大鼠脂肪组织源性间充质干细胞的分离及向心肌细胞的诱导分化

目的:探讨脂肪组织源性间充质干细胞体外分离培养的方法并将其向心肌细胞方向诱导分化。方法:无菌条件下获取2月龄SD大鼠腹部肠系膜脂肪组织,0.08%胰酶消化分离出单个核细胞,接种7～10d后形成单层贴壁长梭形细胞。0.25%胰酶消化传代,第3代细胞用于鉴定细胞表面分子及诱导分化。浓度为10μmol/L5-氮胞苷与分离细胞共同培养24h,3周后应用抗desmin及抗α-actnin抗体对诱导细胞进行免疫化学鉴定。结果:所分离细胞约90%表达间充质干细胞表面抗原CD13、CD44。5-氮胞苷诱导后3周,所培养的细胞形成desmin及α-actnin染色阳性的心肌细胞团。结论:体外通过消化法可从脂肪组织中分离出大量间充质干细胞,这些细胞经5-氮胞苷诱导后分化为心肌细胞。

应用氯化锶和放线菌酮对小鼠卵母细胞进行孤雌活化的研究

本试验研究了SrCl_2浓度和作用时间,以及卵龄和蛋白合成抑制剂放线菌酮等对昆明种小鼠卵母细胞活化的影响。研究表明,以含1.6mmol/L SrCl_2的无钙M16液对小鼠卵母细胞活化效果最好(87.0％),显著(P<0.05)优于SrCl_2浓度为1.0、5.0、10.0mmol/L的同种液体。SrCl_2作用时间10分钟显著(P<0.05)好于5、20、30或60分钟。注射hCG后18和20小时卵母细胞的活化率(分别为87.0％和84.6％)显著(P<0.01)高于14或16小时的活化率(分别为4.8％和16.5％)。CHX与SrCl_2联合使用产生显著的协同促进卵母细胞活化作用。

两栖类动物肥大细胞生物学研究进展

文章对两栖类动物,特别是蛙科动物肥大细胞的个体发生、形态学、组织化学及其与外周神经和某些激素的关系及其生物学意义等进行了讨论。

成体干细胞研究进展

近年来由于成体干细胞研究技术的突破 ,成体干细胞的多向分化潜能日益为人们所关注。尤其“横向分化”的发现 ,不仅更新了对成体干细胞的传统认识 ,而且为其临床疾病治疗奠定了基础。介绍了成体干细胞的特点及分化潜能 ,并对其临床应用作了概括性讨论。

遗传性角膜基质变性小鼠及其突变基因的定位

以ENU诱导C57BL/6小鼠获得的角膜浑浊突变系小鼠(B6-Cd)为研究对象,遗传试验及病理切片证实为单基因显性遗传的角膜基质变性;采用连锁分析法,用39个微卫星对角膜基质变性小鼠的150只F2代个体[(B6×D2)F1×D2]进行基因组扫描,发现突变基因与D13M it262(距着丝粒42.6 cM)的LOD值为40.54,与D13M it76(距着丝粒47 cM)的LOD值为38.77,突变基因初步定位于13号染色体距着丝粒45.24 cM处.本研究提供了一种人类遗传性角膜基质变性的极好模型,为该病发生机制、药物开发及突变基因的克隆提供了新型材料.

CD33分子信号传递及其功能的研究进展

CD33分子为一种跨膜受体,主要存在于血液、骨髓和淋巴细胞中.它属于免疫球蛋白超家族成员,并且是能够结合唾液酸的免疫球蛋白样的凝集素家族成员.在这一膜受体内部存在免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM).由于ITIM能够特异性的与酪氨酸磷酸酶shp-1和shp-2结合并向胞内传递抑制性信号,从而达到抑制细胞活性的目的,所以CD33分子主要在临床上作为一种靶位点用于急性骨髓系白血病(AML)的治疗.

哺乳类红细胞成熟过程中自然排核现象的电镜观察

作为探讨红细胞自然去核机理的形态学基础,本文用扫描电镜、透射电镜技术,观察了小鼠红细胞成熟过程中自然去核现象及相关的细微结构变化。贫血小鼠骨髓中晚幼缸细胞表面有微绒毛和皱襞,核异染色质聚集成异染色质块,胞质中细胞器退化,结构趋于简单。晚幼成红细胞经历一个特殊的排核过程,包括核偏位、出现细胞突起和伪足样结构,线粒体及其他细胞器团集于偏位核一方,胞核排出时表面带有一薄层胞质而并不完全裸露。伴随胞核排出的细胞表面最明显变化是微绒毛消失、小皱襞变成大皱襞。排核后的胞质体(网织红细胞)由不规则状逐渐演变为成熟红细胞的双凹盘状结构,排出的核表面先出现小孔或空洞,继而被巨噬细胞所吞噬。

阿司匹林诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的 :研究非甾体类抗炎药阿司匹林 (ASA)对体外诱导人急性白血病细胞的凋亡作用及其相关机制。方法 :采用MTT法测定ASA对HL - 6 0细胞的抑制率 ,通过光镜、流式细胞仪 (FCM)、原位末端标记法 (TUNEL)观测ASA诱导HL - 6 0细胞凋亡 ,半定量RT -PCR检测基因表达。结果 :浓度为 2 .5～ 10mmol/L的ASA能抑制HL - 6 0细胞增殖 ,诱导细胞凋亡 ;ASA与阿糖胞苷 (Ara -c)抗肿瘤作用具有相加效应 ;ASA可下调HL - 6 0细胞c -mycmRNA水平表达。 结论 :一定浓度ASA在体外有抑制急性白血病细胞生长和诱导细胞凋亡的作用 ,其机制可能与c-myc基因下调有关。

小鼠胚胎干细胞单层定向诱导分化为肝样细胞的研究

在建立小鼠胚胎干细胞(ES细胞)无饲养层单层培养体系的基础上,使用丁酸钠(NaB)和表皮生长因子(EGF)作为前期诱导分化剂,诱导分化7 d,再用肝细胞生长因子(HGF)和地塞米松(Dex)诱导分化12 d,建立了体外两步法单层诱导ES细胞分化为肝样细胞的方法,并对诱导分化所得的肝样细胞从形态学、基因表达、蛋白分子标记及细胞功能等方面进行了检测,证明了分化所得细胞为肝细胞,肝细胞分化率为41.67%,为肝细胞来源提供了新的方法。

小鼠胚芽干细胞的分离与培养

目的:探讨胚芽干细胞的提取、培养和体外扩增的最佳条件;筛选胚芽干细胞在体外培养中的活力最佳时期。方法:分离受精11d小鼠生殖腺嵴,经消化制备成胚芽干细胞悬液,将细胞分别接种于基础培养液、同种胎鼠成纤维细胞条件培养液、添加LIF的基础培养液、有饲养层的培养基和与胎鼠成纤维细胞共培养5种不同的培养体系中,比较观察在5种培养体系中胚芽干细胞的形态学、碱性磷酸酶染色和体外分化情况。结果:①在含15%胎牛血清的DMEM/F12基础培养液中培养时,胚芽干细胞贴壁明显减少,EGC克隆形成很少,传代率很低;②在基础培养液中添加白血病抑制因子(LIF)或同种胎鼠成纤维细胞条件培养液时,细胞生长情况与基础培养液培养相比无明显差异;③有饲养层存在时,4～6d后出现鸟巢状胚芽干细胞集落。传4代后集落逐渐减少、变小。6～7代后集落消失;④与胎鼠成纤维细胞共培养时,2～4d即可见EGC集落形成。传6代后细胞的集落逐渐减少、变小;⑤在与胎鼠成纤维细胞共培养时,第2、3代细胞的生长曲线基本相同,接种24h后细胞呈对数生长。培养液的更新可以显著影响小鼠胚芽干细胞的生长。第5代的细胞增殖速度减慢。结论:与饲养层细胞或腹壁组织成纤维细胞共培养可较好地培养和扩增胚芽干细胞;第3代细胞的活力最好。

血中游离钙的研究进展

对近几年中血中游离钙(ICa)的临床应用和检测技术进展情况进行了综述。研究表明,甲状旁腺机能亢进、高钙血症、高血压以及多种钙代谢疾病与血中ICa有相关性。与血中总钙(TCa)相比,ICa可以更灵敏地反映人体钙代谢情况。钙离子选择性电极是ICa最优先选择的分析方法。

木豆叶水提物对兔破骨细胞样细胞的形成及其骨吸收功能的影响

通过对骨髓单核细胞诱导分化形成的抗酒石酸酸性磷酸酯酶（TRAP）阳性多核巨细胞计数，研究了木豆叶水提物对1，25-二羟基维生素D3诱导兔骨髓单核细胞分化形成破骨细胞样细胞的影响．通过破骨细胞样细胞与骨片共培养的方法，用显微摄影结合计算机图像分析测定骨吸收造成的陷窝数目及表面积，研究了其对破骨细胞样细胞骨吸收功能的影响．结果表明，在0．01～100mg／L质量浓度内，木豆叶水提物能够剂量依赖性地抑制破骨细胞样细胞的形成（P〈0．05），同时也明显抑制破骨细胞样细胞的骨吸收活性（P〈0.05），具体袁现在，与对照组比较，其骨吸收陷窝数目和表面积明显减少，但没有呈现出质量浓度依赖性，木豆叶水提物对破骨细胞样细胞骨吸收指数的影响的结果给予了进一步的证实．这提示木豆叶水提物对骨质疏松症患者可能有一定的疗效．

天花粉注射后不同时间小鼠子宫肥大细胞的变化

雌性中国１号小鼠３６只，分为实验组和对照组。实验组分别腹腔注射天花粉后不同时间处死，取子宫组织，作甲苯胺蓝及Ａｌｃｉａｎ蓝，藏红染色，对肥大细胞进行计数后结果表明：给小鼠天花粉，可引起其子宫肥大细胞数量明显增多，而且随天花粉作用时间延长，肥大细胞数量逐渐增多。本文对肥大细胞的这一数量变化与子宫功能的关系也作了进一步探讨。

日本沼虾卵巢发育的组织学与组织化学观察

应用组织切片、组织化学技术,对日本沼虾雌性生殖系统的组织结构、卵巢发育周期进行研究。结果表明,日本沼虾雌性生殖系统由卵巢和输卵管组成,卵巢外被结缔组织膜与生殖上皮。日本沼虾的卵巢发育具有明显的色泽与体积的变化,根据其外部形态和内部结构,将其划分为增殖期、小生长期、大生长期、成熟期和恢复期5个时期。卵子发生可分为卵原细胞期、卵黄发生前期、卵黄发生期、卵黄发生后期4个时期。卵黄发生前期的卵母细胞为小生长期的初级卵母细胞,胞质嗜碱性,无卵黄颗粒;卵黄发生期卵母细胞为大生长期卵母细胞,胞质嗜酸性,早期含卵黄颗粒,后期转变为卵黄块,核位于卵母细胞中央;卵黄发生后期卵母细胞为成熟期卵母细胞,体积长足,核移动到卵母细胞周边,最终核生发泡破裂,核膜消失,卵周围滤泡细胞层变得极薄,等待排卵。

北京鸭肾脏间充质干细胞对LPS诱导小鼠急性损伤免疫反应的研究

探讨北京鸭肾脏间充质干细胞对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠急性损伤的免疫反应.用LPS对小鼠进行腹腔注射,制作急性组织损伤模型,用北京鸭肾脏间充质干细胞对小鼠进行腹腔注射.实验结果表明,LPS诱发炎症反应后,取对数生长期能分泌一定抗炎物质且生长增殖活力旺盛的间充质干细胞注入小鼠体内,可显著降低TNF-ɑ和CRP水平,调节促炎因子IL-4和IL-10对炎症的应答反应,说明间充质干细胞对急性炎性反应有一定的作用.

广西红树林区有孔团水虱的卵子发生

摸清有孔团水虱的繁殖特性,对团水虱的防控和消杀,以及保护红树林生态系统具有重要意义。本研究采用组织切片技术,研究广西红树林区有孔团水虱的卵子发生过程,探讨其繁殖期时间。结果表明,有孔团水虱的卵子发生过程可分为4个时期,分别是卵原细胞、无卵黄卵母细胞、卵黄发生卵母细胞和成熟期卵母细胞。其中:无卵黄卵母细胞又可分为前期、中期和后期3个亚期;卵黄发生卵母细胞可分为卵黄开始沉积时相和卵黄充满时相2个亚期。受精后发育的胚胎存在于母体内。周年调查表明:有孔团水虱雌性体内全年存在着各时期的卵母细胞或胚胎;2-3月无成熟期卵母细胞或胚胎出现。结合全年各期卵母细胞分布以及胚胎和幼体情况判断,广西红树林区有孔团水虱的繁殖期为每年的4月至次年的1月。

血浆载脂蛋白H基因多态性研究进展

载脂蛋白Ｈ（ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＨ）又称β２糖蛋白Ⅰ于１９６１年发现，１９８０年才根据其对脂蛋白酯酶的体外激活作用命名为载脂蛋白Ｈ，成熟的载脂蛋白Ｈ是由３２６个氨基酸残基组成的单链糖蛋白，包括５个相似的结构域，其中富含Ｐｒｏ及Ｃｙｓ。载脂蛋白Ｈ的理化性质与先前发现的载脂蛋白差异较大，入载脂蛋白Ｈ基因定位于１７号染色体，已发现４种等位基因，以常染色体共显性方式遗传，ＡＰＯＨ３等位基因可以显著提高血浆甘油三酯水平。载脂蛋白Ｈ促进血浆甘油三酯清除，抑制凝血并与自身免疫性疾病有关。

新一代光敏剂竹红菌素免疫效应实验研究

为了探讨竹红菌素光敏剂在光动力治疗临床上的应用,本实验通过激光辐照,进行了注射光敏剂后动物体组织形态学实验观察,并测定标本淋巴细胞转化率等免疫学指标,对动物体免疫效应的各方面指标做了较全面的实验研究。发现并总结了临床上的一些有用的数据,为注射光敏剂进行PDT治疗提供了科学依据。