TRIM31沉默抑制胰腺癌侵袭和迁移

目的:探讨三结构域蛋白31(TRIM31)对胰腺癌侵袭转移的影响及其机制。方法:利用基因表达数据库(GEO)获得TRIM31在胰腺癌组织、癌旁组织以及正常胰腺组织中的表达,选取两株胰腺癌细胞Panc-1及MIAPa Ca-2分别分为TRIM31沉默组(实验组)和空载体组(阴性对照组),通过Transwell小室细胞迁移和划痕实验观察TRIM31对胰腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响,Western blot实验检测上皮-间充质细胞转化(EMT)相关钙黏附蛋白E(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平。结果:正常胰腺组织中TRIM31 mRNA相对表达量明显低于胰腺癌组织,癌旁组织中TRIM31 mRNA相对表达量明显低于癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);小室细胞迁移和侵袭实验显示,实验组Panc-1及MIA Pa Ca-2迁移和侵袭细胞数明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);沉默TRIM31表达后,Panc-1及MIAPa Ca-2细胞中E-cadherin蛋白表达量明显升高,Vimentin蛋白表达量明显降低。结论:沉默TRIM31的表达可能通过抑制胰腺癌细胞的EMT过程,进而抑制其侵袭迁移。

33例原发灶不明的骨髓转移癌临床病理特征分析

目的探讨原发灶不明的骨髓转移癌的临床病理特征及实验室检查特点。方法回顾分析我院2009年1月-2014年1月收治的33例原发灶不明的骨髓转移癌患者的临床资料,对血常规、骨髓象、生化,肿瘤标记物特征进行分析。结果骨痛(63.4%)、贫血(54.6%)是最常见的临床表现,还伴随不明原因的发热、咳嗽、乏力、体质量减轻等。常见的血液学检查异常包括贫血、血小板减少,外周血中出现幼红、幼粒细胞,丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶升高,55%患者血清白蛋白(ALB)减低,76%患者肿瘤标记物癌胚抗原增高。骨髓细胞学检查发现数量不等、大小不一、分布不均、形态异常、来源于非造血系统的恶性肿瘤细胞。结论骨髓细胞学检查是诊断骨髓转移癌的敏感方法;血液学检查指标的异常对骨髓转移癌有一定的辅助诊断价值。

RIP140/PGC-1α在AngⅡ调节心肌能量代谢中的作用研究

目的探讨转录辅助因子受体相互作用蛋白140(receptor interacting protein 140,RIP140)与过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1α,PGC-1α)在血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)调节心肌细胞能量代谢中的作用。方法借助腺病毒载体系统诱导RIP140和PGC-1α基因过表达;利用荧光检测系统测定乳鼠心肌细胞线粒体ATP的含量;实时荧光定量PCR和Western blot的方法检测RIP140和PGC-1α的表达情况。结果乳鼠心肌细胞给予100 nmol·L-1AngⅡ刺激36 h后,心肌细胞线粒体ATP的含量降低(P<0.01),同时伴随RIP140 mRNA与蛋白水平的升高,而PGC-1αmRNA与蛋白水平下调。AngⅡ诱导的ATP含量减少在过表达RIP140组中进一步下降,而在过表达PGC-1α组中有所减轻。结论AngⅡ诱导的ATP含量减少与RIP140表达上调和PGC-1α表达下调有关。

SCL-tTA/BCR-ABL转基因慢性髓系白血病小鼠模型的建立及鉴定

目的:建立能由Tet-off调控的慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)动物模型,为深入研究CML的发病机制、寻找治疗新方法提供实验工具。方法:通过撤除饮水中的DOX以诱导SCL-tTA/BCR-ABL双转基因小鼠的BCR-ABL在造血干/祖细胞的表达;鉴定小鼠基因型正确后检测小鼠外周血象及脾脏指数,并利用流式细胞术观察小鼠骨髓、脾脏及外周血中各系细胞的分布水平。结果:BCR-ABL实验组小鼠血象中可检测到粒细胞增多,脾脏指数明显升高;且这些双转基因小鼠的骨髓、脾脏及外周血中均可检测到髓系细胞(Gr-1^+Mac-1^+)扩增,以及T系细胞(CD3^+)、B系细胞(B220^+)的减少。结论:通过Tet-off诱导表达系统成功诱导双转基因小鼠BCR-ABL的表达,成功建立了类似于人类CM L慢性期的疾病模型。

合并不同糖尿病病程的胰腺癌患者临床特征及相关危险因素对胰腺癌发病年龄的影响

目的分析胰腺癌(pancreatic cancer,PC)合并糖尿病(diabetes mellitus,DM)患者的临床特征及不同因素对PC发病年龄的影响。方法 1985年1月至2014年10月北京协和医院收治的PC合并DM且符合一定纳入标准的患者,先分析总体人群基本特征,再根据不同DM病程,将总体人群分为新发DM组(病程≤2年)和长病程DM组(病程>2年),分析不同亚组的临床特征、肿瘤特征、既往疾病史及用药情况,并分析不同因素包括性别、生活方式、家族史、既往史、用药情况对PC发病年龄的影响。结果共327例PC合并DM患者纳入本研究。总体人群及按病程分组人群中男性比例均较高,且发病年龄较女性更低[(60.2±9.5)岁比(65.7±8.5)岁,P<0.001]。新发DM组较长病程DM组PC发病年龄更低[(60.6±9.5)岁比(64.4±9.0)岁,P<0.001],有DM家族史者比例更低(13.8%比24.3%,P=0.016),平均体重下降程度更明显(9.0 kg比5.0 kg,P=0.003),空腹血糖水平更低(8.2 mmol/L比9.1 mmol/L,P=0.003),肿瘤平均直径更大(4.0 cm比3.5 cm,P=0.007),胰岛素和降压药的使用比例均较低(41.9%比71.3%,P<0.001;32.9%比49.6%,P=0.004)。男性(P<0.001)、吸烟(P<0.001)、饮酒(P<0.001)、有DM家族史(P=0.048)、使用二甲双胍(P=0.046)的患者PC发病年龄更低,而服用阿卡波糖者PC发病年龄更高(P=0.042)。结论无DM家族史、伴体重明显下降、有吸烟、饮酒史的新发DM患者,可能是患PC的高危人群,需格外警惕,注意早期筛查。

卵巢癌患者CA125水平对细胞免疫功能的影响

目的体外检测卵巢癌患者血中CA125对细胞免疫功能的影响。方法收集2012年5月至2013年6月北京协和医院符合诊断标准的卵巢癌患者58例,按CA125浓度分为3组;同时收集良性妇科疾病患者20例及体检正常的健康者20名作为对照。应用细胞培养、酶联免疫吸附法、酶联免疫斑点(enzyme-linked immunospot,ELISPOT)等实验,观察体外刺激健康人淋巴细胞产生γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的能力,判断CA125对机体细胞免疫状态的影响。结果在卵巢癌患者中,随CA125水平升高,淋巴细胞绝对值及百分比值呈逐渐下降趋势。高浓度CA125卵巢癌患者的血清与植物血凝素共同刺激健康者混合淋巴细胞后,培养上清液中IFN-γ的含量[(36.16±16.89)ng/ml]较阳性对照组和低浓度CA125组[分别为(45.68±18.01)和(46.22±19.30)ng/ml]显著降低(P<0.05);ELISPOT结果显示高浓度和中浓度CA125(斑点数均值分别为108.2和371.6)对细胞免疫抑制功能与健康对照组和良性疾病组(斑点数均值分别为573.0和523.0)比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);而去除血清中CA125后,对细胞免疫抑制作用明显减弱。结论卵巢癌患者体内的CA125水平与淋巴细胞的数量、活性及其产生细胞因子的活性呈负相关关系。CA125除作为与卵巢癌相关的标志物外,还可能是一种细胞免疫抑制因子。

人参皂苷对蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸拟阿尔采末病细胞模型的影响

目的探讨人参皂苷(ginsenoside,GS)对蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸(OA)诱导拟Alzheimer病(AD)细胞模型神经细胞tau蛋白的磷酸化、微管、细胞凋亡和凋亡调节因子的影响。方法GS与人神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH细胞预孵育24h,弃去培养基,然后用OA10nmol·L-1与SK-N-SH细胞共孵育6h;用倒置显微镜观察细胞形态的变化,激光共聚焦显微镜观察微管变化,Western blot方法观察磷酸化tau蛋白、凋亡因子Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达,用TUNEL法观察凋亡细胞的变化。结果正常SK-N-SH神经细胞铺展良好,OA模型组细胞突起断裂,GS显示了细胞保护作用。通过激光共聚焦显微镜观察,正常SK-N-SH细胞微管粗壮、连续,而OA模型组微管断裂、消失;GS能够减少OA引起的微管破坏作用。OA模型组tau蛋白Ser-199/202和Ser-404位点磷酸化水平较正常对照组明显增高,非磷酸化水平较正常对照组明显下降;GS 50mg·L-1和100mg·L-1组使神经细胞tau蛋白Ser-199/202和Ser-404位点磷酸化水平较OA模型组明显下降,GS 50mg·L-1和100mg·L-1组的tau蛋白Ser202非磷酸化水平较模型组则明显升高;正常对照组未见凋亡细胞;OA模型组凋亡细胞明显增多,Bax和Caspase-3表达水平较正常对照组明显增高,Bcl-2水平明显下降;GS能够明显抑制OA诱导的细胞凋亡,减少Bax和Caspase-3表达。结论人参皂苷对蛋白磷酸酶抑制剂OA所致的神经细胞病理变化有明显的保护作用,可能是通过抑制tau蛋白过度磷酸化,防止细胞凋亡来发挥作用的,提示该药在防治AD方面可能具有良好的应用前景。

重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠关节软骨酸敏感离子通道的影响及其保护作用

目的观察重组人内抑素(rh-End)对佐剂性关节炎大鼠关节软骨酸敏感离子通道(ASICs)表达的影响,探讨其对关节软骨的作用。方法将大鼠随机分成正常组、AA模型组、rh-End 1.25、2.5、5.0mg·kg-1组和阿司匹林50mg·kg-1阳性对照组。弗氏完全佐剂(CFA)致佐剂性关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)后d10,大鼠出现继发性炎症,此时皮下注射重组人内抑素,连续7d,对照组灌胃给阿司匹林;正常组与模型组给予等容量的无菌注射用水。光学显微镜观察关节病理变化,半定量RT-PCR方法检测rh-End对AA大鼠关节软骨ASICs和蛋白聚糖体mRNA的影响,Western blot方法检测rh-End对AA大鼠关节软骨ASICs蛋白的影响,免疫组织化学技术测定rh-End对AA大鼠关节软骨中的Ⅱ型胶原蛋白合成的影响。结果rh-End各剂量组能明显抑制AA大鼠关节软骨组织中的ASICs表达,并升高关节软骨基质成分Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖体mRNA表达量。结论重组人内抑素通过抑制ASICs的表达进而保护AA大鼠关节软骨。

某市妇女乳腺癌筛查知信行现状及其影响因素

目的:了解某市妇女乳腺癌筛查的知识、信念、行为及影响因素。方法:采用便利抽样法抽取4个社区妇女为研究对象。应用自行设计的社区妇女乳腺癌筛查知、信、行调查问卷对研究对象进行调查。结果:妇女乳腺癌疾病及筛查知识得分为(8.68±5.25)分,有73.3%的人知道乳腺癌最常见的首发症状为乳房肿块。乳腺癌筛查信念得分为(47.63±5.45)分,大多数妇女同意乳腺癌筛查的益处。49.5%曾经做过乳腺自我检查,但真正有规律1个月做1次的只有2.4%。分别有46.2%和28.6%的人曾做过乳腺临床检查和乳腺X线摄片检查。文化程度对知识得分、信念得分、行为得分有显著影响(P<0.01);家庭收入对知识得分有显著影响(P<0.01);年龄和职业是行为得分的影响因素(P<0.01～P<0.05)。结论:乳腺癌筛查率仍然很低,筛查行为的现状不容乐观,影响因素包括文化程度、年龄、家庭收入、职业。健康教育者应针对影响因素,采取有效的措施对乳腺癌筛查行为进行干预,改善乳腺癌筛查行为,提高妇女生活质量。

基础医学综合性实验教学的改革与实践

为培养高素质应用型人才,稳步提高本科教育教学质量和学生的综合能力以及创新意识,促进课程建设和实践教学的改革,顺利通过国家教育部2008年对大理学院的本科教学工作水平评估,基础医学院在基础医学实验中开展了"综合性实验教学改革的研究,"在充分发挥实验室设备共用、资源共享的基础上,增设了跨学科的综合性实验。通过几年的实际运作,深化了课程体系改革,优化了实验教学内容,激发了学生的学习兴趣。但要保证综合性实验的教学效果,尚有许多具体问题值得探讨。

茅台酒对大鼠肝组织中CYP2E1基因及蛋白质表达的影响

目的:探讨茅台酒对大鼠肝组织中细胞色素P450 2E1(CYP2E1)基因及蛋白质表达的影响。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、茅台酒组、乙醇组,各组大鼠分别予蒸馏水、茅台酒和乙醇灌胃,每天1次,每周6次,连续12周。末次灌胃12 h后处死大鼠,肝组织切片行HE染色观测病理改变,并检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P X)与丙二醛(MDA)含量,RT-PCR、免疫组织化学法和Western Blot检测大鼠肝组织中CYP2E1 mRNA及蛋白质表达。结果:茅台酒组及乙醇组大鼠肝组织切片HE染色均可见不同程度肝细胞脂肪变性及炎性细胞浸润,但茅台酒组的病理改变程度明显低于乙醇组,差异有统计学意义(P<0.05);茅台酒组大鼠肝组织匀浆中SOD、GSH-P X比空白对照组和乙醇组高,差异有统计学意义(P<0.01),与乙醇组比,茅台酒组大鼠肝组织匀浆中MDA显著较低(P<0.01);茅台酒组与空白对照组比较,大鼠肝组织中CYP2E1 mRNA及蛋白质表达差异无统计学意义(P>0.05),茅台酒组与乙醇组比较,大鼠肝组织CYP2E1 mRNA及蛋白质表达显著较低(P<0.01)。结论:饮用一定量的茅台酒12周后可致大鼠酒精性脂肪肝,但比饮用相同剂量单纯乙醇程度较轻,可能与茅台酒所含的非酒精性物质抑制了CYP2E1表达,对抗氧化应激有关。

H2O2及PTEN在肽类生长因子活化Akt激酶中的作用

目的研究H2O2、PTEN与肽类生长因子(胰岛素等)在调控Akt激酶活性中的作用及其相互关系。方法Western Blot检测对照小鼠胚胎成纤维细胞PTEN+/+ MEFs和PTEN基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞PTEN-/-MEFs中PTEN蛋白表达的差异。用胰岛素及NADPH氧化酶(NOX)抑制剂——DPI作用PTEN+/+M EFs和PTEN-/-MEFs细胞,Western Blot检测Akt激酶蛋白磷酸化水平的变化。将细胞接种于96孔板,加入胰岛素及DPI,96h后MTT法检测细胞增殖的变化。结果在对照PTEN+/+ MEFs细胞内,加入胰岛素(100mU/ml)15min后Akt激酶磷酸化水平明显上调,加入10μmol/LDPI处理30min后,Akt激酶磷酸化恢复到基础水平,在PTEN-/-MEFs细胞中未观察到上述变化。经胰岛素作用后PTEN+/+ MEFs细胞增殖加快(P<0.05),加入DPI作用后可减缓细胞的增殖(P<0.05),胰岛素和DPI同时作用对其增殖无明显影响(P>0.05);各种处理因素对PTEN-/-MEFs细胞增殖均无明显影响(P均>0.05)。结论肽类生长因子可以通过磷酸化激活Akt激酶,这一过程依赖于H2O2的产生和抑癌基因PTEN的存在。

重组生长激素对手术后疲劳综合征大鼠模型的影响

目的探讨rhGH对POFS大鼠模型的作用及其作用机制初步探讨。方法选用POFS大鼠模型,观察大鼠体重、肛温、体力活动、血清蛋白、转铁蛋白等;对模型大鼠小肠粘膜损伤进行病理评价;测定肝脏白蛋白基因表达。结果rhGH能改善大鼠模型术后一般情况和转铁蛋白等营养学指标,减轻创伤应激带来的小肠粘膜损伤,增加肝白蛋白基因表达。结论rhGH能缩短大鼠模型POFS持续时间,减轻POFS的程度。

大鼠溶栓治疗研究中的脑梗死模型分析

脑血管病属于较为普遍的一种疾病,于临床表现出较高的致残率以及致死率,其中以缺血性脑血管病最为普遍。当前针对缺血性脑血管病患者,选择溶栓的方法进行治疗,表现出技术设备简单、操作便捷、对患者造成的创伤较小、能够促进血管再通以及将患者后遗症进行有效减少等。为了对脑梗死疾病的发病机制、疾病病理生理过程以及溶栓治疗的情况进行详细了解,创建动物脑缺血模型具有重要的意义。本文主要针对大鼠溶栓治疗研究中的脑梗死模型进行相关分析,旨在为疾病的治疗提供准确的参考依据,最终显著提高脑梗死患者的生活质量。

地塞米松对嘧啶亚硝脲诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的影响

目的观察地塞米松(DEX)对嘧啶亚硝脲(ACNU)诱导的人脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法分别以ACNU、DEX、ACNU联合DEX,作用于体外培养的人脑胶质瘤细胞系SHG-4460h,通过细胞形态学及流式细胞仪分析检测细胞凋亡。结果①形态学观察:ACNU组、ACNU联合DEX组,大部分瘤细胞呈现细胞凋亡的形态学改变。而DEX组及正常对照组仅个别细胞出现上述形态改变。②荧光显微镜观察及流式细胞仪分析:ACNU组、ACNU联合DEX组有典型的凋亡峰,且其瘤细胞的凋亡率明显高于DEX组及正常对照组瘤细胞的凋亡率(P<0.01),但ACNU组的SHG-44细胞的凋亡率与ACNU联合DEX组相差不显著(P>0.05)。结论DEX对ACNU诱导人脑胶质瘤细胞凋亡没有明显影响。

补肾安胎方对肾虚流产大鼠子宫蜕膜Th1/Th2细胞因子的影响

目的:研究补肾安胎方对肾虚流产模型大鼠子宫蜕膜上Th1/Th2型细胞因子的影响。方法:SPF级SD大鼠随机分为3组,每组15只。A组为肾虚流产模型组,用羟基脲加米非司酮灌服;B组为补肾安胎方干预组,用羟基脲加米非司酮加补肾安胎方水提液灌服;C组灌服生理盐水。酶联免疫法检测子宫蜕膜组织的Th1型细胞因子IL-2和Th2型细胞因子IL-10浓度。结果:3组子宫蜕膜IL-2、IL-10浓度和IL-2/IL-10比值比较,差异有统计学意义(P<0.01);A、B组的IL-2显著高于C组(P均<0.01),A组与B组的IL-2比较差异无统计学意义(P>0.05);B组的IL-10显著低于C组(P<0.01),A组的IL-10显著高于C组(P<0.01),A组与C组的IL-10比较差异无统计学意义(P>0.05);IL-2/IL-10比值比较A组显著高于B组(P<0.01),与C组比较无显著差异(P>0.05)。结论:补肾安胎方能促进大鼠子宫蜕膜Th2型细胞因子IL-10的分泌,扭转Th1/Th2细胞因子病理性失衡,降低肾虚流产大鼠模型的流产率。

我院十年医学论文的统计分析

科技论文是学术水平和科技成果的一种表达形式.医院科技生产力的高低,可以从产出论文的数量和质量得到部分体现.它不仅反映一所医院的综合实力和整体医疗技术水平,也反映了科技人员的智慧才能和学识水平.为此,本文对我院1988-1997年发表在国内医学期刊上的699篇医学论文进行统计分析,以期为进一步加强医院临床科研管理,促进多出高质量科研论文和科技成果提供借鉴.

“ABO”血型鉴定实验教学中学生的能力培养

目的通过“ABO”血型鉴定的实验教学,提高学生的操作能力,培养学生观察问题,分析问题的能力。方法明确实验教学目标,具体讲解实验步骤,积极引导学生,充分发挥学生学习的积极性,使学生主动地参与实验教学。结果学生能理论联系实际,运用知识,独立分析判断实验结果。结论通过加强实验教学活动,能使学生在实践中不断地锻炼提高实际工作能力。

失笑散颗粒对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血的保护作用观察

目的观察失笑散颗粒对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血的保护作用。方法将心电图正常的大鼠随机分为6组(每组10只)。空白对照组、模型对照组、低剂量组8g/kg,中剂量组12g/kg,高剂量组16g/kg,阳性对照组5mg/kg硝酸甘油。结果与模型组对比,其余五组15、30s的ST值均具有明显差异,P<0.05;60s时间点,剂量组的ST值较模型组的低,P<0.05;与空白对照组比较,模型对照组的大鼠血清MyoG,CK-MB,cTnI的含量显著性升高,P<0.05;与模型组比较,失笑散颗粒剂量组均能明显降低大鼠血清MyoG,CK-MB,cTnI的含量,而且随着失笑散颗粒剂量的增加,降低程度越大,P<0.05。结论失笑散颗粒对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血有明显的保护作用。

保健食品试验现场核查要点及常见问题解析(下)

1.2.4功效成分检测、稳定性和卫生学试验（微生物部分）功效成分检测、稳定性和卫生学试验的微生物部分涉及项目简单,仅包括几种细菌的测定。然而,由于其采用镜下观察的方法,结果只能取决于操作者的目测结果,因此很难溯源。这也是微生物部分核查的难点所在。以往的核查结果从未出现过微生物方面的问题。本次通过走访试验机构和相关专家,总结了两类可能出现的问题。见附表9。