中国蚯蚓资源研究:Ⅰ.名录及分布

为满足中国蚯蚓分类学、蚯蚓生态学研究和蚯蚓资源开发的需求,本文综述了2005年10月前记录的中国(包括香港、澳门、台湾地区)陆栖蚯蚓(寡毛纲:后孔寡毛目)的名录及其分布,共9科28属306种(含亚种)。其中1990年后发现的新种(包括台湾地区)有59个种(含亚种)。

重金属对蚯蚓胃肠道上皮细胞超微结构损伤的研究

重金属污染区的白颈环毛蚓（Pheretimecalifornica）胃肠道粘膜上皮细胞损伤的透视电镜观察，结果表明，重金属的轻污染区以及中、重污染区的蚯蚓胃肠道粘膜上皮细胞均发生了不同程度的损伤，表现为上皮细胞的核周腔扩大，甚至解体，同时可见到线粒体肿胀，凝聚及线粒体嵴消失呈空泡变，高尔基复合体、内质网扩张，溶酶体增生，这些病变随污染程度的不同而不同，重污染区比轻污染区要严重。

在蚯蚓影响下土壤Pb、Cd有效态的变化及小白菜对Pb、Cd的富集转移作用

研究了在蚯蚓影响下Pb、Cd添加量不同（Pb：500-1 700μg·g^-1;Cd：1-30μg·g^-1）的土壤中Pb和Cd有效态及其含量的变化以及小白菜（Brassica chinensis L.）对土壤中Pb和Cd的富集和转移作用。结果显示,在蚯蚓的影响下,Pb添加量为500-1 400μg·g^-1的土壤中酸提取态和可还原态Pb含量显著提高,有效态Pb总含量也随土壤中Pb添加量的提高逐渐增加;Cd添加量为5-20μg·g^-1的土壤中酸提取态Cd含量显著提高,有效态Cd总含量也随土壤中Cd添加量的提高而逐渐增加;当土壤中Pb和Cd添加量分别达到1 700和30μg·g^-1时,蚯蚓对Pb和Cd基本无活化作用。在蚯蚓的影响下,小白菜地上部分Pb含量显著提高,对Pb的转移系数也均高于各自的对照,地上部分和地下部分对Pb的富集系数分别为0.037-0.061和0.401-0.628。在蚯蚓影响下,在Cd添加量较低（1-5μg·g^-1）的土壤中小白菜地上部分和地下部分的Cd含量以及对Cd的富集系数均高于各自的对照;而在Cd添加量较高（10-30μg·g^-1）的土壤中小白菜地上部分和地下部分的Cd含量以及对Cd的富集系数均低于各自的对照,并随土壤中Cd添加量的提高逐渐降低;小白菜地上部分和地下部分对Cd的富集系数分别为1.196-11.516和1.744-20.425;各处理组小白菜对Cd的转移系数与各自的对照差异不显著。研究结果显示,蚯蚓主要对土壤中酸提取态和可还原态Pb以及酸提取态Cd有活化作用,并且可促进Pb由小白菜地下部分向地上部分的转移,但对Cd的转移无明显促进作用;此外,小白菜对Pb的富集作用不明显,但对Cd有一定的富集能力,这种能力的大小与土壤Cd含量有关。

双胸蚓纤溶酶的纯化及性质

用硫酸铵分段盐析、超滤膜分级分离及DEAE-纤维素、Sephadex A-25和Sephadex G-50三种柱层析方法从双胸蚓组织的粗提取液中分离纯化出一种纤溶酶,分子量为29kD,由一条肽链组成。此晦具有强烈的溶解纤维蛋白的作用,对家兎实验性血凝块也具有明显的溶解作用。此酶的最适pH为8.0,在pH7.6～8.4之间活力相差不到2％;酶在PH4.7—11.0范围内稳定;酶作用的最适温度为57℃;此酶热稳定性较好,于25～50℃保温3小时,酶活力基本不变,60℃时,活力保留65％。金属离子Na^(+)、K^(+)、Mg^(2+)等可提高此酶的活力,而Hg^(2+)、Ca^(2+)等金属离子对此酶有不同程度的抑制作用。

活性污泥中红斑顠体虫的繁殖速率

以剩余污泥为培养基,观察并测定了红斑顠体虫的无性繁殖.红斑顠体虫的无性繁殖以横裂方式进行,分裂后形成母体和子体.母体和子体分裂后会再次长出芽结.在溶解氧、食物、生存空间等不成为限制性增长因子的情况下,25℃时母体的平均连续繁殖世代时间为15.4 h,子体的平均连续繁殖世代时间(无性繁殖的世代时间)为42 h.由此得红斑顠体虫的平均倍增时间为11.2 h,比增长速率为1.49 d-1.

蚯蚓抗菌物质的诱导

初步研究了超声波诱导后蚯蚓血淋巴中抗菌物质的产生规律及抗菌活性。结果表明:最佳诱导时间为3.5min;抑菌作用最强出现在诱导后72h;在几种供试菌中,血淋巴对枯草芽孢杆菌抑菌作用最强。

赤子爱胜蚓胆碱酯酶的纯化和性质

赤子爱胜蚓的TritonX－100抽提液经PEG2000-磷酸钾缓冲液处理、离子交换层析及凝胶过滤后，获得电泳纯的胆碱酯酶．纯酶经鉴定为糖蛋白，凝胶过滤法和SDS-PAGE法测得其Mr分别为59000和58000．酸性氨基酸含量约占24％，碱性氨基酸含量约占12％，最大紫外吸收入λ＝272um；酶作用最适温度θ＝39℃，热稳定性较差；最适pH为7．8，在pH7．0～8．0酶较稳定．对碘化硫代乙酰胆碱的Km值为88μmol／L，有过量底物抑制现象．Mg2＋、Ca2＋和Mn2＋对酶活性的影响较小，DFP则对该酶有强烈抑制作用．

蚯蚓细胞色素P450基因的克隆及序列分析

蚯蚓是一种土壤环境的指示生物,参与土壤中有毒化学物质的降解等过程。细胞色素P450酶是动物体内参与外源化合物代谢的主要酶系。本实验通过已有的其他物种的细胞色素P450酶保守序列设计简并引物,用RT-PCR的方法成功扩增出了赤子爱胜蚓体内的一条P450序列(670bp左右,Genbank登录号:KF823788),并对其保守区域、氨基酸构成及三级结构进行了分析。这是首次从蚯蚓体内扩增出P450基因,为下一步从基因层次研究蚯蚓机体对外源化合物的解毒功能及其机理提供了参考。

蚯蚓外源酶与内源酶酶解产物分析

本试验采用了枯草杆菌(Bacillus subtilis)AS1.398枯草杆菌蛋白酶和自溶制备蚯蚓肽,通过前期单因素试验,设计正交试验L9(34),以氨基氮数,多肽浓度为衡量指标,对最佳酶解条件进行筛选研究,并分析了酶解液氨基酸组成和相对分子量的分布。结果表明:AS1.398枯草杆菌蛋白酶最佳酶解条为pH 6.5、酶浓度1%、温度50℃、反应时间8 h,在此条件下,酶解蚯蚓蛋白的每100 mL水解液氨基氮数可以达到16.55 mmol,多肽浓度达9.22 mg/mL;自溶酶解蚯蚓的最佳条件pH 7.0、底物浓度1∶2、温度50℃、反应时间6 h,在此条件下,酶解蚯蚓蛋白的每100 mL水解液氨基氮数可以达到21.55 mmol,多肽浓度达11.65 mg/mL;二者酶解产物分子量大部分是在5000以下的多肽、小肽及氨基酸的混合物,其中分子量在300以下占了80%,氨基酸组成平衡,含量丰富,可用来制取新型氨基酸微量元素及小肽添加剂。通过控制酶解条件,蚯蚓可以利用自身的酶源自溶来代替外源酶,从而降低成本。

可口革囊星虫三种同工酶表达初步分析

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法 ,对可口革囊星虫的收吻肌、吻、肠、肾管和体壁 5种组织或器官进行了同工酶分析 .共分析了酯酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶等三种同工酶 .结果表明 :酯酶具有显著的组织特异性 ,其余两种酶相对不明显 ;可口革囊星虫的肠除了行使消化功能外 ,还和吻、肾管一起在清除自由基方面起着重要作用 ;

镉诱导威廉环毛蚓（Pheretima guillelmi）金属硫蛋白的分离纯化及特性研究

蚯蚓威廉环毛（ｐｈｅｒｅｔｉｍａ ｇｕｉｌｌｅｌｍｉ）经皮下注射ＣｄＣｌ２溶液诱导后，整体匀浆，再经热沉淀、乙醇沉淀后，经凝胶过滤Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０柱层析，得两个镉结合蛋白峰，分子量依次为４３ｋＤ及１９ｋＤ。这两个组份再分别经ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ柱层析，各得三个镉结合蛋白峰。根据光谱学特征、巯基含量及氨基酸组成等分析，表明凝胶过滤第二峰为金属硫蛋白（ＭＴ），其经ＤＥＡＥ柱层析所得三个峰为ＭＴ三个亚型，Ｎ末端分别为Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ａｌａ。

蚯蚓的药用活性成分研究

综述了蚯蚓的药用活性成分的研究。

人工催产时泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)尾部神经分泌系统单胺荧光和乙酰胆碱酯酶活性的变化

在人工催产过程中,我们用单胺荧光结合乙酰胆碱酯酶(AChE)组化方法对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)尾部神经分泌系统进行了研究。给泥鳅注射LRH-A(0.05微克/克)12小时后,尾部神经分泌系统中单胺荧光强度明显比催产前增强,但神经分泌细胞的AChE活性却明显降低;当注射LRH-A 24小时和48小时后,单胺荧光强度减弱,而AChE活性却明显增强。

豆豉溶栓酶的研究进展

对豆豉溶栓酶的菌种选育、产酶条件、分离纯化、基因的克隆与表达、酶学性质以及药效试验的研究进展进行综述。

中国海洋鱼类单殖吸虫研究ⅩⅫ.分室科一新记录属

记述采自广东汕尾青干金枪鱼Thunnus tonggol鼻腔中的1种单殖吸虫——卡氏嗜鼻虫Nasicola klawei(Stunkard,1962)Yamaguti,1968.所获标本的形态结构及大小与原始描述及Yamaguti(1968)、Kohn等(2004)的描述基本一致,但在子宫结构、睾丸数目及后吸器边缘小钩的长度上略有差别.嗜鼻虫属及卡氏嗜鼻虫均为我国新记录,青干金枪鱼为宿主新记录.

贵州远盲属蚯蚓二新种(单向蚓目:巨蚓科)

本文报道发现于贵州的远盲属蚯蚓二个新种——少腺远盲蚓,新种Amynthas meioglandularissp.nov.和簇腺远盲蚓,新种Amynthas fasciculus sp.nov.文中作者对新种的外部形态和内部构造进行了详细的描述,并与各自的相似种类进行了比较。二个新种的模式标本均于1988年5月采于贵州雷公自然保护区。

三种水栖寡毛类EST、LDH和MDH同工酶电泳的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳-特异性组织化学染色技术对颤蚓科(Tubificidae)中的三种—苏氏尾鳃蚓(Branchiura sowerbyi Beddard)、克拉泊水丝蚓(Limnodrilus clagaredianus Ratz.)和奥特开水丝蚓(Limnodrilus udekemianus Clap.)的EST、LDH和MDH同工酶进行比较分析研究。实验结果表明LDH同工酶具有多态现象,EST同工酶谱复杂,EST和MDH同工酶均准确反映出种属间的差异。因此,EST同工酶和MDH同工酶电泳酶谱可能成为寡毛类分类学上的生化指标。

直隶环毛蚓消化道扫描电镜观察

采用扫描电镜方法对直隶环毛蚓消化道各个部位内壁表面的超微结构进行观察，并对其各部位的结构进行了比较，结果表明：环毛蚓消化道各部位已有明显分工，各部位结构特点与其功能相适应。同时讨论了各部位的生理功能。

对蚯蚓纤溶酶分子量的测定及其溶栓效果的观察

采用ＳＤＳ—ＰＡＧＥ不连续缓冲系统凝胶进行电泳，测得蚯蚓纤溶酶分子量为２８８４０Ｄ，并对家兔实验性血栓进行溶栓效果观察，结果显示０．１ｍｇ／ｍｌ的纤溶酶在８ｈｒ内可完全溶解３ｃｍ长的栓子。

中国线蚓科的研究 Ⅰ.半线蚓属的新种及新记录(英文)

本文报道线蚓科（Ｅｎｃｈｙｔｒａｅｉｄａｅ）半线蚓属（Ｈｅｍｉｅｎｃｈｙｔｒａｅｕｓ）４种，其中２种为新种，即扁毛半线蚓（Ｈ．ｐｌａｎｉｓｅｔｏｓｕｓ ｓｐ．ｎｏｖ．）和短囊半线蚓（Ｈ．ｂｒａｃｈｙｔｈｅｃｕｓｓｐ．ｎｏｖ）。另２种是国内新记录，即史氏半线蚓（Ｈ．ｓｔａｐｈｅｎｓｏｎｉ）和洛氏半线蚓（Ｈ．ｌｏｋｓａｉ）。