复方钩藤降压片调节TLR4/NF-κB信号通路对自发性高血压大鼠炎症状态的影响

目的研究复方钩藤降压片对TLR4/NF-κB信号通路以及血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)、血管紧张素(1-7)[an-giotensin1-7, Ang(1-7)]、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)相关炎症因子表达的影响,探讨复方钩藤降压片对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensire rats, SHR)的可能降压机制。方法将21只7周龄雄性SHR随机分为模型对照组(SHR组)、复方钩藤降压片治疗组(SHR-G组)、缬沙坦片治疗组(SHR-D组),另取7只雄性WKY大鼠为空白对照组(WKY组)。所有大鼠给予相应干预,6周后采用ELISA方法检测血清中AngⅡ、Ang(1-7)和MCP-1的含量;采用免疫组织化学方法检测胸主动脉内皮细胞中TLR4和NF-κB p65的蛋白水平。结果 (1)SHR组血浆促炎因子AngⅡ、MCP-1的含量明显高于WKY组(P<0.05),而抑炎因子Ang(1-7)的含量明显低于WKY组(P<0.01);经复方钩藤降压片和缬沙坦片干预,可以明显降低SHR血浆中AngⅡ和MCP-1的含量(P<0.05),而增加血浆抑炎因子Ang(1-7)的含量(P<0.05 or P<0.01)。(2)SHR组胸主动脉内皮细胞中TLR4和NF-κB p65的蛋白水平明显高于WKY组(P<0.01);相对于SHR组,SHR-D和SHR-G组大鼠胸主动脉组织中TLR4和NF-κB p65的表达量显著降低(P<0.05 or P<0.01)。结论复方钩藤降压片可通过抑制胸主动脉组织内皮细胞TLR4/NF-κB信号通路的活化,降低促炎因子AngⅡ、MCP-1的水平,提高抑炎因子Ang(1-7)的水平,抑制机体的炎症状态。

虫草多糖脂质体对小鼠肝损伤的保护作用

本文研究虫草多糖脂质体对小鼠用ＣＣｌ４及硫代乙酰胺致肝损伤的预防及治疗作用。实验显示：小鼠口服虫草多糖脂质体后，可使肝损伤后的ＡＬＴ下降，其幅度与剂量有关。小鼠肝组织病理切片显示：虫草多糖脂质体对于ＣＣＩ，损伤的肝组织有一定保护作用，但由硫代乙酰胺损伤的肝组织无效。

高粱泡叶治疗Ⅱ型糖尿病的分子作用机制的网络药理学研究

目的:通过网络药理学方法研究,预测高粱泡叶治疗Ⅱ型糖尿病的潜在分子作用机制。方法:通过Gene Cards数据库检索Ⅱ型糖尿病相关靶点;建立“高粱泡叶-化学成分-靶点”作用网络,通过Metascape数据库对交集靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,运用AutoDock及Pymol对度值靠前的靶点与对应活性成分进行分子对接验证。结果:筛选出高粱泡叶12个成分和169个预测靶点,2026个疾病靶点;通过Venny2.1在线分析,得到73个共同靶点。GO富集分析得到蛋白丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活性、成纤维细胞增殖的正调控、胰岛素结合、血管内皮生长因子激活受体活性等多种生物学过程和癌症的途径、PI3K-Akt信号通路、ErbB信号通路等21条信号通路。分子对接结果显示筛选的主要活性成分与其对应靶蛋白均具有较好的结合活性。结论:高粱泡叶通过众多靶点、多途径、多通路治疗Ⅱ糖尿病。该研究为高粱泡叶的后期开发利用奠定了相关理论基础。

基于多组学探讨川陈皮素调控脂质合成氧化逆转胃癌顺铂耐药的机制

目的运用脂质代谢组学和网络药理学寻找川陈皮素对胃癌顺铂耐药细胞(AGS-DDP)的核心靶点,并结合细胞实验进一步探究川陈皮素逆转胃癌顺铂耐药的机制。方法采用UPLC-Orbitrap质谱系统进行非靶向脂质组学分析。利用GENE Card、TCMSP数据库挖掘川陈皮素和甘油磷脂代谢通路的潜在靶点,通过微生信在线作图工具平台整合二者的交集靶点,并进行基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,通过STRING数据库绘制蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,运用Cytoscape软件将川陈皮素的核心靶点可视化。川陈皮素给药后,通过CCK-8法检测AGS和AGS-DDP细胞的存活率;流式细胞术检测AGS-DDP细胞的凋亡情况;划痕实验检测AGS-DDP细胞的迁移能力;Western blotting检测AGS-DDP细胞的B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)和三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶(adenosine triphosphate citrate lyase,ACLY)蛋白表达。结果AGS和AGS-DDP细胞通过脂质组学分析检测得到31个亚类中的1450个差异的脂质化合物,主要富集在甘油磷脂代谢通路,对川陈皮素潜在靶点进行KEGG富集分析结果显示川陈皮素具有逆转铂类耐药的潜力。细胞实验结果显示,与对照组比较,川陈皮素剂量相关性地抑制AGS-DDP细胞的存活率(P<0.05、0.01),增加AGS-DDP细胞对顺铂的敏感性(P<0.05),且能诱导AGS-DDP细胞凋亡并抑制其迁移能力(P<0.05、0.01)。Western blotting实验结果显示川陈皮素组Bax、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05、0.01),Bcl-2、N-cadherin、Vimentin、ACLY和PPARγ蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01)。结论AGS和AGS-DDP细胞的差异脂质代谢产物主要富集在甘油磷脂代谢通路,川陈皮素通过调控脂质合成氧化关键基因抑制AGS-DDP细胞增殖、迁移,最终逆转胃癌顺铂耐药。

绞股蓝总苷对自发性高血压大鼠血压影响及其作用机制研究

研究绞股蓝总苷对SHR血压、RAAS系统活性的影响及其作用机制。方法:选用WKY和SHR,随机分为WKY组、SHR对照组、厄贝沙坦治疗组、绞股蓝高低剂量治疗组和联合治疗组;测量鼠尾动脉血压变化,检测血清中肾素、Ang II、醛固酮水平以及血管平滑肌内ATR 1mRNA表达。结果:各组大鼠收缩压均较SHR对照组有所下降,且联合治疗组降压效果优于单用厄贝沙坦治疗组;绞股蓝高剂量治疗组、厄贝沙坦治疗组,大鼠血清肾素、Ang II、醛固酮含量相较于对照组均显著下降;厄贝沙坦治疗组、绞股蓝高剂量治疗组及绞股蓝联合厄贝沙坦治疗组大鼠血管平滑肌内血管紧张素受体(ATR 1)mRNA 的表达相较于对照组均下降。结论:绞股蓝总苷具有降压的作用,降压幅度与给药剂量成正比,其机制可能与抑制RAAS系统,下调ATR 1mRNA表达相关。