液态基准标志物在图像引导放疗中的应用价值

评价一种可降解的液态基准标志物(Liquid fiducial marker,LFM)在图像引导放疗中的应用价值。体外实验:以固态基准标志物(Solid fiducial marker,SFM)为参考,评价不同锥形束CT管电压条件下LFM的可视性、伪影和最优注量。体内实验:以SFM为参考,评价LFM在裸鼠体内的稳定性和降解状况。将种植了肿瘤细胞的裸鼠随机分为未注入LFM的单次放疗组(16 Gy/次),注入了LFM的单次(16 Gy/次)、二分次(8 Gy/次)和四分次放疗组(4 Gy/次)。根据照射结果评价LFM对肿瘤生长的影响。相比SFM,LFM的伪影显著较小(均p<0.05),可视性满足临床鉴别要求,当注量为10μL时成像质量最佳。裸鼠体内LFM质心相对脊髓位移显著大于黄金基准标志物((0.22±0.03)mm vs.(0.17±0.02)mm,p<0.05),但始终小于一个像素尺寸,故稳定性良好。LFM的实际降解率同理论降解率高度相符。LFM对单次放疗组肿瘤生长影响较小,对分次放疗组影响较大。LFM具有一定临床应用和推广价值,未来有望取代SFM。

微创内固定技术治疗跟骨骨折的基础研究

目的:测量跟骨轴长、宽度和高度,探讨螺钉入路及固定点,为微创内固定技术治疗跟骨骨折治疗提供解剖学依据。方法:260份无跟骨损伤的轴位及侧位X线片和120份无跟骨损伤的CT片,在X线片及CT上做其纵轴长度为跟骨轴长L,取其中点做跟骨纵轴的垂线为宽度W。在跟骨侧位片上,从跟骨丘部顶点向下做垂线,于跟骨下缘相交的距离为跟骨丘部高度H。成人跟骨标本60个,测量跟骨轴长、宽度、高度;跟骨结节入钉点区域及该部位入钉固定跟骨前部、后关节面、载距突。结果:X线片跟骨测量跟骨轴长平均为(68.02±8.24)mm,宽度平均为(30.86±6.26)mm,高度平均为(40.66±7.48)mm;CT片跟骨测量跟骨轴长平均为(67.82±6.38)mm,宽度平均为(30.16±4.62)mm,高度平均为(40.02±3.34)mm;跟骨标本测量跟骨轴长平均为(69.12±7.32)mm,宽度平均为(32.18±5.34)mm,高度平均为(42.02±6.62)mm;各数值均为非正态分布,因此未进行均数的显著性检验。跟骨各数值之比:宽度/轴长为0.45,高度/轴长为0.60,宽度/高度为0.76。跟骨结节外侧区域入钉可以牢固地与跟骨前部、后关节面及载距突固定为一体。结论:跟骨宽度、高度与轴长的测量可为跟骨骨折治疗及手术器械研制提供解剖学参数,通过跟骨结节外侧区域入钉可以固定跟骨前部、后关节面、载距突为一体,可有效维持跟骨的外形。

兔脂肪干细胞(ADSCs)与聚羟基乙酸/壳聚糖(PLGA/CS)支架材料生物相容性研究

目的探讨兔脂肪来源于细胞（adipose-derived stemcells，ADSCs）作为种子细胞复合新型聚羟基乙酸（polylaetic-co—glycolicacid，PLGA）／壳聚糖（chitosan，CS）支架材料的生物相容性，为进一步构建组织工程化脂肪组织提供实验依据。方法取雄性新西兰大白兔腹股沟脂肪组织，I型胶原酶消化分离出ADSCs进行培养，贴壁细胞至3～5代，评价其多向分化能力。将干细胞收集重悬后，以l×10^7／mL的密度接种于多孔PLGA／CS支架，形成细胞一支架材料复合物。培养7天后，扫描电子显微镜观察细胞在支架材料上的黏附生长和基质分泌情况，评价细胞与支架材料的生物相容性；Dil荧光标记检测细胞在支架材料上的分布；Hochest33258检测细胞在支架上的生长情况。接种1和7天后，分别对细胞一材料复合物行AnnexinV／PI双染色法检测材料对细胞的毒性作用。用成脂诱导条件培养基诱导分化ADSCs及ADSCs支架材料复合物，7天后，尼罗红荧光染色液检测ADSCs在不同环境下的成脂分化能力。结果原代培养的ADSCs呈成纤维细胞样外观，在相应诱导条件下能够分化为脂肪细胞和骨细胞。细胞接种于PLGA／CS支架材料上第8天分裂增殖达到高峰，扫描电子显微镜下提示ADSCs在支架表面贴附生长良好，并向孔隙内壁充分延伸，细胞周围形成丰富的基质成分。活死双染结合共聚焦显微镜显示材料对细胞活性无影响，尼罗红染色可见成脂诱导后的ADSCs细胞质内有红色脂滴颗粒形成。结论多孔PLGA／CS支架与兔ADSCs具有良好的生物相容性，可作为构建组织工程脂肪组织的支架材料。

表面粗糙度对种植体钛片表面成骨细胞的影响

目的探讨种植体表面粗糙度对成骨细胞增殖、分化、功能及基因表达的影响。方法种植体钛片分为3组,表面粗糙度(Ra)分别为0.175μm(1组)、1.00μm(2组)及1.689μm(3组)。将人成骨肉瘤细胞系MG63细胞接种于3组材料表面,利用激光共聚焦显微镜观察细胞在各组钛材料表面黏附铺展形态,采用MTY法、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素活性检测评价成骨细胞在钛片表面黏附、增殖和分化水平,通过RT- PCR检测细胞内Cbfa1mRNA表达。结果Mg63在各组材料表面均生长良好,4h时各组细胞均附着,第2组细胞可见突起,24h时各组细胞均伸展,形态不规则。各组细胞在1、5、10d,第2组ALP及骨钙素(OC)活性均逐渐增高,在15d有所下降,在5、10d,ALP及OC活性显著高于其他两组(P<0.05)。第2组的Cbfal mRNA表达高于其他两组(P<0.01)。结论种植体表面适度粗化能够促进成骨细胞的功能,1.00μm是比较适宜的表面粗糙度。

丝素蛋白/纳米羟基磷灰石/淫羊藿苷可促进移植骨髓间充质干细胞增殖分化为髓核样细胞

背景:近年来利用组织工程技术修复椎间盘退变成为脊柱外科领域的研究热点。目的:对比丝素蛋白/纳米羟基磷灰石/淫羊藿苷与丝素蛋白/纳米羟基磷灰石复合材料在椎间盘退变修复中的效果。方法:采用物理共混法与致孔剂制备丝素蛋白/纳米羟基磷灰石水凝胶,将水凝胶直接与淫羊藿苷物理混合制备含淫羊藿苷(10 mmol/L)的水凝胶。采用髓核抽吸法建立新西兰大白兔椎间盘退变动物模型,将造模成功的36只兔随机分3组,每组12只:模型组采用微量注射器向椎间盘内注射PBS,对照组注射丝素蛋白/羟基磷灰石水凝胶与骨髓间充质干细胞悬液,实验组注射丝素蛋白/羟基磷灰石水/淫羊藿苷凝胶与骨髓间充质干细胞悬液。正常组(n=12)不建模也不进行任何处理。术后4,8,12周进行X射线片、MRI检查,术后12周进行组织学(苏木精-伊红染色与甲苯胺蓝染色)、RT-PCR检测(Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、Sox9 mRNA的表达)与Western blotting检测(Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、Sox9蛋白的表达)。结果与结论:(1)X射线片显示,术后4,8,12周时,模型组椎间盘高度逐渐下降,对照组、实验组椎间盘高度逐渐增加,其中实验组兔椎间盘高度的恢复好于对照组;(2)MRI检查显示,术后4,8,12周时,模型组兔椎间盘T2加权像信号值呈逐渐降低趋势,对照组与实验组逐渐升高,其中以实验组升高更明显;(3)苏木精-伊红染色显示,模型组髓核组织破坏较明显,髓核细胞显著减少;对照组髓核组织欠完整,中央髓核区可见少量髓核样细胞增生;实验组髓核组织较完整,中央髓核区可见大量髓核样细胞增生;(4)甲苯胺蓝染色显示,模型组髓核无着色,对照组中度染色,实验组髓深染;(5)RT-PCR与Western blotting检测显示,模型组Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、Sox9的mRNA及蛋白表达水平低于正常组(P<0.05),对照组与实验组的Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、Sox9的mRNA及蛋白表达水平高于模型组(P<0.05),实验组的Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、Sox9的mRNA及蛋白表达水平高于对照组(P<0.05);(6)结果表明,丝素蛋白/羟基磷灰石水凝胶联合淫羊藿苷可促进移植骨髓间充质干细胞增殖并分化为髓核样细胞,增加细胞基质的合成,促进退变椎间盘的修复。

可生物降解PLA/PCL、PELA/PECL共混体系的研究

本工作以DSC研究了聚d,l-乳酸/聚ε-己内酯(PLA/PCL)、聚d,l-乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物/聚ε-己内酯-聚乙二醇嵌段共聚物(PELA/PECL)共混体系的相容性,发现PLA/PCL体系是不相容的,随PLA含量的增大,PCL结晶度增大。而PELA/PECL共混体系中,由于PEG链段的“内增容作用”,使二组分有较好的相容性。随PELA含量的增加,PECL的熔点、结晶度降低。

镁合金支架双重可控释放涂层的制备及药物释放性能研究

在镁合金支架材料WE42表面制备了双重可控腐蚀和药物缓释涂层,并对其药物释放性能进行了研究。DSC研究表明紫杉醇均匀分散在PLGA体系中。药物释放实验表明,PLGA可使紫杉醇长期持续释放,突释较弱,释放是由扩散-降解控制。随载药膜中PEG分子量和含量的增加,药物释放率增加。外层明胶涂层能有效降低药物释放率,延长药物释放时间。

碱处理法制备钛合金表面羟基磷灰石涂层

采用碱处理法制备钛基羟基磷灰石涂层,考察了碱液处理中有关钛合金表面活化参数对其诱导羟基磷灰石沉积速度的影响,采用X射线衍射和扫描电镜对样品的化学组成、结构和性能进行了表征,确定了钛合金表面活化处理的最优参数。结果表明,钛基体经10mol/L氢氧化钠,饱和硝酸钙预钙化处理,模拟体液中培养后,羟基磷灰石沉积速度快,14d就可形成致密、均匀、裂纹少的涂层;碱液处理后饱和硝酸钙溶液预钙化可得到片状的羟基磷灰石生物矿化层;且钛基体在600℃的热处理是HAP涂层沉积的重要条件之一。与相关研究相比较,该方法的优点在于可在形状复杂的植入体上形成均匀的涂层,工艺简单,并且涂层与基体结合牢固。

软骨组织工程支架材料的研究进展

软骨组织工程支架材料要求具有特定的生化、物理性质,如极强的生物相容性、合适的生物降解性、可控的孔径大小、足够的孔隙率等。随着软骨组织工程的发展,如何选取理想的支架材料已成为这一课题的关键。文中就近年来软骨组织工程的支架材料研究进展进行综述。

全自动生物脱水机乙醇更换方法的探讨

影响病理切片质量的因素较多,标本前期处理是其中的重要环节,而组织固定和脱水又是前期处理的关键。全自动生物脱水机以其标本多、稳定好及安全佳一直被受各医院病理科和科研机构的青睐[1]。本文分析3种乙醇更换方法及其处理后的组织蜡块和HE切片染色质量,旨在寻找既能使HE染色优良又节省试剂的新乙醇更换法。

正常(牙合)者下颌运动时的肌电活动研究

目的研究正常(牙合)者在下颌运动及姿势位时,双侧颞肌前束(TA)、嚼肌(MM)、二腹肌前腹(DA)及胸锁乳突肌(SCM)的肌电活动情况,为临床提供相关参考数据。方法运用美国BioEMGⅡ八道表面肌电仪和美国产BioFLEX双极表面电极,记录32例正常(牙合)者上述肌肉的肌电变化情况。结果下颌姿势位,TA、MM、DA及SCM均有轻微的电位活动,TA活动最明显。牙尖交错(牙合)时(最大紧咬),TA、MM、DA均出现明显的肌电活动,MM和TA肌电活动最大,DA和SCM最弱。前伸运动,MM、DA的肌电活动大于TA和SCM;后退运动,DA肌电活动最明显。吞咽运动,TA活动最明显。结论不同运动状态下,颞肌前束,嚼肌,二腹肌和胸锁乳突肌的肌电活动不同。

慢性神经电生理实验中微电极的研究现状

从不同的角度介绍几种目前广泛使用的神经微电极,比较了不同的制作工艺和方法的优缺点,提出了目前慢性微电极记录中仍然存在的问题及可能的解决方案。从手工工艺生产的微电极及其推进系统到利用半导体技术和微加工技术生产的微电极阵列,每一种微电极都为慢性神经电生理实验的发展奠定了重要的基础。

具有梯度构造的CaO-P_2O_5-Al_2O_3-B_2O_3系统生物微晶玻璃的制作

介绍了制备具有梯度构造的ＣａＯ－Ｐ２Ｏ５－Ａｌ２Ｏ３－Ｂ２Ｏ３系统生物微晶玻璃的热处理方法。应用ＸＲＤ、ＳＥＭ等测试手段对材料的结晶相及细微结构进行了测试和分析，结果表明其主要晶相为羟基磷灰石和磷酸三钙。该材料的表面与内部具有梯度的组织构造，所制得的材料与天然牙齿有相近的色泽和外观。

个性化义眼的定制与临床应用

【目的】为眼球摘除Ⅰ期植入义眼座的患者定制个性化义眼,观察其临床效果及并发症。【方法】患者术后2周试戴成品义眼,不满意者予以定制个性化义眼。分别测量患者佩戴两种义眼后双侧睑裂高度、眼球突出度及义眼水平方向活动度。就个性化义眼的颜色、外形、活动性、固位性及舒适性等指标向患者征询意见。【结果】佩戴个性化义眼后,与成品义眼相比较,睑裂高度及眼球突出度更接近健眼,且水平活动度增加。患者对个性化义眼外形、颜色、活动性、固位性、舒适性评价总满意率分别为92.6%、88.9%、81.5%、100%、92.6%,且并发症少而轻微。【结论】个性化义眼适用于眼球摘除义眼座植入术后的患者。依据患眼结膜囊形态取模,并参照健眼特征定制个性化义眼,可获得较好的仿真效果,具有临床应用与推广价值。

系列仿生高分子复合材料与小鼠成纤维细胞生物相容性体外实验研究

目的:对含有壳聚糖的4种新型仿生高分子复合材料进行细胞生物相容性评价。方法:采用小鼠NIH/3T3细胞的体外实验,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和琼脂覆盖法评价CS/HA复合材料、添加碳酸钙离子的CS/CaCO3复合材料、添加铁离子的Fe3O4/CS复合材料和Fe3O4/HA/CS复合材料等4种材料的细胞增殖和细胞毒性。结果:这4种生物材料MTT试验中毒性级均为0级,琼脂覆盖法中材料周围及脱色区内细胞溶解评价(Z/L值)均为0/0。结论:这4种生物材料具有良好的细胞生物相容性,可以满足临床应用的需要。

牛BMP注射型骨修复材料异位诱导成骨活性的研究

目的了解以纤维蛋白胶(Fibrin sealant,FS)为载体复合牛骨形态发生蛋白(bovine BMP,bBMP)的注射型骨修复材料异位诱导成骨的作用。方法实验分为:实验组(FS+bBMP)、对照组b(bBMP)、对照组FS(FS)和空白对照组。将各组材料注射或植入小鼠肌袋内,采用放射学检查、成骨量测定、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)测定、组织形态学检查等方法对各组材料2周、4周异位诱导成骨进行研究。结果(1)术后4周实验组及对照组b骨痂显影明显,对照组FS及空白对照组无骨痂形成;(2)术后4周,实验组的成骨量显著高于对照组、对照组FS和空白对照组(P<0.01);(3)2周时各研究组ALP表达水平由高到低依次为:对照组b→实验组→对照组FS→空白对照组,有显著性差异(P<0.01);4周时各研究组ALP表达水平由高到低依次为:实验组→对照组b→对照组FS→空白对照组,差异有显著性(P<0.01)。结论以FS为载体复合bBMP的注射型骨修复材料具有高效的骨诱导活性。

腹腔注射高渗盐水对下丘脑室旁核加压素能神经元的兴奋作用

目的 探讨外周高渗刺激激活下丘脑室旁核 (PVN)神经元的细胞类别。方法 以腹腔注射高渗盐水作为外周高渗刺激。细胞外记录PVN神经元单位放电的变化 ,并用免疫细胞化学方法观察PVN中fos的表达及fos表达阳性神经元的性质。结果 腹腔注射高渗盐水使PVN的位相型放电神经元兴奋 ,PVN内fos表达明显增加 ,特别是PVN大细胞中大量的fos阳性神经元同时表达精氨酸加压素 (AVP)。结论 外周高渗刺激能够激活PVN内的加压素 (VP)能神经元。

MTT法评价Ca2KNa（Po4）2陶瓷的体外细胞相容性

羟基磷灰石（HAP，Ca10（Po4）6（OH）2）和磷酸三钙（3-TCP，β-Ca3（PO4）2）在化学成分上与骨组织中的无机盐（生物磷灰石）成分相似，而得到广泛的研究和应用。但HA在骨组织内很难被降解吸收，β-TCP在不承力的骨组织部位几乎不被吸收。在β-TCP生物陶瓷的基础上，通过高温化学反应合成了化学式为Ca2KNa（PO4）2的可降解性磷酸钙陶瓷材料。采用体外细胞培养技术，以L929为评价细胞系，采用MTT法评价研究了Ca2KNa（PO4）2陶瓷材料的体外细胞相容性。研究发现，用细胞培养液浸提的Ca2KNa（PO4）2陶瓷颗粒的浸提液与L929细胞共培养2～6d，MTT法测定相对细胞存活率〉83％，说明Ca2KNa（PO4）2陶瓷材料的体外细胞毒性评级为1级，符合人体植入材料对细胞毒性的要求。