人骨髓间充质干细胞体外优化条件的研究

目的通过比较5种不同体外培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs)条件,找到一种能在质和量上均能满足需要的体外培养条件。方法使用Percoll-Paque液(1.073 g/ml)分离人骨髓血,采用DMEM+15%的小牛血清、人体白蛋白、人血清、脐带血清及MesenCult培养基,在相同培养条件下,动态观察hMSCs的生长状况、细胞数量变化,通过流式细胞仪检测细胞的纯化状况。结果5种培养条件在一定时相内均能获得较为纯化的hMSCs,但在生长速度和纯化率上存在一定的差异。结论Mesen Cult是一种较为优秀的hMSCs培养基,胎儿脐带血清培养也能在短期内获得足量纯化的hMSCs,人血清的使用还需要做进一步的研究。

在空气—液体交界面培养角朊细胞

为使体外培养的角朊细胞在近似体内状况下生长,本实验将人体表皮角朊细胞置于塑料培养环内的胶原基质上进行空气—液体交界面培养。培养14d后,将培养物冰冻切片,行普通细胞染色和免疫细胞化学检查,结果显示,有多层细胞形成,且在上层细胞中出现filaggrin。提示此培养技术可用于研究人体表皮细胞的生长和分化。

双层细胞培养技术在粒系造血中的应用

双层细胞培养技术在粒系造血中的应用山东医科大学（２５００１２）张锑，徐从高，刘海鹏，韩祥淳，徐勇，张茂宏研究造血微环境及基质细胞对造血的影响，在生理和病理造血中均具有重要意义。我们建立了以人内皮细胞作铺层的半固体双层细胞培养技术，并观察了本方法对正常...

正常人黑素细胞体外纯培养

黑素细胞体外纯培养是国外80年代发展的一项细胞生物技术。这一技术为黑素细胞生物学研究、探讨色素障碍性疾病的病因和发病机理以及治疗色素减退性疾病提供了一种非常重要的手段,因此目前受到国内外研究者的重视。我们于1992年起开展这项工作,已成功地建立体外黑素细胞纯培养技术,并培养了3代,报道如下。

皮肤电镜样品制备的体会

皮肤电镜样品制备的体会Ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅｏｆｐｒｅｐａｒｉｎｇｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙｓｐｅｃｉｍｅｎｆｏｒｓｋｉｎ周萍，李叶君（第三军医大学附属大坪医院电镜室）重庆，６３００４２关键词皮肤；组织切片术中图法分类号Ｒ３６１．２皮肤由于其...

肾上腺髓质素在肾间质纤维化实验小鼠肾脏细胞增殖中的作用

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)在梗阻性肾病中对细胞增殖的影响。方法采用单侧输尿管结扎(UUO)的方法制备梗阻性肾病模型,给予缬沙坦10mg·kg-1·d-1灌胃治疗,采用免疫组化及RT-PCR检测野生小鼠(WT)和肾上腺髓质素基因敲除小鼠(AMKO)肾脏增殖细胞核抗原(PCNA)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。结果野生UUO组小鼠与假手术组相比PCNA阳性细胞数增加,缬沙坦能减少PCNA阳性细胞数。与野生小鼠比较,AMKO假手术组PCNA阳性细胞明显增多,AMKO-UUO组尤为明显,缬沙坦能减少AMKO-UUO组的PCNA阳性细胞数,Ⅲ型胶原和TGF-β1的蛋白表达与mRNA在AM-KO-UUO组明显上调,可被缬沙坦拮抗。结论肾上腺髓质素在UUO介导的肾间质病变的细胞增殖过程中有着重要的作用。

成年大鼠嗅球嗅鞘细胞的分离、培养、纯化与生物学特性的研究

目的探讨成年大鼠嗅球嗅鞘细胞(OECs)的分离、培养和纯化方法,并观察其形态学变化及免疫细胞化学特性。方法采用原代培养技术,从成年大鼠的嗅球分离培养OECs,用差速贴壁+Thy1.1抗体及补体等方法纯化培养OECs,并用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)扩增OECs,倒置相差显微镜下观察OECs的形态变化特点及生长情况,采用GFAP、NGFRp75、S100等抗体行免疫细胞化学染色,根据NGFRp75免疫细胞化学染色结果统计培养的OECs的纯度,并计算OECs的增殖率。结果体外培养的成年大鼠OECs主要为双极或三极细胞,其突起细长。差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的纯化效率高于其他两种。免疫细胞化学染色显示,培养的成年大鼠OECs呈现GFAP、NGFRp75、S100蛋白染色阳性。bFGF能明显促进OECs的增殖(P<0.01),对OECs的形态、纯度没有明显影响。结论差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法是一种高效率的纯化培养OECs的方法,bFGF能明显促进OECs的增殖。

正常小鼠睾丸的酶组织化学及氯化镍对其影响

用6O只LACA纯系成年雄性小鼠的睾丸,研究一组酶的代谢特点和分布规律及不同剂量氯化镍对其各种酶活性的影响。结果表明I型黄递酶主要见于间质细胞和晚期精子细胞;琥珀酸脱氢酶和细胞色素氧化酶见于晚期精子细胞;非特异性酯酶见于间质细胞;而5’-核(艹廿)酸酶主要见于围腔小室细胞。一次性腹腔注射不同剂量的氯化镍对睾丸酶活性未见显著影响。

游离肝细胞培养技术在肝脏毒理学研究中的应用

本世纪五十年代初,国外就有人开始用大鼠的游离肝细胞来研究肝细胞的生理功能。1954年Dulbeeo和Voget用胰蛋白酶消化肝脏,成功地得到了单个的肝细胞。Longmuir等又用此法研究了大鼠肝细胞的呼吸功能。此后,分离肝细胞的技术就得到了不断的改进和进一步的完善。1967年Howard首次报道了用胶元酶和透明质酸灌流并分离肝细胞的新方法,使游离肝细胞培养技术得到了广泛的应用,并发展成为一种简便、快速、经济的毒理学体外实验系统,为毒理学工作者所接受。

血管壁弹力纤维板染色方法探讨（摘要）

血管壁弹力纤维板染色方法探讨（摘要）张敏（病理学教研室）关键词血管；弹力纤维板；染剂和染色法目前，对动脉粥样硬化及血管成形术后动脉管腔再狭窄（ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ）的病理形态学分析多采用血管连续切片，计量管腔面积、新内膜的形成程序。内弹力板（ＩＥＬ）...

中性树胶封片延长吉氏染色玻片标本使用效果的观察（摘要）

中性树胶封片延长吉氏染色玻片标本使用效果的观察（摘要）石秀珍（寄生虫学教研室）关键词树腔；封片；方法改良吉氏染色法是观察血液及骨髓细胞之原虫常用的方法之一。随着医疗水平的提高，寄生虫病的减少，使标本的来源日益困难。因此，提高及延长吉氏染色标本的使用寿...

用Nissl法复染Golgi法镀染的树鼠脑切片

Ｇｏｌｇｉ染色法由于能充分显示神经元胞体及其突起而成为神经解剖学研究的重要手段之一，但此法镀染的神经元很少，不能定位。本实验用焦油紫对Ｇｏｌｇｉ法染色的树脑切片进行复染。结果表明，Ｎｉｓｓｌ法复染既能保留原来被镀染神经元及其树突的形态结构完整性，又可显示出原脑组织的细胞构筑特点及被镀染神经无所坚心的层次，克服了Ｇｏｌｇｉ法不能定位的弱点。复杂的切片透明和反差效果好，不易褪色。

两种角膜内皮细胞活性染色的应用比较

两种角膜内皮细胞活性染色的应用比较中山医科大学，中山眼科中心郑湖铃，陈家祺，刘华供眼角膜内皮细胞的活性是穿透角膜移植成功的关键性的因素之一。评价供体内皮细胞的活性，除常规裂隙灯检查，以及细胞化学酶（ＮＢＴ）染色、扫描电镜、角膜内皮显微镜检查等外［１］...

人动脉平滑肌细胞胶原酶解离培养方法

人动脉平滑肌细胞胶原酶解离培养方法汪浩川，刘秉文动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）的培养始于７０年代，原代培养方法包括贴块法［１］和酶解离法。国内实验室均采用贴块法，至今未见酶解离法分离及培养人动脉ＳＭＣ的报道。影响人动脉ＳＭＣ酶解离法原代培养的因素多，成功率...