大花金挖耳内生真菌H-18菌株的鉴定及其抑菌活性研究

对大花金挖耳内生真菌H-18菌株的菌丝提取物进行了抑菌活性研究并对菌株进行了鉴定.离体试验结果表明,H-18菌株菌丝体丙酮提取物在500mg/L浓度下对玉米大斑病菌、番茄灰霉病菌和辣椒疫霉病菌的菌丝生长抑制率均大于80%;组织法和盆栽试验结果表明,H-18菌株菌丝体丙酮提取物在2000mg/L浓度下对番茄灰霉病和辣椒疫霉病的保护效果和治疗效果均在50%以上.结合形态分类学和ITS-5.8S rDNA序列分析结果鉴定菌株H-18为同色镰孢菌(Fusarium concolor).

高氨氮降解菌株DA-1的分离鉴定及降解性能研究

一株高效的氨氮降解菌株DA-1从沼液中分离,16S rDNA序列分析将其鉴定为Arthrobacter arilaitensis。实验研究了不同碳源、C/N比及氨氮浓度对菌株DA-1氨氮降解性能的影响。结果表明:多种有机碳源条件下,当C/N比为10、菌液接种量为1%(v/v)时,在2 d内,菌株DA-1的氨氮降解率达到了80%以上(100 mg/L),随着氨氮浓度的上升降解率随之下降,当氨氮浓度高达1000 mg/L,降解率下降至26.3%。实验还考察了菌株DA-1对沼液样品的氨氮降解能力,通过添加乙醇调节沼液的C/N比,处理5 d后,沼液样品的氨氮浓度下降了70%以上。

13种白腐真菌产漆酶能力的初步比较研究

通过PDA-Bavendamm平板显色反应和变色圈试验方法,对13种白腐真菌产漆酶的能力进行了比较研究,实验结果表明,M5、M6、M7和M12菌株不产生漆酶;M1、M10、M8、M44个菌株产漆酶能力较强.

脱盐牛乳乳清粉中β-乳球蛋白的分离纯化

结合硫酸铵分级盐析、阴离子交换层析和葡聚糖凝胶层析三种方法,从牛乳乳清蛋白中分离、提纯出β-乳球蛋白。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白成分,结果显示:1在质量分数为75%盐析段与其他成分相比含有较多的β-乳球蛋白;2用阴离子交换层析进行进一步的分离,经过两次的阴离子交换层析可得到较高纯度的β-乳球蛋白;3再用Sephadex G-10凝胶层析,电泳结果显示只有一条带,并与β-乳球蛋白标准品(纯度95%)带一致,得到高纯度的β-乳球蛋白。

杜鹃内生细菌DJ-6的鉴定及生防活性研究

为筛选新的生防资源菌种,用平板对峙培养法测定了杜鹃内生细菌DJ-6的抑菌谱。通过菌株形态学观察、培养特征、生理生化特性和分子辅助分类法确定其分类地位,同时对其活菌制剂(BCA)进行田间防效试验。结果表明,DJ-6对供试植物病原真菌均有不同程度的抑制作用,BCA对草莓炭疽病和灰霉病的防治效果都极显著高于对照化学药剂(多菌灵),根据菌株形态观察、生理生化特征和16Sr DNA基因和gyr B基因序列比对分析,鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

一株生物脱硫菌株的分离、鉴定及其脱硫活性的研究

以二苯并噻吩(DBT)为模型化合物,从火力发电厂周围的土壤和污水处理厂的活性污泥中分离得到一株能高效脱除有机硫的菌株S4,并对其进行了分子鉴定及脱硫活性的研究。应用PCR技术克隆到16S rDNA片段,核苷酸序列分析结果表明,该菌的16S rDNA的全序列与醋酸钙不动杆菌存在99%的同源性。该菌的最适脱硫温度为30℃,pH值为6～8,在此条件,该菌株对DBT的去除率可达到82%。

高通量测序技术在宏基因组学中的应用

随着生命科学及研究技术的不断发展，人们对生命现象的了解更加深入。微生物因为其在工业、农业、医疗卫生、环境保护等各方面的重要地位，被越来越多的研究者关注。

蚕豆根尖微核技术检测南盘江曲靖段水质状况

以蚕豆根尖微核技术检测南盘江曲靖段的3月份枯水期水质污染状况,分别以下桥闸、弹药库、八大河3个河段处为取样点,统计微核千分率,并计算污染指数(PI).实验结果表明:南盘江下桥闸河段的污染指数为5.78,弹药库河段的污染指数为12.44,八大河的污染指数为19.56,3个河段都为重污染并且依次递增.此结果与水体自净化作用结果相反,该结果应引起有关方面的注意.

油菜内生真菌的分离鉴定及抑菌作用

从油菜幼苗中通过PDA培养基分离出9株内生真菌,通过形态观察和18S rRNA基因序列分析,其中6株鉴定为链格孢菌(Alternaria alternata),1株鉴定为球毛壳菌(Chaetomium globosum),1株属于镰刀菌属(Fusarium),1株属于炭角菌目(Xylariales)。从鉴定出的油菜内生真菌中,筛选出1株有抑菌活性的生防真菌——球毛壳菌(Chaetomium globosum)YY-11,此菌株对油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、油菜灰霉病菌(Botrytis cinerea)、小麦赤霉菌(Fusarium graminearum)等有不同程度的抑制作用。球毛壳菌YY-11对立枯丝核菌的玻片对峙镜检结果显示:在对立枯丝核菌的抑制过程中,球毛壳的拮抗机理主要是重寄生作用。

一株具有耐铝促生作用的茶树内生细菌的分离鉴定

从健康茶树体内分离出53株耐铝内生细菌,通过促生指标评测,筛选出一株具有显著促生功能的内生细菌G3。该菌株具有明显的固氮与溶磷作用,可以产生植物生长素及铁载体,并具有1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶活性,同时该菌株还对小麦种子萌发及根芽生长具有显著的促进作用。经细菌16S rDNA序列比对确定G3属于伯克霍尔德菌属,并与Burkholderia cepacia具有99%的相似度。铝离子吸附实验则表明,在pH 5.0,温度30℃时,G3对铝离子的吸附效果最好,吸附平衡时间为1 h。

脉冲场凝胶电泳技术及其在真菌学研究中的应用

脉冲电泳是用于分离大分子量DNA的一种电泳技术,已广泛用于真菌的核型分析,种群特异性鉴定,基因定位及遗传分析的研究。介绍了脉冲电泳的原理,发展和基本操作程序,并阐述了脉冲电泳技术在真菌分子生物学研究领域的应用。

优化两歧双歧杆菌培养基的增菌研究

针对两歧双歧杆菌的营养需要,采用正交实验设计优化增殖培养基。结果表明,酵母膏是短双歧杆菌的显著影响因素。最佳的优化培养基配比是:酵母膏0.9%,胰蛋白胨0.3%,大豆蛋白胨0.3%,葡萄糖2.0%,双歧因子0.8%,生长因子10%(均为质量分数)。用经优化的增殖培养基配方测定两歧双歧杆菌的生长曲线及其pH值的变化,确定该菌增殖培养的最适终止时间约为18h,此时平板菌落计数的菌数可高达2.1×1010mL-1。

1株产纤维素细菌的初步鉴定

从果胶中分离得到1株产纤维素膜的菌株AXI,对其16SrRNA序列进行克隆和分析。结果表明,菌株AXI的16SrRNA序列与醋杆菌属菌种的同源性达99%,结合其形态和生理生化特征研究结果,将其归为醋杆菌属。

氮气用于兽用疫苗制品的保存试验

为达到延长兽用弱毒冻干疫苗保存期的目的,进行了用安瓿分装冻干疫苗并充氮气后熔封的试验。将鸡新城疫低毒力活疫苗和猪瘟活疫苗用安瓿分装冻干,安瓿拉丝灌封机充盈氮气后熔封。同等条件冻干的疫苗,分别对充氮气安瓿和抽真空安瓿进行了病毒含量测定,结果显示:鸡新城疫低毒力活疫苗(La Sota株)25℃放置14 d,检测病毒含量(EID50),抽真空的安瓿病毒含量为106.545,充氮气的安瓿病毒含量为106.625;2℃～8℃放置17 d,抽真空的安瓿病毒含量107.68,充氮气的安瓿病毒含量107.5。猪瘟活疫苗(Ι)在25℃和37℃最长放置7 d,抽真空和充氮气安瓿均能达到合格的判定标准。说明在较高温度条件下,抽真空与充氮气保存的样品病毒含量基本一致,充氮气对兽用活疫苗冻干保存效果与真空保存的效果基本相同。使用充氮气方法保存疫苗,不仅避开了兽用疫苗管制玻璃瓶由于保存几年后部分胶塞变形造成失真空的问题,而且使用机械对安瓿充氮气和熔封,免去人工熔封安瓿的麻烦。

钼、钴、锰离子对红法夫酵母生长及积累虾青素的影响

采用单因素实验方法探讨了钼(Mo^(2+))、钴(Co^(2+))、锰(Mn^(2+))对红法夫酵母(Phaffia rhodozyma)生长及虾青素积累的影响.结果表明:Mo^(2+)能有效促进红法夫酵母积累虾青素,但对细胞生长影响不大;Co^(2+)对细胞生长和虾青素的积累都有明显的促进作用;Mn^(2+)可显著提高细胞干重和类胡萝卜素产量,但对虾青素产量影响不大.根据单因素实验结果,通过Box-Behnken的中心组合设计和响应面方法考察了以上3种金属离子复合添加对虾青素产量的影响.拟合结果预测,当MoO_4·2H_2O为33μmol/L,CoSO_4·7H_2O为12μmol/L,MnSO_4·H_2O为14μmol/L时,虾青素理论产量将达到15.03mg/L.采用复合金属离子培养基培养红法夫酵母,得到虾青素产量15.99mg/L,较对照组提高了98.7%,实验结果与模型预测值相近.

小肠结肠炎耶尔森氏菌的检测

通过对多种标准方法进行比较发现,中温增菌能有效复苏增殖小肠结肠炎耶尔森氏菌;碱处理的浓度和时间可在一定范围内根据需要调整;CIN-1琼脂的选择性和鉴别性均最好,可与改良Y琼脂同时使用,提高检出率;API20E和VITEKGNI就能较好地鉴定小肠结肠炎耶尔森氏菌。

枸杞对乳酸杆菌体外保存活力及体内定植的影响

研究了枸杞对乳酸杆菌保存和体内定植的影响。采用MRS液体培养基中添加不同浓度的枸杞水解产物,观察一个月内常温下培养基中乳酸杆菌活菌数的变化。实验小鼠用抗生素脱污染,导致菌群失调后,分别用单一乳酸杆菌治疗、乳酸杆菌与枸杞联合治疗5 d后,统计不同治疗组中指示菌的变化,确定枸杞对乳酸杆菌在体内定植的影响。结果表明,添加不同体积分数的枸杞水解产物后,MRS液体培养基中乳酸杆菌的存活数高于对照组;实验小鼠用不同方式治疗后,联合治疗组乳酸杆菌的数量高于单一乳酸杆菌治疗组。枸杞对乳酸杆菌的保存及体内定植具有促进作用。

固氮菌株XD20对不同甘蔗品种的促生效应

菌株XD20是从甘蔗根内分离获得的一株具有固氮活性的内生菌株。该试验对其进行16SrDNA鉴定和nifH基因扩增,并对其固氮、溶磷、产嗜铁素、产吲哚乙酸(IAA)等促生特性进行分析,然后接种于甘蔗,研究其对甘蔗的促生效应。结果表明:(1)16SrDNA序列的分析鉴定显示,该菌株属于成团泛菌。(2)nifH基因通用引物polyF/polyR扩增得到一条大小为360bp左右的基因序列,该菌的固氮酶活性约为3 187.8nmol·mL^(-1)·h^(-1)。(3)菌株XD20具有产生IAA的能力,IAA浓度可达36.71μg·mL^(-1),同时具有溶解有机磷和产生嗜铁素的能力。(4)接种XD20到不同甘蔗品种B8、ROC22和GT40的组培苗,接菌处理不同程度地提高3个品种甘蔗的株高、生物量以及叶片的叶绿素含量、硝酸还原酶活性、谷氨酰胺合成酶活性以及硝态氮的含量,并对品种B8的促生作用效果最为显著。

多巴染色与光密度法在细胞水平评价原料美白功效的应用研究

目的:在细胞水平评价化妆品原料的美白功效。方法:体外培养小鼠黑素瘤细胞B16,通过多巴特异性染色,利用平均光密度法检测化妆品原料对细胞中黑素生成的抑制作用。结果:多巴对细胞内黑素具有特异性染色,浓度为25μg/ml的曲酸对黑素细胞内黑素生成的抑制率为(48.44±3.44)%,板内标准偏差值仅为7.09%,板间标准偏差值小于7.22%,曲酸、白藜芦醇和绿茶提取物均对细胞内黑素的生成具有较为明显的抑制作用,而桑白皮提取物对细胞内黑素生成几乎没有抑制作用。结论:采用多巴染色和平均光密度的方法检测黑素瘤细胞中黑素含量,精度较高、板间板内误差较小,能够成功用于化妆品原料美白功效的评测。

几种细菌染色方法的改良建议

针对革兰染色法、抗酸染色法、鞭毛染色法、芽孢染色法、荚膜染色法5种传统染色方法的不同特点,结合多年的实践,对这些染色方法进行了改良,形成了一套适合不同需要的染色方法。改良后的染色方法不仅操作简便易学,而且镜检效果良好。