便携式小型压力泵系统在遗体防腐灌注中的应用

经捐献后的人体标本需要进行多个步骤的处理才能用于实验教学,而遗体防腐则是其中最为关键的一步,直接关系到实验教学的效果^([1])。常规防腐灌注技术采用“吊瓶法”,即将连接好橡胶管的玻璃瓶,在地面配制好防腐液后,采用徒手或者升降机将玻璃瓶升至2 m左右高度的固定平台上,从而提高灌注压力^([2])。基于目前的实验技术需求,此方法存在操作笨拙、方式落后、防腐效果欠佳、压力不可控等缺陷^([3])。

1例脑出血气管切开术后拔管困难患儿的康复护理

总结1例脑出血气管切开术后留置气管套管8个月出现拔管困难患儿的康复护理体会,包括严格把控堵管、拔管指征,分析试堵管失败原因,注重患儿口鼻呼吸功能训练、心理干预、呼吸肌功能的保护与锻炼以及呼吸功能训练,加强肢体功能锻炼与营养支持。经过精心的护理、康复训练以及治疗,患儿成功拔除气管套管,康复出院。本病例强调了长期留置气管套管拔管困难中口鼻呼吸训练、心理因素对患儿的重要影响,为临床上处理气管切开术后拔除气管套管提供了参考。

慢病毒介导的解整合素-金属蛋白酶17RNA干扰对气道上皮细胞MMP-9表达及NF-κB活性的影响

目的探讨脂多糖(LPS)诱导的气道上皮细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的TNF-α/NF-κB信号转导机制及慢病毒介导的解整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)RNA干扰(RNAi)对MMP-9表达的影响。方法构建ADAM17 siRNA慢病毒载体、包装重组慢病毒。以NF-κB抑制剂(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)或TNF-α拮抗剂(etanercept)预处理HBE4-E6/E7细胞,以LPS刺激HBE4-E6/E7细胞24 h。以重组慢病毒感染HBE4-E6/E7细胞72 h后,以LPS或TNF-α刺激HBE4-E6/E7细胞24 h。以半定量RT-PCR检测MMP-9 mRNA表达;以酶联免疫吸附试验检测TNF-α蛋白含量;以Western blot检测MMP-9蛋白表达;以凝胶阻滞分析实验检测NF-κB活性。结果 LPS或TNF-α刺激均明显增加HBE4-E6/E7细胞MMP-9 mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P<0.05);etanercept和PDTC均明显抑制LPS诱导的MMP-9表达及NF-κB活性(P<0.05)。慢病毒介导的ADAM17 RNAi明显降低LPS诱导的HBE4-E6/E7细胞上清液中TNF-α蛋白含量(P<0.05),亦明显降低MMP-9 mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P<0.05),但不能降低TNF-α诱导的MMP-9mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P>0.05)。PDTC明显抑制TNF-α诱导的MMP-9 mRNA和蛋白表达及NF-κB活性(P<0.05)。结论 TNF-α/NF-κB信号通路参与调控LPS诱导的气道上皮细胞MMP-9的表达,ADAM17通过调节TNF-α释放在其信号通路上游起到重要作用。

核因子-κB和p38丝裂原活化蛋白激酶调节脂多糖诱导的气道上皮细胞白细胞介素8的表达

目的探讨脂多糖(LPS)对HBE4-E6/E7细胞IL-8表达的影响及Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR-4)、p38MAPK、NF-κB在其中的作用。方法在量效实验中,分别以0、0.1、1、10、100μg.L-1 LPS刺激HBE4-E6/E7细胞24 h;在时效实验中,以10μg.L-1 LPS分别刺激HBE4-E6/E7细胞0、8、12、16、24 h。以100μg.L-1 TAK-242、10 mg.L-1SB202190、50 mg.L-1 PDTC预处理HBE4-E6/E7细胞,以100μg.L-1 LPS刺激24 h。半定量RT-PCR法检测IL-8mRNA表达;酶联免疫吸附试验检测IL-8蛋白水平;凝胶阻滞分析实验检测NF-κB活性。结果 HBE4-E6/E7细胞IL-8 mRNA的表达随LPS刺激剂量的增加明显增加(P<0.05);在24 h内,以10μg.L-1 LPS刺激时,IL-8 mRNA的表达随刺激时间的延长明显增加(P<0.05)。TAK-242、SB202190和PDTC均能明显抑制LPS诱导的HBE4-E6/E7细胞IL-8 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。TAK-242和PDTC均能明显抑制LPS诱导的NF-κB的活性(P<0.05);SB202190不能抑制LPS诱导的NF-κB活性(P>0.05)。结论 LPS能诱导HBE4-E6/E7细胞IL-8的表达,TLR4、p38MAPK、NF-κB均参与调控LPS诱导的气道上皮细胞IL-8的表达,且p38 MAPK是通过不依赖NF-κB信号途径来参与调节的。

朝医鹿茸大补汤通过WNT5A和TLR4信号通路交互调节气道重塑的机制研究

支气管哮喘(bronchial asthma)属朝医学“哮喘”范畴,是以气道炎症(airway inflammation)和气道重塑[1](airway remodeling)为明显病理标志的呼吸系统疾病。鹿茸大补汤为太阴人哮喘代表方剂,有补肺气益精血的功用。课题组前期研究显示鹿茸大补汤能够通过WNT5A、TLR4等通路调控哮喘相关蛋白的表达[2],但是对通路间是否存在交互作用尚未验证。故本次利用朝医鹿茸大补汤对WNT5A和TLR4信号通路交互调节的机制进行研究。

PDGF、foxp3和MMP-9与哮喘气道重塑的关系研究

目的探讨PDGF、foxp3和MMP-9与哮喘气道重塑的关系。方法采用双抗体夹心ELISA法检测40例哮喘患者治疗前后及30例健康查体者血清PDGF、foxp3和MMP-9,高分辨率CT(high resolution computed tomography,HRCT)行胸部检测。结果哮喘组血清中PDGF和MMP-9水平比健康对照组明显升高(P<0.05),而foxp3明显降低(P<0.01)。与治疗前相比哮喘组PDGF(P<0.05)和MMP-9水平明显降低(P<0.01),但仍高于对照组;foxp3与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。HRCT结果显示,与对照组相比,哮喘组小支气管内径狭窄;小支气管内面积明显变小(P<0.05);小支气管外径无明显差异。治疗后小支气管管腔有明显扩张,面积明显增加(P<0.01);治疗前后小支气管对比外径无明显变化。结论哮喘患者有PDGF-foxp3和MMP-9的环路存在,综合治疗可以逆转气道重塑。

黄芪丹参联合应用可延缓大鼠失神经骨骼肌萎缩

目的探讨黄芪丹参联合应用对大鼠失神经骨骼肌萎缩的治疗效果。方法取雄性健康8周龄SD大鼠20只,随机分为对照组、治疗组。两组均切断右侧坐骨神经约1cm,建立右下肢失神经腓肠肌萎缩模型。治疗组术后每日采用黄芪与丹参各1.5ml混合液,腹腔注射给药;对照组不做任何处理。于给药后的第2周和第3周时间点,各取两组大鼠双侧腓肠肌,测量肌湿重,计算肌湿重比值;另取两组右侧腓肠肌测量肌纤维横截面积、总蛋白含量、细胞凋亡率、叉头蛋白(FoXO3a)、肌萎缩F-box蛋白(MAFbx)mRNA及蛋白表达水平。结果第2周对照组、治疗组肌湿重比值:0.62±0.07、0.76±0.05;肌纤维横截面积:300.24±17.87、365.49±24.19;总蛋白量:63.32±5.30、80.28±3.12;细胞凋亡率:20.34±2.51、12.62±1.20;FoXO3a蛋白及mRNA表达:0.828±0.090、0.643±0.090、24.45±7.21、19.38±5.55;MAFbx蛋白及mRNA表达:1.224±0.090、0.956±0.040、27.45±8.50、19.44±5.64;第3周对照组、治疗组肌湿重比值:0.35±0.03、0.59±0.07;肌纤维横截面积:253.38±13.32、314.50±16.74;总蛋白量:50.34±4.12、67.70±5.42;细胞凋亡率:33.45±1.71、17.53±1.26;FoXO3a蛋白及mRNA表达:1.963±0.150、1.236±0.060、35.62±6.24、27.91±7.71;MAFbx蛋白及mRNA表达1.487±0.050、1.240±0.123、43.63±8.22、35.39±7.96,两组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论黄芪丹参联合应用可延缓大鼠失神经骨骼肌萎缩,其可能的机制为抑制细胞凋亡、延缓总蛋白降解速度;抑制蛋白降解通路FoXO3a、MAFbX mRNA和蛋白表达水平。

经翼点入路大脑前动脉A1段和前交通动脉及其穿通支的显微解剖

目的观察大脑前动脉(ACA)A1段和前交通动脉(AcoA)及其穿支数目、走行、分布区域。方法10例成人尸体头颅,经翼点入路开颅,手术显微镜下观察ACA的A1段和AcoA发出穿支的部位、走行、数目及分布区域。结果翼点入路可以很好暴露ACA的A1段和AcoA及其穿支。A1穿支包括回返动脉、前穿动脉、丘脑下部穿通支。AcoA穿支均起自后壁和上壁,平均3.2支,止于下丘脑前部视交叉背面和前穿质。结论经翼点入路观察到了ACA的A1段和AcoA及其穿支的解剖结构。

肩关节手术人路中的应用解剖学研究

目的:观测肩关节的形态结构及周围结构的特点,为临床手术提供资料。方法:解剖观察20具成人肩关节周围肌肉及其血管神经等重要结构。结果:三角肌外侧部深面主要有横过骨肌肉之间的腋神经前支和旋肱后血管,后侧深部主要有冈上肌冈下肌、小圆肌、回边孔、三边孔及其内部结构。(2)冈上肌肌腱密切粘着于肩关节囊例上部肌腱表面,于肩峰深面有肩峰下深液囊,有时与三角肌下滑液囊相通。(3)肩关节的血液供应主要靠旋肱前动脉及肩胛后动脉．肩关节靠近大血管主干,血供丰富、血流速度快。(4)神经界面,肩关节周围的界面有三角肌冈下肌间隙,三角肌胸大肌间隙,三角肌与喙肱肌、肱二头肌间隙、冈下肌小圆肌间隙。结论:肩关节结构极为复杂,解剖肩关节时应避免损伤重要组织结构。

VEGF与其受体2在哮喘大鼠气道中表达变化及其对气道平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体2(Flk-1)在哮喘大鼠气道中表达变化及其对气道平滑肌细胞增殖的影响。方法SD大鼠18只,随机分为对照组,哮喘模型组和地塞米松干预组各6只。以腹腔注射1%卵蛋白致敏和2%卵蛋白雾化吸入激发复制哮喘模型,干预组在每次激发前给予地塞米松干预。用免疫组织化学技术检测气道平滑肌αactin以及VEGF和Flk-1蛋白质在不同组大鼠肺组织的表达程度;用RTPCR方法检测VEGF和Flk1mRNA在不同组大鼠肺组织的表达程度;采用HMIAS2000型高清晰度彩色医学图文分析系统进行图像分析。结果(1)哮喘模型组气道壁平滑肌厚度较对照组和干预组显著增加(P<0.05)。(2)哮喘模型组VEGF及Flk-1蛋白质在大鼠肺组织中的表达较对照组和干预组显著增加(P<0.05)。(3)哮喘模型组VEGF144,VEGF188mRNA和VEGF205mRNA在大鼠肺组织中的表达较对照组和干预组显著增加(P<0.05或P<0.01)。哮喘模型组Flk1mRNA在大鼠肺组织中的表达较对照组和干预组显著增加(P<0.05)。直线相关性分析显示,气道壁平滑肌厚度与大鼠肺组织中VEGF205,188,144及Flk-1mRNA表达水平呈正相关(r分别为0.739,0.747,0.744,0.682;P<0.05);气道壁平滑肌厚度与大鼠肺组织中VEGF及Flk-1蛋白质表达水平也呈正相关(r分别为0.693,0.672;P<0.05)。

经鼻-蝶窦入路至鞍区内镜解剖与显微解剖的比较研究

目的为比较内镜下与显微镜下经鼻-蝶窦入路的解剖标志和显露范围差异。方法对9例汉族成人灌注尸头采用经鼻-蝶窦入路进行解剖,其中4例行显微解剖,5例采用内镜下解剖,在内镜与显微镜下分别对入路的解剖标志和显露范围进行比较。结果在蝶窦内,内镜下可以观察到更多的解剖标志以确定鞍底、海绵窦等重要结构的位置;内镜经鼻-蝶窦入路更易于向颅前窝底、鞍旁海绵窦和斜坡方向扩展。内镜与显微镜下的操作存在较大差异。结论内镜经鼻-蝶窦入路鞍区及其周围的显露范围较显微镜下更大。

经皮扩张气管切开术临床应用研究

目的:研究经皮扩张气管切开术与传统气管切开术2种方法的不同特点。方法:90例气管切开患者,根据手术方式的不同分为A、B两组,A组(48例)行经皮扩张气管切开术,B组(42例)行传统气管切开术,观察并比较两组患者手术时间、切口大小、术中出血量、术后并发症及切口愈合等情况。结果:与传统气管切开术相比,经皮扩张气管切开术操作时间短,切口小,术中出血少,术后并发症少,切口愈合快,感染率低(P<0.05～0.01)。结论:经皮扩张气管切开术优于传统气管切开术。

胰酶冷消化加刮刷法分离培养气管上皮细胞的实验研究

目的 :改进气管上皮细胞的培养技术。方法 :采用胰酶冷消化加刮刷法分离兔气管上皮细胞 ,测定分离细胞的数量、纯度及成活率 ,并与机械剥离加酶消化法、酶温消化加刮刷法进行比较。同时比较无血清与有血清培养方法对上皮细胞纯度、融合时间的影响。结果 :( 1)胰酶冷消化加刮刷法分离所得上皮细胞的数量 [( 8.2 17±0 .4 4 3)× 10 6cells/只 ]明显高于机械剥离加酶消化法 [( 2 198± 0 5 33)× 10 6cells/只 ],P <0 0 1;成活率 ( 91 730 %±1 5 32 % )明显高于机械剥离加酶消化法 ( 86 2 9%± 0 4 6 % )和胰酶温消化加刮刷法 ( 83 0 7%± 1 80 % ) ,均P <0 0 5 ;纯度 ( 94 0 8%± 2 70 % )接近机械剥离加酶消化法 ( 97 0 2 %± 0 5 1% ) ,P >0 0 5 ,但明显高于胰酶温消化加刮刷法( 88 90 0 %± 1 30 4 % ) ,P <0 0 5。 ( 2 )无血清组在培养第 3d( 95 0 %± 0 0 % )、第 5d( 95 3%± 0 3% )、第 7d( 95 3%±0 3% )气道上皮细胞纯度显著高于有血清组 ( 90 1%± 0 8% ,84 7%± 1 6 %和 83 0 %± 0 9% ) ,P <0 0 1;且细胞生长融合时间 ( 6 - 7d)明显早于有血清组 ( 12 - 14d)。结论 :胰酶冷消化加刮刷法是一种经济、简便、高效的兔气管上皮细胞体外分离培养方法 ,无血清培养可以提高?

腰椎关节突关节的应用解剖与在微创术中的定位价值

目的通过解剖标本和影像资料测量腰椎关节突关节及毗邻结构的相关数据,探讨关节突关节作为腰椎微创术中重要解剖定位标志的可行性。方法收集新鲜成年人体腰椎标本10具20侧,共计80个节段。腰椎X线影像资料50例,200个节段。以关节突关节最高点（Highest point of lumbar zygapophysial joint,HP）作为测量中心,从微创手术应用解剖的角度,分别观测HP与手术相关结构的距离和角度。结果 HP至腰神经距离随椎间隙向下,数值逐渐增大,而角度趋于变小;HP至邻近椎间盘的距离,向下逐渐增大;HP和相邻椎间盘中平面垂直距离为0.8～1.5 mm,HP垂直高度位于椎间盘厚度范围内。结论腰椎关节突关节具备位置稳定、显露简单、容易辨认、对应关系易于掌握、准确性高的特点。是理想的解剖标志。在临床腰椎后路微创手术中可发挥一定的解剖定位作用。

犬肋骨肌瓣的应用解剖与气管成型及气管再造的实验研究

目的：对犬肋骨肌瓣与肌瓣环进行解剖学观察，并以此组织瓣进行气管成型与气管再造动物实验。方法：将犬的第３ 肋间血管灌注后观察其分布情况。将第３ 肋骨与上下肋间肌修整成带血管蒂的肋骨肌瓣、骨肌瓣环，分别行胸内气管成型与环形替代术。结果：犬的肋骨肌瓣、瓣环血供均良好。第３肋间动脉、静脉有多个分支在胸膜与骨膜之间上行分布于上位肋间肌。实验获得满意效果，气管成型手术的犬与非手术犬一样正常活动。气管再造的１８ 条犬中１１ 条犬生存已超过３ 个月。结论：肋骨肌瓣、骨肌瓣环有可能用于气管成型与再造手术。

心脏血管三角的应用解剖学研究

目的:探讨心脏血管三角的形态学特点,为心脏手术提供形态学资料。方法:取正常成人心脏60例,10%甲醛溶液固定;取新鲜成人心脏10例,制作出心脏的血管铸型标本。定点解剖显示左冠状动脉及其分支的形态、位置、数目、直径及角度,心大静脉的形态、位置,进行观测。比较前室间支、左旋支与心大静脉围成的三角的特点。结果:左冠状动脉起始处与终末处的外径分别为4．18±1．36mm、4．79±1．53mm,主干长度8．99±1．26mm;左旋支、前室间支起始处的外径分别为3．30±1．02mm、3．31±1．03mm;左冠状动脉分别与前室间支、左旋支形成的夹角为173°±5．3°,117°±4．6°。对角支起于心血管三角的上角,有1-3支不等,其起始处的外径为1．78±0．32mm,长度为20．12±0．42mm。心大静脉与前室间动脉、左旋支呈深、浅相交,静脉行于动脉表面占56%、静脉行于动脉深面占44%。心大静脉、前室间支、左旋支两两相交形成心血管三角的三角与三边,其夹角分别为41．97°±11．9°, 65．05°±14．5°,70．17°±16．5°,前室间支的起始处与心大静脉相交处的距离23．04±5．36mm,旋支的起始处与心大静脉相交处的距离15．24±4．23mm,心大静脉横跨前室间支与左旋支的距离为26．28±6．31mm。结论:前室间支、左旋支与心大静脉在左心室前上部围成一闭合、开放、半闭合半开放、山峰四型血管三角。三血管以不同的角度两两相交,三角形的形状可分为A、B、C类。三角形内有数目不等的对角支及左心室前支,对角支分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。左冠状动脉介入治疗,心二尖瓣,主动脉瓣置换应充分考虑心血管三角的形态特点,尽可能避免血管的损伤。

影像技术在“精准肝切除”术中导航的应用

我国是肝癌大国,世界卫生组织统计数据显示中国肝癌病人总数约占世界肝癌病人总数的55%,每年新增病例约占世界总数的一半^（[1]）。肝胆外科技术的发展对国民健康水平的提高具有重要意义。随着＂精准医疗＂概念的提出与发展,我国的肝胆外科领域逐步步入＂精准肝切除＂时代。

学龄前期儿童钩椎关节部位的组织学观察及意义

目的 观察学龄前期儿童钩椎关节组织切片的发育特点,验证其是否为真正的“滑膜关节”。方法 将3岁儿童尸体标本的颈椎进行连续切片并行HE染色,以观察其镜下形态结构。结果 通过对C2-C7各椎间结构进行组织学切片制作,镜下观察并未观测到滑膜样结构与组织。结论 学龄前期儿童的颈椎尚未形成钩椎关节,也未见关节所具备的滑膜样组织结构,本文的研究结果可为钩椎关节的形成年龄提供参考依据。

利用数字散斑法测量股骨干骨折加压钢板内固定下的位移和形变

目的利用数字散斑法测试成人股骨加压钢板内固定术中骨折断端第5颗螺钉在不同拉力条件下的位移和形变情况,分析减少加压钢板螺钉数量是否影响骨折断端螺钉的位移和形变,旨在为临床成人股骨加压钢板内固定术中加压螺钉数量的确定提供理论依据。方法取成人防腐股骨标本,剔除软组织后用牙托粉包埋固定,制作股骨中1/2内固定模型。加压钢板置入股骨后外侧骨膜下,骨折端两侧各5枚螺钉穿透4层骨皮质。标本分10个状态,按A～J组测量顺序进行测量。在400、500N拉力下,用CSS-44100型电子万能实验机进行加载拉力测量骨折断端第5颗螺钉的位移和形变,计算机自动处理数据。结果方差分析,在400N、500N拉力下第5颗螺钉的位移测量均值,B～J组与A组比较差异有显著性(P<0.05);在400N、500N拉力下第5颗螺钉的形变测量均值,A组与F～J组比较差异有显著性(P<0.05),A组与B～E组比较无显著性差异(P>0.05)。结论骨折断端第5颗螺钉位移大小与加压钢板上螺钉数量呈负相关。靠近骨折线的螺钉承受较大的应力,容易断裂。

手掌分区与指掌侧总神经和指掌侧总动脉

目的:为研究手掌血管、神经损伤修复重建提供解剖学基础。方法:手掌借5条横平行线和4条纵平行线分为20区,解剖并观察指掌侧总神经和指掌侧总动脉在手掌的分布及其伴行关系。结果:第一、二指掌侧神经起始处位于7区外上象限,第三指掌侧总神经、小指尺掌侧神经起始处位于4区内下象限。第一、二、三指掌侧总动脉起始处位于7、8区近C线处,小指尺掌侧动脉起始处位于8区内下象限。第一、二指掌侧总神经在7区被掌浅弓骑跨,分弓上、下两段。弓上、下段,分别在13、14区D线处发出指掌侧固有神经。小指尺掌侧神经、第三指掌侧总神经起始处位于同名动脉的近侧,其行程在9、15、20区位于同名动脉的尺侧。第一、二指掌侧总动脉分别在18、19区距E线0．8-1．0cm处发出相应的指掌侧固有动脉。第一、二、三指掌侧总神经及其发出的指掌侧固有神经与同名的指掌侧总动脉的伴行关系有四型:H1、H2、O、V型。结论:指掌侧总神经与指掌侧总动脉在手掌的一定区域内有按规律分布的特点,有助于手掌损伤离断手术修复过程中指掌侧总神经与指掌侧总动脉的寻找和吻合,以及手掌神经阻滞麻醉的精确定位。