XG32菌株产ACC脱氨酶的培养条件和酶活影响因素

为了明确具1-氨基环丙烷-1-羧酸（1-aminocyclopropane-1-carboxylate ACC）脱氨酶活性细菌菌株XG32的产酶条件和酶活影响因素，以ACC为底物，研究了诱导培养基中底物的浓度、温度、pH对该菌株产酶的影响及产酶的时程：分别在不同温度、不同pH及添加8种金属离子的条件下测定了酶的活力和稳定性．结果表明：菌株XG32在有底物ACC存在时才能被诱导产酶，温度上升至5℃及pH〉5．5时酶活性才开始被诱导，在25℃和pH7．0-8．0时酶活性最高；诱导初始至24h内是酶产生的上升期，24h后酶产生呈下降趋势．酶的最适反应温度为30℃，高于35℃酶的活力下降，在65℃酶的活力趋于零；该酶在pH7．5-9．5之间有较好的稳定性；金属Cu^2＋、Zn^2＋对ACC脱氨酶有激活作用，而Hg^2＋、Ag^2＋则有抑制作用．因此，认为ACC脱氨酶酶活性的出现对底物的存在非常敏感，在自然界中少量的酶就可以催化ACC的分解．但酶活力受条件影响较大，仅能在一定的范围内保持酶活的稳定性．

银杏叶中苯丙氨酸解氨酶基本特性的研究

苯丙氨酸解氨酶(PAL)在硼酸缓冲液中最适pH是8.8,在Tris-HCl缓冲液中最适pH为:pH8.0、pH8.8。用pH10和pH4 Tris-HCl处理,5min后,PAL活性分别残存13.07％,45.64％。PAL最适反应温度为50℃,在40℃、50℃水浴30min,60℃、70℃、80℃水浴20 min,90℃水浴10 min,100℃水浴5 min时,酶活性还残存50％左右。酶液酶活性残存50％左右时,贮存时间长短依次为:-20℃甘油贮存液37d、-20℃40％(NH4)2SO4悬浮液21d、-20℃上清液15d、4℃甘油贮存液21d、4℃上清液5d、4℃40%(NH4)2SO4悬浮液3d。PAL最适底物浓度为0.02mol·L-1,其Km为8.568×10-3mol·L-1。

光照及机械损伤对银杏叶苯丙氨酸解氨酶活性的影响

在室温和低温条件下 ,用黑暗、红光、白光和机械损伤条件诱导离体银杏叶苯丙氨酸解氨酶 (PAL)活性。结果表明 :室温下 ,PAL活性在黑暗条件下缓慢降低 ;红光、白光以及机械损伤均能使PAL活性升高 ,在红光、白光下 ,PAL活性呈周期性变化 ,其周期约为 2 4h ,其中白光的作用效果优于红光 ,但差异没达到显著水平。机械损伤使PAL活性快速上升 ,然后急剧下降一段时间再缓慢下降。低温下的光照实验结果与室温下的相同。

活性氧和超氧化物歧化酶在植物抗病反应中的作用

活性氧在植物体内的代谢平衡受众多环境胁迫因子的影响超氧化物歧化酶作为生物自由基的清除剂,具有清除逆境胁迫时体内过量的超氧化物自由基,维持活性氧代谢平衡的功能在植物-病原物相互作用过程中,活性氧和超氧化物歧化酶参与了植物的抗病反应。

活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶基因多态性与成人哮喘及IgE的相关性研究

目的:探讨活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶(Activation-induced ey-tidine deaminase.AICDA)8408C/T基因的多态性与成人哮喘及血浆总IgE的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术(PCR-RFLP)检测AICDA基因多态性。结果:成人哮喘患者AICDA 8408位T/T基因型频率与对照组相比较差异有显著性(P<0.05),T等位基因频率与对照组相比较差异无显著性(P>0.05)。成人哮喘组T/T基因型血浆总IgE高于C/C、C/T基因型(P<0.05)。结论:成人哮喘患者AICDA 8408位T/T基因型与成人哮喘的发病及高血浆总IgE均相关。

高效液相色谱测定鸟氨酸脱羧酶活性方法的改进

对柴彪新等报道的高效液相色谱测定鸟氨酸脱羧酶(ODC)活性的方法作了改进.结果表明,改进后的方法更灵敏,更简便,线性范围明显扩大,相关系数为0.9998,显著高于柴彪新等报道的0.9939.同时,新方法还可使苯甲酸和苯甲酰氯降到很低.

活化诱导的胞嘧啶核苷脱氨酶与免疫球蛋白基因多样性及免疫性疾病的关系

类别转换重组(CSR)和体细胞高频突变(SHM)是活化的B淋巴细胞在免疫球蛋白基因组中启动第2次多样化进程的2个重要过程,然而活化诱导的胞嘧啶核苷脱氨酶(AID)是CSR和SHM过程中必需的酶。研究发现,AID在免疫球蛋白基因多样性中发挥重要作用,并且与免疫性疾病有关。现就AID与免疫球蛋白基因多样性及免疫性疾病之间的关系进行综述。

胆色素原脱氨酶的研究进展

胆色素原脱氨酶是生物体内参与四吡咯化合物生物合成过程的关键酶之一,它催化了4个底物脱去4分子氨依次连接成线形的四吡咯产物羟甲基胆素.论文总结了胆色素原脱氨酶在生化性质、晶体结构、催化机理等方面的研究成果,并介绍了该酶的一些重要氨基酸.

腺苷脱氨酶同工酶的醋纤膜电泳及其应用

采用醋酸纤维薄膜电泳分辨人、鼠淋巴细胞与红细胞中的腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）同工酶。对已进行人ＡＤＡ基因转移并筛选后的鼠Ｔ淋巴细胞株Ｙａｃ－Ｉ进行分析检测，发现该细胞株出现一条泳动速率与人ＡＤＡ同工酶相同的电泳带，证实外源性人ＡＤＡ基因可导入体外培养的鼠Ｔ淋巴细胞株Ｙａｃ－Ｉ并表达人的ＡＤＡ。

β-环糊精对苯丙氨酸解氨酶反应影响的研究

在含有较高浓度底物反式肉桂酸(trans-cinnamic acid,CA)和氨反应介质中,研究了β-环糊精(β-CD)对红酵母苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL,EC4.3.1.5)催化反应的影响。加入适量β-CD可以克服高浓度CA对PAL活性的抑制作用,显著增加产物L-苯丙氨酸(L-phe)的产量。β-CD最适用量随CA浓度升高而增加,其摩尔数量约为CA用量的1/12—1/4。CA浓度范围为100—200mmol/L时,对β-CD有效浓度范围为6—50mmol/L。

腺苷脱氨酶在人睾丸及附睾的分布

应用本实验室前期制备的特异性的抗人精子膜结合腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）同功酶的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）和免疫组化技术，我们分析了该同功酶在正常人睾丸和附睾中的分布。实验结果显示：（１）ＡＤＡ在正常人睾丸中无分布，而在附睾头部，附睾管腔上皮细胞中开始分布；（２）ＡＤＡ在正常人附睾管腔上皮细胞中的分布，由附睾头部至尾部，其密度递增。这一研究结果提示：（１）ＡＤＡ分布具有附睾特异性；（２）人精子膜结合ＡＤＡ可能来自附睾管腔上皮细胞。

甘油脱水酶和二醇脱水酶β亚基生物信息学分析

依赖辅酶B12的甘油脱水酶和二醇脱水酶是同工酶。它们不仅氨基酸序列和蛋白质折叠方式非常相似,而且有着相同的催化机制。该文在同一菌株中将编码甘油脱水酶β亚基基因和编码二醇脱水酶β亚基基因片段分别克隆至T载体,从而获得两段核苷酸片段序列,将pddB序列提交Genbank数据库,获登陆号为DQ483052。同时结合PDB数据库中甘油脱水酶和二醇脱水酶的晶体结构,该文用生物信息学方法对所测序列进行了初步分析,并对两种同工酶的β亚基对脱水酶与辅酶的亲和力进行了比较。

氨气敏电极终点法测定腺苷脱氨酶活性

目的：建立血清腺苷脱氨酶传感器分析方法。方法：血清样品与腺苷溶液恒温反应３０ｍｉｎ。三氯乙酸终止反应，调溶液ｐＨ值９．０，氨气敏电极测定，标准曲线法定量。结果：线性范围５～１００Ｕ／Ｌ，日内、日间相对标准偏差（ＲＳＤ）分别为２．８６％、３．９２％，平均回收率１０１．７％。结论：方法线性范围宽，准确度高，重现性好，且操作简便，无需较多的酶试剂，可用于临床样品测定。

人胃腺苷脱氨酶的分离纯化及性质研究

用硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析、免疫亲和层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００凝胶柱层析从人胃组织中提取出腺苷脱氨酶，酶纯化１９３２４倍，比活力为５７９７Ｕ／ｍｇ蛋白．提取酶液经ＰＡＧＥ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦只呈现一条区带。测得该酶的分子量为４１．２ｋＤ，等电点为ｐＨ４．８．氨基酸组成分析表明该酶由３８８个氨基酸残基组成，Ｎ端氨基酸为精氨酸。酶的最适ｐＨ为６．５，ｐＨ小于５．０或大于９．０时不稳定；最适温度为３７℃，对热不太稳定，以腺苷及２－脱氧腺苷作为底物，其Ｋｍ分别为８７μｍｏｌ／Ｌ和４１μｍｏｌ／Ｌ。

应用高效液相色谱技术（HPLC）测定血清腺苷脱氨酶活性

应用ＨＰＬＣ法改进血清腺苷脱氨酶（ＡＤ）活性的测定，对该酶反应主要因素如血清浓度、底物特异性进行比较实验。并测定３４例健康人血清ＡＤ活性，其正常活性值０．２５５±０．０７５，此法较传统测氨法具有较多优点，如准确性高、重复性好和操作简便。此外，还可适用于检测血清中尿酸含量变化，有助于诊断肾脏疾病和老年痛风症。