“补肾活血”针刺疗法对辅助生殖技术薄型子宫内膜的临床观察

目的:观察补肾活血针刺疗法治疗辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)薄型子宫内膜患者的可行性和有效性。方法:选择62例行ART助孕的薄型子宫内膜患者,胚胎移植前予补肾活血针刺疗法治疗[取穴:腹部取中极、关元、大赫(双)、子宫(双)、归来(双),头部取百会,四肢取血海(双)、足三里(双)、三阴交(双)、太冲(双)、合谷(双)],每次留针30 min,1次/周,月经期暂停治疗。胚胎移植前予针刺治疗2个月。结果:治疗后患者子宫内膜厚度较治疗前有所增加(P<0.01),中医证候积分较治疗前降低(P<0.01)。总临床妊娠率、高龄临床妊娠率、卵裂期胚胎临床妊娠率、囊胚临床妊娠率、异位妊娠率、流产率、活产率分别为53.22%(33/62)、37.50%(6/16)、41.38%(12/29)、63.64%(21/33)、0%(0/33)、27.27%(9/33)、38.71%(24/62)。结论:补肾活血针刺疗法可增加ART薄型子宫内膜患者的子宫内膜厚度,缓解肾虚血瘀症状,提高临床妊娠率;但流产率较高,活产率偏低,其确切疗效及作用机制有待大样本、多中心的随机双盲试验。

发育完全停滞的体外受精胚胎线粒体DNA突变研究

目的 通过探究不明原因早期胚胎发育全部停滞患者线粒体基因的特异性突变。方法 本研究为病例对照研究。收集2021年5月至2022年11月就诊我院的不孕不育女性患者共计46人,均进行外周血全外显子测序及线粒体基因突变检测。经筛选纳入研究组10人,为全部胚胎发育停滞患者;对照组15人,为具有3个以上可移植胚胎的患者,所有入组病例夫妻双方未见染色体异常。统计2组患者临床基线数据、胚胎发育情况,比较2组患者线粒体基因突变位点及其定位基因情况,并对特异性突变位点/基因进行功能注释。结果 研究组发现5个特异线粒体突变位点,分别为:MT-16172(T>C)、MT-12882(C>T)、MT-12406(G>A)、MT-10609(T>C)、MT-16129(G>A)。这些突变点均位于线粒体呼吸链复合物基因和线粒体基因调控区。结论 5个线粒体基因特异性突变位点[MT-16172(T>C)、MT-12882(C>T)、MT-12406(G>A)、MT-10609(T>C)、MT-16129(G>A)]可能与不明原因早期胚胎发育停滞相关。

基于Fas/FasL信号通路对桂药生精胶囊治疗少精子症的临床研究

目的探讨桂药生精胶囊对少精子症(肾精亏虚型)患者的精子浓度(SC)、前向运动精子比例(PR)、PR+非前向运动精子比例(NP)、精子总数、精子脂肪酸合成酶(Fas)信使RNA(mRNA)、脂肪酸合成酶配体(FasL)mRNA表达水平及精浆Fas蛋白、FasL蛋白表达水平的影响。方法选取2019年10月至2020年3月就诊于广西中医药大学附属瑞康医院男性科门诊的少精子症(肾精亏虚型)患者60例,随机分为对照组和治疗组,每组30例。对照组采用左卡尼汀治疗,治疗组在对照组的基础上联合桂药生精胶囊治疗,12周为1个疗程。观察治疗前后两组患者的SC、PR、PR+NP、精子总数、精子Fas mRNA、FasL mRNA和精浆Fas蛋白、FasL蛋白表达水平。结果治疗组总有效率比对照组高(P<0.05)。治疗前两组患者SC、PR、PR+NP和精子总数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组患者精子SC、PR、PR+NP和精子总数均比治疗前高(P<0.05),且治疗组患者精子SC、PR和精子总数高于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者精浆Fas和FasL蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组精浆Fas蛋白表达水平低于治疗前(P<0.05),且治疗组Fas蛋白表达水平低于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者精子Fas mRNA和FasL mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组患者精子Fas mRNA和FasL mRNA表达水平低于治疗前(P<0.05),且治疗组Fas mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)。结论桂药生精胶囊能明显提高少精子症(肾精亏虚型)患者的SC、PR、精子总数,降低精子Fas mRNA及精浆Fas蛋白的表达水平。

评估胚胎发育潜能研究的新进展

胚胎发育潜能关系到辅助生殖结局中单胚胎移植的选择和最终的临床妊娠结局。形态学评估法因其简单、便捷、廉价、较稳定和时效性高的优势,成为辅助生殖实验室评估胚胎发育潜能最广泛运用的方法;时差成像(TL)技术的诞生和兴起为辅助生殖实验室提供了实时记录胚胎完整发育动态过程的手段;代谢组学可通过检测葡萄糖、氨基酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(磷酸)、黄素腺嘌呤二核苷酸等代谢产物对胚胎发育潜能进行生理学上精确地评估;植入前遗传学检测(PGT)可对胚胎进行严重遗传疾病或染色体异常状况(非整倍性)的检测。本文对以上4种评估胚胎发育潜能方法的新进展进行综述。

取卵术中不同负压吸引压力值对妊娠结局的影响

目的:探讨取卵术中不同负压吸引压力值对妊娠结局的影响。方法:选取2019年2月—2020年2月江西省妇幼保健院生殖中心收治的107例行辅助生殖技术的不孕症患者作为研究对象,使用随机摸球法将其分为A组(n=35)、B组(n=36)和C组(n=36),三组患者分别设置100 mmHg (1 mmHg=0.133 kPa)、130 mmHg、160 mmHg负压吸引压力。比较三组患者的获卵率、优质胚胎率、受精率、生化妊娠率、临床妊娠率、进针次数、穿刺持续时间、穿刺过程中出血量。结果:B组患者进针次数、穿刺持续时间分别为(2.61±0.54)次、(9.87±2.14) min,C组患者进针次数、穿刺持续时间分别为(2.47±0.39)次、(9.76±2.32) min,均低于A组的(3.41±0.87)次、(13.21±3.74) min,C组患者取卵过程中的出血量为(1.51±0.61) mL,高于A组、B组的(0.64±0.12) mL、(0.63±0.21) mL,差异有统计学意义(P<0.05),B组患者的优质胚胎率(75.00%)明显高于A组(51.43%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:取卵术中设置130 mmHg的负压能够提高优质胚胎率,设置较小的压力能够获得更高的操作安全性,但临床实际过程中需根据具体情况进行压力选择,以获得更佳的妊娠结局。

宫腔镜检查在体外受精-胚胎移植中的应用

目的探讨宫腔镜在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的应用价值。方法回顾性分析宫腔镜检查及治疗的IVF-ET病例160例,根据检查原因分为A组(IVF-ET前常规检查)、B组(反复种植失败,即移植高质量胚胎超过3次未妊娠患者)、C组(ET后异位妊娠者)、D组(既往ET后早期自然流产、稽留流产患者),每组40例。比较4组宫腔镜检查结果及处理情况,记录宫腔镜检查及治疗后的IVF-ET妊娠结局。结果 B、C、D组宫腔镜检查异常率高于A组(P<0.05);D组子宫内膜息肉和子宫内膜炎患病率高于其他3组(P<0.01),而A、B、D组差别无统计学意义(P>0.05);子宫纵隔、宫腔粘连和子宫黏膜下肌瘤患病率4组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。宫腔异常者手术治疗后1年内行IVF-ET,妊娠率为30.65%,早孕自然流产率为6.45%,异位妊娠率为3.23%。结论宫腔镜检查是IVF-ET术前的一种理想的检查方法,可避免因宫腔异常导致的IVF-ET失败,可作为行IVF-ET前的常规检查。

不同时期胚胎评分与单囊胚移植周期胚胎丢失的关系

目的探讨单囊胚移植周期中囊胚期胚胎评分及其相应的卵裂期胚胎评分对胚胎丢失的影响。方法选取2017年7月至2022年7月于宜春市妇幼保健院辅助生殖科行新鲜或冻融复苏单囊胚移植且β-HCG阳性的196个周期为研究对象,按照妊娠结局分为生化妊娠组(34个周期)、早期流产组(22个周期)和持续妊娠组(140个周期);比较3组患者的基础资料、移植不同评分囊胚占比及其对应的卵裂期胚胎评分占比、D2~D3的卵裂模式占比等实验室指标,并采用多因素Logistic回归分析生化妊娠的影响因素。结果3组间基础资料包括年龄、体质量指数(BMI)、不孕年限、基础性激素水平、抗苗勒管激素(AMH)水平、窦卵泡计数(AFC)比较均无统计学差异(P>0.05),组间获卵数、成熟卵数、IVF比例、新鲜周期比例、移植日内膜厚度比较亦无统计学差异(P>0.05)。生化妊娠组的优质囊胚率为70.6%,较早期流产组(100.0%)和持续妊娠组(93.6%)显著降低(P<0.05);生化妊娠组移植囊胚的D2~D3优质卵裂模式占比显著低于早期流产组(44.1%vs.77.3%,P<0.05);生化妊娠组移植囊胚内细胞团(ICM)、滋养层细胞(TE)的A+B评分占比、D5囊胚占比显著低于持续妊娠组(P<0.05)。调整混杂因素后,多因素Logistic回归分析结果显示继发不孕、囊胚TE评分低和D6囊胚移植是单囊胚移植周期生化妊娠的风险因素(P<0.05)。结论无论囊胚来源于何种质量的卵裂期胚胎,建议优先选择D5优质囊胚进行移植,并优先考虑TE评分级别高的囊胚,以期减少单囊胚移植周期胚胎丢失的发生。

杜惠兰教授补肾法辅助治疗体外受精-胚胎移植临证经验

杜惠兰教授以“肾主生殖”中医理论为指导思想,提出肾精亏损、冲任失调是体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者的基本病机,采用中医药介入IVF-ET技术,以补肾填精、调补冲任为治疗法则,分期论治,可有效改善卵巢功能及子宫内膜容受性,提高IVF-ET患者的成功率。

适当的降调节在体外受精-胚胎移植长方案治疗中的价值

目的探讨使用促性腺激素释放激素激动剂降调节在体外受精-胚胎移植治疗中的意义。方法回顾分析我中心2008年1-12月185例因不孕不育接受体外受精-胚胎移植助孕的长方案治疗周期共187个。根据促性腺激素使用前患者是否达到降调标准,分为达标组(n=95)与未达标组(n=92)。分析比较2组患者年龄、使用促性腺激素释放激素激动剂(gonadotrophin releasing hormone agonist,GnRH-a)和促性腺激素(gonadotropine,Gn)剂量、获卵数、成熟卵数、受精率、优质胚胎率、临床妊娠率等之间的差异。结果2组的临床妊娠率分别为48.94%和32.61%,达标组显著高于未达标组(P<0.05);继续妊娠的观察中,二者的流产率无明显差别;达标组使用GnRH-a和Gn的剂量略大于未达标组,但两组间的差异无统计学意义。实验室资料显示两组的获卵数、MⅡ卵数以及受精率均较接近,均无明显差异(P>0.05);而在优质胚胎获得率的对比中,达标组(43.70%)明显高于未达标组(31.80%)(P<0.05)。结论在体外受精-胚胎移植的长方案治疗中,垂体降调节达标者的临床妊娠率高于未达标者。可见降调节是否充分和适当对助孕治疗的结局有重要意义。本中心现行的降调节标准是适宜的。

短时受精对体外受精结果的影响

目的了解短时受精对体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)结局的影响。方法选择在本生殖医学中心接受常规IVF治疗的248个周期,通过一定条件限制将其分为短时受精组和过夜受精组,将248个常规IVF周期中的卵子进行配对资料(同一IVF周期同时进行短时受精和过夜受精者,共20个周期)和非配对资料(1个IVF周期只采用1种方式受精者,过夜受精组177个周期,短时受精组51个周期)研究,比较短时受精组和过夜受精组的正常受精(2PN)率、多精受精率、卵裂率、优质胚胎率及临床妊娠率。结果无论配对还是非配对资料,短时受精组的正常受精(2PN)率、多精受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率等与过夜受精组比较均无统计学差异(P>0.05);在非配对资料中,短时受精组的移植优胚率(77.33±36.69)%明显高于过夜受精组(64.04±41.85)%(P<0.05),而在配对资料中,用于移植的优质胚胎率短时受精组和过夜受精组无统计学差异(P>0.05)。结论短时受精是一种安全、有效的受精方式,但不能改善胚胎质量和妊娠结局。

不同来源精子行卵胞浆内单精子注射临床妊娠结局分析

目的探讨不同来源精子对卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗后妊娠结局的影响。方法回顾性分析因男性因素行ICSI的不育患者835例的859个助孕周期,根据精子来源不同分A组即射精精子组699周期,B组即经皮附睾精子抽吸术(PESA)组114周期,C组即睾丸精子抽吸术(TESA)组46周期。结果 (1)A、B、C三组正常受精(2PN)率分别为:82.4%、76.2%、71.8%,A组最高,即射精组>PESA组>TESA组,B、C组与A组比较有显著性差异(P<0.05);A、B、C三组卵裂率分别为:98.6%、97.6%、98.3%,B组与A组比较有显著性差异(P<0.05),而C组与A组比较无显著性差异(P>0.05)。(2)A、B、C三组可利用胚胎率、优质胚胎率比较无显著性差异(P>0.05)。(3)A、B、C三组着床率分别为32.5%、37.7%、41.7%,三组比较无显著性差异(P>0.05)。(4)A、B、C三组妊娠率分别为50.8%、56.1%、60.9%,三组比较无显著性差异(P>0.05)。结论不同来源精子行ICSI,对受精率有影响,但三组都可获得相似的可利用胚胎、优质胚胎,应用射精精子以及PESA、TESA精子行ICSI都能获得较好的妊娠结局。

益气血补肝肾中药对体外受精-胚胎移植临床结局的影响

目的:探讨辅助生育技术结合益气血补肝肾中药对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠率的影响。方法:将行IVF-ET患者249例随机分成中药组(115例)及对照组(134例),两组均采用标准长方案垂体降调节治疗,中药组于促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)降调节同时给予中药促黄体颗粒1周,给予促性腺激素(Gn)促排卵时加用经后增殖颗粒至HCG日;取卵后继续给予促黄体颗粒1周;对照组采用标准方案治疗不加用中药。对两组临床资料及结局进行分析。结果:两组患者HCG日E2、P、LH水平相比无显著性差异(P>0.05);中药组胚胎种植率及妊娠率高于对照组(P<0.05);中药组卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率低于对照组(P<0.05)。结论:在采取辅助生育技术的同时,运用益气血补肝肾中药能提高子宫内膜容受性,从而提高胚胎种植率和妊娠率。

短时受精与长时受精对体外受精及临床妊娠结局的影响

目的:探讨短时受精与长时受精对体外受精及临床妊娠结局的影响。方法:2008年1月至2010年12月因女性输卵管因素或盆腔炎症在本中心接受短时IVF与长时IVF。短时IVF共1095周期,长时IVF共1008周期,比较短时受精与长时受精两组患者的基本情况、受精、胚胎及临床妊娠情况。结果:两组患者正常受精(2PN)率的差异无统计学意义(P>0.05)。长时受精的0PN率(18.1%vs 13.5%)、1PN率(3.8%vs1.6%)明显高于短时受精组,3PN率比较,结果相反(4.5%vs 7.8%)。短时受精的卵子利用率(58.4%vs 53.7%)、优质胚胎率(70.6%vs 65.5%)、胚胎利用率(85.2%vs80.1%)明显高于长时受精组,两组临床妊娠率无统计学差异(44.6%vs 41.5%,P>0.05)。结论:短时IVF的多PN率比长时IVF高,但是0PN、1PN率显著降低,卵子利用率提高。短时IVF的优质胚胎率、胚胎利用率明显高于长时IVF。短时受精在一定程度上能提高卵子利用率,改善胚胎质量从而提高胚胎利用率。

脱氢表雄酮(DHEA)治疗对卵巢低储备患者体外受精-胚胎移植周期的影响

目的:初步探讨脱氢表雄酮(DHEA)对卵巢储备功能低下妇女的体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)周期的影响。方法:筛选105例卵巢储备功能低下拟进行IVF/ICSI-ET治疗的女性患者105例,根据其意愿分成两组。试验组口服DHEA(75mg/d)和坤泰胶囊,对照组单独口服坤泰胶囊,疗程均为3个月。结果:服用DHEA后卵巢储备功能显著改善,FSH及E2显著低于对照组(P<0.05);服药结束后进行IVF-ET治疗,对比两组患者药物治疗前后卵巢储备的变化,并比较两组妊娠结局,结果发现总促性腺激素使用剂量(Gn量)及周期取消率显著低于对照组(P<0.05),获卵数、优质胚胎数及临床妊娠率均高于对照组(P<0.05)。但两组胚胎种植率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DHEA可以改善卵巢储备功能低下患者IVFET周期的妊娠结局。

小鼠早期完整胚胎诱导子宫内膜白血病抑制因子和整合素β_3表达并提高子宫容受性

目的:探讨小鼠早期胚胎诱导子宫内膜容受性改变的空间结构,确定胚胎各个部分能否引起子宫内膜容受性中白血病抑制因子(LIF)和整合素β3改变。方法:选用6～8周昆明雌鼠,体外实验分为子宫内膜培养前组、子宫内膜单纯培养组、子宫内膜全胚胎共培养组、子宫内膜卵裂球共培养组、子宫内膜透明带共培养组,各组培养2 d后收集子宫内膜行下一步检测;体内实验分为胚胎移植前组、单纯培养液移植组、全胚胎移植组、卵裂球移植组、透明带移植组及正常妊娠未干预组,移植后2 d收集子宫内膜行下一步检测。荧光定量PCR检测整合素β3和LIF mRNA表达;免疫组织化学及Western blotting检测整合素β3和LIF的蛋白表达部位及表达水平。结果:体外实验子宫内膜全胚胎共培养组中子宫内膜的整合素β3和LIF表达显著高于其它组,体内实验正常妊娠未干预组的整合素β3和LIF表达显著高于其它组。结论:完整胚胎可显著提升小鼠孕早期子宫内膜容受性因子整合素β3和LIF的表达,而单纯透明带或卵裂球则不能明显增加整合素β3和LIF的表达。早期胚胎诱导子宫内膜容受性可能需要完整胚胎结构的存在。

原核期形态特征与胚胎体外发育能力和体内着床潜能的关系

目的探讨原核期评分系统与受精后第3天胚胎形态、受精后第6天囊胚形成和着床率之间的关系,以评估其在体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)中的应用价值。方法于常规IVF或卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)受精后16～20 h观察受精情况,将正常受精卵母细胞参照Scott提出的Z评分系统分为Z1～Z4四种类型,比较不同原核类型之间的卵裂率,胚胎第3天(D3)优质胚胎率和第6天(D6)囊胚形成率。并通过分析着床结局明确的移植胚胎,比较各种类型受精卵之间的着床率。结果 Z4组受精卵的卵裂率(92.9%)、D3优质胚胎率(14.25%)、D6囊胚形成率(10.48%)均明显低于其他各组(P<0.01)。Z4组的着床率(5.88%)很低,但各组的着床率之间差异无显著性(P>0.05)。Z1、Z2、Z3三组间的卵裂率、D3优质胚胎率、D6囊胚形成率和着床率之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论异常的原核形态(Z4型)可预测胚胎的体内外发育潜能,但核仁的形态特征并不一定能预测胚胎的活力,Z1、Z2和Z3胚胎可能具有相同的发育潜能。

体外受精与胚胎移植治疗不孕症290个周期临床分析

目的 :分析体外受精与胚胎移植 (IVF ET)治疗不孕症 2 90个周期的效果。方法 :采用GnRHa/FSH/hCG和GnRHa/FSH/hMG/hCG两种超促排卵方案 ,对 2 5 2对不孕夫妇共进行了 2 90个周期常规IVF、冻融胚胎或卵胞浆内单精子显微注射 (ICSI)及胚胎移植 (ET)治疗。结果 :合计 2 90个周期共获临床妊娠 10 5例 ,周期妊娠率为36 .2 %。流产 9例 ,异位妊娠 11例 ,已分娩 6 5例 ,获新生儿 91个 ,另 2 0例继续妊娠。按女性年龄 <30岁、30～ 34岁、35～ 39岁、≥ 4 0岁分为 4个年龄组 ,4组的周期妊娠率依次为 4 7.0 %、34.1%、2 5 .5 %、0 ,有统计学差异 (P <0 .0 5 )。结论 :不孕夫妇用常规IVF、冻融胚胎移植或ICSI后均能获得较好的妊娠效果。

人胎睾丸发生过程中VEGF的表达研究

目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)在人胚胎睾丸组织发生过程中的表达特征,探讨其在睾丸发生中的作用。方法:采用HE染色观察睾丸发育,SP免疫组织化学法检测VEGF在不同胎龄睾丸组织中的表达变化。结果:人胚胎睾丸发育正常;VEGF在胎儿睾丸间质细胞、生殖细胞中均有不同程度表达,间质细胞以12～24周为表达高峰,生殖细胞以16～24周为表达高峰,24周后随着胎龄的增长均呈下降趋势(P<0.01)。结论:VEGF在人胎睾丸发生、发育过程中有不同程度的表达,表明其在睾丸发生过程中起着一定的作用。