血管内皮细胞内皮素分泌功能与茶多酚及血管紧张素Ⅱ的相关性(英文)

背景:内皮素是一种强效血管收缩物质,血管紧张素Ⅱ可以刺激血管内皮细胞分泌内皮素,通过检测血液或细胞培养液中的内皮素含量,可以间接反映血管内皮细胞的功能及损伤情况,因此,增强血管内皮细胞对损伤因素的抵抗作用意义重大。茶多酚是茶叶药效的主要活性成分,具有抗动脉粥样硬化、对抗血管内皮细胞损伤、预防心血管疾病等作用。目的:通过建立血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞损伤模型,观察了血管紧张素Ⅱ作用不同时间后血管内皮细胞分泌内皮素含量的变化以及不同浓度的茶多酚对这种变化的影响,以探讨茶多酚对血管内皮细胞的保护作用。设计:观察性实验。单位:解放军海军总医院航空潜水医学中心。材料:实验于2005-03/09在解放军海军总医院航空潜水医学中心实验室完成。主要材料:血管紧张素Ⅱ(Sigma公司);茶多酚(浙江大学茶学系);血管内皮细胞(美国CBI公司的人大动脉血管内皮细胞体系)。方法:将培养的血管内皮细胞分为4个组:①对照组:不加特殊试剂,加入等体积的细胞培养液,分别在加液前和加液后0.5,6,24h提取上清液100μL。②血管紧张素Ⅱ组:在细胞培养液中加入血管紧张素Ⅱ,使培养液中血管紧张素Ⅱ的终浓度为10-7mol/L,余同对照组。③高浓度茶多酚+血管紧张素Ⅱ组:将茶多酚加入细胞培养液中,使培养液中茶多酚终浓度为50mg/L,余同血管紧张素Ⅱ组。④低浓度茶多酚+血管紧张素Ⅱ组:加入茶多酚,使培养液中茶多酚终浓度为25mg/L,余同血管紧张素Ⅱ组。采用放射免疫法测定血管紧张素Ⅱ及茶多酚作用前及作用后0.5,6,24h各组细胞培养上清中的内皮素含量。主要观察指标:内皮素含量。结果:①血管紧张素Ⅱ组培养上清的内皮素含量显著高于对照组(P<0.01)。②高浓度茶多酚在作用6h和24h后,内皮素含量较血管紧张素Ⅱ组显著下降(P<0.01);而低浓度茶多酚在各作用时间点均较高浓度茶多酚组及血管紧张素Ⅱ组显著下降(P<0.01)。结论:茶多酚对血管紧张素Ⅱ所致血管内皮细胞分泌内皮素的功能具有抑制作用,提示茶多酚对血管内皮细胞具有保护作用;且低浓度茶多酚的保护作用要强于高浓度茶多酚。

吻合趾—指血管的显微外科解剖及急诊拇、手指再造

目的：为改进急诊拇、手指部分缺损的再造方法，缩短手术时间。方法：根据第２足趾及拇、手指的血管、神经分布的解剖学规律。１９９３年３月至１９９５年７月，利用第２足趾，采用吻合趾—指血管的方法急诊再造拇、手指１２例１２指。结果：再造拇、手指全部成活，恢复了拇、手指对掌及捏握功能，病人自觉满意。结论：第２足趾及拇、手指血管、神经解剖恒定，远侧指（趾）间关节以近的指固有动脉、趾底动脉及指（趾）背静脉口径在０．５ｍｍ以上，完全可以吻合。急诊再造适合于：局部污染不重，无广泛严重挫伤的拇指Ⅲ度以内缺损及近侧指关节以远的手指缺损，手指近节远端的缺损也可以应用。

一氧化氮抑制血管损伤引起的新内膜形成

体内一氧化氮由一氧化氮合酶催化L－精氨酸合成，具有舒张血管、调节血管张力、抑制血小板粘附聚集、调节白细胞功能等多种生物学活性，尚可抑制血管损伤引起的新内膜形成。血管平滑肌细胞（VSMCs）的增殖、迁移和分泌在新内膜形成中有重要作用。作者就该方面的最新进展作一介绍。

大鼠颈动脉球囊损伤局部A20基因转染后内皮细胞再生及血管超微结构的影响

目的：锌脂蛋白A20是核因子κB信号系统活化的产物。研究证实核因子κB的激活是球囊损伤动脉后血管狭窄发生的重要机制之一。实验拟观察锌指蛋白A20对大鼠颈总动脉球囊损伤局部血管内皮再生和血管超微结构的影响。方法：实验于2006-03／2007-06在大连医科大学附属第二医院中心实验室完成。①实验材料：健康雄性SD大鼠42只，体质量350-400g。②分组及实验过程：采用随机数字表法将大鼠分为3组，每组14只。制备A20质粒DNA，建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型（假手术组只进行颈动脉结扎，不进行球囊损伤术）；对照组：球囊损伤术后局部灌注Lipofectamine 2000 Reagent＋TE缓冲液；治疗组：球囊损伤术后局部灌注Lipofectamine 2000 Reagent＋TE缓冲液＋pCAGGS-GFP／A20重组质粒。A20质粒DNA在球囊损伤大鼠颈动脉的局部转染。③实验评估：荧光显微镜观察A20在损伤动脉壁的转染效率；伊文思蓝染色法评估损伤后颈动脉内皮再生情况；透射电镜观察血管超微结构改变。实验过程对动物的处理符合动物论理学标准。结果：①球囊损伤术和A20转染治疗后2周，治疗组再内皮化百分比大于对照组（P〈0．05）。②假手术组大鼠颈动脉平滑肌细胞电镜下呈典型的“收缩表型”；对照组球囊损伤后3d可见合成型细胞及过渡型细胞，7d血管平滑肌细胞表型发生明显改变，呈典型的“合成表型”，治疗组术后7d可见接近收缩型的血管平滑肌细胞。结论：局部转染A20基因可促进损伤血管内皮再生，抑制损伤处血管平滑肌细胞表型转化。

雌激素对糖尿病患者内皮祖细胞数量和功能的影响

目的:观察雌激素对2型糖尿病患者外周血内皮祖细胞数量和功能的改变,并检测趋化因子受体CXCR4的表达。方法:实验于2005-02/09在华中科技大学同济医学院附属协和医院完成。选取武汉市中心医院收治的20例2型糖尿病患者,均根据1999年中国糖尿病学会新的诊断标准确诊。①抽取2型糖尿病患者外周静脉血,常规密度梯度离心法获取单个核细胞,进行内皮祖细胞的分离培养。加入雌二醇培养3d,按其浓度分为雌激素0nmol/L组、雌激素50nmol/L组、雌激素100nmol/L组。②检测内皮祖细胞的生长增殖和凋亡情况,测定其黏附能力。分别以反转录-聚合酶链法及流式细胞术对内皮祖细胞表达CXCR4的水平进行检测。结果:按意向处理分析,实验选取20例2型糖尿病患者血样全部进入结果分析。①内皮祖细胞的培养、鉴定及计数情况:培养4d后可见贴壁的单个核细胞,7d后细胞变为梭形,并慢慢变长。流式细胞仪鉴定细胞表型,可见内皮祖细胞大多表达CD34,且60%～80%表达CD133。对贴壁细胞行荧光染色后,>80%的细胞双染色阳性,可认为是正在分化的内皮祖细胞。计数结果显示,随着加入雌激素浓度的增加,各组内皮祖细胞数量差异具有显著性意义(P<0.05)。②内皮祖细胞增殖及凋亡的检测结果:各组内皮祖细胞增殖率基本相似(P>0.05)。随着雌激素浓度的增加,雌激素0nmol/L组、雌激素50nmol/L组、雌激素100nmol/L组的凋亡率呈下降趋势,差异有显著性意义(P<0.05)。③内皮祖细胞黏附能力检测结果:各组内皮祖细胞黏附能力基本相似(P>0.05)。④CXCR4在内皮祖细胞上的表达情况:流式细胞术检测各组内皮祖细胞上CXCR4的表达阳性率,可见随着雌激素浓度增加,各组CXCR4表达率也随之增加,差异具有显著性意义(P<0.05)。反转录-聚合酶链反应法检测CXCR4的表达,亦得到相似结果。结论:雌激素对2型糖尿病患者内皮祖细胞的数量及功能均产生影响,可明显抑制内皮祖细胞凋亡及上调CXCR4的表达。提示雌激素可能在防止糖尿病周围血管病变上发挥一定作用。

人脐静脉内皮细胞血管紧张素转化酶及血管紧张素转化酶2表达与氧化型低密度脂蛋白的关系

目的：新近研究发现血管紧张素转化酶2与血管紧张素转化酶在功能上相拮抗。采用反转录-聚合酶链反应及蛋白质免疫印迹方法，观察氧化型低密度脂蛋白对人血管内皮细胞血管紧张素转化酶及血管紧张素转化酶2表达的影响。方法：实验于2007—05/08在南方医科大学附属珠江医院中心实验室完成。①用正常人新鲜血浆制备氧化低密度脂蛋白，人脐静脉内皮细胞株复苏、传代后取生长良好的3～6代用于实验。②实验分为7组：空白对照组加无血清培养基；20，40，80mg／L氧化型低密度脂蛋白组分别与人脐静脉内皮细胞孵育24h；40mg／L氧化型低密度脂蛋白分别与人脐静脉内皮细胞孵育6，12，24h。各组实验重复6次。③提取细胞总RNA及蛋白，应用反转录-聚合酶链反应检测血管紧张素转化酶、血管紧张素转化酶2mRNA表达水平；以蛋白质免疫印迹法检测血管紧张素转化酶、血管紧张素转化酶2蛋白表达水平。结果：①与空白对照组比较，氧化低密度脂蛋白20，40，80mg／L组血管紧张素转化酶mRNA表达增加，血管紧张素转化酶2mRNA表达降低（P〈0．01），不同剂量组间差异亦有显著性意义（P均〈0．01）。40mg／L氧化型低密度脂蛋白6，12，24h组血管紧张素转化酶mRNA表达增加，血管紧张素转化酶2mRNA表达减少（P〈0．05），不同时间点间差异亦有显著性意义（P均〈0．05）。②与空白对照组比较，氧化低密度脂蛋白20，40，80mg／L组血管紧张素转化酶蛋白表达增加，血管紧张素转化酶2蛋白表达减少（P〈0．01），不同剂量组间差异亦有显著性意义（P均〈0．01）。40mg／L氧化型低密度脂蛋白6，12，24h组血管紧张素转化酶蛋白表达增加，血管紧张素转化酶2蛋白表达降低（P〈0．05），不同时间点间差异亦有显著性意义（P均〈0．05）。结论：氧化型低密度脂蛋白可上调血管紧张素转化酶蛋白及基因表达，下调血管紧张素转化酶2蛋白及基因表达，且呈剂最和时间依赖性。

前列腺素E1对腹主动脉球囊损伤大鼠血管内膜、中膜增生及血浆相关因子水平的影响

目的:观察前列腺素E1对腹主动脉球囊损伤大鼠血管内膜、中膜增生及对血浆内皮素、血小板颗粒膜蛋白和D-二聚体的干预作用,并了解其作用是否有剂量依赖性。方法:实验于2003-03/2004-04在郑州大学医学院药理学教研室心血管实验室进行。①取雄性Wistar大鼠160只随机分为假手组、模型组、前列腺素E18,24,72μg/kg组5组,每组32只;每组又分术后6,24h、10,21d共4个时间点,每个时间点8只。②前列腺素E18,24,72μg/kg组大鼠连续5d经尾静脉给予前列腺素E18,24,72μg/kg,其他两组给予等容积生理盐水。③最后一次给药24h后进行大鼠腹主动脉球囊损伤手术,假手术组仅作左颈总动脉结扎。④各组动物于术后6h取血,测定血浆中血小板颗粒膜蛋白、D-二聚体水平;于术后6,24h、10,21d各时间点心脏取血测定血浆中内皮素水平;并在以上4个时间点取出腹主动脉下段,进行病理分析。结果:160只大鼠进入结果分析。①球囊损伤术后可使血管内皮剥脱,内弹力板断裂,模型组术后21d可见受损血管内膜、中膜明显增厚,狭窄形成。前列腺素E13个剂量组内膜及中膜增生程度均较模型组有不同程度的减轻,前列腺素E124,72μg/kg组与模型组比较差异显著(P<0.01)。②血浆内皮素:模型组术后6,24h显著高于假手术组(P<0.01),前列腺素E124,72μg/kg组术后6,24h,10d显著低于模型组(P<0.01,0.05),前列腺素E18μg/kg组仅在术后24h,10d显著低于模型组(P<0.01,0.05)。③模型组术后6h血浆血小板颗粒膜蛋白和D-二聚体水平显著高于假手术组(P<0.01),前列腺素E1各组均低于模型组(P<0.01)。结论:前列腺素E1对球囊损伤术后腹主动脉血管内膜、中膜增生有干预作用,其作用与降低血浆内皮素水平、血小板颗粒膜蛋白和D-二聚体水平有关,且与用药剂量有关。

抑癌基因p53与p16及PCNA蛋白在皮肤增生期血管瘤中的表达及其对血管内皮细胞的干预

目的:应用免疫组化法检测抑癌基因p16,p53及DNA聚合酶δ的辅助蛋白PCNA在增生期血管瘤中的表达,及其对血管内皮细胞的影响。方法:实验选取2001-01/2005-04北京世纪坛医院病理科收集的手术切除皮肤增生期血管瘤组织标本36例作为增生期血管瘤组(患者术前均未经任何辅助性治疗),以痔静脉标本30例作为痔静脉对照组。患者均知情同意。①两组标本切片均采用DAKOEnvisions二步法进行免疫组化处理。切片以体积分数为0.03的过氧化氢消除内源性过氧化物酶,微波法抗原修复,92～95℃于pH6.0枸盐酸缓冲液浸泡10min;室温冷却10min,双蒸水洗涤,pH7.2磷酸盐缓冲液浸泡5min;体积分数为0.1的山羊血清(磷酸盐缓冲液稀释)封闭,去血清,加入Ⅰ抗,37℃浸泡30min;pH7.2磷酸盐缓冲液冲洗;Envision孵育,37℃下放置30min;二氨基联苯胺显色,苏木精复染后,脱水、透明、封固。免疫组化阴性对照以磷酸盐缓冲液代替Ⅰ抗,其他步骤维持不变,以确认试剂质量及控制染色效果。②p16,p53阳性信号为棕黄色,以内皮细胞浆和/或核染成棕黄色为阳性细胞。阴性对照除细胞核染成蓝色外,无棕黄色反应物。血管内皮细胞核内见棕黄色颗粒者为PCNA蛋白染色阳性。采用CMIAS高清晰彩色病理图像分析系统分别对两组切片p53,p16及PCNA蛋白的表达进行图像检测,测定每个视野下p16和p53阳性细胞的平均吸光度以及PCNA蛋白阳性表达指数。结果:实验选取手术切除皮肤增生期血管瘤组织标本36例,痔静脉标本30例,全部进入结果分析。①两组p53阳性表达检测及平均吸光度的比较:增生期血管瘤组内皮细胞核内有较多棕黄色颗粒,p53表达强;痔静脉对照组血管内皮细胞核内无棕黄色颗粒沉积,p53表达极弱。增生期血管瘤组p53阳性表达的平均吸光度明显强于痔静脉对照组(6.423±1.415,1.036±0.131,P<0.05)。②两组p16阳性表达检测及平均吸光度的比较:两组切片组织中除细胞核着色外,部分细胞浆有着色。p16的阳性表达在增生期血管瘤组和痔静脉对照组中基本相同,平均吸光度分别为1.241±0.373和1.206±0.267。③两组PCNA蛋白阳性表达指数的比较:PCNA蛋白阳性表达的细胞光镜下可见核内弥漫分布细小的棕黄色颗粒,这些内皮细胞围成血管腔及团块状,核椭圆,体积较大。增生期血管瘤组PCNA蛋白阳性表达指数明显高于痔静脉对照组(67.40±8.79,38.41±9.89,P<0.01)。结论:抑癌基因p53在增生期血管瘤组织中呈高表达,能够促进血管内皮细胞的增殖,但p16的表达与血管内皮细胞增殖的关系不明显。此外PCNA蛋白可作为增生期血管瘤的可靠标志物。

血管内皮细胞的滤膜培养方法

目的：建立、稳定内皮细胞滤膜培养的模型。方法：分组比较不同明胶浓度处理滤膜，不同种植密度及孵育时间，不同孔径滤膜对内皮细胞生长的影响，从而确定滤膜培养的各实验条件。结果：不同明胶浓度处理滤膜、不同种植密度，不同孵育时间对内皮细胞生长的影响差异显著（Ｐ＜０．０１）不同孔径滤膜对内皮细胞生长的影响差异不显著（Ｐ＞０．０５）。结论：用１‰明胶处理滤膜，１０５／ｃｍ２的种植密度及孵育２ｄ即可获得较好结果。

糖尿病患者血管内皮细胞活性因子变化:接受金芪降糖片干预的效应

目的:细胞因子可作用于血管内皮细胞,在糖尿病的血管病变中起重要作用。通过观察金芪降糖片治疗前后血管内皮细胞损伤相关因子的变化,探讨金芪降糖片对糖尿病患者血管内皮细胞活性因子的影响及临床应用价值。方法:①对象:选择2005-03/2006-09在解放军济南军区总医院内分泌科就诊的2型糖尿病患者63例;金芪降糖片由天津中新药业隆顺榕制药厂生产。②分组:患者随机被分为两组:对照组30例,男19例,女11例,平均年龄(56.6±8.9)岁;金芪组33例,男20例,女13例,平均年龄(58.4±7.7)岁。③给药:对照组用常规西药双胍类等降糖药物治疗;金芪组在西药治疗基础上加服金芪降糖片8片,3次/d,连续治疗3个月。④评估:采用ELISA检测两组患者治疗前后血浆中内皮素1、可溶性细胞间黏附分子1、可溶性P-选择素和肿瘤坏死因子α内皮细胞活性因子水平,以及血糖、血脂、糖基化血红蛋白等各项指标的变化。结果:63例患者全部进入结果分析。①与治疗前比较,治疗后金芪组血糖和血脂、糖基化血红蛋白均有显著变化(P<0.05),对照组仅血糖有明显变化(P<0.05);与对照组治疗后比较,金芪组血糖、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇都有明显改善(P<0.05)。②与治疗前比较,金芪组治疗后患者血浆中细胞因子水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),对照组4项指标水平皆无明显变化(P>0.05);与对照组治疗后比较,金芪组患者血浆中内皮素1、可溶性细胞间黏附分子1、可溶性P-选择素和肿瘤坏死因子α水平均显著降低(P<0.01)。结论:①金芪降糖片可通过降低糖尿病患者血浆中血管内皮细胞活性因子水平,起到保护血管内皮细胞的作用。②中西医结合治疗糖尿病,能有效地延缓糖尿病合并症的发生和发展。

核苷酸结合寡聚结构域受体1作为先天免疫识别受体在血管平滑肌细胞激活中的作用

目的:核苷酸结合的寡聚结构域受体1是新近发现的先天免疫细胞内模式识别受体。实验通过观察细菌细胞壁粘肽对血管平滑肌中细胞内核苷酸结合的寡聚结构域受体1激活和表达的影响,探讨核苷酸结合的寡聚结构域受体1介导的先天免疫信号通路在血管平滑肌激活中的作用。方法:实验于2006-06/2007-03在大连医科大学附属二院中心实验室完成。①实验材料:人冠状动脉血管平滑肌细胞购自Cambrex公司。②实验过程:体外培养人冠状动脉血管平滑肌细胞,用核苷酸结合的寡聚结构域受体1激动剂细菌细胞壁粘肽(10mg/L)刺激0,3,6和24h。③实验评估:用实时定量反转录-聚合酶链反应检测平滑肌细胞中核苷酸结合的寡聚结构域受体1mRNA的表达,用酶联免疫吸附法检测细胞培养物上清液中白细胞介素8和肿瘤坏死因子α的浓度。结果:①血管平滑肌细胞在静息状态下表达低水平的核苷酸结合的寡聚结构域受体1。细菌细胞壁粘肽刺激能够引起血管平滑肌细胞中核苷酸结合的寡聚结构域受体1mRNA表达上调(从0.164±0.005增加到0.231±0.027,P<0.05)。②酶联免疫吸附法显示细胞培养物上清液中白细胞介素8和肿瘤坏死因子α的浓度也显著增加[白细胞介素8从(0.12±0.01)μg/L增加到(2.31±0.11)μg/L,肿瘤坏死因子α从(4.22±0.50)ng/L增加到(143.11±12.58)ng/L,P<0.01]。结论:推测血管平滑肌细胞中的核苷酸结合的寡聚结构域受体1介导的先天免疫信号通路被激活,参与了动脉粥样硬化的发生和发展。

睾酮对动脉粥样硬化内皮功能的影响

目的:探讨睾酮在雄兔动脉粥样硬化模型中是否具有保护内皮细胞功能的作用。方法:实验于2003-10/2004-06在哈尔滨医科大学第一临床医学院动物实验中心完成。选择雄性哈尔滨大耳白兔45只,随机分为5组,分别为安慰剂组、丙酸睾酮0.25,2.5,12.5mg/(kg·d)组及假手术组,每组9只。安慰剂组去势并给安慰剂;丙酸睾酮0.25,2.5,12.5mg/(kg·d)组家兔去势并分别予丙酸睾酮0.25mg/(kg·d),2.5mg/(kg·d),12.5mg/(kg·d)肌肉注射。3个月后,采集动物血样,检测血中睾酮水平、血脂浓度、纤溶酶原激活物抑制物活性,一氧化氮、内皮素、血管紧张素Ⅱ含量。麻醉后气栓法处死动物,分离主动脉,纵向剖开固定,计算斑块占总内膜面积的百分比。另外利用westernblot方法比较各组家兔雄激素受体表达量的变化。结果:进入结果分析安慰剂组、丙酸睾酮0.25,2.5,12.5mg/(kg·d)组及假手术组家兔数量分别为8,8,7,7及7只。①安慰剂组血清睾酮水平、一氧化氮含量显著低于其他组(P<0.05～0.01)。②安慰剂组纤溶酶原激活物抑制物活性、内皮素、血管紧张素Ⅱ含量及主动脉斑块面积百分比均显著高于其他组(P<0.05～0.01)。接近生理浓度犤0.25mg/(kg·d)犦的外源性睾酮可抑制兔纤溶酶原激活物抑制物活性,剂量增至10倍犤2.5mg/(kg·d)犦作用反而减弱,剂量再次增大至50倍犤1.25mg/(kg·d)犦又抑制纤溶酶原激活物抑制物活性犤(0.3344±0.0513,0.5051±0.0504,0.3742±0.1069)U/mL犦。③各组家兔的主动脉雄激素受体表达量差异无显著性意义(P>0.05)。结论:在高脂饮食诱发的兔动脉硬化模型中,睾酮可以保护内皮细胞功能,从而减轻动脉粥样硬化的程度。但外源性睾酮的作用并未随着剂量的增加而成倍增加,而且并未发现各组雄激素受体表达量有不同,考虑这种作用差别的原因位于受体后。

大鼠尾壳核微血管壁的组织化学研究

本文在15只SD大鼠尾壳核上用半定量方法对微血管壁上5种酶,在亮视野显微镜下进行了组织化学观察。结果:皮质和尾壳核的血管壁上,乳酸脱氢酶活性呈微量至强阳性反应,且随血管直径增大活性增强;琥珀酸脱氢酶活性呈微量至中度;葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性呈阴性至微量,说明核酸及蛋白质合成能力低下;三磷酸腺苷酶活性呈强至极强反应,提示血管壁平滑肌利用三磷酸腺苷能力强。上述各酶在尾壳核各部之间活性无差别。提示:皮质和尾壳核微血管壁代谢活跃,有氧代谢微弱,以无氧代谢为主。

神经导向因子Netrins与血管发生

学术背景:血管和神经有非常相似的复杂分支结构,它们常常伴行到达同一远隔靶位,这提示它们应当受到某些共同信号分子调控。有研究表明,神经轴突导向因子ephrins、slits、semaphorins及netrins调节血管内皮细胞的迁移和血管新生。目的:分析信号分子Netrins在血管形成中的作用及其在血管和神经疾病中的应用前景。检索策略:应用计算机检索Medline2000-01/2007-04与导向因子netrins与血管形成相关的文章,检索词"netrins,neuronal guidance,angiogenesis,blood vessel,endothelial cells,vasculature system,nervous system",限定文献语言种类为English。同时计算机检索万方数据库2000-01/2007-04的相关文章,检索词"血管形成,神经导向因子,Netrins,血管,内皮细胞,神经系统,血管系统",限定文献语言种类为中文。初检索到相关文献381条,纳入标准:有关神经导向因子Netrins在血管形成中作用的文章,筛除重复性研究和综述文献,最后共纳入文章30篇,其中有关血管形成的文章9篇,netrins在血管形成过程中作用的21篇。文献评价:所有文献均为RCT发表,均是来源于动物实验。资料综合:内皮祖细胞存在于各种成年动物和人的骨髓及外周血中,也可由骨髓、成人外周血或脐血中的单核细胞在体外培养、扩增得到。内皮祖细胞参与血管新生和缺血损伤后的血管修复,在这一过程中,需要生长因子和信号分子参与。其中神经导向因子Netrins不仅参与神经的生长还参与血管新生,Netrin-1对人动脉和微脉管系统初期不同内皮细胞的促有丝分裂前、粘附前和迁移前有积极效应。Netrins能恢复神经和血管功能,Netrin-1、Netrin-4与血管内皮生长因子都有促血管形成作用,但以Netrin-1在恢复神经传导速度方面更具有优越性,可能是因为具有内皮和神经的双重生物学效应。结论:Netrins具有促进神经和血管的生长及再生能力,这为许多退行性疾病的治疗提供了广阔的前景,尤其是对糖尿病引起的血管和神经并发症的治疗具有重要的临床意义。

血管钙化大鼠接受阿仑磷酸钠干预后的血管组织学变化

目的:通过观察阿仑磷酸钠干预后血管钙化模型大鼠血管的组织病理学变化,验证阿仑磷酸钠对血管钙化的治疗作用。方法:选用SD大鼠30只,适应性喂养1周后,按随机数字表法分成3组(n=10),维生素D3模型组及阿仑磷酸钠组分别在分组即时、分组后24,48h给予维生素D325万U/(kg·d),正常对照组在同一时刻给予等容量生理盐水对照灌胃。实验第4天开始,阿仑磷酸钠组给予阿仑磷酸钠0.9mg/(kg·d)进行治疗。所有大鼠于实验第6周末麻醉后处死,取主动脉,主动脉弓固定后切片,苏木精-伊红染色后光镜下观察其病理变化;测血管钙含量;行Von Kossa染色,用Image-Pro Plus6.0病理图像分析软件计算各组大鼠钙化斑块面积百分比;同时检测大鼠血脂含量。结果:阿仑磷酸钠组大鼠主动脉弓血管壁有乳白色钙化斑块,但数量较维生素D3模型组明显减少;镜下可见血管中层平滑肌有较少部位出现坏死,坏死面积明显少于维生素D3模型组。阿仑磷酸钠组大鼠血管钙含量、钙化面积百分比及血清总胆固醇浓度均较维生素D3模型组下降(P<0.01)。结论:组织病理学观察结果显示,阿仑磷酸钠可明显减少维生素D3造成的血管钙化大鼠模型的血管钙化面积;同时定量结果也证实,阿仑磷酸钠可降低血管钙及血清总胆固醇水平。

活性氧介导血管紧张素Ⅱ促血管平滑肌细胞增殖的作用

目的:了解血管紧张素Ⅱ通过活性氧诱使血管平滑肌细胞增殖的信号转导途径,为抗氧化剂治疗提供理论依据。资料来源:应用计算机检索1990-01/2005-09期间Medline的相关文章,检索词“vascularsmoothmusclecell,angiotensinⅡ,reactiveoxygenspecies,signalingtransduction”,并限定文章语言种类为English。资料选择:对资料进行初审,选取随机、盲法的研究文献,然后筛除重复研究,对剩余的文献开始查找全文。资料提炼:共收集到48篇关于活性氧在血管紧张素Ⅱ介导的血管平滑肌细胞增殖中的信号转导文献,16篇符合纳入标准。排除的32篇中,18篇为未随机研究或重复性研究,14篇为综述类文章。资料综合:血管紧张素Ⅱ通过一型受体作用于血管平滑肌细胞,刺激NAD(P)H氧化酶产生活性氧,活性氧作为重要的第二信使激活下游的信号分子,如钙离子、蛋白酪氨酸激酶、丝裂原活化的蛋白激酶、核因子-κB,通过信号的级联反应参与血管平滑肌细胞的增殖。结论:活性氧作用于血管平滑肌细胞的信号途径,血管平滑肌细胞增殖中具有重要作用。

骨(膜)瓣显微外科解剖学研究进展

骨（膜）瓣显微外科解剖学研究进展徐达传①钟世镇①移植骨、骨膜的关键在于移植体的血供是否存在。传统的骨移植方法无血供，移植骨因缺血大部分骨细胞坏死，移植体仅作为一种桥梁，使两骨端骨膜在膜内化骨过程中沿其表面进行“爬行替代”。这种骨移植方法愈合时间长，抗...

组织工程静脉血管种子细胞的培养

目的获取可应用于静脉血管组织工程的种子细胞内皮细胞。方法选取北京地区雄性杂种犬,取其双侧颈外静脉,采用翻转后酶消法,获取原代内皮细胞,对其进行原代培养和传代培养,冻存、复苏和鉴定,并利用光学显微镜进行观察。结果获取犬的颈外静脉后,实验采取了翻转后酶消法,所获得的内皮细胞纯度和数量得到了提高;经过鉴定确实为内皮细胞来源;活性好,增殖快,在较短的时间内能够达到后期实验所需数量。结论经体外培养的犬的颈外静脉内皮细胞可以作为组织工程血管的种子细胞。

1型糖尿病大鼠血管内皮细胞损伤后血生化学指标变化及锌原卟啉、正铁血红素的干预效应

目的:观察1型糖尿病血管内皮细胞损伤后内源性一氧化碳、血清总抗氧化能力、丙二醛、游离脂肪酸水平变化,以及锌原卟啉、正铁血红素对这种变化的干预结果。方法:实验于2004-10/2005-06在河北省人民医院老年医学省重点实验室完成。①选用健康雄性SD大鼠89只,8周龄,体质量240～260g。②取17只为对照组:腹腔仅注射柠檬酸缓冲液,4d后隔日腹腔注射生理盐水。将其余72只造成1型糖尿病模型:大鼠按50mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(溶于pH4.5的柠檬酸缓冲液中),4d后,有60只大鼠空腹血糖>16mmol/L为1型糖尿病模型复制成功。将其随机分为3组:1型糖尿病组(n=36):造模4d后隔日腹腔注射生理盐水,饲养4,8和12周后处死12,14,10只;正铁血红素+1型糖尿病组(n=12):造模4d后隔日给1型糖尿病大鼠腹腔注射正铁血红素30μmol/kg,连续4周后处死;锌原卟啉+1型糖尿病组(n=12):造模4d后隔日给1型糖尿病大鼠腹腔注射锌原卟啉10μmol/kg,连续4周后处死。③处死前采用Chrion855血气分析仪检测动脉血中碳氧血红蛋白水平,以其反映一氧化碳水平。采用比色法检测血清总抗氧化能力,丙二醛和游离脂肪酸水平。扫描电镜观察股动脉内皮超微结构。④多组均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用LSD法。结果:由于造模失败脱失12只,最终进入结果分析77只。①动脉血碳氧血红蛋白水平:1型糖尿病大鼠4周明显低于对照组(P<0.01),正铁血红素+1糖尿病组干预4周后明显高于1型糖尿病组干预4周后(P<0.05),干预8,12周后低于对照组,但差异不明显。②血清总抗氧化能力水平:1型糖尿病大鼠呈时间依赖性降低,均明显低于对照组(P<0.01),锌原卟啉+1型糖尿病组干预4周后明显低于1型糖尿病组干预4周后(P<0.05)。③血清丙二醛水平:1型糖尿病大鼠呈时间依赖性升高,其中干预8,12周后明显高于对照组(P<0.01),锌原卟啉+1型糖尿病组干预4周后明显高于1型糖尿病组干预4周后(P<0.05)。④血清游离脂肪酸水平:锌原卟啉+1型糖尿病组干预4周后明显高于1型糖尿病组干预4周后(P<0.05),1型糖尿病组干预12周后明显高于干预4周后(P<0.05)。⑤股动脉内皮超微形态学观察结果:对照组内皮细胞形态结构正常。1型糖尿病组内皮细胞出现损伤,干预8,12周后可见内皮细胞更严重损伤;应用正铁血红素后1型糖尿病大鼠内皮细胞形态接近对照组;锌原卟啉+1型糖尿病组大鼠内皮细胞形态异常。结论:随病程进展1型糖尿病大鼠内皮细胞抗氧化能力逐渐降低,脂代谢紊乱更加严重,内源性一氧化碳水平下降,并逐渐接近正常。锌原卟啉可加重血管内皮细胞结构损伤,应用正铁血红素可减轻血管内皮细胞结构损伤。

一种研究血管中膜平滑肌细胞形态、配布的方法

全面观察与测量血管平滑肌层的形态,是在纵面研究血管肌层配布及其变化的有效方法之一.对血管平滑肌细胞形态结构的研究,早期大多是在血管横断面上进行的.由于血管中膜平滑肌细胞彼此参差相连,一般的染色方法难以显示细胞周界,很难了解平滑肌在血管壁中的层次构造.电镜可逐个观察平滑肌细胞的形态和超微结构,但难以显示管壁中肌层的位置和配布.扫描电镜已能显示血管中膜平滑肌层的单层结构,但无法展示多层细胞间的构筑形式.我们在Hautchen技术的启示下,摸索出一种银染平滑肌细胞周界和纵面铺片的方法,在光镜下可大面积展示血管肌层的细胞形态和层间的细胞配布.