含227bp。膜结合型IgM-IgZ由两个膜外显子与CH2中的一个剪切位点剪切而成。氨基酸序列比对结果显示IgZ-2和IgM-IgZ的恒定区存在保守的半胱氨酸。系统进化树分析显示,草鱼IgZ-2以较高的支持率与斑马鱼IgZ聚为一枝,再与草鱼IgZ、草鱼IgM-IgZ和鲤IgM-IgZ这一枝聚为一类。用半定量RT-PCR检测IgZ-2和IgM-IgZ在4条草鱼的器官/组织中的表达,发现分泌型IgZ-2、分泌型IgM-IgZ和膜结合型IgM-IgZ在4条鱼中的表达存在个体差异,但主要都在免疫器官中表达。

Thanh法提取7S、11S球蛋白功能特性的研究

以中豆36为原料,分别提取大豆分离蛋白(SPI)、7S、11S球蛋白,系统地比较了它们的功能性质的差异。结果表明:SPI、7S及11S的功能特性之间存在较大差异,11S球蛋白具有较强的凝胶性、吸油性和溶解度;7S球蛋白具有较高的持水性和乳化性。

3,3',5,5'-四甲基联苯胺-H_2O_2-辣根过氧化物酶伏安酶联免疫分析法测定人血清免疫球蛋白E

A differential pulse voltammetric immunoassay associated with the TMB-H2O2-HRP for the determination of IgE antibody was developed. The enzymatic reaction product produced by HRP catalyzing the oxidation of H2O2 with TMB exhibits a sensitive voltammet-ric response at 0.10V(vs.Ag/AgCl) in pH4.0 phosphate-citrate buffer solution. The de-tection limit of the present method for IgE antibody was 4.0IU/mL, which was four times lower than that obtained by traditional spectrophotometric ELISA procedure. It has been ap-plied to the determination of IgE in human serum with satisfactory results.

温度对兔腰大肌肌球蛋白质凝胶特性的影响

肌球蛋白质热诱导凝胶对肉糜类制品的黏结性、保水性等功能性质有很重要的影响。该研究主要通过差式扫描量热(DSC)技术、流变学、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)以及浊度探讨不同温度(30℃、40℃、50℃、60℃)处理下兔腰大肌肌球蛋白质溶液凝胶的过程。结果表明:在30℃条件下,肌球蛋白质分子没有发生变性聚集,不能形成蛋白凝胶;40℃时,肌球蛋白质变性时间较长,随时间延长蛋白质分子之间相互聚合,形成较弱的凝胶;当温度大于50℃时,肌球蛋白质迅速变性,并随着时间的延长,蛋白质分子间紧密交联,形成致密的凝胶网络。因此,温度对肌球蛋白质凝胶有很重要的影响。在肌球蛋白质凝胶的形成过程中,重链起了连接分子的作用,轻链(LC2、LC3)只是起填充分子间隙的作用。

高效液相色谱法测定牛初乳中IgG含量的方法研究

采用高效液相色谱法对牛初乳中IgG含量进行测定,并与琼脂双扩散法进行比较,筛选出一种快速、精确测定IgG含量的方法。在牧场(非热应激条件,平均温度-10℃)随机选取7头体况良好、体重、胎次、产奶量及分娩日期都相近的黑白花奶牛作为试验研究对象。分别在母牛分娩后不同时间内收集乳样,用液氮冷冻,然后于-70℃的冰柜中保存,分析测定时再进行解冻,分别用琼脂双扩散法和高效液相色谱法测定牛初乳中IgG效价和含量。结果表明:①选用反相键合色谱柱ZORBAX300SB—C18,流动相0.02mol/lPBS(pH值6.8)与乙腈的比例为95%:5%时,初乳各成分分离效果达到最佳;②选择流速为0.2ml/min时,初乳蛋白组分得到有效分离。与琼脂双扩散法相比,高效液相色谱法测定牛初乳中IgG含量具有分析速度快、灵敏度和精确度高、分离效果好、回收率高等优点。

一步法提取鸭血清转铁蛋白

一步法提取鸭血清转铁蛋白是利用热变性沉淀去除鸭血清中的杂蛋白,在微碱性(pH值为8.0)条件下,75℃保温25 m in,转铁蛋白的纯化倍数为1.11,收率为96%,而硫酸铵分级沉淀法的纯化倍数为1.03,收率为51%。一步法与硫酸铵分级沉淀法相比,方法简单,成本低廉,适宜工业化生产。

复合改性提高大豆分离蛋白功能性的研究

目的:利用中性蛋白酶和谷氨酰胺转胺酶(TG)对大豆分离蛋白(SPI)进行复合改性,探讨对其功能性的影响。方法:通过单因素和正交实验以及电泳分析,研究了中性蛋白酶和TG对SPI的影响趋势。结果:中性蛋白酶作用的最佳工艺条件为温度60℃、时间0.5h、pH7.0、酶用量4000U/g,SPI溶解性可达97.9%。结论:经中性蛋白酶作用后,再经过TG改性,所得的聚合物不仅有很大的相对分子质量,还可以改善SPI的溶解性,并且乳化性、发泡性均有提高。

大菱鲆免疫球蛋白轻链IgL全长cDNA的分离、鉴定及表达分析

实验采用末端快速扩增(RACE)技术从大菱鲆脾脏cDNA文库中筛选得到了免疫球蛋白轻链IgL的全长cD-NA片段。该序列包含47 bp的5′末端非编码区(5′UTR),738 bp的开放阅读框(ORF)和202 bp 3′UTR,整个开放阅读框编码246个氨基酸。系统发生分析表明大菱鲆IgL基因与五条鰤的IgL基因起源关系最近。RT-PCR分析表明,大菱鲆IgL基因只在正常脾脏、肾脏和头肾组织中表达;IgL在大菱鲆胚胎发育细胞期就已开始表达,在大菱鲆胚胎尾芽期和体节期表达持续增强;在鳗弧菌感染大菱鲆脾脏和头肾早期均检测到IgL基因强烈表达,后期表达逐渐减弱;大菱鲆胚胎细胞(TEC)在用鳗弧菌感染48h后,IgL开始表达。这些结果均表明IgL基因在大菱鲆免疫应答中起着重要作用。

南方鲇免疫球蛋白单克隆抗体的制备及特性

采用PEG沉淀结合Sepharose-4B柱层析法分离纯化了健康非免疫状态下南方鲇血清免疫球蛋白,在SDS-PAGE电泳条件下血清免疫球蛋白重链和轻链的分子量分别约为77 kD和27 kD。应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了4个南方鲇免疫球蛋白特异性的单克隆抗体细胞株,并对这些单克隆抗体的特性进行了分析。经抗体亚级份测定,其中IgG1有2株,IgG2a有1株,IgG2b有1株;抗体滴度为104—106,有三株单抗具有Western-blot反应特性,识别南方鲇免疫球蛋白的重链。4株单抗都能特异地识别南方鲇、鲇的免疫球蛋白,而与鲫、草鱼、罗非鱼、斑点叉尾、光泽黄颡鱼血清以及水产动物常见病原菌如气单胞菌、爱德华氏菌、弧菌、柱状屈桡杆菌、沙门氏菌及大肠杆菌等无任何交叉反应。单克隆抗体F4-A12对纯化的南方鲇免疫球蛋白的检测灵敏度为31 ng。实验结果证明这些单抗具有高度特异、高度灵敏等特点,可用于南方鲇免疫球蛋白的结构分析、免疫应答水平监测和病原诊断,具有广阔的应用前景。

伸展态β-乳球蛋白重折叠过程的动力学特性

从蛋白质变性的渐变模型及构象态渐变的观点出发 ,对伸展态 β -乳球蛋白的重折叠过程进行了分析 ,发现蛋白质分子从伸展态到最终折叠态历经一系列中间稳定态 .尿素浓度梯度电泳实验结果显示 ,存在两条不同的折叠途径 .在不同的尿素浓度范围内 。

低pH条件下11S球蛋白热聚集现象的研究

以浊度、平均粒径、ζ-电位分布、11S二级结构、三级结构为评价指标,研究了低pH条件下11S球蛋白溶液的热聚集现象。热处理条件为:浓度为5mg/mL的11S在80℃加热30min。实验结果表明,11S溶液pH越低,颗粒带正电荷越多,结构越松散,在静电作用力下聚集很少,加热处理后结构更松散,溶液仍然澄清。在pH3.6时,加热处理后的ζ-电位分布结果表明,颗粒大部分都是带正电荷,基本上没有负电荷,浊度明显减小,溶液澄清。

15例原发性巨球蛋白血症免疫表型和治疗分析

目的:探讨原发性巨球蛋白血症(WM)的临床特点。方法:回顾性分析15例患者免疫表型及治疗。结果:临床表现多样性,免疫表型CD20+占75%,CD19+CD22+占50%,CD38+37.5%。15例接受治疗患者有11例部分缓解,其中加用沙利度胺的全部都获部分缓解。结论:传统的诊断WM方法不够完善,免疫表型能够更进一步明确诊断。在治疗方面可考虑在化疗并血浆置换的基础上,使用沙利度胺来联合治疗。

转铁蛋白的制备方法及其应用前景

转铁蛋白是一种铁结合性糖蛋白,具有多种生物学功能。对转铁蛋白的结构、功能、制备方法及应用前景进行了综述,指出了转铁蛋白分离纯化的重要性。

去神经对快、慢肌纤维肌球蛋白ATPase影响的组织化学观察

本文用组织化学方法观察了豚鼠比目鱼肌(SOL)和腓骨第三肌(PT)在去神经后其快、慢纤维肌球蛋白ATPase特性的变化。在正常肌肉中Ⅰ型(慢)纤维和Ⅱ型(快)纤维分别具有酸和碱稳定ATPase活性。慢纤维在去神经后出现了碱稳定ATPase活性,而快纤维则无明显变化。结果表明,只有慢纤维的肌球蛋白ATPase特性才与神经支配有关。