极端嗜热菌Thermotoga hypogea细胞抽提液中醇脱氢酶和氢化酶的活性检测

极端嗜热菌Thermotogahypogea(T.h.)是一株来自中非油田井下的,能够生长在90℃高温下的短杆状厌氧嗜热菌,经研究发现,在T.h.菌体细胞抽提液中存在一种特殊的NADP依赖性醇脱氢酶(ADH)。该酶在T.h.菌的醇醛代谢途径中起着关键性的催化作用,可催化多种醇醛底物的脱氢反应。同时,当以二氯联卞吡啶为作用底物时,T.h.菌的细胞抽提物显示很高的氢化活性(Km=0.29mmol·L-1,Vmax=41.69)。

紫红曲霉M-4液态发酵产孢子工艺优化

采用单因素试验和响应面方法对紫红曲霉M-4液态发酵产孢子的培养基成分和培养条件等因素进行优化。结果表明:马铃薯浸粉为最佳氮源,其最适添加量为0.4 g/100 mL;葡萄糖为最佳碳源,其最适添加量为2.0 g/100 mL;培养基最适pH值为自然条件下的pH值(6.72);培养基最佳装液量为120 mL(500 mL锥形瓶);添加2.0 g/100 mL CaCO3的培养基中菌株发酵产孢子数提高较为明显;最佳传代次数为2代,当菌株培养时间达到72 h时,菌株产孢子数达到最大。进一步通过响应面方法分析得到影响紫红曲霉M-4液态发酵产孢子数3个主要因素的优化条件为马铃薯浸粉添加量0.38 g/100 mL、葡萄糖添加量2.2 g/100 mL、培养时间6.5 d,此条件下紫红曲霉M-4最大产孢子数为(7.47±0.15)×106 CFU/mL,接近理论预测值(7.53±0.31)×106 CFU/mL,实验平均误差为0.79%。优化后紫红曲霉M-4产孢子数较优化前提高30.13倍,菌株单位体积产孢子能力得到大幅度提升。