基于网络药理学的乳腺康注射液治疗乳腺癌机制

利用网络药理学和分子对接技术探讨乳腺康注射液治疗乳腺癌(Breast Cancer,BC)的有效成分和作用机制.通过TCMSP数据库和查询文献获取乳腺康注射液中的中药活性成分及其作用靶点,检索乳腺癌疾病相关靶点,两者取交集后,使用Cytoscape 3.9.0建立“药物-成分-共同靶点”网络.将共同靶点输入String数据库,构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图.将相同的靶基因输入DAVID数据库进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析.根据活性成分节点和靶点的适当参数进行排序,使用PyMol软件对筛选到的靶基因编码的蛋白质和核心成分进行分子对接.共筛选出106个潜在活性成分和891个作用靶点,乳腺癌疾病相关靶点1341个,药物疾病交集靶点为236个,PPI网络及拓扑学分析显示TP53、EGFR、VEGFA、ESR1、HRAS、STAT3、CCND1、SRC等是乳腺康注射液治疗BC的核心靶点.GO功能富集分析显示主要参与酶的调控、RNA转录等生物过程.KEGG通路富集分析得到了癌症信号通路、PIK3/AKT、Hepatitis B等20条相关性最高的通路.将核心靶点编码蛋白与活性成分对接,结果良好.通过网络药理学探讨和分子对接验证,显示乳腺康注射液可能通过多靶点、多信号通路发挥干预乳腺癌的形成和治疗疾病的作用.

奇任醇的抗炎免疫实验研究

目的研究奇任醇的抗炎作用及对免疫系统的影响。方法建立大鼠佐剂性关节炎模型,观察奇任醇对大鼠足肿胀、脾淋巴细胞增殖、T淋巴细胞亚群的影响;观察奇任醇对小鼠耳廓肿胀、大鼠肉芽肿的抗炎作用;通过碳粒廓清、小鼠迟发型变态反应和血清溶血素水平实验,评价奇任醇对小鼠非特异性和特异性免疫功能的影响。结果奇任醇能够抑制佐剂性关节炎大鼠的足肿胀,增强佐剂性关节炎大鼠脾淋巴细胞增殖能力,调节T淋巴细胞亚群比例;抑制小鼠耳廓肿胀和大鼠肉芽肿增生;抑制正常小鼠特异性免疫功能。结论奇任醇可抑制佐剂性关节炎大鼠的原发性与继发性足肿胀,抑制急、慢性炎症反应,调节机体免疫功能。

TLC生物自显影技术在药物筛选中的应用

TLC生物自显影是一种将薄层色谱分离和生物活性测定相结合的药物筛选方法,具有操作简单、耗费低、灵敏度和专属性高等优点,是一种快速测定生物活性的方法。可用于对具有抗菌/真菌,抑制胆碱酯酶以及清除自由基和抗氧化等活性的天然产物的筛选,可实现活性指导的提取分离。利用TLC生物自显影,可测定单体活性化合物的最小抑制浓度(MID),通过与对照品的MID值比较,能够推测该化合物活性的强弱。此外,利用TLC生物自显影定性及定量的特征,还可对食物、水样及动物组织中抗生素残留量进行监测。现综述TLC生物自显影技术及其在天然产物筛选中的应用,同时对其优点及不足也进行了总结。

桂枝茯苓胶囊对实验性大鼠前列腺增生的影响

目的观察桂枝茯苓胶囊对丙酸睾丸素致大鼠前列腺增生症的影响。方法大鼠去睾丸7d后,sc丙酸睾丸素(3mg/kg)建立大鼠前列腺增生症病理模型,同时连续ig桂枝茯苓胶囊(2.16、1.08、0.54g/kg)30d,末次给药后1h,处死动物,取前列腺称质量,测定体积并进行病理学检查。结果桂枝茯苓胶囊给药组大鼠前列腺质量和体积均低于模型组(P<0.05,0.01);病理镜检显示桂枝茯苓胶囊给药组前列腺腺腔组织扩张较轻,且增生腺上皮高度较模型组低,尤以大、中剂量组最为明显(P<0.05,0.01)。结论桂枝茯苓胶囊可明显抑制大鼠前列腺组织增生。

黄芪甲苷对新生乳鼠心肌细胞过氧化氢损伤的保护作用

目的:探讨黄芪甲苷(ASⅣ)对培养的心肌细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养的新生Wistar大鼠心肌细胞分为对照组、0.1%二甲基亚枫(DMSO)溶剂组、H2O2损伤组(0.2 mmol.L-1)、阳性药黄芪注射液组及ASⅣ小、中、大(3、10及30 mg.L-1)剂量组。药物预先处理心肌细胞30 min后,加入H2O2损伤心肌细胞24 h,观察ASⅣ对心肌细胞形态学的影响,MTT法测定心肌细胞存活力以及测量乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的变化。结果:H2O2损伤组心肌细胞部分皱缩,细胞核暗淡,伪足消失;ASⅣ各剂量组心肌细胞损伤程度减轻,心肌细胞核折光性较H2O2损伤组好,伪足略变细;ASⅣ各剂量组细胞存活力均高于H2O2损伤组(P<0.05或P<0.01);ASⅣ10及30 mg.L-1剂量组LDH、MDA含量低于H2O2损伤组(P<0.05或P<0.01),SOD、NO含量高于H2O2损伤组(P<0.05或P<0.01)。结论:ASⅣ可对抗H2O2对心肌细胞的损伤,其机制与提高心肌细胞抗氧化损伤能力、诱导NO生成有关。

Caco-2细胞模型及其对黄酮类成分作用机制研究进展

Caco-2细胞模型作为ADME/Tox研究平台中肠吸收模型之一,已广泛用于药物动力学研究,可通过体外试验预测药物在体内的吸收和代谢,阐明药物在体内的吸收机制、毒性、药物吸收过程中的相互作用、药物的化学结构和体内转运关系以及药物代谢稳定性等。以黄酮类成分为代表,介绍Caco-2细胞模型在中药有效成分吸收代谢机制研究方面的应用进展。

大蒜新素对人巨细胞病毒感染的人胚肺成纤维细胞凋亡的影响

目的研究大蒜新素对人巨细胞病毒(HCMV)诱导感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)凋亡的动态变化及凋亡调控基因bcl-2和fasmRNA表达的影响。方法用流式细胞术测定HELF在高、低感染复数(MOI分别为2.5、0.25)HCMV感染后1、12、24、36、48、72、96h凋亡细胞比率;大、中、小剂量大蒜新素(9、6和3μg/mL)处理正常的和感染的HELF细胞(MOI为2.5)后上述各时间点凋亡细胞比率。用原位杂交法检测大剂量大蒜新素处理感染细胞(MIO为0.25)72h后bcl-2和fasmRNA表达强度变化,并与正常细胞和感染细胞对比分析。结果正常细胞凋亡比率保持恒定低水平(凋亡率平均2.68%);低、高感染复数感染细胞随时间延长凋亡细胞逐渐增多,凋亡率峰值分别达8.85%(96h)和25.63%(72h);各剂量大蒜新素处理的正常细胞凋亡率增加,呈剂量依赖性,峰值分别为4.88%、6.47%和8.35%;但各剂量药物处理感染细胞后却使细胞凋亡比率下降,大剂量药物处理72h时效应最为明显,凋亡细胞比率由25.63%降至16.24%。正常细胞高表达bcl-2,低表达fas基因;感染HCMV后,bcl-2表达显著下调,fas表达明显增强;大蒜新素处理感染细胞后使bcl-2表达强度明显高于感染细胞,fas表达水平明显低于感染细胞,但仍未恢复到正常细胞水平。结论HCMV是HELF凋亡的强诱导剂;

回心草心脏保护作用的活性部位筛选

目的探讨回心草各极性部位抗心律失常、抗心肌缺血及耐缺氧作用,初步筛选其活性部位。方法采用导联生理仪观察回心草不同极性部位对氯仿诱发小鼠室颤的作用;并采用常压耐缺氧、特异性心肌缺血、缺氧及小鼠断头模型,观察回心草各部位对小鼠存活时间的影响。结果回心草醋酸乙酯相低剂量和正丁醇相低剂量均可显著降低氯仿诱发小鼠室颤的发生率、延长心律失常出现时间;还可明显延长小鼠常压耐缺氧存活时间,并可使特异性心肌缺血、缺氧小鼠存活时间显著增加,其中醋酸乙酯相各剂量还可显著延长断头小鼠张口动作持续时间。结论回心草可提高小鼠耐缺氧能力,具有明显的抗心律失常、抗心肌缺血作用,其95%乙醇提取物的醋酸乙酯及正丁醇部分可能是有效活性部位。

中药薰香抗菌条空气消毒的效果观察

目的:探讨中药薰香抗菌条抗菌抗病毒作用。方法:在空气消毒柜中,采用中药薰香抗菌条直接烟熏的方法,观察中药薰香抗菌条对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、白色念珠菌、流感病毒FM1株、呼吸道合胞病毒的抑杀作用。取学生上课现场,进行直接烟熏,分别于0 h,0.5 h,1.0 h,2 h,4 h取样,培养48 h计数活菌数,比较中药薰香抗菌条作用前后空气中自然菌数量。结果:中药薰香抗菌条对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌的抑制作用与2%过氧乙酸组比较,差异无统计学意义(P>0.05);中药薰香抗菌条作用前后病毒含量比较,差异有统计学意义(P<0.05);中药薰香抗菌条对空气中自然菌有明显的清除作用,并有随药物作用时间延长而清除率增加的趋势。结论:中药薰香抗菌条对细菌、病毒以及空气中自然菌均有清除作用,可在有人情况下进行,可用作空气消毒剂。

骨疏丹抗骨质疏松的药理作用

目的观察和分析骨疏丹对糖皮质激素强的松龙所致实验性骨质疏松大鼠的防治作用。方法将60只Wistar雄性大鼠随机分为6组:对照组,模型组,骨疏丹大、中、小剂量(3、1、0.3 g/kg)组及骨疏康组。观察骨疏丹对强的松龙所致实验性骨质疏松大鼠血液、骨组织指标及骨密度,骨生物力学的影响。结果8周后,骨疏丹可明显增加强的松龙所致实验性骨质疏松大鼠的骨密度、骨生物力学以及血骨钙素,骨钙、磷的量,与模型组相比有显著差异,并呈剂量依赖性关系。结论骨疏丹可使强的松龙所致实验性骨质疏松大鼠骨钙、骨磷,血骨钙素的量提高,骨密度增加,骨生物力学提高,有明显的防治骨质疏松作用。

基于情绪应激下心血管疾病大鼠复合模型的构建探索益气活血方对脂联素水平的影响

目的在情绪应激下心血管疾病复合模型大鼠构建的基础上,研究情绪和心血管疾病间的关系。通过观察、对比益气活血方对复合病模型大鼠心肌组织、脑海马体内脂联素含量的影响,为基础实验研究和临床心血管疾病防治、用药提供新的理论设想和依据。方法采取腹腔注射异丙肾上腺素合并慢性不可预见性情绪刺激法构建大鼠复合模型。将实验动物分为空白组、ISO模型组(单纯心肌缺血模型)、复合模型组(心肌缺血合并情志刺激模型)、中药组、西药组5组。采用超声心动图监测和行为学实验作为模型大鼠构建成功的依据。观察、对比大鼠心脏功能,行为学指标,心肌组织和脑海马体中脂联素各组用药后的变化情况。结果实验32d后,复合模型组和ISO模型组射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)均低于空白组,差异有统计学意义(P<0.01);复合模型组、ISO模型组心肌组织、脑海马体中的脂联素含量均低于空白组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);中药组、西药组大鼠脂联素含量均高于复合模型组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论益气活血药可以改善复合模型大鼠心脏功能和行为学指标,从而使模型大鼠机体走上良性循环道路,其原因可能与其对脂联素的作用有关。

可用于中医药系统研究的药物高内涵筛选分析

药物高内涵筛选分析是系统生物学时代的一项领先技术,具有活体、动态、多指标的综合特点,能够全面反映细胞组学的整体变化,非常适用于中药的复杂成分组成和多靶点作用途径的研究。因此,积极将该技术应用于中医药研究,对发现中药的有效组分和毒性成分,阐明中药的复杂作用机制,促进中医药理论的发展均有重要意义。

安体舒哥胶囊的急性毒性实验研究

目的:观察安体舒哥胶囊的急性毒性反应,评价其安全性。方法:采用小鼠半数致死量(LD50)和最大耐受量(MTD)的测定方法,观察小鼠口服给药的急性毒性反应。结果:未测得安体舒哥的LD50,小鼠对本品口服MTD为12g/kg(约相当于临床口服用药剂量的342倍)。结论:安体舒哥胶囊毒性较低,安全性好。

用子宫增重试验检测莲须的雌激素样作用

目的 评价莲须的雌激素样效应.方法20天幼小鼠50只,随机分5组(空白对照组、尼尔雌醇阳性组对照和2.5、5.0、10.0g/kg莲须剂量组),连续7天灌胃给药,第8天剖杀动物。取子宫、卵巢称重.结果 10g/kg莲须组的子宫增重、卵巢增重明显,小鼠阴道开口率增加.结论 莲须可能具有雌激素样作用.

金银花质量评价模型的敏感度分析

本文对金银花谱-效相关质量评价模型进行了敏感度分析,从而定量描述了药材色谱指纹图谱中各共有峰的变化对药效指标表达值(抑菌率)的影响程度。文中的分析方法可以为中药材质量评价研究提供一种新的、可借鉴的思路和方法。

通脉降脂丸对链脲佐菌素诱导糖尿病模型小鼠糖、脂代谢的影响

目的:研究通脉降脂丸对糖尿病昆明小鼠空腹血糖及血脂的影响。方法:采用链脲佐菌素腹腔注射致大鼠糖尿病模型,观察小鼠血脂的变化;采用灌胃方法给予通脉降脂丸,并观察糖尿病小鼠模型分别给予生理盐水、通脉降脂丸的空腹血糖及血脂的变化。结果:链脲佐菌素腹腔注射成功制成糖尿病模型;通脉降脂丸高、中、低剂量对糖尿病小鼠的空腹血糖均无明显降低作用(P>0.05),但高剂量组对糖尿病小鼠的空腹血糖有一定的降低趋势;降通脉降脂丸高剂量组均能显著降低血清TC与TG的含量(P<0.05);中剂量组能显著降低血清中TC的含量(P<0.05);低剂量组作用不明显。结论:通脉降脂丸有明显的降脂作用,为防治糖尿病提供有效的药理学依据。

荔枝核皂苷对糖调节受损大鼠胰腺组织氧化应激的改善作用及其机制

目的:研究荔枝核皂苷(SL)对糖调节受损(IGR)大鼠氧化应激及核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路的作用,阐明其相关机制。方法:采用高脂饲料喂养制备IGR大鼠模型,随机分为模型组、二甲双胍组(0.20 g·kg-1)、低剂量SL组(0.05 g·kg-1)、中剂量SL组(0.10g·kg-1)和高剂量SL组(0.20g·kg-1),同时设正常对照组,每组12只,连续给药6周。观察SL对实验大鼠糖脂代谢的影响,采用实时荧光定量(Real-time PCR)法检测大鼠胰腺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和HO-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测大鼠胰腺组织胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达水平,采用SOD和MDA试剂盒检测大鼠胰腺组织中SOD活性和MDA水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠空腹血糖(FBG)和血脂水平明显升高(P<0.05或P<0.01),胰腺组织中SOD活性和mRNA表达水平降低(P<0.01),MDA水平和mRNA表达水平升高(P<0.01),胞核和胞质中Nrf2蛋白表达水平和核转位率升高(P<0.01),HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,二甲双胍组和中、高剂量SL组大鼠FBG和血清甘油三酯(TG)水平明显降低(P<0.05或P<0.01),胰腺组织中SOD活性和mRNA表达水平升高(P<0.05或P<0.01),MDA水平和mRNA表达水平降低(P<0.05或P<0.01),胞质中Nrf2表达水平降低(P<0.05或P<0.01),胞核中Nrf2表达水平和核转位率升高(P<0.05或P<0.01),HO-1mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。结论:SL具有改善糖脂代谢和增强抗氧化应激作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路、促进Nrf2核转位及增强下游抗氧化基因HO-1表达有关。

海带多糖硫酸酯对bFGF诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:研究海带多糖硫酸酯WPS、WPS-1、WPS-2和WPS-3对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法:采用组织贴块法培养VSMC并用免疫组织化学染色法对VSMC进行鉴定;采用bFGF诱导VSMC增殖;以MTT法检测海带多糖硫酸酯对bFGF诱导的VSMC增殖的影响;黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶产超氧阴离子自由基(O2-.)体系测定海带多糖硫酸酯对O2-.的清除力。结果:在0.1～1mg/mL质量浓度范围内,WPS、WPS-1和WPS-3对bFGF诱导的VSMC增殖具有抑制作用,其中WPS的增殖抑制性表现显著。WPS-2则对VSMC增殖基本无影响。在O2-.清除力上,WPS-2对O2-.清除率仅为34%,而其他组分自由基清除率均超过70%。结论:WPS、WPS-1和WPS-3对bFGF诱导的VSMC增殖均有显著抑制作用,且抑制作用可能与它们的自由基清除能力相关。

护心通络方对高脂血症大鼠内皮细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:观察护心通络方对高脂血症大鼠内皮细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法:采用高脂饲料喂养建立高脂血症病理模型;50只高脂血症模型大鼠随机分为模型对照组、护心通络方低剂量组、护心通络方中剂量组、护心通络方高剂量组和辛伐他汀组,每组10只。采用Western blot测定凋亡蛋白Bcl-2/Bax表达,同时利用透射电镜观察细胞凋亡、细胞结构的特征性变化。结果:随着护心通络方药物浓度的增加,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达水平呈现上升趋势,而促凋亡蛋白Bax呈现下降趋势(P<0.05);电镜下内皮细胞凋亡小体数目不断减少,核固缩逐渐减弱,细胞间隙减少,线粒体数目上升。结论:护心通络方能通过调整Bax和Bcl-2的蛋白表达强度降低大鼠内皮细胞凋亡率。

河南山胡椒属植物资源及其药理、化学及应用研究

河南山胡椒属植物资源丰富,近十年来国内外对山胡椒属药用植物临床作用、药理作用、化学成分都有深入的研究。认为河南山胡椒属药用植物资源的保护及研究开发有一定意义。