测定多种动物血清中LH生物活性RRA法的应用

利用已建立的可测定多种动物血清中促黄体激素 ( LH)生物学活性的 LH-RRA法 ,检测了不同生理状态下的 LH分泌量 ,进一步分析了该 RRA法在实践应用中的可靠性。通过用特异性刺激 LH分泌的 LRH-A3注射动物和诱导体外培养的垂体细胞分泌 LH的试验表明 ,该方法具有很高的特异性和可靠性。结果显示 ,雄兔对于 LRH-A3刺激有特异性反应。 2只兔前后、不同兔同时的对照试验表明 ,该 RRA法可以特异性地检测出 LRH-A3引起的 LH特异性变化。对母猪发情至早期妊娠阶段血清中 LH检测结果表明 ,此 RRA法可有效地测定出猪血清中 LH的动态变化。利用绵羊垂体细胞体外培养模型 ,分别用不同剂量的 LRH-A3( 0、1、1 0、1 0 0、1 0 0 0 ng/孔 )诱导垂体细胞合成和分泌 LH,RRA测定结果表明 ,试验组 LH含量分别比对照组增加 1 .77、1 .78、2 .0 3和 1 .4 6倍 ( P <0 .0 1 ) ,呈现剂量依赖关系。以上结果表明 ,建立的 LH-h CG的 RRA可以替代

人类绒毛膜促性腺激素(HCG)的高分辨双向聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

采用高分辨的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D—PAGE)对人类绒毛膜促性腺激素(~bCG)进行分析。第一向等电点聚焦电泳(IEF)后,在第二向SDS—聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直板上电泳(SDS)—PAGE),电泳结束,用银染色法染色,电泳图谱上得到三条主要的蛋白区带,即A,B和C带,并测定了它们的pH值和分子量,A带分子量是36K为未裂解的~hCG,B带分子量是23K为~hCG的β—基亚,C带分子量是17K为~hCG的α—亚基,通过双向电泳的分析和鉴定,为~hCG的分子结构在双向电泳中的特性提供了初步参考数据。

蓖麻凝集素－Sepharose4B柱层析纯化人绒毛膜促性激素

本文报导一种新的制备和纯化ＨＣＧ的方法。正常２～５个月妊娠妇女尿用苯甲酸钠吸附的脱附品，经５０％乙醇抽提、１０～６０％乙醇分级、ＤＥＡＥ－纤维素柱层析和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ－蓖麻凝集素柱层析纯化后，低温酒精沉淀干燥，可得到生物活性４６００ＩＵ／ｍｇ的ＨＣＧ精品。

利用灌注层析系统分离高活性人绒毛膜促性腺激素

利用先进的灌注层析系统结合分子筛层析进行高纯人绒毛膜促性腺激素 (HCG)的分离纯化 ,得到比活性为 140 0 0I .U ./mg ,SDS PAGE呈现两条主带的高纯HCG .两步层析的总收率达到 6 0 %以上 .为高纯HCG的制备提供了一种简便。