实验性高血压大鼠室旁核加压素分泌的免疫细胞化学研究

精氨酸加压素 (AVP)主要是由下丘脑室旁核 (PVN)和视上核 (SON)的加压素能神经元合成分泌。近年来的研究表明 ,AVP作为一种血管活性肽与高血压的发病有关。本文采用二肾一夹法制成高血压模型。应用光、电镜技术、免疫细胞化学技术和图象分析技术对实验性高血压大鼠 PVN加压素神经元进行了研究 ,并与 SON加压素神经元及正常大鼠进行比较。研究结果表明 ,实验性高血压大鼠 PVN和 SON内 AVP阳性细胞中分泌颗粒密集呈棕黄色 ,正常大鼠组染色浅谈。图象分析检测两组 PVN和 SON中 AVP阳性细胞平均灰度值。所得数据分别经统计学处理。实验组和正常组 AVP神经元在PVN有显著性差异 ;在 SON也有显著性差异。但在实验组内的 PVN和 SON之间无显著性差异 ,正常大鼠组 PVN和 SON之间亦无显著性差异。结果表明 ,实验性高血压大鼠在血压升高时 ,PVN和

坎地沙坦对高血压大鼠左室重构的抑制作用

目的:研究坎地沙坦对大鼠心肌组织中钙网蛋白(CRT)及细胞凋亡蛋白caspase-12表达的影响及其对左室重构的逆转作用。方法:采用双肾双夹术建立高血压大鼠模型。将36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、手术组和坎地沙坦干预组,每组12只(n=12)。喂养6周后,通过颈动脉插管测定大鼠平均动脉压(MBP);称量大鼠的体质量(BW)、心脏质量(HW)、左心室质量(LVW),计算心脏质量指数(HW/BW)及左心室质量指数(LVWI=LVW/BW)。采用免疫组化染色法检测大鼠心肌组织中CRT及caspase-12表达的水平。结果:与假手术组比较,手术组大鼠的MBP、LVWI均有显著升高(P<0.05),内质网应激相关分子CRT及caspase-12蛋白的表达水平均增强。与手术组比较,坎地沙坦干预组大鼠的MBP和LVWI均降低(P<0.05),内质网应激相关分子CRT及caspase-12蛋白的表达水平均减弱。结论:高血压触发的内质网应激可能参与了高血压后期的左室重构过程。而坎地沙坦干预后内质网应激水平明显降低且心室重构在一定程度上得到逆转,提示坎地沙坦可能通过降低CRT和caspase-12介导的内质网应激反应起到抑制高血压左室重构的作用。

血管紧张素Ⅱ2型受体的功能及其信号转导

血管紧张素 2型受体 (AT2 )的生理功能及其信号转导机制 ,过去所知甚少 ,并存在错误认识。近年来对 AT2的研究进展很快 ,对其功能和信号转导机制又有新的发现和认识。

血管紧张素Ⅱ对氧化低密度脂蛋白受体LOX1基因表达的调控

目的 :观察不同浓度血管紧张素Ⅱ对氧化低密度脂蛋白内皮受体LOX1基因表达的影响 ,并探讨其机制。方法 :采用反转录 聚合酶链反应 (RT +PCR)。结果 :①血管紧张素Ⅱ可上调LOXI的mRNA水平 ,且呈剂量依赖效应 ;②应用血管紧张素Ⅱ一型受体阻断剂Losartan后抑制了血管紧张素Ⅱ对LOX1的上调作用。结论 :血管紧张素Ⅱ可显著上调LOXI的基因表达 ,且呈剂量依赖效应 。

金华猪心精氨酸加压素的免疫组化研究

用免疫组织化学 (ABC)法观察金华猪心精氨酸加压素 (AVP)免疫反应 (IR)阳性的神经纤维和细胞的分布 .结果发现 AVP- IR纤维分布于左右心房、心室、冠状窦和冠状动脉周围 ,但以心房为多 .右心房近冠状窦处见散在分布的阳性神经细胞 .IR纤维呈线状、点线状或交织成网络状 ,主要分布在心肌层及外膜下肌层 ,多伴血管走行 ,或攀附血管走行 .这一发现提示金华猪心有与人心相似的神经肽 ,这为研究金华猪心的神经肽在心血管系统中的作用提供了形态学基础 .

血管紧张素-(1-7)的研究进展

本文就血管紧张素（Ａｎｇ）－（１－７）的生成、作用，以及与疾病的关系进行了综述。近年来的研究发现：Ａｎｇ－（１－７）可以由ＡｎｇⅠ和ＡｎｇⅡ转化而成，Ａｎｇ－（１－７）具有扩张血管降压、利尿、抑制平滑肌细胞生长的作用，这些作用与缓激肽、一氧化氮、前列腺素有关，通过一种特殊的受体介导。

罗非鱼肉双酶分步控制酶解制备血管紧张素转化酶抑制肽的研究

本实验以罗非鱼肉为材料,利用Trypsin、Al-calase2.4L、Protamex两两复合后,分步控制酶解制备血管紧张素转化酶抑制肽(ACEIP)。以ACE抑制率(I值)、氨基酸态氮含量(Cn值)、和TCA可溶性蛋白(短肽)含量(Cp值)为指标对酶解过程进行分析,说明双酶分步控制酶解过程以及产物的特点,指出以单酶控制酶解为基础的双酶分步控制酶解法优于单酶控制酶解法。Trypsin与Al-calase2.4L、Trypsin与Protamex及Alcalase2.4L与Protamex双酶分步控制酶解产物经稀释40倍后对ACE的最大抑制率分别可达到82.9%、82.9%和91.91%,具有较好的抑制效果。

促红细胞生成素合成释放调节机理研究进展

促红细胞生成素合成释放调节机理研究进展大连大学医学院形态学研究室贺家全，赵亚平综述促红细胞生成素（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＥＰＯ）是机体内调节红细胞生成的主要体液性生长因子。在胚胎期，ＥＰＯ主要来源于肝脏，但出生后不久，肾脏便很快成为ＥＰＯ合成...

hEPO cDNA重组逆转录病毒的构建

通过ＤＮＡ重组技术，将不含非编码区的ｈＥＰＯｃＤＮＡ片段重组到逆转录病毒质粒ｐＬＸＳＮ，ｐＬＮＣＸ中重组质粒转染ＰＡ３１７细胞后，经Ｇ４１８筛选，抗性克隆细胞培养上清能成功地感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，使之在筛选培养基中形成典型的Ｇ４１８抗性克隆，该克隆细胞染色体中成功地整合了ＥＰＯｃＤＮＡ，并且表达出有生物学活性的红细胞生成素（ＥＰＯ）产物。

糖皮质激素抑制加压素释放的细胞膜机制

利用离休孵育脑薄片和放射免疫测定其释放的精氨酸加压素（ＡＶＰ）方法，探讨糖皮质激素（ＧＣ）在不能进入细胞内的情况下，对去肾上腺大鼠的下丘脑薄片释放ＡＶＰ的快速影响及其可能的细胞膜机制。结果如下：（１）下丘脑薄片能够稳定地释放ＡＶＰ（２ｈ），其释放量为１５．４２±１．２８ｐｇ／ｍｉｎ；（２）牛血清白蛋白耦联皮质酮（Ｂ－ＢＳＡ）对ＡＶＰ的释放具有快速的（２０ｍｉｎ）抑制性效应，在１０￣（－７）─１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ范围内呈剂量一效应关系；（３）ＧＣ细胞内受体拮抗剂ＲＵ４８６（１０￣（－４）─１０￣（－３）ｍｏｌ／Ｌ）能部分地阻断Ｂ─ＢＳＡ的快速抑制效应；（４）孵育液中Ｃａ￣（２＋）程度升高，Ｂ─ＢＳＡ的快速抑制效应明显增强；反之，孵育液中无Ｃａ￣（２＋）则Ｂ－ＢＳＡ的快速抑制效应有所减弱。表明ＧＣ在未进入细胞内的情况下也可快速地抑制大鼠下丘脑薄片释放ＡＶＰ，因此没有通过传统的基因组机制，而是由非基因组机制介导的，其作用部位在细胞膜水平上，可能是影响Ｃａ￣（２＋）的跨细胞膜内流通量或／和影响有Ｃａ￣（２＋）参与的ＡＶＰ释放过程的结果。

血管紧张素Ⅱ受体研究概况

Ｒ－Ａ系统一直备受注目，本文从分子水平和基因水平对Ｒ－Ａ系统中新的热点：血管紧张素受体的研究进行了综述。

Ⅱ型血管紧张素Ⅱ受体与肾脏

近年来，Ⅱ型血管紧张素Ⅱ受体（ＡＴ２受体）介导的生理、病理作用逐渐受到人们的重视。

血管紧张素原基因分子生物学研究进展

血管紧张素原（Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ，ＡＧＴ）是血清中一种较为丰富的糖蛋白，其肽链含４５２个氨基酸，并含有１４％的碳水化合物，分子量为５５～６０ｋＤ。它是肾素作用的唯一底物，经肾素酶切后生成十肽物质的血管紧张素Ⅰ，继而又被血管紧张素Ⅰ转化酶（...

吉培福林对映体的毛细管电色谱分离

在碱性条件下合成了单(六-氧-甲基丙烯酸酯)-β-环糊精(CD),以甲基丙烯酸甘油酯(GMA)和单(六-氧-甲基丙烯酸酯)-β-CD为单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙磺酸(AMPS)用来产生电渗流,正丙醇和1,4-丁二醇为制孔剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,在内径100μm的毛细管内原位聚合制得了手性毛细管电色谱整体柱。采用制得的手性整体柱,在加压毛细管电色谱(pCEC)模式下,对吉培福林对映体进行手性分离,考察了流动相配比、背景电解质pH值、柱温和分离电压等对分离的影响。在缓冲溶液为5mmol/LNaH2PO4-Na2HPO4(pH2.5)、运行电压20kV、毛细管温度15℃条件下,16min内成功分离了吉培福林对映体,其分离度为1.53。

小鼠胚胎干细胞分化心肌细胞血管紧张素Ⅱ 1型和2型受体的表达特征

胚胎干细胞(ESC)具有无限增殖和分化为体内3个胚层来源的各种类型组织细胞的潜能,经过体外诱导能够分化为心肌细胞,亦称为胚胎干细胞分化心肌细胞(ESCM).本研究探讨了ESC诱导分化心肌细胞过程中血管紧张素Ⅱ受体(ATR)的亚型AT1R和AT2R的表达特征.10-4mol/L维生素C体外诱导小鼠R1胚胎干细胞分化为自发搏动的心肌细胞,用免疫荧光法检测分化后的细胞表达心肌细胞特异性标志物α辅肌动蛋白.小鼠胚胎干细胞在诱导分化为心肌细胞以后,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时定量RT-PCR(Real-timeRT-PCR)方法检测到ESCM表达AT1R,并且呈时间依赖性逐渐增加的特点,在第14d达到高峰.Western印记法检测AT1R表达特征与RT-PCR结果相符.Western印记法的结果显示,血管紧张素Ⅱ(10-6mol/L)可作为AT1R激动剂激活AT1R,并使其下游的细胞外信号调节激酶(ERK1/2)磷酸化水平上调,预孵育AT1R抑制剂Losartan(10-6mol/L),此作用被抑制.RT-PCR方法显示,与新生小鼠心室肌细胞相比,ESCM的AT2R表达水平较低.

人促红细胞生成素基因组基因和cDNA的克隆及其在COS－7细胞中的表达

利用ＰＣＲ技术，从正常人胎肝染色体ＤＮＡ中克隆到长度为１５７２ｂｐ的人促红细胞生成素（ＥＰＯ）基因组基因片段，它包含除第一个外显子和第一个内含子外所有外显子及内含子。再人工合成１３ｂｐ外显子１的编码区，并与１５７２ｂｐ片段拼接，从而得到除第一个内含子的人促红细胞生成素基因组基因。将克隆得到的ＥＰＯ基因插入载体ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ得到ｐＳＶ２－ＥＰＯ表达载体，转染ＣＯＳ－７细胞后获得高效表达。利用自行研制的小鼠抗人ＥＰＯ单抗及兔抗人ＥＰＯ多抗，对表达产物进行ＥＬＩＳＡ定量测定，细胞分泌ＥＰＯ量高达２５１±７Ｕ／ｍｌ．Ｋｒｙｓｔａｌ法测得体外生物活性２４１．５±６．５Ｕ／ｍｌ．用ＥＰＯ单抗免疫沉淀结合ＳＤＳ－ＰＡＧＥ对转染细胞的表达产物做了进一步鉴定，清晰地看到了ＥＰＯ条带。从高效表达ＥＰＯ的转染细胞中分离纯化ｍＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增并克隆到ＥＰＯ的ｃＤＮＡ，这为ＥＰＯ在其它系统中的表达及ＥＰＯ的功能与结构的研究打下了基础。

肾上腺素受体与血管紧张素受体间的交互作用

Adrenoceptors(ARs) and angiotensin receptors(ATs) play important roles in regulating cardiovascular actions. In the meanwhile, there is extensive cross- talk between them at various levels, such as aranscription and expression of receptor mRN, expression and pharmacological properties of receptors, signal transduction, and functional effects,which make physiological actions of cardiovascular system more accurate.

非ACE依赖的AngⅡ的生成──糜酶系统

人体内除ＡＣＥ参与ＡｎｇⅡ的形成外，糜酶也参与了ＡｎｇⅡ的形成，糜酶的ＡＣＥ都是高效的ＡｎｇⅡ形成酶，糜酶依赖的ＡｎｇⅡ形成较普遍存在于心内膜间质和外膜及血管的中间部分，而ＡＣＥ依赖的ＡｎｇⅡ形成在血管腔的表面。这些为新研制的糜酶抑制剂、ＡｎｇⅡ受体拮抗剂以及血管紧张素肽原酶抑制应用于临床提供了理论依据．