水体中诺瓦克病毒RT-PCR检测研究

诺瓦克病毒是公认的食源性或水源性非细菌性胃肠炎的主要致病因子之一。建立诺瓦克病毒的RT-PCR检测方法,验证其特异性及灵敏度,并在实验室人工污染水样,进行模拟水样的检测,验证RT-PCR检测方法的实用性。所用引物为RNA多聚酶区的JV12/JV13,多次反复实验,均可产生327bp预期大小的特异条带,并通过杂交进一步证实了其特异性和正确性;在临床粪样中,可达到的最高检测限为50pg/mL。在共42份模拟样品的检测中,经过播毒、富集和浓缩,38份均可检出诺瓦克病毒。其中4份池塘水未检出。在模拟水样中的检测灵敏度为200pg/mL。实验中所建立的试验条件和体系可用于实际水样中诺瓦克病毒的筛选,对水质控制起到了很好的监控作用。

猕猴巨细胞病毒(RhCMV)nested PCR检测方法的建立与初步应用

目的建立猴巨细胞(RhCMV)病毒的nested PCR检测方法,并初步应用。方法根据GenBank中报道的RhCMV全基因序列,针对其中的保守区域Rh85设计两对引物进行nested PCR反应,利用此方法对20份猕猴全血标本进行检测,将检测到的猕猴阳性标本扩增片段进行克隆测序。结果利用保守区域Rh85设计的引物可对人HCMV阳性对照进行扩增。用此方法检测的20份猕猴全血标本,出现2例阳性。其中一例扩增片段经纯化、回收克隆测序后用BLAST软件进行同源性对比,与GenBank中报道的RhCMV序列基本相同。结论建立了从猴全血中直接检测猴RhCMV病毒DNA的敏感、特异的nested PCR方法。

法国移动生物安全三级实验室控制系统剖析

介绍了法国标准型移动生物安全三级实验室控制系统,分析了实验室工作模式与开闭控制流程,详细分析了供电安全设计、变频器压力梯度控制和温度控制,总结了实验室先进的控制技术并提出在中国应用存在的主要问题,为维护和使用该实验室提供技术帮助。

反向遗传操作技术在流感病毒研究中的应用进展

流感病毒属于正粘病毒科,流感病毒属,为单股、负链、分段的RNA病毒.按照病毒核蛋白和基质蛋白的不同可分为A、B和C三个型.A型流感病毒又可根据病毒粒子血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的不同分为不同的亚型.尽管历史上对流感病毒进行了大量的研究工作,但是关于流感病毒决定致病机理和宿主限制性的分子基础却知之甚少;另外流感病毒为什么能够跨越种间的障碍进行传播的机理也无从知晓.

不同采样液对噬菌体活性的影响研究

目的了解噬菌体在不同采样液中耐冲击能力的强弱,筛选用于液体冲击式采样器采集噬菌体气溶胶的最佳采样液和耐冲击性强的噬菌体。方法使用全玻璃液体冲击采样器(AGI-10)对噬菌体进行耐冲击实验,采样液选用蒸馏水(DW)、磷酸盐缓冲液(PBS)和SM液,每种采样液又分为加橄榄油组(50μl)和不加橄榄油组(0μl),在以7L/min的气流冲击30min后测定采样液中噬菌体滴度和终末采样液体积,采用校正存活率评价噬菌体耐冲击性。结果同一种噬菌体在不同采样液中的耐冲击性不同,以SM液作为采样液时,噬菌体存活率较高,SM液中是否加入橄榄油对噬菌体的耐冲击性没有影响。噬菌体SM701、SM702、PhiX174、EcP1和F2在SM液中经7L/min的气流冲击60min后,校正存活率分别约为79%、77%、86%、50%和71%。结论噬菌体在不同采样介质中的耐冲击性不同,其中以SM液保护效果最佳,噬菌体SM701、SM702和PhiX174的耐冲击性较强。

禽流感病毒实验争议重演

8月7日，全球多位禽流感病毒研究专家在国际知名学术期刊Science与Na-ture同期发表公开信，建议展开禽流感病毒H7N9功能获得性突变（Gain—of—Function，GOF）实验研究，以了解H7N9基因突变在自然界发生的可能性，以及在人类中流行的风险性。