噬菌体随机肽库在确定单抗识别表位中的应用

以抗人感冒病毒凝血素蛋白单克隆抗体 12CA5为筛选配基 ,从丝状噬菌体 (M13)表面展示的随机 6肽库中筛选抗体特异性识别的多肽。噬菌体与单抗的结合可以用酶联免疫吸附法鉴定 ,而展示的氨基酸序列可以通过测定相应克隆的插入外源核苷酸来确定。筛选所得的多肽与单抗的表位 ,特别是C -端的四个氨基酸残基PDYA有高度的同源性 ,说明该四肽在单抗与抗原的结合中起到十分重要的作用。

HCPT联合Ver诱导兔结膜成纤维细胞的凋亡实验研究

目的 观察羟基喜树碱 (hydroxycam ptothecin,H CPT)、维拉帕米 (verapam il,Ver)单独或联合应用诱导兔体外培养成纤维细胞 (fibroblast ,FB)凋亡的作用。方法 采用兔结膜 FB体外原代培养及 TU NEL染色法观察 HCPT单独或联合 Ver应用时 ,对兔结膜 FB凋亡指数 (apoptotic index,A I)、形态的影响 ,并进行相关统计学分析。结果 H CPT 1m g· L- 1作用 12 h后 ,细胞开始出现凋亡的形态学改变 ,5～ 3 0 m g· L - 1的 HCPT诱导 FB的 A I高峰均出现在作用后 72 h左右 ,且随着浓度增加 ,凋亡细胞数增多。5m g· L- 1H CPT联合 5m g· L- 1Ver诱导 FB的 A I(48h为 2 4 .5± 3 .4 )于 12～ 4 8h略低于 10 m g· L- 1组 H CPT的 A I (48h为 2 4 .6± 3 .9) ,当作用时间达 72 h时 ,则前者的 A I (3 0 .4± 3 .4 )大于后者的 AI (2 5.2± 5.6) (χ2 =6.74 ,P<0 .0 1)。结论 H CPT可诱导兔 FB凋亡 ,当联合 V er应用时 ,诱导凋亡作用增强。