虎杖果实中白藜芦醇与大黄素提取工艺优化及其与3类根茎含量比较

目的:研究虎杖果实中白藜芦醇与大黄素提取工艺,比较其果实与雄株、未结果雌株、结果雌株3类根茎中白藜芦醇与大黄素得率。方法:采用高效液相色谱法测定其果实与3类根茎中白藜芦醇与大黄素含量,确定果实中白藜芦醇与大黄素提取的溶剂与方法,采用正交试验法考察微波火力档、溶剂体积分数、料液比及提取时间对提取工艺的影响,确定微波辅助提取的最佳提取工艺,比较虎杖果实、3类根茎中二者得率。结果:正交试验与方差分析得出果实中白藜芦醇与大黄素的最佳提取条件为乙醇体积分数70%、料液比1:20(g/mL)、额定功率800 W微波炉先40火力处理3 min冷却后60火力处理3 min、提取时间6 min,高效液相色谱法测得虎杖雄株、未结果雌株根茎中的白藜芦醇与大黄素得率均高于结果雌株根茎及果实,果实及3类根茎中白藜芦醇与大黄素得率均超过《中国药典》(2010)规定值,提取工艺合理、稳定、可行,虎杖果实具备开发利用的价值。

微波程序控温控压辅助双水相萃取虎杖果实中白藜芦醇与大黄素的研究

以虎杖果实为原料,采用微波程序控温控压辅助乙醇-硫酸铵双水相萃取白藜芦醇与大黄素,对比了该方法与微波辅助提取、微波辅助双水相萃取对提取得率和纯度的影响,并进一步通过红外光谱分析产物结构。结果表明:料液比1∶20(g∶m L)、相分离系数0.5的乙醇-(NH4)2SO4双水相体系,程序控温分为5级,依次为室温、40、50、60和70℃,对应控压为137.9、344.75、689.5、1 034.25、1 379 k Pa,每级微波辐射1.2 min后间歇5 min,进行微波功率自动连续调整,在此条件下虎杖果实中白藜芦醇与大黄素得率为0.694%与2.067%,纯度分别为82.68%与87.25%,提取效果明显优于微波辅助提取和微波辅助双水相萃取,且不会引起生物活性物质失活或变性。该方法能显著提高虎杖果实中白藜芦醇与大黄素提取得率,稳定性好、重复性好、精密度高、回收率高,同时又能简化其分离纯化工艺,降低生产成本,因此该方法适合用于虎杖果实中白藜芦醇与大黄素的提取分离。

鱼腥草中主要黄酮成分含量测定及其道地性研究

目的对不同产地的鱼腥草中的黄酮成分进行含量测定,为鱼腥草的质量控制提供有价值的资料。方法采用HPLC法,对12个产地的鱼腥草药材中的芦丁、金丝桃苷、槲皮苷含量进行测定。流动相为0.05%磷酸水溶液/乙腈;梯度条件为0-15-20-25-30-35-40-60 min,2%-15%-15.5%-16%-18%-18%-20%-40%B;检测波长为260 nm。结果 4不同产地的鱼腥草中的活性成分含量存在较大差别,芦丁的含量为9-115 mg kg-1,金丝桃苷的含量为16-416 mg kg-1,槲皮苷的含量为110-710 mg kg-1。怀化、邵阳产地的鱼腥草样品中3种黄酮类成分的含量相对较高。结论本方法简便、稳定,适合作为鱼腥草的质量控制的方法。

HPLC法研究配伍对麻黄汤中苦杏仁苷含量的影响

目的 建立 HPL C法测定麻黄汤各配伍煎液中苦杏仁苷含量的分析方法 ,研究配伍对汤剂中苦杏仁苷含量的影响。方法 采用 L8(2 7)正交设计和统计方法 (统计软件 SPSS 10 .0 0 ) ,以 HPL C法测定苦杏仁苷的含量。结果 该法简便、准确、灵敏 ,复方中其他成分对测定无干扰 ,可用于麻黄汤中苦杏仁苷的含量测定 ,麻黄、桂枝、甘草对方中苦杏仁苷含量的影响差异不存在显著性 ,两两交互作用差异不具有显著性。结论 麻黄、桂枝、甘草对麻黄汤中苦杏仁苷含量影响没有显著性。

竹根七HPLC-ELSD指纹图谱的研究及薯蓣皂苷的含量测定

目的建立陕西"七药"竹根七的高效液相色谱指纹图谱,并测定指标成分薯蓣皂苷的含量。方法Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),蒸发光散射检测器,气体流速2.8 L·min^(-1),漂移管温度95℃。结果建立了竹根七的指纹图谱,确立了12个共有峰,同时测定了指标成分薯蓣皂苷的含量。结论本研究建立的指纹图谱与指标成分测定相结合的分析方法快速、准确,可用于评价竹根七的质量,并为建立竹根七制剂的质量控制方法提供依据。

海南小果酸浆HPLC指纹图谱的研究

[目的]建立海口地区不同季节小果酸浆指纹图谱检测方法,为小果酸浆的质量控制提供依据。[方法]采用La Chrom C18(4.6mm×150 mm)色谱柱,乙腈-0.05%磷酸溶液(15∶85)为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长230 nm,进样量10μl,柱温30℃,分析时长35 min;采用高分辨LC-MS/MS技术进行色谱峰指认。[结果]采用高分辨LC-MS/MS方法对20个共有峰中的14个色谱峰进行了定性鉴别。不同季节的小果酸浆成分有很大不同,可根据所需成分而在其含量最高时间采集。[结论]该方法精密度高,稳定性和重复性良好,为小果酸浆的全面质量评价奠定了基础。

HPLC波长切换技术对葛根中8种成分的测定及指纹图谱研究

目的建立高效液相色谱波长切换技术同时测定葛根中3′-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、芒柄花素、鹰嘴豆芽素A8种成分的量,并建立了葛根的特征指纹图谱,为葛根质量的全面评价提供了科学依据。方法采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量1 mL/min,柱温30℃,进样量10μL。结果 3′-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、芒柄花素、鹰嘴豆芽素A的质量浓度分别在16.10～161.00、103.8～1 038.0、19.82～198.20、2.788～27.880、4.112～41.120、0.258 4～2.584 0、0.336 2～3.362 0、0.080 5～0.805 0 mg/L内与色谱峰峰面积呈良好的线性关系,平均回收率均在98.0%～99.4%,RSD均小于3.0%(n=6);在指纹图谱研究中,以葛根素为参照峰,标定了27个共有峰,指认其中7个峰,分析10个产地的葛根与共有模式之间具有良好的相似性,相似度均在0.97以上。结论建立的测定方法及指纹图谱分析方法简便、准确、重复性好、专属性强,为葛根质量的全面评价提供了科学依据。

远志UPLC多指标成分的测定及指纹图谱研究

目的建立远志超高效液相色谱(UPLC)多成分测定方法及指纹图谱方法。方法采用UPLC法,以乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,体积流量0.4 m L/min,检测波长320 nm,测定24批远志药材中sibiricose A5、sibiricose A6、sibiricaxanthone B、glomeratose A、polygalaxanthone III、3,6′-disinapoyl sucrose 6种成分的量,并建立远志药材指纹图谱,采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS^E)指认共有峰。结果不同产地远志中3,6′-disinapoyl sucrose与sibiricose A6量差异较大;建立的药材UPLC指纹图谱共标定37个共有峰,指认出其中33个峰,24批样品相似度在0.756~0.997。成分量及相似度综合分析结果表明不同地区远志药材质量存在一定差异。结论建立的测定结合指纹图谱分析方法可有效、全面地用于远志药材的质量评价。

HPLC法测定不同产地重楼属植物中7种甾体皂苷成分

目的研究不同产地重楼属植物主要活性成分甾体皂苷量的差异性,为探讨品种及产地对重楼属植物活性成分的影响提供参考依据。方法采用HPLC法测定不同产地的重楼属6种药材中偏诺皂苷-3-O-α-L-Rha(1→2)[α-L-Rha(1→4)]-β-D-Glc(PGRR),重楼皂苷I、II、VI、VII、H及纤细薯蓣皂苷的量。结果不同重楼属植物中的皂苷种类及其量存在较大差异,滇重楼、巴山重楼以及长药隔重楼的皂苷种类及其量较多;同一品种不同产地的重楼药材,其皂苷的种类及其量亦不同,湖北恩施的金线重楼较重庆巫溪产的皂苷量高,贵州安顺的长药隔重楼皂苷量明显高于湖北来凤产。结论重楼属植物的品种及产地对其活性成分的量及类型有很大的影响。

不同干燥方法对人参花和西洋参花皂苷类成分的影响

目的筛选适合人参Panax ginseng花和西洋参Panax quinquefolius花采收后的加工方法,以14种人参皂苷的质量分数为考察指标,评价不同干燥方法对人参花和西洋参花药材质量的影响。方法采用HPLC法测定人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd及其相对应的丙二酰基人参皂苷(m-Rg1、m-Re、m-Rb1、m-Rc、m-Rb2、m-Rb3和m-Rd)的量。结果西洋参花中人参皂苷在40℃烘干的条件下质量分数要比红外干燥、微波干燥和冷冻干燥的高,人参花中人参皂苷在40℃烘干的条件下质量分数要比冷冻干燥的高,并且随着烘干温度的升高质量分数都有不同程度降低,丙二酰基人参皂苷m-Re、m-Rg1、m-Rb1、m-Rc、m-Rb2、m-Rb3、m-Rd的质量分数在高温(>100℃)时明显下降,且丙二酰基人参皂苷的减少量与相应的人参皂苷的变化量并没有明显的对等关系,这14种皂苷的总量也都有下降的趋势。结论 40℃烘干可使人参花和西洋参花中原有人参皂苷量保持在最高水平,而高温处理则可使其转化为其他稀有皂苷。

国产沉香HPLC指纹图谱研究

目的建立沉香药材HPLC特征指纹图谱分析方法,为其科学鉴定和质量控制提供依据。方法 Dionex-Acclaim 120C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱;体积流量0.4 m L/min;检测波长254 nm;柱温26℃。利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"和SPSS软件分别对其进行相似度评价和聚类分析。结果建立了沉香药材HPLC指纹图谱共用模式,确定24个共有峰,并根据对照品指认9个共有峰。10批沉香药材相似度分析结果与聚类分析结果基本一致。结论首次建立了沉香药材HPLC指纹图谱分析方法。该分析方法简便、快速,可较全面地反映沉香药材中化学成分的信息,为沉香药材的鉴定和质量评价提供了科学依据。

HPLC法测定不同主产地莪术饮片中莪术二酮、莪术醇、吉马酮和β-榄香烯

目的采用HPLC法同时测定不同产地莪术饮片中莪术二酮、莪术醇、吉马酮和β-榄香烯的量,为临床合理用药提供科学依据。方法固定相为依利特Hypersil ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-水为流动相,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温25℃;检测波长214 nm;进样量10μL。结果在上述色谱条件下测得莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯分别在8～264、7～214、2～52、8～253μg/mL时与色谱峰面积线性关系良好,平均回收率分别为98.3%、98.0%、98.2%、97.3%,RSD分别为2.9%、1.5%、2.0%、2.7%。结论该方法准确、灵敏,可作为不同产地莪术饮片的质量控制方法;测定结果表明,不同主产地莪术饮片中4种成分的量差异较大,临床应用时应注意区分。

一测多评法测定枇杷叶有效部位中6种三萜酸成分的量

目的建立枇杷叶有效部位中蔷薇酸、委陵菜酸、马斯里酸、科罗索酸、齐墩果酸和熊果酸的一测多评HPLC-ELSD测定方法。方法以熊果酸对照品为内参物,建立其与蔷薇酸、委陵菜酸、马斯里酸、科罗索酸、齐墩果酸的相对校正因子,采用校正因子计算这5种三萜酸成分的量,实现一测多评;同时用外标法测定有效部位中该6种成分的量,并比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评的合理性、可行性和重复性。结果 15批有效部位中6种三萜酸成分量的计算值与实测值无显著性差异。结论该方法操作简便,测定结果准确,实现了只用一个对照品同步测定枇杷叶总三萜酸有效部位中6个成分的量,可为中药多指标成分质量评价模式提供参考。

HPLC法测定黄连不同部位中6个生物碱

目的建立黄连不同部位中盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的测定方法。方法色谱条件为Phenomenex Gemini-NX C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-30 mmol/L碳酸氢铵溶液(每1 000 mL碳酸氢铵溶液含7 mL氨水及1 mL三乙胺);体积流量1.0 mL/min;检测波长270 nm;柱温30℃。结果黄连须根、根茎、叶中6个生物碱量具有较明显差异。经比较,黄连适宜在移栽后第4年采挖,7～10月的最佳采挖月份是10月。结论该法简便、准确、分离效果好,适用于黄连主要生物碱的定量分析。

栀子多波长HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的采用多波长HPLC法研究67批栀子药材,对不同产地的栀子采用指纹图谱相似度评价及聚类分析和主成分分析(PCA)等化学模式识别技术进行研究,以期为栀子药材品质评控和生产区划提供参考。方法色谱条件为Durashell C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量0.8 m L/min,检测波长238、330、440nm,进样量10μL,柱温30℃。结果 67批样品有16个共有峰,共有峰保留时间的RSD<1%,峰面积的RSD比较大。各批次药材化学成分组成及量均存在一定差异。采用聚类分析及PCA从化学成分上揭示了67批样品的相似性及差异性。结论以指纹图谱数据为基础,将聚类分析与PCA结合起来,不仅可以进行栀子药材的质量控制,还可以为下一步栀子全国生产区划研究提供理论支持。

不同种质金银花中有机酸类及苷类成分的测定

目的建立高效液相色谱法同时测定不同种质资源金银花中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸和4,5-二咖啡酰奎尼酸等7种有机酸及断氧马钱子苷的量。方法采用高效液相色谱法测定,色谱条件为phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相0.1%磷酸溶液和甲醇采用梯度洗脱,检测波长225nm,体积流量0.8 mL/min。结果金银花中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸和4,5-二咖啡酰奎尼酸及断氧马钱子苷在各自的线性范围内均呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.41%、99.05%、99.01%、98.71%、98.79%、98.82%、98.89%、99.16%,RSD分别为0.56%、0.37%、0.93%、1.11%、0.90%、0.87%、0.71%、1.04%。结论该方法快速、简便、准确,可用于不同种质金银花中7种有机酸及断氧马钱子苷的定量测定。

五味子的UPLC指纹图谱研究

目的建立五味子Schisandra chinensis的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱。方法采用Acquity UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-水为流动相梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温30℃;检测波长216 nm;进样量2μL。结果首次建立了五味子的UPLC特征指纹图谱共有模式,标定了21个共有峰,结合保留时间和紫外光谱分析,指认了五味子醇甲、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、五味子酯甲、五味子酯乙、五味子甲素、五味子γ-乙素、五味子乙素和五味子丙素的峰位。19批五味子的相似度均在0.970以上。结论该方法快速、高效,可用于五味子的质量评价。

化橘红黄酮类成分UPLC与HPLC指纹图谱的比较研究

目的比较超高效液相色谱(UPLC)法与HPLC法分析化橘红总黄酮指纹图谱的效果。方法分别采用UPLC法与HPLC法对17批化橘红药材的黄酮类成分进行指纹图谱分析。结果分别建立了化橘红黄酮类成分的UPLC与HPLC指纹图谱共有模式。其中UPLC法标识出21个共有峰,HPLC法标识出17个共有峰,17批样品的相似度均大于0.9。结论 2种方法均可用于化橘红的质量控制,UPLC法较HPLC法更高效、快速、灵敏。

叶下珠指纹图谱及模式识别研究

目的建立叶下珠HPLC指纹图谱评价体系。方法采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.2%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长270 nm,体积流量1.0 m L/min。测定9个不同产地叶下珠指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)计算相似度,并用对照品和液质联用技术指认色谱峰。结果建立了叶下珠指纹图谱共有模式,标定了11个共有峰,指认了其中8个主要色谱峰,用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行模式识别。结论将指纹图谱和模式识别结合起来对叶下珠进行质量控制是一种有效的评价方法,为叶下珠的全面质量控制提供了基础。

RP-HPLC法同时测定不同产地连翘中的7种成分

目的建立同时测定连翘中咖啡酸、连翘酯苷B、连翘酯苷A、芦丁、金丝桃苷、连翘苷、牛蒡子苷元7种化学成分的HPLC方法。方法采用反相高效液相色谱法,以Inertsil ODS-3 C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱;流动相为乙腈-0.2%磷酸水,梯度洗脱,检测波长为275 nm,体积流量为1.0 mL/min,柱温为30℃。结果在上述色谱条件下,咖啡酸、连翘酯苷B、连翘酯苷A、芦丁、金丝桃苷、连翘苷、牛蒡子苷元获良好分离,分别在18.24～91.20、5.88～29.40、132.60～663.00、8.34～41.70、1.96～9.80、7.60～38.00、11.34～56.70μg/mL内线性关系良好,平均回收率分别为97.7%、96.7%、102.6%、101.3%、93.2%、91.8%、96.7%,RSD分别为2.3%、1.4%、2.4%、2.2%、1.0%、1.0%、1.3%。结论该方法分离度好,简便快速,可用于同时检测连翘中7种成分的量,为连翘的质量评价提供依据。