用RAPD技术研究3种鳗鱼的种质鉴定

利用RAPD技术从32个随机引物中筛选出20个引物,对日本鳗(Anguillajaponicus)、欧洲鳗(Anguillaanguilla)和美洲鳗(Anguillarostrata)的DNA进行扩增,均得到1～13条大小不等的DNA片段,长度大部分在500～2300bp,其中14个引物共扩增出37个特异性标记,可用来区分这3种鳗鱼。日本鳗和欧洲鳗和美洲鳗种群内相似系数分别为0.885,0.717,0.686;种间遗传距离分别为:日本鳗和欧洲鳗0.747,日本鳗和美洲鳗0.668,欧洲鳗和美洲鳗0.211。这与形态学分析的结果相一致。

欧洲鳗鲡血液指标的研究

以 114尾欧洲鳗鲡 (Anguillaanguilla)为材料 ,测定了血液中红细胞数、白细胞数、血红蛋白值、比积、白细胞分类计数值及各型血细胞大小等正常值 ;按统计学原理进行分析 ,并对总体正常值范围进行估计。

欧洲鳗鲡血液某些生物化学指标的测定

以 1 1 4尾欧洲鳗鲡为材料 ,测定了血液中肌酸酐、血糖、尿素氮、甘油三酯、总胆固醇、总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、乙酰胆碱脂酶、γ 谷氨酰转肽酶、钠、钾、钙、镁、氯化物、二氧化碳、无机磷等血液指标值。按统计学原理进行分析 ,并对总体正常值范围进行估计。获得了欧洲鳗鲡血液生理生化指标参考值。

不同生长状况下日本鳗鲡耗氧率的初步测定

日本鳗鲡（Ａｎｇｕｉｌａｊａｐｏｎｉｃａ）是我国淡水养殖的主要名优鱼类。鳗鲡养殖过程中，会出现为数不少的生长缓慢的个体，这些个体饲养２年，仍然达不到每尾１５０ｇ以上的出口商品规格，俗称“老头苗”，对养鳗的经济效益产生很大的影响。关于鱼类耗氧率的测定研...

鳗鲡病原菌16S rRNA基因序列测定及系统进化分析

对从福建省不同鳗鲡养殖场发病鳗鲡肝脏中分离并经感染证实的35株致病菌的16S rRNA基因进行序列测定和系统进化分析。用CTAB法提取各菌株DNA,以细菌16S rDNA通用引物进行PCR扩增,用限制性片段长度多态性分析1、6S rDNA序列分析和系统进化分析对其进行分子鉴定,构建系统进化树。结果表明:35株致病菌分别属于γ-变形菌纲和厚壁菌门2大类群的6个属和1个科,主要种类是气单胞菌属的嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌、简氏气单胞菌和豚鼠气单胞菌等,占63%;其次是芽孢杆菌属细菌;少量为鲁氏耶尔森菌、弗氏柠檬酸杆菌、克雷伯氏菌属、假交替单胞菌属细菌和肠杆菌科细菌。

长江上游江津江段鲢种群的年龄和生长特征

三峡工程的建设对长江鱼类产生了显著的影响.为了解三峡工程建设后长江上游鲢的种群状况,根据2008-2010年在江津江段采集的149尾标本对鲢的年龄和生长特征进行了研究.采集到的鲢体长范围为95.0～860.0mm,平均体长为(451.1±171.6)mm,体质量范围为13.5～9 750.0g,平均体质量为(2 314.2±2 125.9)g.鲢鳞片上的年轮表现为闭合性切割和疏密特征,年龄结构由0+～5+龄共6个龄组组成,其中优势龄组为1+～4+龄.体长(L)与鳞径(R)呈显著的线性关系:L=139.841 2R+15.973 4;与体质量(W)呈显著的幂函数关系:W=1.876 7×10-5 L2.992 5.长江上游江津江段鲢为匀速生长类型,其Von Bertalanffy生长方程为Lt=1 036.974 8[1-e-0.188 2(t+0.216 5)],Wt=19 864.662 3[1-e-0.188 2(t+0.216 5)]2.992 5,其生长拐点年龄为5.80龄.尽管年龄结构和生长性能表现出一定的衰退趋势,但与湖泊、水库中的鲢种群相比,长江上游鲢种群仍然具有相对复杂的年龄结构和较优的生长性能.三峡工程建设后,长江上游已逐渐成为鲢重要的栖息地和产卵场,该江段鲢种群在4大家鱼资源保护中应该得到重点保护.

鳗鲡线粒体DNA的研究

本文采用差速高心法及RNase消化法制合并约化了鳗鲡（AnguillajaponicaTemminketSchlegel）肝脏线粒体DNA（mtDNA），用8种限制性内切酶对mtDNA进行了分析．BglⅡ、XhoⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ、HiedⅢ、Bg、XbaⅠ在鳗鲡mtDNA分子上分别具0、1、3、5、2、7、2、4个切点．mtDNA分子量约10．16×106道尔顿，大小为16．44kb．根据鳗鲡肝mtDNA的单酶及双酶完全酶解片段的大小，建立了鳗鲡mtDNA的限制性酶切图谱．

鲤脑垂体匀浆液和人绒毛膜促性腺激素混合注射对鳗鲡脑区促性腺激素释放激素和血清促性腺激素及性类固醇激素含量的影响

雄鳗注射 5～ 6次、雌鳗注射 9～ 10次鲤脑垂体匀浆液 (CPE) +人绒毛膜促性腺激素 (HCG)能分别诱导精巢和卵巢发育成熟。在雌雄鳗鲡 ,注射CPE +HCG可显著增加端脑、间脑、中脑和下丘脑mGnRH的含量 ,而对后脑和延髓mGnRH的影响较小 ;注射CPE +HCG增加雄鳗后脑和延髓cGnRH -Ⅱ含量 ,对雌鳗脑区cGnRH -Ⅱ则无显著影响。雌雄鳗鲡每次注射CPE +HCG后 1天 ,血清促性腺激素 (GtH)急剧上升 ,10天后逐渐下降 ,但雌鳗在注射 7次后 10天血清GtH水平仍然显著高于相应对照组。雄鳗注射CPE +HCG 1～ 4次后 ,血清睾酮浓度无显著变化 ;雌鳗每次注射CPE +HCG后 ,血清睾酮浓度升高并一直维持在较高水平。雌鳗血清 17β -雌二醇浓度在注射 4～ 6次期间与对照组无显著差异 ,注射 7次后显著上升。

日本鳗鲡排卵的人工诱导

对日本鳗鲡(Anguillajaponica)卵巢发育的时间与催产率的关系进行研究,对卵母细胞在体内胚泡破裂(GVBD)的发生过程、以及用17α-OHP和17α,20β-DHP诱导日本鳗鲡排卵的方式、时机和催产效果进行观察,结果表明,卵巢发育时间越长,催产率越低。造成催产率低的原因主要是由于日本鳗鲡在卵母细胞成熟后期,雌鳗个体对催产药物敏感性差异较大,催产时机难以掌握。通过采用适合日本鳗鲡卵母细胞的透明液观察GVBD的发生过程,并根据每个个体GVBD的发生速度,制订适宜的催产方案基本解决了上述难题。本实验采用CP、HCG、17α-OHP或17α,20β-DHP混合催产,使其平均催产率由35 4%分别提高到91 9%和93 0%。17α-OHP和17α,20β-DHP的催产剂量为5mg/(500g)和10mg/(500g)。在(21±0 5)℃水温条件下,催产效应时间分别为15～18h和13～16h。

日本鳗鲡(Anguilla japonica)和欧洲鳗鲡(A. anguilla)的微卫星差异

采用PCR扩增单位点微卫星的方法研究了日本鳗鲡 (Anguillajaponica)和欧洲鳗鲡(A anguilla)的遗传差异。结果表明 ,微卫星等位基因数目分布范围为 8— 2 6,35组被试 ( 5个分类单元各 7个位点 )的显著性检验的结果表明其杂合性显著缺乏 (P <0 0 1 ) ,日本鳗鲡的 4个亚种群的所有微卫星位点均偏离哈 温平衡 ,对日本鳗鲡种群分化进行的正合检验结果也否定了种内个体随机分布的假设。FST值为 0 0 0 98(P =0 0 0 0 4 8)揭示了日本鳗鲡亚种群内存在较弱但显著的遗传分化。各分类单元间的FST及RST逐一对应矩阵显示了日本鳗鲡与欧洲鳗鲡两个远缘种之间存在显著差异。计算Goldstein的遗传距离并由此推算出两个种的分化时间约为 2 0 0多万年。

饥饿对鳗鲡某些血液指标的影响

鳗鲡 (Anguillajaponica)饥饿 4～ 2 0d后 ,红细胞数 (RBC) ,红细胞比容 (HCT) ,全血比重 (BSG)及红细胞脆性 (EOB)均下降 ,血红蛋白含量 (Hb)则上升到一定水平后维持稳定。其中红细胞性指标 (即红细胞最大抵抗值 )对饥饿反应敏感 ,且离散率低 。

鳗鲡某些繁殖生物学特性的研究

自然界生活的成年鳗鲡,普遍是雌性个体较大,雄性个体较小。体长在400mm以下全为雄性,700mm以上全为雌性。400～700mm之间雌、雄均有出现。随着体长的增长,雄鳗出现率渐减,而雌鳗出现率渐增。肥满度是雌性稍大于雄性。雌、雄个体的体长与体重关系为W=5 596×10-8L3 492,W♀=4 72×10-7L3 165,W♂=1 317×10-8L3 717。体围与体长、消化道长与体长的关系分别为Y=0 22L-34 82,D=0 56L-12 11。达性成熟年龄的雌、雄鳗蓄养在淡水或海水中,其性腺成熟系数都很小。在人工催熟情况下,雌、雄鳗的性腺成熟系数都显著增加;在一定范围内,雌鳗体重与体围都随催熟注射次数的增加而逐渐增大;肝体系数也有一定的增加。

真鲷、黑鲷及其杂交子代的染色体构成与AFLP分析

采用核型分析和AFLP技术对真鲷、黑鲷及其杂交子代进行遗传差异分析。结果显示真鲷、黑鲷和杂交子代均含有48条染色体,核型分别为2n=2st+46t,NF=48、2n=4m+4sm+2st+38t,NF=56和2n=30m+8sm+2st+8t=48,NF=86,杂交子代核型与其父、母本种均不一致。两对AFLP选扩引物组合在真鲷、黑鲷和杂交子代中共扩增到278个条带,其中黑鲷特异性条带93条、真鲷特异性条带108条;杂交子代中分别出现了21条父本种(黑鲷)特异条带和67条母本种(真鲷)特异条带,另出现了15条非双亲条带。杂交子代与真鲷、黑鲷的遗传相似系数和遗传距离分别为0.113、0.350和2.180、1.050,表明杂交子代总体上更偏向于母本种。染色体核型和AFLP条带分析结果表明真鲷(♀)×黑鲷(♂)所获得的杂交子代为含有48条染色体的异源二倍体,且父、母本遗传物质在杂交中发生了部分重组,杂交子代表现出一定的偏母系遗传特性。

日本鳗鲡早期幼苗趋光性及视觉发育特征

研究了出膜后第1～9 d的日本鳗鲡(Anguilla japonica)早期幼苗,在不同光强度下趋光性分布及视觉发育组织学特征。结果显示:在8900 lux的强光条件下,日本鳗鲡早期幼苗随着发育,表现出明显的负趋光性。到9 d时,占存活幼苗52.2%的幼苗都集中在最暗的110 lux区域;而在2300 lux的弱光条件下,表现出趋弱光性。到9 d时,占存活幼苗44.6%的幼苗都集中在25 lux区域。视网膜发育的组织学观察发现,日本鳗鲡幼苗的视网膜发育首先出现的是外界膜和内界膜,最后出现的是外丛层。幼苗的整个视网膜结构到9 d时,发育为9亚层结构。视网膜中最发达的是外核层,由3种细胞构成。发育最快的是内核层,由2种细胞构成。结果表明,与日本鳗鲡早期幼苗趋光性有关的因素包括视网膜分层、视网膜厚度、内核层细胞数等多种因素。另外,本研究还探讨了日本鳗鲡幼苗在自然界可能生存的水深和光环境。

鳗鲡肝脏、脾脏显微与超微结构

经光镜和电镜观察发现：鳗鲡肝脏的肝小叶不规则。肝细胞胞质内富含多种细胞器及包含物。胆小管由２—４个肝细胞围成，相邻肝细胞间有连接复合体封闭胆小管。肝血窦为有孔型、孔处无隔膜，内有巨噬细胞。窦周隙明显，未见贮脂细胞。肝细胞向胆小管腔与窦周隙面伸出许多指状微绒毛。脾脏内白髓中淋巴细胞聚集成群，未见明显脾小结、淋巴鞘。红髓由脾索与脾窦组成，动脉分支末端（壁厚的毛细血管）可开放于红髓，无明显巨噬细胞中心。脾窦及脾小动脉内皮细胞通常为长杆状、沿血管纵向平行排列。脾窦为有孔型，孔处可见薄的隔膜。脾小动脉内皮外为２—５层平滑肌（多数为纵行）。

海鳗性腺形态和发育的研究

本文对海鳗性腺的形态与组织结构及发育周年变化进行了研究。海鳗卵巢由许多紧密排列的卵巢叶片构成，精巢则由许多精巢叶片构成。整条卵巢或精巢的外部无被膜包裹。组织学观察表明，卵巢在５月下旬后陆续发育成熟，精巢在４月下旬陆续发育成熟。５月下旬进入繁殖期，６月～７月为繁殖盛期。随后，产过卵的个体进入恢复期并重新发育。组织学与扫描电镜观察显示，海鳗的精子头部呈镰刀形，有一较短的尾部。

日本鳗鲡初孵仔鱼耗氧率的初步研究

研究了不同盐度、温度、光照条件下日本鳗鲡仔鱼 ( 4 .4 2± 0 .0 34 mm )的耗氧情况。结果表明 ,幼鱼的耗氧率随盐度的升高而下降 ,随温度的升高而上升 ,耗氧率遮光比在自然光下要低。同时还测定了幼鱼的窒息点。

大豆黄素对美洲鳗生长及肝、肠组织中几种代谢酶活性的影响

为探讨大豆黄素对鳗鱼生长的影响,实验选用美洲鳗(Anguilla rostrata)幼鳗,分别饲喂含大豆黄素的质量比为0、5×10-6、10×10-6、20×10-6和40×10-6的饲料,测定增重率、肝脏系数、常规体成分,肠道蛋白酶和淀粉酶活性,肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性及酸性磷酸酶(ACP)活性.结果表明:大豆黄素处理组的鳗鱼肝脏系数、体增重率、鱼体成分与对照组的差异不明显;饲料中大豆黄素质量比为40×10-6剂量时肠道蛋白酶活性显著增加,随大豆黄素剂量增加,淀粉酶活性随之增加,且20×10-6、40×10-6剂量时肠道淀粉酶活性显著增加;20×10-6、40×10-6剂量时大豆黄素使肝中SOD活性显著升高,10×10-6剂量时ACP活性显著高于对照组;其余各组与对照组差异不明显.说明大豆黄素没有明显促进鳗鱼生长,但提高了消化酶活性,且通过提高体内的抗氧化活性和ACP活性而增强鱼体的抗应激能力.

欧洲鳗鲡胃肠道激素免疫组织化学的研究

用免疫组织化学技术研究了９种哺乳动物胃肠道激素抗体在正常生长欧缓和僵鳗胃肠道的定位分布。研究结果表明， ５－ＨＴ， ＳＯＭ、ＧＡＳ、α－１－ＡＴ和 Ｐ物质免疫活性内分泌细胞存在于正常鳗和僵鳗胃肠道中，其余４种抗体呈阴性反应。文中讨论了胃肠道激素在僵鳗成因中可能的生理作用。