组蛋白修饰调节机制的研究进展

表观遗传学涉及到DNA甲基化、组蛋白修饰、染色体重塑和非编码RNA调控等内容,其中组蛋白修饰包括组蛋白的乙酰化、磷酸化、甲基化、泛素化及ADP核糖基化等,这些多样化的修饰以及它们时间和空间上的组合与生物学功能的关系又可作为一种重要的表观标志或语言,因而被称为"组蛋白密码".相同组蛋白残基的磷酸化与去磷酸化、乙酰化与去乙酰化、甲基化与去甲基化等,以及不同组蛋白残基的磷酸化与乙酰化、泛素化与甲基化、磷酸化与甲基化等组蛋白修饰之间既相互协同又互相拮抗,形成了一个复杂的调节网络.对组蛋白修饰内在调节机制的研究将丰富"组蛋白密码"的内涵.

组蛋白与hAMFR基因启动子的结合对体外转录活性的影响

采用从鸡血红细胞中分离纯化的组蛋白、从HeLa细胞核中革取的含有RNA聚合酶Ⅱ和多种Ⅱ类基因转录因子的可溶性抽提物，以及从非洲爪蟾卵细胞核中提取的革取物热处理物上清（HTS）用于核小体构建，以含有人自班移动因子受体（hAMFR）基因启动子序列的DNA片段为模板进行体外转录实验，结果表明，组蛋白和转录因子在hAMFR基因启动子序列上的竞争性结合对转录活性具有重要的影响作用，在启动子区域预先构建的核小体能够抑制转录活性；反之在启动于上先形成转录起始复合物则能防止核小体的转录抑制作用；当组蛋白和转录因子同时作用在DNA模板时，转录活性取决于组蛋白和转录因子的相对浓度。

组蛋白H2A去泛素化酶MYSM1抑制骨髓来源树突状细胞的抗原提呈功能及炎性细胞因子的分泌

目的研究组蛋白H2A去泛素化酶Myb样SWIRM和MPN结构域1(MYSM1)对骨髓来源树突状细胞(BMDC)吞噬、抗原提呈、炎性细胞因子mRNA水平的影响。方法分离小鼠的骨髓细胞,在体外联合粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)诱导骨髓细胞分化为DC,利用小干涉RNA(siRNA)下调MYSM1的表达,采用免疫荧光微球实验检测BMDC的吞噬功能、流式细胞术检测BMDC的抗原提呈功能、实时定量PCR检测BMDC的IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达变化,探讨MYSM1下调后DC在固有免疫应答中的作用。结果下调MYSM1的表达后,BMDC的吞噬功能无显著变化,抗原提呈功能增强,IL-6、TNF-α的表达增强。结论 MYSM1在固有免疫应答中可以抑制BMDC的抗原提呈功能及炎性细胞因子分泌能力。

去乙酰化酶Sirtuin研究进展

依赖于NAD+的去乙酰化酶Sirtuin对细胞的存活、衰老、凋亡等生理活动的调节起到十分重要的作用。Sirtuin系统中的ySir2和SIRT1就目前来说是研究得较为透彻的两个成员。ySir2参与了酵母的交配型基因沉默、端粒的沉默、rDNA重复序列的沉默以及细胞寿命等生理功能。人类SIRT1在细胞存活与代谢等过程中也起到调节作用。本文对Sirtuin的结构、作用机制、底物特异性、影响因子及其功能作了综述。

组蛋白H2AX与DNA损伤的分子感应

DNA双链断裂是电离辐射对DNA的重要损伤类型,与细胞死亡、基因突变甚至细胞恶性转化有密切联系。DNA发生双链断裂后最早反应之一是位于断裂点附近的组蛋白H2AX的C末端丝氨酸残基发生磷酸化,形成γ-H2AX。磷酸化的γ-H2AX快速转导DNA损伤信号,导致下游分子磷酸化的激活,引发一系列的生物级联反应和和细胞学反应。γ-H2AX是迄今所研究的最重要的DNA损伤感应分子。

丁酸钠部分依赖CREB上调急性白血病细胞CD86分子

目的:观察丁酸钠(SB)对急性白血病细胞CD86分子表达的影响,并探讨其作用机制。方法:流式细胞术检测NB4、HL-60、U937细胞经SB处理前后的CD86分子表达变化,半定量RT-PCR检测SB对各组细胞CD86 mRNA表达变化,AUT凝胶电泳检测核心组蛋白乙酰化程度,pCREB试剂盒检测细胞核内pCREB含量变化。结果:SB处理各组细胞CD86分子表达与对照组比较均出现显著升高;CD86 mRNA水平表达也明显增高;AUT电泳显示经SB作用后,各组细胞组蛋白乙酰化程度明显增加;SB处理后细胞核内pCREB含量增多。结论:SB使NB4、HL-60、U937细胞核心组蛋白乙酰化程度增加,染色质重塑,有利于CREB等转录因子的活化并与DNA结合,促进CD86转录增强,表达增多。

酮病和健康奶牛血清中触珠蛋白和血清淀粉样蛋白A浓度的比较研究

血清中触珠蛋白(HP)和血清淀粉样蛋白A(SAA)浓度的变化与奶牛代谢性疾病(如酮病、脂肪肝等)密切相关。为了明确酮病奶牛和健康奶牛血清中触珠蛋白和血清淀粉样蛋白A浓度差异,本试验运用酶联免疫吸附试验(ELISA),分别测定了酮病和健康奶牛血清中触珠蛋白和血清淀粉样蛋白A浓度,结果显示,酮病奶牛血清中触珠蛋白浓度和SAA浓度极显著高于(P<0.01)健康奶牛。结果表明,酮病奶牛普遍存在炎症等病理过程,这一结果可为进一步阐明奶牛酮病的发病机制提供理论依据。

沉默信息调节因子1在神经退行性疾病中的作用

沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)作为NAD+依赖的脱乙酰基酶,通过对组蛋白及多种非组蛋白的去乙酰化修饰,参与基因转录、能量代谢以及细胞衰老过程的调节。近年研究发现,SIRT1具有明显的神经保护作用。本文拟对SIRT1在几种常见神经退行性疾病中的保护作用作一综述。

GST-SDF-1α融合蛋白的原核表达及纯化

构建融合重组表达载体并对其进行诱导表达蛋白以获得大量重组融合蛋白。通过PCR方法扩增出小鼠SDF-1α基因,克隆入pMD18T载体中,进行测序分析。将该基因亚克隆入原核表达载体pGEX-4T11中GST的下游构建重组质粒pGEX-4T1-SDF-1α,转化受态细胞BL21中,经IPTG诱导表达重组融合蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE电泳检测分析。在约Mr36×103处出现一新生的蛋白条带。经灰度扫描检测,表达量约占菌体总蛋白的30%,纯化后得到了目的蛋白。成功克隆了小鼠的SDF-1α基因,并纯化融合基因GST-SDF-1α的原核表达产物。

非组蛋白磷酸化与核内信息传递

生物信息分子如激素、神经递质、生长因子、癌蛋白以及药物等所携带的生物信息,在细胞内的传递一般可以分为三个阶段,即跨膜传递、细胞质传递、最后在核内传递。生物信息的核内传递是调节细胞代谢、生长、增殖。

分子伴侣及其功能的研究进展

分子伴侣是一类能够协助其它多肽进行正常折叠、组装、转运、降解的蛋白质,并在DNA的复制、转录、细胞信号转导及微管的形成和修复过程中发挥重要作用的蛋白质。

心脏Smyd1蛋白研究进展

心脏的发育是一个复杂的过程,它受一系列基因的精确调控。Bop基因在心肌细胞分化和心脏形成中起到关键性作用。Smyd1蛋白是一个由Bop基因编码的包含SET功能域和MYND功能域的、与肌原纤维形成和肌肉收缩相关的必需的组蛋白甲基转移酶,它与心肌和骨骼肌的细胞分化和细胞成熟调控有关,在细胞特化、细胞分化和细胞成熟等过程中发挥着重要作用。文章就心脏Smyd1蛋白在肌细胞分化和成熟调控中的效应以及与Smyd1蛋白相关的转录因子等作一简要综述。

萃取法氯化血红素脱铁的研究

报导了一种氯化血红素(Hemin)脱铁的TBP萃取新方法,在萃取时间1 h,萃取剂磷酸三丁酯(TBP)加入量为Fe量的10～20倍,盐酸加入量为硫酸体积的1/3,稀释剂选用非极性的苯和萃取温度40℃等条件下,氯化血红素的脱铁率和血卟啉及血卟啉衍生物的含量分别达到了99.01%和95.05%.采用此方法不但降低了生产成本,而且还缩短了生产周期.

人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)转基因小鼠的建立

利用小鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因的调控序列指导人ＧＣＳＦ基因所构建的融合基因，注射小鼠受精卵，ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明，获得了人ＧＣＳＦ转基因小鼠，整合率为２３７％。

组蛋白脱乙酰化酶及其与基因转录的关系

含有组蛋白脱乙酰化酶活性的分子有两类 :一类是与酵母RPD3同源的分子 ,另一类是与RPD3不同源的分子 .它们各有其不同的来源 ,存在于各自的复合物中 ,催化不完全相同的组蛋白或其他蛋白质脱乙酰化 ;这些脱乙酰化酶与基因转录的调控存在着密切的关系 。

蛋白质组学研究进展

综合论述了蛋白质组学研究的意义、研究技术、研究策略及发展趋势.

高原鼢鼠心肌和骨骼肌肌红蛋白含量的季节变化

为了研究高原鼢鼠肌红蛋白在不同季节的变化,用分光光度法测定了肌红蛋白含量。结果显示:在春季、夏季和秋季,高原鼢鼠心肌肌红蛋白含量分别为1 001.25±103.25(nmol/g),726.50±54.70(nmol/g),767.33±88.73(nmol/g);骨骼肌肌红蛋白含量分别为781.85±100.98(nmol/g),672.15±108.88(nmol/g),676.80±77.31(nmol/g)。春季高原鼢鼠心肌肌红蛋白和骨骼肌肌红蛋白含量显著高于夏季和秋季(P<0.05)。说明随着洞道氧气和二氧化碳浓度的季节性变化,高原鼢鼠通过改变肌红蛋白含量,来维持机体的氧平衡。

改良PAGE法用于人类珠蛋白多态性研究

目的 :探讨人类新生儿HbF中珠蛋白链简便、快速、准确的分离方法。方法 :对传统的含TritonX 10 0的酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳法的凝胶系统作了进一步的改进 ,其中TritonX 10 0和TEMED等主要物质的浓度作了调整 ,不同于其它文献报导的。结果 :该改良法能使凝胶聚合时间缩短、一次电泳时间从 6h缩短为 2h ,HbF中各珠蛋白链得到良好分离 ,电泳条带清晰 ,无拖尾现象 ;结论 :该方法操作简便 ,分离效果好 ,电泳时间缩短 ,极大地提高了研究效率。