Cortactin/N-cadherin信号轴在病理性心肌肥大中的作用

目的探究皮层肌动蛋白结合蛋白(Cortactin)对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的病理性心肌肥大的调控作用及其机制。方法采用ISO刺激新生大鼠心肌细胞(neonatal rat cardiomyocytes,NRCMs)24 h,在细胞水平建立心肌肥大模型;C57BL/6小鼠皮下注射ISO 1周,在动物水平建立心肌肥大模型。采用RT-qPCR检测mRNA的变化;免疫印迹法检测相应蛋白含量的变化;免疫荧光法检测Cortactin的亚细胞定位及表达量的变化;采用腺病毒感染的方法过表达Cortactin,通过转染小干扰RNA敲低Cortactin。结果在细胞和动物水平上,成功建立ISO诱导的心肌肥大模型,均观察到ISO引起Cortactin和N型钙黏连蛋白(N-cadherin)水平降低;过表达Cortactin可逆转ISO导致的N-cadherin蛋白水平的降低及心肌细胞肥大反应;敲低Cortactin则显示相反的效应。结论Cortactin可能联合N-cadherin通过增强心肌细胞之间的连接,发挥抗心肌肥大的作用。

基于网络药理学和斑马鱼模型的心可舒片抗心肌缺血活性成分及作用机制研究

目的基于网络药理学和斑马鱼模型研究心可舒片抗心肌缺血活性成分及作用机制。方法利用盐酸异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的斑马鱼心肌缺血模型和过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的大鼠心肌细胞(H9c2)损伤模型,评价心可舒片抗心肌缺血活性。利用TCMSP等数据库检索心可舒片的活性成分;利用PharmMapper数据库预测潜在作用靶点;利用OMIM数据库检索心肌缺血疾病靶点;分析心可舒片抗心肌缺血的潜在治疗靶点;对核心靶点进行GO和KEGG富集分析。利用斑马鱼和细胞模型对活性成分进行验证;利用qRT-PCR检测心可舒片对关键靶点表达的影响。结果心可舒片可以明显缓解ISO诱导的斑马鱼心包水肿、心动过缓、静脉窦-动脉球(SV-BA)距离增大,提高细胞存活率。心可舒片的30个潜在活性成分主要作用于ALB、AKT1、MAPK1等30个核心靶点;通过调节蛋白质磷酸化、负调控凋亡、正调控PI3K信号转导等627个GO条目,调控PI3K/Akt、FOXO、Ras等117条信号通路发挥抗心肌缺血作用。丹酚酸A、紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸D、丹酚酸B、人参皂苷Rg2、金丝桃苷、3′-甲氧基葛根素、3′-羟基葛根素和人参皂苷Rg1能够缓解ISO引起的斑马鱼心肌缺血、提高缺氧细胞存活率。心可舒片能够上调ras、akt1等基因的表达,下调mapk1、mapk8等基因的表达。结论心可舒片中的丹酚酸A、紫草酸等活性成分通过靶向AKT1、MAPK1等靶点,调控PI3K/Akt、MAPK、Ras等信号通路发挥抗心肌缺血作用。

7,8-二羟基黄酮对脂多糖诱导心肌细胞损伤的保护作用及机制研究

目的研究7,8-二羟基黄酮(7,8-dihydroxyflavone,7,8-DHF)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导心肌细胞损伤中的作用及机制。方法传代培养H9c2心肌细胞系,随机分为对照组(Ctrl)、LPS组、LPS+7,8-DHF组和7,8-DHF单独处理组,给药24 h后观察细胞形态,分别采用MTT法检测细胞活力、Live/Dead染色检测细胞活死比例、Mitosox染色检测细胞线粒体氧化应激水平,Western blot技术检测Akt、核因子κB(NF-κB)p65、信号传导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)等蛋白表达水平。结果7,8-DHF增加LPS诱导的心肌细胞活力,减少氧化应激水平和细胞死亡。7,8-DHF激活LPS诱导的心肌细胞Akt信号,抑制STAT3磷酸化水平和NF-κB p65蛋白表达。结论7,8-DHF可能通过激活Akt、抑制磷酸化STAT3和NF-κB p65信号分子减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。

利拉鲁肽通过调控自噬和Na^(+),K^(+)-ATPase活性抑制高糖诱导的心肌细胞肥大

目的探讨利拉鲁肽(liraglutide,LRG)抑制高糖(HG)诱导的心肌细胞肥大的可能机制。方法体外培养H9c2细胞,分为对照(CON)组、HG组、低、中、高剂量LRG(LRG-L、LRG-M、LRG-H)组、LRG-H+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组。鬼笔环肽染色观察细胞表面积;试剂盒测定细胞膜Na^(+),K^(+)-ATPase(NKA)活性;Real time-PCR和Western blot测定NKAα1、NKAα2 mRNA和蛋白表达;单丹磺胺戊二胺(MDC)荧光染色观察自噬囊泡数量;Western blot测定肥大标志基因(ANP、β-MHC)、自噬标志基因(Beclin-1、LC3、p62)蛋白表达。随后将H9c2细胞分为CON组、HG组、LRG-H组、LRG-H+Sirt1抑制剂EX 527组、LRG-H+AMPK抑制剂Compound C(CC)组,再次检测上述指标;Western blot测定Sirt1/AMPK/mTOR通路相关蛋白表达。结果LRG可抑制心肌细胞肥大,下调ANP、β-MHC蛋白表达;LRG可促进NKA活性恢复,上调NKAα2 mRNA和蛋白表达;LRG可增加自噬囊泡数量,上调Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达,下调p62蛋白表达;LRG可上调Sirt1、p-AMPK/AMPK蛋白表达,下调p-mTOR/mTOR蛋白表达;使用自噬抑制剂3-MA、Sirt1抑制剂EX 527、AMPK抑制剂CC则部分逆转了LRG的作用。结论LRG可抑制高糖所致心肌细胞肥大,其机制与调控Sirt1/AMPK/mTOR通路激活自噬及促进NKA活性恢复有关。

bFGF和IGF-1对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化促进作用及相关机制探讨

目的 探讨成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)和胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)单独或联合使用对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)向心肌细胞(cardiomyocytes, CMs)分化的影响,以及IGF-1和bFGF促分化的作用机制。方法 IGF-1和bFGF单独或联合使用,以及IGF-1和bFGF分别与LY294002联用,诱导4周后,采用免疫细胞化学、免疫荧光检测心肌特异性蛋白表达水平;Western blot检测心肌特异性蛋白和通路相关蛋白表达水平;透射电镜观察细胞的超微结构。诱导1、2和4周后,采用RT-qPCR检测心肌转录因子表达水平。结果 IGF-1和bFGF单独或联合组,均提高心肌特异性蛋白和基因表达水平,且最高表达水平出现在IGF-1和bFGF联合组。IGF-1和bFGF联用组,透射电镜可观察到平行排列的肌丝,以及线粒体和内质网等丰富细胞器。IGF-1和bFGF分别与LY294002联用组,相较于IGF-1和bFGF单独诱导组降低心肌特异性蛋白和基因的表达水平,降低通路相关蛋白Akt磷酸化水平。结论 IGF-1和bFGF均可诱导BMSCs向CMs的定向分化,且两种生长因子的联合是一种更加高效的诱导方法。PI3K/Akt信号通路参与了IGF-1和b FGF促进BMSCs向CMs分化的过程。

草苁蓉多糖下调miR-302a-3p表达对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响

目的探讨草苁蓉多糖(boschniakia rossica polysaccharides,BRPS)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法H/R诱导大鼠心肌细胞H9c2建立细胞损伤模型,不同剂量的BRPS处理H9c2细胞;酶联免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性;流式细胞术检测凋亡率;qRT-PCR检测miR-302a-3p的表达量;anti-miR-NC、anti-miR-302a-3p分别转染至H9c2细胞后进行H/R处理,miR-NC、miR-302a-3p mimics分别转染至H9c2细胞后加入100 mg·L^(-1)BRPS处理24 h,进行H/R处理;Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达;线软件预测和双荧光素酶报告实验检测miR-302a-3p和LRP8的靶向关系;Western blot检测低密度脂蛋白受体相关蛋白8(LRP8)的表达量。结果BRPS降低H/R诱导的H9c2细胞中MDA的水平、miR-302a-3p的表达量、细胞凋亡率、Bax表达(P<0.05),提高SOD、GSH-Px、Bcl-2(P<0.05);转染anti-miR-302a-3p后,MDA的水平、细胞凋亡率、Bax表达下调(P<0.05),SOD、GSH-Px、Bcl-2上调(P<0.05);转染miR-302a-3p mimics后,MDA的水平、细胞凋亡率和Bax蛋白水平升高(P<0.05),SOD、GSH-Px和Bcl-2降低(P<0.05)。miR-302a-3p靶向调节LRP8,且BRPS通过下调miR-302a-3p上调LRP8基因的表达。结论BRPS通过调节miR-302a-3p/LRP8轴减轻H/R诱导的心肌细胞损伤。

甲基化转移酶样蛋白3介导的m6A修饰参与高静水压诱导的心房肌细胞电重塑

目的探讨甲基化转移酶样蛋白3(methyltransferase-like protein 3,METTL3)介导的N-6甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰对高静水压下心房肌细胞L型钙通道的调控作用。方法C57BL/6J小鼠随机分为对照组和高血压组(血管紧张素持续给药4周)。采用Masson染色观察小鼠心房组织纤维化情况,斑点印迹实验检测小鼠心房组织中m6A,Western blot检测METTL3和Cav1.2表达情况。体外培养的小鼠心房细胞株HL-1细胞,予加压构建高静水压模型及干预METTL3,观察细胞中m6A表达含量、METTL3和Cav1.2水平的改变,全细胞膜片钳检测HL-1动作电位时程(action potential duration,APD)及L型钙电流(L-type calcium current,I Ca,L)。结果与对照组相比,高血压组小鼠心房肌细胞形态紊乱,间质纤维化增加,且心房组织中m6A含量及METTL3表达水平也明显增加,离子通道蛋白Cav1.2表达减少。体外培养的HL-1细胞,施予不同静水压(0、20、40 mmHg)干预后,随着静水压的升高,细胞中m6A、METTL3上调,Cav1.2下调。STM2457(特异性METTL3抑制剂)和si-METTL3可逆转上述变化,同时STM2457逆转高静水压所致的HL-1细胞的APD缩短和I Ca,L峰值密度降低,METTL3可直接与CACNA1C(Cav1.2 mRNA)发生结合。结论高静水压下METTL3介导的m6A修饰可直接调控CACNA1C参与心房肌细胞电重塑。

不同剂量吸烟对健康男性动脉弹性和内皮功能的影响

目的探讨不同剂量吸烟对动脉弹性及内皮功能的影响。方法选取102例健康男性,根据吸烟情况分为3组:不吸烟组、低剂量吸烟组和高剂量吸烟组。采用高分辨率超声检测静息状态下的肱动脉横断面顺应性(CSC)、容积扩张性(VD)以及反应性充血时和舌下含服硝酸甘油后的内皮依赖性血管功能(FMD)和非内皮依赖性血管功能(NID),用于评估动脉弹性和内皮调节功能。结果 3组CSC和VD比较,差异均有统计学意义(P<0.05),3组FMD间差异有统计学意义(P<0.05),3组NID间比较均无统计学意义(P>0.05)。结论不同剂量吸烟均可以降低动脉弹性并造成血管内皮损伤,其损伤程度与吸烟剂量有关。

家兔离体主动脉血管对天麻水煎剂干预的反应(英文)

背景:现代医学研究发现天麻(Gastrodiaelata Bl)具有明显地心肌保护和血管扩张作用,可用于冠心病、高血压的治疗,但其作用机制仍需明确。目的:观察天麻水煎剂对去甲肾上腺素、KCl预收缩血管反应的舒张作用,并分析其作用途径。设计:分组设计、离体动物组织对照实验。单位:川北医学院生理学教研室。材料:选用健康家兔12只,兔龄七、八个月,雌雄不拘,由川北医学院实验动物中心提供。实验所用药品天麻水煎剂由慧仁堂药店鉴定提取,将其配制成10%,20%,40%和80%浓度备用。β肾上腺素能受体阻断剂普萘洛尔为北京第二制药厂产品;一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸为Sigma公司产品;甲烯蓝、环氧酶抑制剂吲哚美辛为江苏太仓制药厂产品。方法:实验于2006-01/2007-01在川北医学院药物研究所完成。采用家兔离体主动脉平滑肌标本,以去甲肾上腺素(1×10-6mol/L)预收缩主动脉后给予1.0,2.0,4.0,8.0和16.0g/L天麻水煎剂观察其张力变化,并观察去除血管内皮、给予1×10-4mol/L左旋硝基精氨酸、1×10-5mol/L甲烯蓝、1×10-5mol/L吲哚美辛和1×10-5mol/L普萘洛尔对血管张力的影响;血管张力经张力换能器输入BL-410智能型生物信号处理系统进行处理。另外观察8g/L天麻水煎剂对无内皮细胞血管环NA和KCl的量效收缩反应。主要观察指标:离体血管张力。结果:天麻对血管环静息张力无明显影响,但不同剂量的天麻可使1×10-6mol/L去甲肾上腺素预收缩血管产生明显舒张(r=0.85,t=18.45,P<0.01)。去除血管内皮、1×10-4mol/L左旋硝基精氨酸或1×10-5mol/L甲烯蓝可减弱天麻的舒张作用,但吲哚美辛和普萘洛尔对其无影响。另外,8g/L天麻水煎剂对无内皮细胞血管环去甲肾上腺素和KCl的量效收缩反应明显降低,且去甲肾上腺素和KCl的PD2(-log游离药物半数有效浓度)分别由温育前(6.90±0.93)mol/L和(1.53±0.55)mmol/L降低为(5.61±0.70)mol/L和(1.10±0.25)mmol/L,(t=2.41,3.82,P<0.05)。结论:天麻水煎剂对主动脉的舒张是内皮依赖性的,并与内皮一氧化氮的释放有关;也可通过拮抗ROC和PDC通道,抑制Ca2+的内流和释放等机制有关。

miR-29a抑制KLF4对血管平滑肌细胞表型转化的影响

目的探讨miR-29a是否可通过抑制KLF4表达影响血管平滑肌细胞(VSMCs)的表型转化。方法原代培养大鼠VSMCs。采用荧光素酶报告基因系统验证KLF4是否为miR-29a靶基因。将VSMCs分为转染miR-29a表达质粒组、转染阴性表达质粒组及未转染质粒组,采用Western blotting检测KLF4及VSMCs收缩表型蛋白的表达,[3H]-TdR掺入法检测VSMCs的增殖能力。结果共转染野生型KLF4荧光素报告基因+miR-29a表达质粒的实验组中,荧光素酶活性显著降低。转染miR-29a表达质粒组KLF4蛋白表达水平(0.36±0.02)显著低于未转染组(1.52±0.06)及转染阴性表达质粒组(1.55±0.05,P<0.01)。与未转染及转染阴性表达质粒组相比,转染miR-29a表达质粒组VSMCs收缩表型相关蛋白SMMHC、SM-22α、calponin的表达均明显增高,增殖能力明显降低。结论 miR-29a可靶向抑制KLF4表达,进而维持VSMCs的收缩表型,降低其增殖能力。

颈动脉损伤大鼠新生内膜增生与局部平滑肌细胞的增殖

目的:观察大鼠颈动脉损伤后高同型半胱氨酸血症对新生内膜形成和局部炎症因子单核细胞趋化因子1、细胞间黏附分子1表达及局部平滑肌细胞增殖的影响。方法:实验于2004-10/2005-02在北京大学第一临床医院心血管研究所完成。①Wistar雄性大鼠50只,采用随机数字法分为蛋氨酸组:1g/(kg·d)L-蛋氨酸灌胃;对照组:饮用水灌胃,每组25只。4周后检测两组血浆同型半胱氨酸浓度,并行左颈动脉球囊拉伤,分别于3,7,14,28d取材,检测血管损伤后新生内膜增生和局部单核细胞趋化因子1、细胞间黏附分子1表达情况。结果:①两组大鼠血浆同型半胱氨酸浓度:蛋氨酸组血浆同型半胱氨酸浓度明显高于对照组[(106.19±19.75),(4.90±0.10)μmol/L]。②两组大鼠血管组织形态学观察结果:苏木精-伊红染色血管损伤后7d可见内膜增生,14,28d蛋氨酸组新生内膜增生厚度比对照组增加36%,33%;新生内膜面积增加41%,30%;内膜面积/中膜面积增加36%,21%;管腔面积减少47%,61%;两组间比较差异均有显著性,但中膜面积无显著性差别。蛋氨酸组14d血管内膜和中膜平滑肌细胞中增殖细胞核抗原阳性颗粒百分比是对照组的1.7倍和2.3倍[(84.40±9.05)%比(49.00±4.51)%,P<0.01;(53.30±5.25)%比(23.70±6.17)%,P<0.01]。未损伤的右颈总动脉两组血管内膜及中膜增殖细胞核抗原阳性颗粒数小于0.1%。蛋氨酸组血管损伤局部单核细胞趋化因子1、细胞间黏附分子1表达增强,单核细胞趋化因子1主要分布在新生内膜和中膜,细胞间黏附分子1主要分布在内皮下和新生内膜,3d,7d明显,持续28d。结论:高同型半胱氨酸血症上调血管损伤局部炎症因子单核细胞趋化因子1、细胞间黏附分子1表达,促使局部平滑肌细胞增殖,使新生内膜增生。

骨髓间充质干细胞对氧化应激损伤心肌细胞凋亡、自噬的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)对氧化应激损伤心肌细胞凋亡、自噬的影响。方法(1)以不同浓度(0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、300μmol/L、500μmol/L和700μmol/L)H 2O 2处理大鼠心肌细胞H9c26 h、9 h和12 h,采用CCK-8检测细胞活力,筛选H 2O 2的最佳作用浓度及作用时间以构建氧化应激损伤心肌细胞模型。(2)将大鼠心肌细胞H9c2分为对照组、H 2O 2组、BMSC+H 2O 2组。H 2O 2组和BMSC+H 2O 2组均采用500μmol/L H 2O 2诱导12 h建立氧化应激损伤心肌细胞模型,在此基础上,BMSC+H 2O 2组加入对数生长期大鼠BMSC进行共培养。对照组正常培养而不给予干预。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,分别采用实时荧光定量PCR、Western blot检测各组细胞自噬相关基因[Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)]mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,H 2O 2组细胞凋亡率升高(P<0.05);与H 2O 2组相比,BMSC+H 2O 2组细胞凋亡率降低(P<0.05)。与对照组、H 2O 2组比较,H 2O 2+BMSC组Beclin-1、LC3B mRNA和蛋白表达水平均升高(均P<0.05)。结论BMSC可以通过抑制心肌细胞凋亡及增强心肌细胞自噬水平,以减轻氧化应激对心肌细胞的损伤,从而发挥心肌保护作用。

血管内皮细胞内皮素分泌功能与茶多酚及血管紧张素Ⅱ的相关性(英文)

背景:内皮素是一种强效血管收缩物质,血管紧张素Ⅱ可以刺激血管内皮细胞分泌内皮素,通过检测血液或细胞培养液中的内皮素含量,可以间接反映血管内皮细胞的功能及损伤情况,因此,增强血管内皮细胞对损伤因素的抵抗作用意义重大。茶多酚是茶叶药效的主要活性成分,具有抗动脉粥样硬化、对抗血管内皮细胞损伤、预防心血管疾病等作用。目的:通过建立血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞损伤模型,观察了血管紧张素Ⅱ作用不同时间后血管内皮细胞分泌内皮素含量的变化以及不同浓度的茶多酚对这种变化的影响,以探讨茶多酚对血管内皮细胞的保护作用。设计:观察性实验。单位:解放军海军总医院航空潜水医学中心。材料:实验于2005-03/09在解放军海军总医院航空潜水医学中心实验室完成。主要材料:血管紧张素Ⅱ(Sigma公司);茶多酚(浙江大学茶学系);血管内皮细胞(美国CBI公司的人大动脉血管内皮细胞体系)。方法:将培养的血管内皮细胞分为4个组:①对照组:不加特殊试剂,加入等体积的细胞培养液,分别在加液前和加液后0.5,6,24h提取上清液100μL。②血管紧张素Ⅱ组:在细胞培养液中加入血管紧张素Ⅱ,使培养液中血管紧张素Ⅱ的终浓度为10-7mol/L,余同对照组。③高浓度茶多酚+血管紧张素Ⅱ组:将茶多酚加入细胞培养液中,使培养液中茶多酚终浓度为50mg/L,余同血管紧张素Ⅱ组。④低浓度茶多酚+血管紧张素Ⅱ组:加入茶多酚,使培养液中茶多酚终浓度为25mg/L,余同血管紧张素Ⅱ组。采用放射免疫法测定血管紧张素Ⅱ及茶多酚作用前及作用后0.5,6,24h各组细胞培养上清中的内皮素含量。主要观察指标:内皮素含量。结果:①血管紧张素Ⅱ组培养上清的内皮素含量显著高于对照组(P<0.01)。②高浓度茶多酚在作用6h和24h后,内皮素含量较血管紧张素Ⅱ组显著下降(P<0.01);而低浓度茶多酚在各作用时间点均较高浓度茶多酚组及血管紧张素Ⅱ组显著下降(P<0.01)。结论:茶多酚对血管紧张素Ⅱ所致血管内皮细胞分泌内皮素的功能具有抑制作用,提示茶多酚对血管内皮细胞具有保护作用;且低浓度茶多酚的保护作用要强于高浓度茶多酚。

人心房肌细胞超微结构观察

目的：观察人心房肌细胞的超微结构特征，为进一步研究人心房肌细胞的结构和功能提供形态学依据。方法：心脏手术取右心房组织，共10例（年龄13～35岁），超薄切片，JEM-100SX透射电镜观察和摄片。结果：人心房肌细胞较心室肌细胞短且细，分枝少，肌质网呈泡状多聚集在肌膜下，细胞缺乏典型的横小管。部分心房肌细胞胞质内可见成群聚集的心房特殊分泌颗粒。结论：进一步证明了人心房肌细胞与心室肌细胞之间存在着一定的超微结构差异。

牛磺酸对心肌细胞钙离子的调节作用

牛磺酸占心肌游离氨基酸的５０％以上，它对心肌细胞许多依赖于Ｃａ２＋的生理病理现象具有明显的调节作用。牛磺酸能增加高亲和力Ｃａ２＋转运系统转运Ｃａ２＋的量和速度，对低亲和力Ｃａ２＋转运系统的调节作用依胞外Ｃａ２＋浓度的不同而不同，具有稳态调节细胞内Ｃａ２＋作用；另外，牛磺酸尚能抑制各种原因引起的胞内Ｃａ２＋超负荷，显示其具有细胞保护作用。

吻合趾—指血管的显微外科解剖及急诊拇、手指再造

目的：为改进急诊拇、手指部分缺损的再造方法，缩短手术时间。方法：根据第２足趾及拇、手指的血管、神经分布的解剖学规律。１９９３年３月至１９９５年７月，利用第２足趾，采用吻合趾—指血管的方法急诊再造拇、手指１２例１２指。结果：再造拇、手指全部成活，恢复了拇、手指对掌及捏握功能，病人自觉满意。结论：第２足趾及拇、手指血管、神经解剖恒定，远侧指（趾）间关节以近的指固有动脉、趾底动脉及指（趾）背静脉口径在０．５ｍｍ以上，完全可以吻合。急诊再造适合于：局部污染不重，无广泛严重挫伤的拇指Ⅲ度以内缺损及近侧指关节以远的手指缺损，手指近节远端的缺损也可以应用。

一氧化氮抑制血管损伤引起的新内膜形成

体内一氧化氮由一氧化氮合酶催化L－精氨酸合成，具有舒张血管、调节血管张力、抑制血小板粘附聚集、调节白细胞功能等多种生物学活性，尚可抑制血管损伤引起的新内膜形成。血管平滑肌细胞（VSMCs）的增殖、迁移和分泌在新内膜形成中有重要作用。作者就该方面的最新进展作一介绍。

大鼠颈动脉球囊损伤局部A20基因转染后内皮细胞再生及血管超微结构的影响

目的：锌脂蛋白A20是核因子κB信号系统活化的产物。研究证实核因子κB的激活是球囊损伤动脉后血管狭窄发生的重要机制之一。实验拟观察锌指蛋白A20对大鼠颈总动脉球囊损伤局部血管内皮再生和血管超微结构的影响。方法：实验于2006-03／2007-06在大连医科大学附属第二医院中心实验室完成。①实验材料：健康雄性SD大鼠42只，体质量350-400g。②分组及实验过程：采用随机数字表法将大鼠分为3组，每组14只。制备A20质粒DNA，建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型（假手术组只进行颈动脉结扎，不进行球囊损伤术）；对照组：球囊损伤术后局部灌注Lipofectamine 2000 Reagent＋TE缓冲液；治疗组：球囊损伤术后局部灌注Lipofectamine 2000 Reagent＋TE缓冲液＋pCAGGS-GFP／A20重组质粒。A20质粒DNA在球囊损伤大鼠颈动脉的局部转染。③实验评估：荧光显微镜观察A20在损伤动脉壁的转染效率；伊文思蓝染色法评估损伤后颈动脉内皮再生情况；透射电镜观察血管超微结构改变。实验过程对动物的处理符合动物论理学标准。结果：①球囊损伤术和A20转染治疗后2周，治疗组再内皮化百分比大于对照组（P〈0．05）。②假手术组大鼠颈动脉平滑肌细胞电镜下呈典型的“收缩表型”；对照组球囊损伤后3d可见合成型细胞及过渡型细胞，7d血管平滑肌细胞表型发生明显改变，呈典型的“合成表型”，治疗组术后7d可见接近收缩型的血管平滑肌细胞。结论：局部转染A20基因可促进损伤血管内皮再生，抑制损伤处血管平滑肌细胞表型转化。

颈内动脉海绵窦段分支及分布的显微解剖

目的 :为海绵窦的直接手术提供显微解剖学基础。方法 :采用 48侧成人新鲜海绵窦标本 ,颈内动脉灌注苯乙烯 (ABS) ,然后在手术显微镜下解剖观察。结果 :脑膜垂体干出现率为 10 0 % ,脑膜垂体干可分为两型 ,典型的脑膜垂体干出现率为 5 8.3 % ,非典型的脑膜垂体干又分为单干型和非单干型 ,前者出现率为 3 1.3 % ,后者为 10 .4%。海绵窦下动脉出现率为 95 .8% ,垂体被囊动脉为 3 1.3 %。另外眼动脉的出现率为 10 .4%。两侧颈内动脉海绵窦段分支之间的吻合 ,提供了重要的侧支循环血液供应。结论 :本文对颈内动脉海绵窦段分支的显微解剖结果 ,对临床显微外科、血管介入、影像学有指导意义。

人胎心脏中心纤维体的组织学和组织化学研究

利用光镜对22例胎儿心脏的中心纤维体进行了组织学(12例)和组织化学(10例)观察.结果如下:(1)胎儿中心纤维体为致密结缔组织.在中央部成纤维细胞和基质较多,而纤维细胞和胶原纤维少,后二者主要分布于周边部.中心纤维体内有较多的小血管和大小不等的结细胞岛.结果表明:胎儿中心纤维体是一种不成熟的组织,正处于迅速发育阶段.(2)房室束恒定的穿经中心纤维体.(3)在中心纤维体内碱性磷酸酶和酸性磷酸酶为阴性反应,5’-核苷酸酶,乳酸脱氢酶和糖原为弱阳性反应.