锯缘青蟹卵母细胞的卵黄发生

锯缘青蟹（Ｓｃｙｌｌａｓｅｒｒａｔａ）卵母细胞的卵黄粒形成是通过多种胞器的共同作用完成的。粗面内质网和线粒体是参与卵黄粒和脂滴形成的主要胞器，其演化方式复杂多样：高尔基液泡和胞溶酶体不同程度参与卵黄粒的形成；卵黄粒还可直接在胞质中聚集形成，此外．微吞饮颗粒可参与卵黄合成表明部分卵黄物质也来源于卵母细胞之外．中文讨论了上述结构在卵黄发生中的变化特点和作用。还描述了卵黄粒内一种类似“微管”的微细结构。

蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮(CHX)对猪卵母细胞体外成熟的影响

研究了蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮 (CHX)对猪卵母细胞体外成熟过程中的GVBD、染色质凝集、MⅡ期成熟及卵丘细胞扩展的作用。结果表明 :( 1)培养液中添加CHX ,可抑制卵母细胞GVBD的发生 ,而且此作用是浓度依赖性的 ,但CHX的抑制效果是完全可逆的 ;( 2 )在含 10 μg/mlCHX液中分别培养 0、 6、 12和 2 4h后转入正常培养液再继续培养至 4 8h ,卵母细胞成熟率分别为 84 1%、 77 1%、 4 8 9%和 2 7 8% ;( 3 )正常培养液中培养 0、 6、 12、 2 4、 3 6和 4 8h后 ,再转入浓度为 10 μg/mlCHX液中继续培养至 4 8h ,卵母细胞成熟率分别为 0、 0、 0、 3 1 3 %、 65 4 %和 79 5 % ;( 4 )CHX对卵丘细胞扩展的影响随培养时间延长而增强 ,在CHX中处理时间为 16h或更长 。

硬骨鱼类精子发生及其在系统演化研究中的应用前景

综述了近年来硬骨鱼类精子发生及精子形成方面的研究进展 ,指出应用硬骨鱼类精子发生及精子形成的特征可以系统研究鱼类的系统演化 ,对精子超微结构以及精子表面大分子物质的三维结构的比较研究 ,在鱼类进化生物学研究中具有广阔的应用前景。

原癌基因c-erbB_2、c-myb对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

目的:探讨原癌基因c-erbB2、c-myb对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法:建立小鼠卵 母细胞体外培养模型,用不同浓度反义c-erbB2寡脱氧核苷酸(c-erbB2ASODN)和反义c-myb寡脱氧 核苷酸(c-myb ASODN)分别与未成熟卵母细胞共孵育,观察c-erbB2ASODN和c-myb ASODN对 卵母细胞体外成熟的影响。结果:c-erbB2ASODN和c-myb ASODN均能呈剂量依赖方式抑制24h 卵母细胞的GVBD率和PB1排出率,并显著延迟其成熟的时间,而无义tat寡脱氧核苷酸则无此 作用。结论:原癌基因c-erbB2和c-myb均在卵母细胞成熟过程中起着重要的作用。

轮虫休眠卵研究进展

综述了近年来国内外对轮虫休眠卵的研究概况。重点介绍了轮虫休眠卵的形态、影响轮虫休眠卵形成的因素、轮虫休眠卵的萌发形式及影响其萌发的因素、自然水体中轮虫休眠卵的研究概况。

热应激对小鼠卵母细胞和附植前胚胎及其生长内环境氧化损伤的影响

【目的】研究热应激对机体(肝脏)以及生殖系统氧化、卵母细胞和附植前胚胎氧化及发育能力的影响,探讨热应激影响卵母细胞及附植前胚胎发育能力的机制。【方法】分别用总谷胱甘肽和微量丙二醛测定试剂盒检测热应激后小鼠卵母细胞、附植前胚胎和组织器官内总谷胱甘肽(totalGlutathione,TGSH)、丙二醛(MDA)的含量,并且观察后续胚胎的发育情况。【结果】母体经35℃处理6和12h后,其体内的卵母细胞(6h)和发育至1～3d的胚胎(桑椹胚前期,12h)的后续胚胎发育率显著降低,胚胎中TGSH含量下降(P<0.01)、MDA含量升高(P<0.01),卵母细胞中二者的含量未有变化;发育至第4天、第5天的胚胎(桑椹胚和囊胚)中TGSH和MDA的含量及胚胎发育率均未有变化(P>0.05);发育至第1～5天的体外培养的胚胎分别经39℃处理12h后,胚胎中TGSH和MDA及其发育率均未有变化(P>0.05);随着热应激温度升高和时间的延长,肝脏和输卵管中TGSH显著降低、MDA显著升高;当温度达到41℃时,卵巢和子宫中TGSH显著降低、MDA显著升高。【结论】桑椹胚以前的胚胎遭受母体热应激后,发育能力降低,这与热应激所诱导的氧化损伤密切相关,但是母体热应激后卵母细胞后续胚胎的发育能力降低与氧化损伤无关。体外培养的胚胎经39℃处理12h后,对附植前胚胎氧化损伤和孵出率均无影响。

人的重组促黄体生成素对小鼠卵母细胞体外受精的影响

目的 探讨人的重组促黄体生成素 (r hLH)对性成熟前的小鼠卵母细胞体外受精 (invitrofertilization ,IVF)后的分裂、以及IVF胚的体外培养 (invitroculture ,IVC)过程中发育状况的影响。方法 选用性成熟前的清洁级昆明小鼠 ,分别用r hFSH(人的重组促卵泡素 2 0IU) ,r hFSH +r hLH(各 2 0IU)或 2 0IUr hLH对其进行超排处理 ,通过对从各处理组小鼠卵巢中手工器械分离出来的卵丘 卵母细胞复合体 (cumulusenclosedoocyte,CEO)进行体外受精之后 ,进一步观察这些CEO经IVF后的受精分裂状况 ,以及IVC后的发育情况。结果 r hFSH +r hLH处理组小鼠卵母细胞IVF率 (72 .2 % )极显著高于r hFSH单独处理组 (39.9% )或r hLH单独处理组 (37.2 % )的相应指标 ;r hFSH +r hLH处理组和r hFSH单独处理组的IVF胚 ,发育至 8～ 16细胞阶段的比例 (8～ 16细胞率 )趋于一致 (2 5 .15 %∶2 7.18% ) ,但是都极显著高于r hLH处理组的 8～ 16细胞率 (17 2 4% ) ;r hFSH处理组IVF胚发育至 16～ 32细胞阶段的总比例 (16～ 32细胞率∶33 0 1% ) ,极显著高于r hFSH +r hLH处理组及r hLH单独处理组的指标 (1.75 %和 0 )。结论 在IVF条件下 ,r hLH对小鼠卵母细胞的受精有明显的促进作用 。

IGFs对卵泡生长发育的影响

ＩＧＦｓ对卵泡生长发育的影响李键，王建辰（西北农业大学动物医学系，陕西杨陵７１２１００）近年来，人们对卵泡生长发育的内分泌调控机制的认识开始发生变化。传统的观点认为，卵泡的生长发育主要受促性腺激素和性腺类固醇激素的调节。新的研究发现，卵巢内部还存在着...

影响小鼠腔前卵泡体外发育因素的研究

通过在培养液中添加胎牛血清 (FCS)、牛血清白蛋白 (BSA)及卵泡刺激素 (FSH) ,对小鼠腔前卵泡进行体外培养 ,观察卵泡腔的形成及雌二醇 (Estradiolum ,E2 )和睾酮 (Testosteronipropionas ,T)

微黄镰玉螺卵黄发生过程中细胞器的变化

应用透射电镜技术观察微黄镰玉螺卵黄发生过程 ,结果表明 :卵黄合成早期的卵母细胞 ,胞质内出现大量管状或泡状膜性囊泡 ,卵黄前体物质逐渐增多并开始向囊泡内聚集 .在卵黄合成中期 ,细胞质内高尔基复合体和内质网活动很活跃 ,细胞质中逐渐形成和积累大量卵黄颗粒 ,核伸出伪足状突起 ,核质间交换频繁 .卵黄合成后期 ,细胞质充满卵黄粒 ,细胞器不发达 ,但核糖体在整个卵黄合成期间很发达 .电镜观察还表明微黄镰玉螺卵母细胞的卵黄颗粒形成是通过多种胞器的共同作用完成的 .高尔基复合体和内质网是参与卵黄粒形成的主要胞器 ,线粒体和核糖体也参与卵黄粒的形成 .此外 。

鲑鱼促性腺激素释放激素类似物和Domperidone诱导几种养殖鱼GtH分泌和排卵的研究

鲑鱼GnRH的一种类似物:(D-Arg^6,Trp^7,Leu^8,Pro^9NET)-LHRH(sGnRH—A)和多巴胺拮抗物domperidone对诱导鱼类GtH分泌和排卵具有非常高的活性。sGnRH-A和DOM同时一次注射能促使大鳞副泥鳅和鲤鱼的GtH大量迅速释放,并有效地诱导它们以及草鱼、鲢鱼、鳙鱼、鲮鱼等排卵或产卵。

去除卵丘细胞的小鼠卵母细胞体外成熟过程中的超微结构变化

去除卵丘细胞会降低小鼠卵母细胞的成熟质量。利用透射电子显微镜技术观察去卵丘细胞的小鼠卵母细胞体外成熟过程中的超微结构变化,目的是在亚细胞水平上寻找由于卵丘细胞的去除而导致卵母细胞质量降低的原因。结果显示,成熟培养过程中微绒毛逐步从透明带内撤出,并竖直于卵膜表面;卵周隙逐步形成;线粒体由成簇到散布于卵质内;皮层颗粒由多到数量极少。因此,皮层颗粒的减少或继续生成路径的障碍可能是去除卵丘细胞的小鼠卵子成熟质量降低的重要原因。

卵泡生长发育及其调控的研究进展

综述了卵泡生长发育的动态模式,即卵泡经原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和窦腔卵泡发育至排卵卵泡的过程,着重阐述了卵泡生长发育过程中的调控机制,为进一步研究卵泡的生长、发育和排卵机制提供了理论基础。

催乳素及生长因子对体外培养的鸡卵泡膜细胞增殖的调节作用

目的和方法：本文利用建立的鸡卵泡膜细胞无血清培养，研究了一些激素及生长因子对鸡卵泡膜细胞增殖的调节作用。结果：ＰＲＬ能刺激体外培养的鸡卵泡膜细胞增殖，并具有剂量依从关系，其中１０００ｎｇ／ｍｌ的ＰＲＬ达到最大刺激效果，使膜细胞增殖３５５％；ＬＨ、ＥＧＦ、Ｉｎｓ、ＣＴ和Ｔｆ亦均能刺激鸡卵泡膜细胞增殖，且具有剂量依赖关系。

山羊卵巢无腔卵泡的体外发育

在三维琼脂凝胶培养体系中 ,山羊无腔卵泡的生长模式类似于体内。在一定培养时间内能善为保持其完整的立体结构和形态。原始卵泡能在体外启动 ,并得到一定程度的生长。初级卵泡能发育为次级卵泡 ,次级卵泡发育为有腔卵泡。卵泡在体外发育过程中 ,表现出了明显的优势化。本试验首次初步揭示了山羊无腔卵泡的体外发育基本过程和规律。

小鼠不同类型孤雌激活卵的形成及其孤雌胚发育状况的研究

注射hCG 18h后收集小鼠卵母细胞,采用不同试剂和作用不同时间对其进行激活,观察不同类型激活卵的形成情况及孤雌胚的发育状况,并对单倍体孤雌胚进行了核型分析。结果表明:1)几种激活方法均可得到均质单倍体、嵌合单倍体、1个原核(1PN)的杂合二倍体和2个原核(2PN)的杂合二倍体4种孤雌激活类型。乙醇及Srcl_2单独激活后出现单倍体的比率较高;而乙醇联合6-DMAP以及Srcl_2联合CB激活后出现二倍体的比率较高;2)10%的乙醇单独作用10min,卵母细胞激活率最高,达到63.3%;在激活卵的原核类型上,2-细胞(嵌合单倍体)的比率随着乙醇刺激强度的增加而增加,但乙醇单独激活后过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率较差;3)10%的乙醇处理5min后染色观察发现出现2细胞嵌合单倍体的比例较高,但接着用6-DMAP分别处理2、4、6h,跟踪观察发现杂合二倍体类型出现比率随时间延长而升高,处理6h后出现2PN杂合二倍体比率最高,且过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率也显著高于乙醇单独激活,但嵌合单倍体数量较不加6-DMAP时却减少;4)10%的乙醇、2mmol/L的6- DMAP联合5μg/mL的CB处理6h后,过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率与不加CB比较差异不显著;5)10mmol/L的Srcl_2单独及联合CB分别作用2、4h均能有效激活小鼠卵母细胞,单独及联合CB作用4h的激活率最高,两者差异不显著;在激活卵的原核类型,Srcl_2单独激活后出现单倍体类型的比率较高,而联合CB后出现二倍体的比率较高,且过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率与Srcl_2单独作用相比差异显著;6)先Srcl_2处理1h后染色观察发现形成均质单倍体的比例较高,但接着用CB分别处理1、2h,跟踪观察发现杂合二倍体类型出现比率大大提高,同时发现均质单倍体类型数目反而有所减少。结论:小鼠卵母细胞孤雌激活类型与不同激活试剂有关;不同类型激活卵的数目与激活剂浓度及作用时间有关;6-DMAP和CB有利于卵母细胞激活后形成二倍体孤雌胚;二倍体孤雌胚的发育情况较单倍体孤雌胚要好;嵌合单倍体激活卵可能由于卵裂球融合而形成二倍体激活卵;单倍体孤雌胚在8-细胞期开始出现二倍体核型,孤雌胚的核型中还出现较高比率的非整倍体。

鲫鱼卵子发生──Ⅱ一些细胞器的变化和放射带的形成

在卵原细胞和早期的Ⅰ期卵母细胞中，没有内质网和线粒体．在Ⅱ期和Ⅲ期的卵母细胞中，线粒体和内质网逐渐增多，线粒体常被一层粗面内质网包绕着．在成熟卵子中，线粒体和内质网多分散在卵皮质部分．线粒体有多种形态结构．高尔基复合体经历了从少到多，再到少的变化过程．另外，鲫鱼的卵母细胞中还有丰富的环形片层．放射带是由卵母细胞和滤泡细胞伸出突起并向其中分泌物质而形成．

小鼠卵母细胞去核时间对卵丘细胞核移植的影响

对超数排卵的小鼠分别在注射HCG后14～16,16～18,18～20和20～22 h采小鼠卵母细胞用于核移植,观察小鼠卵母细胞的去核时间在体细胞核移植中的作用.结果显示,在注射hCG后14～16,16～18,18～20和20～22 h,小鼠卵母细胞去核效率分别为80.09%(338/422),73.12%(283/387),55.02%(230/418)和48.74%(193/396);重构胚激活率分别为66.20%(190/287),75.43%(175/232),84.78%(156/184)和85.14%(126/148);重构胚的囊胚发育率分别为13.94%(40/287),7.33%(17/232),3.80%(7/184)和1.35%(2/148).试验证实小鼠卵母细胞在注射hCG后14～16 h进行去核较为适宜.

中华大蟾蜍卵母细胞成熟过程中膜电位变化的实验分析

中华大蟾蜍冬眠卵和高温卵的静息膜电位分别为-41.51±O.77 mV和-43.83±1.39mV。孕酮作用后,冬眠卵发生GVBD,膜逐渐去极化,至第二次成熟分裂中期,膜电位甚至可降至-10 mV;高温卵不发生GVBD,在早期(前4小时左右)出现膜去极化,之后恢复。高温休克(37-38℃)卵虽然亦不发生GVBD,膜去极化的情况与高温卵的相似,然而,卵质中却出现MPF。将孕酮作用后的冬眠卵核液转移注入未经任何处理的冬眠卵中,未能激起受体卵GVBD ??和膜去极化。接受MPF或促冬眠卵成熟因子的冬眠卵,均发生GVBD和膜去极化。接受MPF的冬眠卵的GVBD时间较孕酮诱发的提前约4小时,膜去极化的进程也相应提前4小时左右。蛋白质合成抑制剂嘌呤霉素能抑制由孕酮诱发的冬眠卵成熟效应,而不能抑制由MPF诱发的卵成熟效应。接受MPF的高温卵发生GVBD和膜去极化,而高温卵本身无能产生MPF,也不具备扩增MPF的能力。上述实验结果说明,冬眠卵质膜去极化与GVBD之前的核液无关,与MPF的出现亦无直接关系,该逐渐去极化的全过程可分二阶段,前阶段的去极化与孕酮诱发的早期蛋白质合成活动有关,后阶段与含MPF的卵质引起的生物学效应有关。