MiRNA-106a参与β-淀粉样蛋白致AD的相关研究

目的:探讨miR-106a参与老年性痴呆(Alzheimer’s disease,AD)的发生及可能机制。方法 :应用β淀粉样蛋白(amyloid beta protein,Aβ)处理小鼠原代海马神经元及大鼠嗜铬细胞系(PC12细胞)建立AD细胞模型,分别采用RT-PCR及Western blot检测AD细胞模型中miR-106a、STAT3、JAK2 mRNA及STAT3、p-STAT3、JAK2蛋白水平的表达情况。结果 :miR-106a在2种AD细胞模型中的表达量均明显低于对照组(P<0.05),同时miR-106a的靶基因STAT3 mRNA和蛋白水平表达量均明显高于对照组(P<0.05),而JAK2 mRNA和蛋白水平与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:miR-106a负性调节STAT3表达而参与AD的发生。

血清诱导95D细胞中Nm23H1从细胞质转位至细胞膜板状伪足

目的 探索Nm2 3H1(肿瘤转移抑制因子之一)在细胞内的定位与其功能关系。方法 以人肺巨细胞癌95D细胞为模型,在血清饥饿2 4h后加入血清,观察细胞形态变化及Nm2 3H1在细胞内的分布变化。结果 血清刺激可以诱导95D细胞形成板状伪足,细胞免疫荧光实验发现Nm2 3H1主要分布于细胞质,但在血清诱导形成的细胞板状伪足部位出现显著的Nm2 3H1分布。亚细胞组分分离及免疫印迹的实验结果也证实Nm2 3H1在血清刺激下可以转位到细胞膜,并且这种诱导作用是迅速的,在30min左右达到高峰,8h后降至仍然略高于血清诱导前的水平。结论 Nm2 3H1这种特殊的定位可能涉及细胞的运动,为进一步研究Nm2 3H1的功能与作用机制提供了基础。

Nucleophosmin／B23在肝细胞癌组织中的高表达

目的探讨Nucleophosmirt／B23(B23)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其临床病理意义。方法采用重组蛋白表达和杂交瘤细胞技术制备B23重组蛋白和鼠抗B23单克隆抗体。收集103例HCC组织、12例肝局灶性结节性增生和17例肝血管瘤旁肝组织的临床病理档案资料,10例HCC及癌旁肝新鲜组织,采用免疫组织化学(ABC)方法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹等技术检测B23在这些组织中的表达,并与增殖细胞核抗原(PCNA)的表达相比较。应用统计学方法对结果进行分析。结果RT—PCR及免疫印迹结果显示:在mRNA和蛋白质水平,B23在HCC组织中的表达明显高于对应的癌旁肝组织。免疫组织化学结果显示:B23在4组(HCC组、癌旁肝组织组、肝局灶性结节性增生组、血管瘤旁肝组织组)中的表达差异有统计学意义(P<0．001),其中B23在HCC组织中的表达显著高于其他3组(P<0．01),PCNA在HCC组织中的表达也显著高于其他3组(P<0．01),相关性分析表明B23与PCNA在4组中表达强度及其差异具有相关性(r=0．4767,P <0．01)。B23在HCC组织中的表达强度与患者血清AFP水平、肿瘤病理分级及是否伴有肝硬化之间的关系有统计学意义(P<0．05)。结论B23在HCC中呈高表达,且显著高于非癌肝组织;B23可作为HCC细胞增生程度的潜在标记,并在临床病理上具有潜在的应用意义。