颈神经丛的组织化学研究

目的 拟确定颈丛及其分支是否含有运动神经轴突 ,从而探讨根治性颈清扫术后肩 (胛 )综合征的发生机制 ,并提出改良颈清扫术术式 ,以保存术后正常的肩功能。方法 通过AchE组织化学染色法对颈丛C2～C4及其相关分支的神经纤维进行鉴定。结果 颈丛C2～C4均含运动神经轴突。 6 6 .6 7%的病例至少有 1根以上。颈丛近根部AchE染色呈阳性 ,4 5 .4 5 %颈丛斜方肌支含运动神经轴突 ,颈丛肩胛提肌支及头夹肌的分支均含有运动纤维。结论 颈丛可作为斜方肌的一个运动神经支配来源。颈清扫术中保留颈丛到斜方肌的支配和行颈丛肩胛提肌支副神经移位吻合可较好地恢复术后斜方肌的功能。

PKA参与ATP对大鼠背根神经节神经元电压门控性钙通道的抑制

目的探讨ATP对大鼠背根神经节(DRG)神经元的电压门控性钙通道(VGCC)的抑制效应及其信号转导途径。方法在急性分离的大鼠DRG神经元上应用全细胞膜片钳技术记录ATP诱导的电流以及VGCC电流;应用钙离子成像技术检测胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的变化。结果 ATP能够可逆性地抑制DRG神经元的VGCC电流和VGCC介导的[Ca2+]i升高。用PKA抑制剂H-89预处理DRG神经元,ATP对VGCC电流及其介导的[Ca2+]i升高的抑制被反转;而用PKC抑制剂bisindolylmaleimide(Bis)预处理DRG神经元,ATP对VGCC介导的[Ca2+]i升高的抑制效应则无影响。结论在大鼠DRG神经元中,PKA参与了ATP对该神经元VGCC的抑制。

坐骨神经结扎后大鼠背根神经节和脊髓CGRP表达的变化

目的研究大鼠坐骨神经结扎后降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP)表达变化。方法SD大鼠随机分为假手术对照组和坐骨神经结扎组,实验组结扎后分别存活1、3、5、7、14、21和28d(n=8),免疫荧光(双标法)和免疫组织化学(SABC法)观察术后不同时间点CGRP和NGF在坐骨神经、背根神经节(dorsalrootganglion,DRG)和脊髓的表达变化,Westernblot结合图像分析技术对不同时间的变化进行定量测定。结果术后1d结扎远端坐骨神经内NGF大量堆积,持续到28d仍高于正常。结扎后7dDRG内CGRP阳性细胞百分率减少,持续到28d仍低于正常;结扎后14d脊髓后角CGRP下降,28d仍低于正常,各时间点脊髓前角CGRP表达未见明显变化。结论神经结扎可导致DRG和脊髓后角的CGRP表达下调,可能与靶源性的NGF来源减少有关。

应用辣根过氧化物酶逆行示踪技术观察左右侧脊神经节间纤维联系

目的:观察大鼠左右侧脊神经节之间的纤维联系,以寻找两侧脊神经节 (背根节)的神经元交互支配这一电生理学现象的形态学基础。方法:实验于2004-11／2005-03在首都医科大学人体解剖学系解剖学实验室进行,取Wistar大鼠48只,根据注射示踪剂的不同随机分为3 组:游离辣根过氧化物酶(300-500g/L)组,麦芽凝集素结合辣根过氧化物酶(10-50 g／L)组和霍乱毒素B单位结合辣根过氧化物酶(3g／L) 组,按注射部位不同又分为左侧脊髓(L3或L4)、左侧脊神经节(L3或L4)、左侧坐骨神经和左侧股神经4小组,每小组4只,注射量均为3μL。注射示踪剂后两三天麻醉状态下处死取材,钨酸钠法显色。观察各组动物左右侧脊神经节、脊髓组织切片阳性标记的细胞及纤维。结果:48只全部进入结果分析。无论注射哪种标记物,一侧神经、神经节注射辣根过氧化物酶仅在单侧前角有标记细胞,背外侧束、后角、中央管后灰质处有标记的纤维,个别对侧可见标记的纤维,偶见一两个标记细胞。脊髓一侧注射的除同侧有标记细胞外,对侧(脊髓、神经节)也有少量标记细胞。结论:一侧背根节细胞的中枢突可达到两侧后角,不能直接定论是否存在或不存在直接联系,还需要进行深入的电镜和神经递质研究。

靶肌内注射促红细胞生成素对大鼠坐骨神经再生的作用

目的：探讨靶肌内注射人重组促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin，rh-EPO）对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的作用。方法：选用健康雄性SD大鼠12只，制备大鼠右侧坐骨神经钳夹损伤模型，随机分为2组，每组6只。EPO组：腓肠肌内注射rh-EPO 2500U／kg；对照组：腓肠肌内注射等体积的生理盐水。术后第7、14、21d观察坐骨神经功能指数（SFI），第21d组织学观察脊髓腰膨大（腰4-6）、夹伤远端坐骨神经、损伤侧腓肠肌组织并作图像分析，测定脊髓前角运动神经元数、再生有髓神经纤维数、髓鞘厚度、轴突直径和腓肠肌肌细胞横截面积等指标。结果：术后第7d两组SFI差异无显著性意义，术后第14、21dEPO组SFI恢复程度明显大于对照组（P〈0．05）；术后第21d损伤侧脊髓前角运动神经元数、再生有髓神经纤维数、髓鞘厚度、轴突直径和腓肠肌肌细胞横截面积等指标，EPO组均优于对照组（P〈0，05，P〈0．01）。结论：靶肌内注射rh-EPO能促进周围神经再生和功能恢复。

ABRA在不同年龄大鼠腰段脊髓中的表达变化

目的检测Actin binding Rho activator(ABRA)在不同年龄大鼠腰段脊髓中的表达变化。方法采用Western blot定量检测不同年龄大鼠腰段脊髓中ABRA蛋白水平表达变化,采用免疫荧光染色显示不同年龄大鼠腰髓中ABRA细胞定位。结果 Western blot显示ABRA在新生鼠腰段脊髓中表达显著高于成年鼠及老年鼠。免疫荧光染色显示ABRA广泛表达于神经元的胞核、胞浆和突起,在腰髓前角,与前角运动神经元存在共定位,在腰髓后角,与小的NeuN阳性感觉神经元存在共定位。腰髓前角、后角的阳性细胞计数均显示新生鼠ABRA+NeuN双阳性细胞占总ABRA阳性细胞百分比显著低于成年鼠及老年鼠。结论 ABRA广泛表达于腰髓中的神经元,ABRA在新生鼠腰髓中表达最强,随年龄的增长呈现明显的时相变化,提示ABRA可能参与了腰髓中神经元的发育和成熟。

股神经阻滞相关筋膜层次解剖:薄层塑化与超声影像对比

目的揭示股神经阻滞操作区域股神经前方筋膜的层次结构,为临床超声下股神经阻滞定位提供准确的解剖学依据。方法选取3具成人盆部标本,制作横断面连续薄层塑化切片观察并分析;临床收集36例股神经阻滞操作超声影像,结合薄层塑化图像进行对比分析。结果薄层塑化结果显示,在股神经阻滞操作对应层面,髂筋膜紧密覆盖于股神经与髂腰肌表面,在内侧延续为股鞘后外侧壁,未见髂筋膜形成包绕股神经的筋膜鞘样结构。阔筋膜自缝匠肌表面向内走行至股鞘前方,覆盖髂筋膜、股神经、髂腰肌、股鞘等结构;3例(6侧)标本中,4侧显示阔筋膜在缝匠肌内侧缘未融合而分为两层,2侧显示在缝匠肌前缘融合为单层。超声图像显示股神经前方筋膜均可视,髂筋膜为白色条索状高回声影,位于股神经前方且与股神经紧密相邻;阔筋膜覆盖股神经、髂筋膜、股鞘,与股神经相距较远;36例超声影像中,30例显示阔筋膜为两层,6例显示为1层。结论髂筋膜与股神经关系紧密,可作为超声引导的股神经阻滞的定位标志,分层的阔筋膜易被误认为髂筋膜,应根据其移行特点进行准确地辨识。

大鼠初级感觉神经元P2X3受体的表达及其与SP的关系

目的研究在大鼠初级感觉神经元细胞上P2X3受体的表达情况及其与P物质的关系。方法取SD大鼠背根神经节(DRG)和三叉神经节(TG)固定后切片;用抗P2X3受体抗体和抗SP抗体进行免疫组织化学反应,并通过两种不同的显色方法同时进行P2X3受体和SP的双标。结果P2X3免疫反应阳性细胞主要集中在小细胞和中等细胞(其中在TG,P2X3-ir阳性神经元约占整个细胞的24.8%;在DRG约31.7%的神经元是P2X3-ir阳性),并且在DRG和TG细胞上均存在有P2X3受体和SP共存(TG上的双标细胞占P2X3-ir阳性细胞总数的36.26%,DRG上占46.81%)。结论由于ATP门控阳离子通道受体P2X3本身就与伤害性感受的初级传入有关,而它与SP的共存可提示当组织中的ATP释放时可以通过P2X3受体作用于含SP的伤害性感觉神经末梢上,促使SP释放引起痛觉过敏。