Bt L-93菌株培养基的正交试验及培养代谢

采用正交试验方法对ＢｔＬ－９３菌株发酵培养基进行筛选，确定了最佳配方ＳＦ－１号，其发酵液菌数可稳定达到７０亿／ｍＬ。通过对２～３龄落叶松毛虫进行生物测定，杀虫效果可达８０％以上。同时考查了此菌株在发酵培养基上的生长、ｐＨ变化、溶氧以及还原糖和氨基氮等诸因子和代谢情况。

小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇酶联免疫吸附测定方法的研究

用B淋巴细胞杂交瘤技术制备了能稳定分泌抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3D7.3D7的亚类为lgG_1.运用该抗体,建立了检测小麦中DON的间接竞争性酶联免疫吸附测定法.该法最低检出量为5ng/ml,敏感范围为5—1000ng/ml;平均回收率为96.6—107.3%;精密度为6.2—13.3%.运用该方法,检测了10份小麦样品.均为阳性,其含量为56.4—1002.0ppb.

离子注入微生物的生物效应研究

用４０ｋｅＶ、６０ｋｅＶ的Ｎ＋离子束对红霉素产生菌进行了离子注入，发现菌株存活率随注入剂量的增加呈指数衰减，并拟合了存活率—剂量公式。扫描电镜观察发现离子注入导致了红霉产生菌孢子的表面损伤。用１００ｋｅＶＡｓ＋注入大肠埃希氏菌和枯草芽孢杆菌，对注入离子在其体内分布进行了Ｒｕｔｈｅｒｆｏｒｄ背散射测量和理论估算。

提取植物和微生物DNA的SDS-CTAB改进法

该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总ＤＮＡ的方法，该法是对提取真菌ＤＮＡ的ＳＤＳＣＴＡＢ法进行改进而成，经过修改后的ＳＤＳＣＴＡＢ法可在数小时内高效地提取细胞总ＤＮＡ．制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于２０ｋｂ的ＤＮＡ主带，基本无ＤＮＡ碎带；不用ＲＮａｓｅ处理，就已经无ＲＮＡ的干扰．ＯＤ２６０／２８０值显示产物纯度较高。

利用生物发光分析技术快速检测微生物的方法学研究

阻碍三磷酸腺苷（ＡＴＰ）－虫萤光素酶发光体系用于微生物快速检测的主要因素之一，在于使用了不适当的非微生物ＡＴＰ清除方法和微生物ＡＴＰ提取方法．文章对非微生物ＡＴＰ的清除和微生物ＡＴＰ提取方法进行了实验研究．选择ＴｒｉｔｏｎＸ－１００作为非微生物ＡＴＰ淬取剂．Ａｐｙｒａｓｅ作为非微生物ＡＴＰ清除剂．三氯醋酸作为微生物ＡＴＰ的淬取剂．观察了淬取剂及清除剂浓度对淬取效果及ＡＴＰ分析的影响．最佳工作浓度分别为：ＴｒｉｔｏｎＸ－１０００．１５％、ａｐｙｒａｓｅ０．１％、三氯醋酸１．５％．对超声、加热超声、加热、三氯醋酸、氯仿淬取微生物ＡＴＰ的方法作了对比研究，认为三氯醋酸方法更简便。

质粒DNA的酚-氯仿一步抽提法

本文介绍了一种极快速提取质粒DNA的方法。该法是对Serghini等发表的方法的改进,全过程只需用酚-氯仿混合液抽提一次,用时少,操作简便,适用于大规模筛选重组克隆子,也可直接用作转化、酶切及DNA序列测定。

蜜环菌遗传测定的单孢分离和培养方法

从平板中直接分离担子菌萌发孢子的单孢分离方法，主要利用自制的毛细管和显徽玻璃针等简单工具操作。该法简便快速，抗污染，获得单孢率高。同时报道一种改进型的担子菌互交不育性测定用培养基MEJA，与国内外目前常用的SR和MEA培养基相比，增加一项判断标准，使互交不育性和互交可育性的反应更加清晰可靠。

用三对引物检测血液中细菌DNA的方法学

目的建立稳定、敏感的检测血液中肠源性细菌 DNA的方法。方法取 23例腹部手术后体温 >38.5℃患者的肘静脉血进行血培养，并以酚抽提法提取全血 DNA进行 PCR，靶基因分别为大肠杆菌特异性的β-半糖苷酶基因、脆弱类杆菌特异性的谷氨酰胺合成酶基因，以及大多数细菌所共有的 16SrRNA基因。以标准菌株提取的 DNA为阳性对照，空白对照为阴性对照， 20例健康志愿者全血 DNA为正常对照。对 20例标本重复检测 2次以确定其复现性。结果 PCR复现率为 95％。血培养阳性率为 13.0％（ 3/23）， PCR检测阳性率为 43.5％（ 10/23），较血培养阳性率高（ P=0.016）。结论按照规范进行的 PCR检测血液中肠源性细菌方法稳定，比血培养敏感。

高效纤维素分解菌分离筛选的研究

从土壤、马粪、牛粪等材料中分离出分解纤维素能力较强的高温细菌３个菌群，中温放线菌３株，中温真菌３株。在稻草培养基中，Ｂ１菌群的纤维素酶活力为５．６６ｍｇ·（ｇ·ｈ）－１，Ａ３菌株的纤维素酶活力为６．５５ｍｇ·（ｇ·ｈ）－１，Ｆ３菌株的纤维素酶活力为５．７６ｍｇ·（ｇ·ｈ）－１，稻草经Ｂ１，Ａ３，Ｆ３分解后，其中的粗纤维含量分别降至６．６９％，６．２６％和６．３５％。

趋磁细菌的分离研究

从与湖南农业大学相邻的东湖水域中采集泥水样，经过样品的富集、趋磁细菌的收集及细菌的培养等过程后，再用超声波破碎细胞，再用永久磁铁收集趋磁颗粒．趋磁颗粒经盐酸溶解后，与硫氰酸铵反应，溶液变为红色，证明有铁离子的存在．结果表明。

马铃薯Y病毒组病毒高产量提取方法的建立

本文报道了高产量提取芜菁花叶病毒（ＴｕＭＶ）、莴苣花叶病毒（ＬＭＶ）、芋花叶病毒（ＤＭＶ）和大豆花叶病毒（ＳＭＶ）的提取方法。本方法通过使用高盐浓度的磷酸盐缓冲液以及在缓冲液中加入氯化镁和脲，并用ＴｒｉｔｏｎＸ－１００作为澄清剂，替代常规使用的氯仿和正丁醇，成功的提取到了大量病毒粒子，上述四种病毒提取的得率分别是ＴｕＭＶ为１７３．３ｍｇ／ｋｇ病叶，ＬＭＶ为９６ｍｇ／ｋｇ病叶，ＳＭＶ为１９９．２ｍｇ／ｋｇ病叶，ＤＭＶ为１７６．６ｍｇ／ｋｇ病叶。

茚三酮比色法测定矿物表面吸附浸矿细菌蛋白质含量

为了研究浸矿细菌在矿物表面的吸附量与金属浸出率的关系,必须测定矿物表面吸附的细菌数量.在100℃的水浴中,用0.5mol/L的NaOH溶液消化矿物表面的细菌时间为25min,然后用0.5mol/L的HCl溶液中和至pH=7.0.在2mL中和液中加入1mL茚三酮显色液,在100℃的水浴中加热20min,冷却6min后,在波长为562nm时测定反应产物的吸光值A.吸光值A对应溶液中的蛋白质含量,进而对应着矿物表面吸附细菌的数量.

几种直接从高温热泉沉积物中提取DNA方法之比较

用酶解法、化学裂解法和微波炉法、冻融法等物理裂解方法组合出 5种方法直接从滇西一个高温热泉沉积物提取DNA。经常规的琼脂糖凝胶电泳检测 ,发现用溶菌酶、蛋白酶K酶解 ,SDS化学裂解结合微波炉法裂解不仅可以得到较大量的DNA ,而且碎片段较少。提取出来的DNA经RNA酶和蛋白酶K处理后可直接进行PCR扩增。同时DGGE(变性梯度凝胶电泳 )电泳检测 ,结果表明 ,此法不仅可以得到该环境中较多微生物分类单位的DNA ,而且还能够较好地体现出它们在量上的差异。

检测中国对虾非包涵体型杆状病毒的PCR方法的建立

中国对虾非包涵体型杆状病毒（ＰｃＮＯＢＶ） 是中国大陆养殖的中国对虾（ Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ） 暴发性流行病———白斑综合征的主要病原，与台湾流行的Ｐｍ ＮＯＢⅢ、泰国的Ｐｍ ＮＯＢⅡ及日本的ＲＶ－ ＰＪ（ ＝ ＰＲＤＶ） 有相似的致病特征、形态学及组织病理学特征。为了解ＰｃＮＯＢＶ 与Ｐｍ ＮＯＢⅢ两种地域分布邻近的毒株基因水平的关系，并建立早期、敏感、特异的检测技术，利用氯化铯密度梯度超速离心技术分离纯化了ＰｃＮＯＢＶ 核衣壳，根据台湾地区分离的Ｐｍ ＮＯＢⅢ的基因序列设计一对引物，从纯化的ＰｃＮＯＢＶ ＤＮＡ 及自然发病的中国对虾、日本对虾和斑节对虾组织ＤＮＡ中成功地扩增出长为３５５ｂｐ 的目的片段，可检测出３ ．４ｐｇ 的ＰｃＮＯＢＶ ＤＮＡ。从健康对虾组织提取的ＤＮＡ未能扩增出目的片段。扩增片段序列与Ｐｍ ＮＯＢⅢ相应的基因序列相同。该结果从分子水平证实ＰｃＮＯＢＶ 与Ｐｍ ＮＯＢⅢ存在基因同源性，同时表明聚合酶链式反应（ＰＣＲ） 可以作为检测ＰｃＮＯＢＶ 的一种敏感、特异、早期、快速的诊断手段。

TTC－脱氢酶活性测定法的改进

以紫色非硫光合细菌、枯草芽孢杆菌为材料，改进了ＴＴＣ脱氢酶活性的测定方法。在该法中样品不需处理，在常温下用三氯甲烷代替丙酮萃取，液－液分层效果好，显色稳定但不褪色。对测定中的诸多影响因素也作了研究，确定了改进后的脱氢酶活性测定的最佳条件。

潜生体定植的原位观察技术研究

对小鼠结肠组织原位标本进行潜生体定植的实验研究。染色采用美蓝初染后 ,高锰酸钾复染的方法。方法简便。

金线莲一促生真菌原生质体制备和再生研究

从药用植物内生真菌中筛选到对植物生长有显著促进作用的粘帚霉属的一种真菌（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍｓｐ.简称Ｙ菌），以它为出发菌株，进行原生质体制备与再生条件的研究。将培养４８ｈ的Ｙ菌菌丝体经过巯基乙醇处理３０ｍｉｎ，并用１％的纤维素酶和溶壁酶混合液于２８℃酶解３ｈ，原生质体得率可达２．１４Ｘ１０７个／ｍＬ，在含０.５Ｍ的甘露醇为稳渗剂的再生培养基上，其原生质体的再生率可达３．８６ｘ１０４。

多波长扫描法测定混合菌浓度

对2一酮基一L一古龙酸发酵过程中，混合菌中各菌量的分别测定方法进行了研究。在吸光度法测定菌量的基础上，提出了利用14个波长下的吸光度值进行拟合计算，分别求取混合菌量的分析方法——多波长扫描法，并据此成功地测定了本体系发酵过程中大、小菌及芽抱的浓度，平均相对偏差小于4％。

红曲霉菌株生物学特性的研究

对降脂红曲霉的生物学特性进行了研究 .通过研究发现降脂红曲霉菌株具有特定的形态特征 ,其最适生长温度为 3 0～ 3 5℃ ,孢子萌发和菌丝生长的最适pH值为 4.0～ 5 .5 ,菌株的耐酒精能力较高 ,体积分数可达 1 5 % .