有效移植转基因后的受精卵

有效移植转基因后的受精卵田小利，刘红，陈兰英，方福德（中国医学科学院心血管病研究所生化研究室，北京１０００３７）受精卵的移植是一项精心、细致的显微操作技术，在转基因动物的制备中，具有连接受精卵和个体发育的桥梁作用。实际工作中尽管工作者细心操作，但移植...

用一种改良的方法分离大鼠肝细胞核

在对细胞核及其组成成分和外来化合物引起DNA分子断裂的研究时,需要分离制备细胞核。用Fasfur和Nicotera法分离细胞核需用超速和高速离心机,在一股实验室缺少这种条件。目前较长用的柠檬酸法又不适于研究核内的某些酶活性。为此,我们在上述三种方法的基础上,

一种线虫、棘头虫快速透明方法

从７０％酒精保存液中取出的线虫、棘头虫标本直接放入高氏洋红中染色，再在乳酸液中透明，结果：虫体透明时间只需３－５ｍｉｎ，虫体结构更为清晰。

绦虫成虫染制方法的改进

本文对传统的绦虫制片染色法作了改进,应用哈里斯氏(Harris,哈氏)苏木精液和1%伊红酒精液对羊曲子宫绦虫成虫制片染色。结果表明,用此法制成的玻片标本具有简便、快速、清晰、不易退色、质量高、效果好等优点,适用于各种绦虫成虫玻片标本的制作。

人用脱毛膏在实验动物被毛去除中的应用

目的 :寻找一种简便、经济、快速的脱毛技术。方法 :采用人用脱毛膏对常用的实验动物进行脱毛试验。结果 :采用人用脱毛膏对常用的 4种动物脱毛 ,小白鼠背部脱毛需 10min ;大白鼠背部脱毛需 15min ;家兔脱毛心前区需 10min ,颈部 15min ,股部 10min ;绵羊脱毛颈部需 2 5min ,股部 2 0min。结论 :显示人用脱毛膏对常用的实验动物的被毛有较好的脱毛效果 ,并无明显的充血和炎症反应 ,优于其他去除动物被毛的方法 ,值得一用。

山羊和家兔各种采血方法的比较

对 10只山羊和 2 4只家兔分别进行频繁采血试验 ,比较各种收集的血液样品和手术安装静脉插管采血与静脉直接采血的可操作性 ,以选择出合适的采血方法。结果发现 ,对于山羊宜取静脉直接采血的方法 ,而对于家兔频繁采血时 ,心脏采血与静脉直接采血都不可行 。

啮齿类动物全胚胎培养方法

啮齿类动物全胚胎培养(Whole EmbryoCulture WEC)最初是由Nicholas和Rudnik(1934,1938)进行实验,获得成功。70年代由New等对此项体外培养技术进行了较大改进。由于该方法具有快速、经济、能够准确控制胚外暴露,并能排除母体对致畸原的影响等优点,近年来在毒理学领域中已用于化学物质致畸性的检验。

改良的猪眼眶静脉窦采血法

采集猪的静脉血液 ,进行血液生物化学成分和血液细胞学分析越来越显得重要。采用改良的猪眼眶静脉窦采血法不仅能获得较多血液标本 ,而且具有更为安全 ,简便 ,血无污染 ,易操作等优点。实践证明改良的猪眼眶静脉窦采血法是目前较好的猪静脉采血技术之一 ,值得推广应用。

用碘六醇分离啮齿动物腹腔渗出细胞的方法

碘六醇（ｌｏｈｅｘｏｌ）是一种新型的无离子含碘化合物。它能溶解于水、惰性强，无细胞毒性，且能高压消毒，为一种理想的细胞分离液。本文描述了利用等渗的碘六醇不连续密度梯度液从Ｗｉｓｔａｒ大鼠和ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔渗出细胞中分离出纯度较高的中性粒细胞（分别为９７％和９８％）；嗜酸性粒细胞（９７％和８３％）；巨噬细胞（９８％和９７％）。细胞活性均在９６％以上。是一种较好的细胞分离方法。

显示肥大细胞的一种简易染色法

本文采用染血涂片的瑞特氏(Wright)染色方法,染皮下疏松结缔组织铺片或切片显示肥大细胞,方法简便,背景清晰,不易退色,效果很好,且便于学生制作。并对本法的作用原理进行了探讨。

动物寄生螨类透射电镜样品制作的改进

本文根据动物寄生螨类特点,改进了常规透射电镜样品制作方法。对不同螨,采用不同的采样和固定方法。对个体较大的种类,先用针在螨体上刺1至若干小孔,以便固定液能较快地进入螨体内部,固定内部组织,以免细胞变性与自溶。同时,还提出用推取捞片法改进常规的贴取捞片法和金属环水面张力引取法,可以得到满意的,无皱折,平坦的大切片。

应用PCR方法通过毛发进行哺乳动物性别鉴定

以哺乳动物的新鲜毛发和在冷冻条件下保存 ４个月的毛发作为材料． 从毛囊中提取 ＤＮＡ、应用 ＰＣＲ方法扩增 ＳＲＹ基因片段、 ＺＦＸ／ＺＦＹ基因片段、探讨哺乳动物性别鉴定的最优化 ＰＣＲ方案。结果表明． 毛发 ＤＮＡ和血液 ＤＮＡ均可获得相同的扩增结果．证实了毛发作为 ＰＣＲ扩增材料是可靠的。对不同材料量、不同模板量、不同提取方法进行比较．优化实验方案．达到１根毛发用Ｃｈｅｌｅｘ－１００提取得到的ＤＮＡ即可以成功地进行动物的性别鉴定。运用这种方法对随机选取的８种动物进行性别鉴定．得到的结果与表型完全一致。动物毛发作为材料不仅可以避免对动物的惊扰或损伤．同时，ＰＣＲ扩增ＺＦＸ／ＺＦＹ和ＳＲＹ基因快速、准确、灵敏．不受物种限制．可以广泛应用于哺乳动物的性别鉴定。

一种在荧光显微镜下同时观察贝螅间质细胞及神经细胞发育的方法

用Ｂｒｄｕ及ＦＩＴＣ同时标记贝螅ｓ期的间质细胞及神经细胞的免疫细胞化学法，不但操作简单，大大缩短实验时间，而且还可避免用同位素Ｈ￣３－Ｔｈｙｍｉｎｄｉｎ标记放射自显影所带来的射线危害。在做成的同一张片子上可通过调节改变荧光显微镜光源的色彩来观察分化前的间质细胞与分化后的神经细胞。在观察两者相互关系上有独特的效果。

对胸鳍棘鉴定鱼类年龄方法的技术改进———简易脱钙切片法

用大鳍、粗唇、瓦氏黄颡鱼等的胸鳍棘作为实验材料 ,用 1 %～ 5 %的硝酸脱钙切片后 ,鉴定年龄。为适应大规模的年龄鉴定 ,对常规的组织切片步骤和时间进行了简化、缩短。与传统的锯片法及磨片法相比 ,该方法易于操作 ,有助于准确的年龄鉴定、年轮半径测量和生长推算 ,特别适用于中。

鱼类染色体显带的研究进展

全世界现存鱼类约有２００００种左右，分属４６目，４５０科，４０３２属［１］。其中淡水鱼类占４１２％，是脊椎动物分布最广，种类最多的类群，具有多种多样的生物学特性和重大的经济价值［１］。在脊椎动物中，鱼类的染色体较小，数目偏多，研究工作难度较大。早期...

应用涂染技术研究人和猕猴染色体的同源性

用２４种人类染色体探针对人和猕猴Ｇ显带染色体进行涂染。结果显示：人类所有染色体在猕猴的染色体组里都有其同源染色体或染色体片段。同源形式有三种：１）人的１条染色体对应于猕猴的单条染色体。该类型有人的１５条常染色体和２条性染色体。２）人的１条染色体对应于猕猴的２条染色体，即人２号染色体对应于猕猴９号和１５号。３）人的２条染色体对应于猕猴的１条染色体。如：人７号和２１号、１４号和１５号、２０号和２２号分别对应于猕猴的２号、７号和１３号染色体。结合Ｇ带分析，人类除１０条染色体与同源的猕猴染色体在结构上相似外，其余１４条染色体与同源的猕猴染色体在结构上有很大差异，包括染色体倒位、染色体融合或断裂等重组。探讨了人类染色体的进化途径。

草鱼生长激素单抗免疫亲和柱的制备及初步应用

用纯化的草鱼生长激素单克隆抗体偶联到CNBr活化的Sepharose4B凝胶上，制成约10ml的亲和层析柱．用该柱一步纯化了重组鲤鱼生长激素基因的表达产物．偶联有13．65mg单克隆抗体的亲和柱一次可纯化得到约0．7mg重组鲤鱼生长激素．酶联免疫受体测定表明它具有强烈的生物学活性，SDS－PAGE表明它为单一蛋白带，分子量约为22000．

银染技术在生殖细胞研究中的应用

新近对传统的银染技术作出改良，以氨银反应观察精子发生及受精过程中碱性蛋白的更替，以ＡｇＡｓ反应观察精子发生过程中ＮＯＲ、嗜银细胞器、细胞骨架及其它嗜银成份的变化以及皮层反应中嗜银成分的变化。

鱼类组织切片技术的改进

鱼类组织切片技术的改进各种方法制片效果图１—５常规方法用二甲苯作为透明剂和石蜡的有机溶剂的石蜡切片图为发眼的卵其大部分卵黄破碎，切片不完整。以松油醇代替二甲苯作为透明剂和石蜡有剂溶剂的石蜡切片图为同一发眼的卵其卵黄完整。切片规整。以松油醇代替二甲苯作...