一氧化氮合酶同功异构酶在大鼠中枢神经系统的分布

本文采用免疫组织化学技术观察三种一氧化氮合酶同功异构酶在正常大鼠中枢神经系统的分布。结果显示：ＮＯＳ１ 阳性神经元分布于中枢神经系统的广泛区域，包括大脑皮质Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ层，海马分子层，齿状回多形层，尾壳核，中脑上丘，小脑皮质分子层和颗粒层，脊髓Ⅰ、Ⅱ层、侧角、中央灰质和前角。脊髓中央管室管膜上皮也为阳性。ＮＯＳ３ 阳性神经元的分布区域与前者有部分重叠，但也有差别：大脑皮质相同层次内的ＮＯＳ３ 阳性神经元的形态和染色不同于ＮＯＳ１；密集分布于海马锥体细胞层和齿状回颗粒细胞层；小脑浦肯野细胞ＮＯＳ３ 阳性；另外，ＮＯＳ３ 阳性神经元弥散分布于脊髓内，其胞体和核仁均呈阳性。ＮＯＳ２ 阴性。广泛的分布表明ＮＯ 与中枢神经系统的诸多功能有关，而ＮＯＳ１ 与ＮＯＳ３ 分布的差异又说明中枢神经系统不同神经元内ＮＯ的产生是由此两种同功异构酶分别参与而完成的。

大鼠脊髓运动神经元嫌Golgi树突的功能解剖学研究——快慢肌运动神经元的不同树突构筑

目的通过对出生后不同时期大鼠趾长伸肌（ＥＤＬ）和比目鱼肌（ＳＯＬ）运动神经元（Ｍｎ）群树突发育的研究，了解脊髓Ｍｎ嫌Ｇｏｌｇｉ树突在发育过程中的变化以及这两种不同功能特性Ｍｎ群所表现的差异，从而推断其功能解剖学意义。方法以霍乱毒素Ｂ亚单位结合辣根过氧化物酶（ＣＢ－ＨＲＰ）对ＥＤＬ－Ｍｎ和ＳＯＬ－Ｍｎ进行逆行追踪，显示两者的树突。结果以张力性活动方式为主的ＳＯＬ－Ｍｎ群生后一直具有丰富的嫌Ｇｏｌｇｉ树突，以位相性活动方式为主的ＥＤＬ－Ｍｎ群，在生后早期也具有较丰富的嫌Ｇｏｌｇｉ树突，但在成年后却明显减少，其面密度值仅是前者的一半。结论脊髓Ｍｎ嫌Ｇｏｌｇｉ树突与Ｍｎ的活动方式密切相关，嫌Ｇｏｌｇｉ树突参与调节脊髓Ｍｎ活动的“旁侧回路”，特别是对张力性慢肌Ｍｎ的调控。以上结果为Ｍｎ的“双重回路调控”即旁侧回路及核心回路假说进一步提供功能解剖学依据。

海绵窦三角的显微外科解剖及其临床意义

目的：了解海绵窦（ｃａｖｅｒｎｏｕｓｓｉｎｕｓ，ＣＳ）有关的三角的显微解剖，为ＣＳ病变直接手术提供安全手术入路。方法：２０例成人头部标本，在显微镜下对ＣＳ颅内三壁有关三角进行解剖观察和测量。结果：ＣＳ上壁内有前内侧三角和内侧三角；外壁内及其附近有旁内侧三角、Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ三角、Ｍｕｌａｎ三角、外侧三角、Ｇｌａｓｃｏｃｋ三角和Ｋａｗａｓｅ三角；后壁上有下外侧三角和下内侧三角。在总共１０个三角中，上壁的内侧三角和外壁的Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ三角能暴露的ＣＳ结构最多。此二者结合起来几乎能显露ＣＳ的所有部位和结构。结论：ＣＳ三角为其病变直接手术提供既不损伤重要神经血管又能进入ＣＳ内的安全手术入路。其中最常用的是内侧三角和Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ三角。临床上最常应用的额颞骨瓣（翼点入路）ＣＳ上壁和外壁联合入路就是经该２个三角进入ＣＳ的。

光、磁分子探针在脑组织间隙内的扩散分布规律

目的:对比荧光分子探针四甲基罗丹明-葡聚糖(dextran-tetramethylrhodamine,DT)和荧光黄(lucifer yellow CH,LY)、磁性分子探针钆-二乙三胺五乙酸(gadolinium-diethylene triamine pentaacetic acid,Gd-DTPA)在多孔介质中的动态扩散分布规律,筛选合适的荧光分子探针用于大鼠脑组织间隙(interstitial space,ISS)光学成像。方法:琼脂糖凝胶分为DT组、LY组、Gd-DTPA组,分别导入相应分子探针,应用激光扫描共聚焦显微镜分别动态观察DT、LY在琼脂糖凝胶内的扩散分布,与磁共振成像显示的Gd-DTPA在琼脂糖凝胶内的动态扩散过程进行比较。LY分别导入18只大鼠尾状核,对不同时间点离体脑切片进行荧光成像,其成像数据与相应导入Gd-DTPA的大鼠的磁共振在体检测成像数据进行对比。结果:DT、LY及Gd-DTPA在琼脂糖凝胶中的扩散分布均表现为各向同性,平均扩散分布速率分别为:(0.07±0.02)×10-2mm2/s、(1.54±0.47)×10-2mm2/s、(1.45±0.50)×10-2mm2/s,DT与LY、DT与Gd-DTPA间差异均有统计学意义(ANOVA,F=367.15,P<0.001;Post-Hoc LSD,P<0.001),LY与Gd-DTPA间差异无统计学意义(Post-Hoc LSD,P=0.091)。重复测量方差分析比较分子探针的扩散分布面积随时间变化的趋势:DT与LY、DT与Gd-DTPA间的变化规律差异均有统计学意义(Bonferroni校正,α=0.0125,P<0.001),LY与Gd-DTPA间差异无统计学意义(Bonferroni校正,α=0.0125,P=0.203)。LY与Gd-DTPA在大鼠尾状核ISS内分布随时间变化呈各向异性,均表现为指向同侧皮层区的单方向楔形扩散,平均扩散分布速率分别为(1.03±0.29)×10-3mm2/s和(0.81±0.27)×10-3mm2/s,t=0.759,P=0.490;信号衰减半衰期分别为(2.58±0.04)h和(2.46±0.10)h,t=2.025,P=0.113。LY与Gd-DTPA间扩散分布面积比率在0.5、1、2、3、7 h差异无统计学意义(t=2.249,P=0.088;t=2.582,P=0.061;t=1.966,P=0.121;t=0.132,P=0.674;t=0.032,P=0.976),在11 h差异有统计学意义(t=2.917,P=0.043)。结论:LY与Gd-DTPA在多孔介质内的扩散分布规律一致,是ISS荧光成像的适用分子探针,可用于脑ISS的微观、宏观、离体检测。

备用背根猫脊髓背核组织提取液对鸡胚背根节神经突起生长的影响

应用Liu和Chambers创立的备用背根模型,切除成年雄猫(5只)一侧的L_1～L_5、L_7～S_2背根节,保留L_6背根为备用背根,术后动物存活5d。分别制备脊髓T_(12)～L_3节段手术侧(实验组)、非手术侧(对照组)背核组织及其条件培养液。以Hanks平衡盐溶液的条件培养液作为参照组。用实验组、对照组以及参照组条件培养液对Hamburger 35期Leghorn鸡胚腰段背根部进行悬滴法培养,每只动物进行一批实验。于培养24h,48h观察测量各个背根节神经突起的平均长度。在各组背根节从培养24h到48h神经突起明显增长的基础上,求出每批培养物实验组、对照组背根节平均突起长度与参照组平均突起长度的比值以及5批培养物之平均比值。比较实验组、对照组平均比值在同一观测时间内的差异,发现两个观测时间实验组平均比值都明显大于对照组者。结果提示,猫脊髓经部分去后肢背根传入后,背核组织提取液促进神经突起生长的作用增强。

含Parvalbum in和Calbind in D-28k样免疫阳性神经元在大鼠三叉神经本体觉中枢通路的分布

本研究应用免疫组织化学技术对Ｐａｒｖａｌｂｕｍ ｉｎ（ＰＶ）和Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ Ｄ２８ｋ（ＣＢ）样免疫阳性神经元在大鼠三叉神经本体觉中枢通路上的分布状况作了普查。结果表明： 这两种钙结合蛋白在该通路上具有下列的分布特点：（１）三叉神经中脑核神经元几乎全部为ＰＶ 样免疫阳性，胞体和突起染色强或中等强度，胞体大（１８～３０ μｍ ），多为假单级神经元，偶见中等大小的多极神经元。（２）在三叉神经脊束核吻侧亚核尾侧段水平的三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部及邻接的网状结构中可看到由ＰＶ 样免疫阳性神经元构成的两团深染区，外侧者大，内侧者小，胞体呈圆形、三角形或不规则形（９～１６ μｍ ）；在此处ＣＢ样免疫阳性细胞亦呈类似分布。（３）“带状区”内ＰＶ 样免疫阳性细胞多为具有短突的多极神经元；在三叉上核尾外侧部，ＰＶ 样神经元分布稀疏，但在感觉主核背内侧部则呈高密度分布；ＡＶＭ 、ＡＤＯ 等两个位于“带状区”腹侧部的新发现的小核团亦可观察到阳性细胞和突起。此“带状区”内ＣＢ样免疫阳性细胞数目较少，分布也稀疏，但胞体较大（１１～１８ μｍ ），呈三角形、圆形或不规则形，轴突上可见少量的串珠状膨体。在ＡＤＯ 中ＣＢ样免疫阳性细胞的分布较Ｐ?

大鼠下丘脑弓状核神经元的衰老性变化

选用青年、中年和老年雄性大鼠各10只,用形态计量学和体视学方法定量分析弓状核神经元年龄性变化结果发现在老年大鼠弓状核、部分暗型和亮型经元内(?)面内质网排列紊乱、缩短和双层膜间隔增宽,线粒体嵴断裂、肿胀和空泡化,溶酶体、微管和颗粒小泡数减少:与青、中年组比较神经元数(0.01mm)分别丢失37和27核仁平均体积缩小30(?)左右;线粒体体密度和脂褐素数增加,但神经元截面积未发生明显变化:核仁样体出现率减少.结果提示,老年下丘脑弓状核已发生衰老性改变,这可能有与老年期机体内分泌和神经内分泌功能变化有关,为研究老年下丘脑神经递质失调提供形态学依据.

一氧化氮合成酶阳性神经元在大鼠脑干的分布及其衰老变化

目的:研究一氧化氮合成酶阳性神经元在大鼠脑干的分布和衰老变化.材料和方法:实验用青年(2～3月),中年(15～18月)和老年(26～30月)三组SD大鼠,采用NADPH黄递酶组织化学技术及计算机图像分析.结果:一氧化氮合成酶阳性神经元主要分布于中脑和脑桥上部,延髓分布极少.上丘浅灰质层、中脑导水管周围灰质的背外侧部、中缝背核、被盖背外侧核和桥脚被盖核内的阳性细胞最密集.比较了以上五个核团内阳性神经元的数量和平均横截面积的年龄性变化,发现中年组青年组相比阳性神经元的数量和平均横截面积没有显著性变化(P>0.05).老年组同青年组相比较,各核团阳性神经元的数量有不同程度的减少(P<0.05),减少率分别为:58.5%、36.8%26.5%、25.4%和22.2%,并且阳性神经元平均横截面积也显著性减少(P<0.05).结论:结果提示一氧化氮可能与脑干功能的调节有关,并且在衰老过程中一氧化氮合成酶阳性神经元数量和形态的变化可能影响一氧化氮在脑干的调节作用.

大鼠运动核内5-羟色胺1A、2A、5A受体的定位分布

为了阐明５羟色胺在中枢神经系统内与运动神经元结合的精确部位，本研究用免疫细胞化学技术分别观察了大鼠躯体运动核和内脏运动核内５羟色胺１Ａ、２Ａ、５Ａ 受体的定位分布。在躯体运动核内观察到：（１）５羟色胺１Ａ 受体样阳性神经元和纤维主要分布于动眼神经核、滑车神经核、三叉神经运动核、面神经核、舌下神经核和脊髓前角；（２）５羟色胺２Ａ 受体样阳性神经元主要见于动眼神经核、三叉神经运动核、面神经核、舌下神经核和脊髓前角，但阳性纤维和终末却密集地分布于三叉神经运动核、面神经核、舌下神经核和脊髓前角等处，除此之外动眼神经核、滑车神经核、展神经核和疑核内也能见到中等密度的阳性纤维和终末，纤维和终末的分布范围和染色浓度、密度都较神经元为明显；（３）少量淡染的５羟色胺５Ａ 受体样阳性神经元和稀疏的阳性纤维及终末主要见于三叉神经运动核、面神经核、舌下神经核和脊髓前角。在内脏运动核内观察的结果是：（１）动眼神经副交感核（ＥＷ 核）、上涎核、迷走神经背核、骶髓副交感核和胸髓侧角内仅有少量５羟色胺１Ａ 受体样阳性神经元、纤维和终末分布；（２）５羟色胺２Ａ 受体样阳性神经元和较密集的阳性纤维和终末见于ＥＷ 核、迷走神经背核、骶?

豚鼠下丘P物质免疫反应显微及亚微结构特点

采用免疫组化ＡＢＣ－ＧＤＮ技术结合免疫电镜，研究正常豚鼠下丘（ＩＣ）Ｐ物质免疫反应（ＳＰ－ＩＲ）阳性产物的分布及超微定位。结果表明：下丘中央核团ＳＰ－ＩＲ阳性神经元数量较多，大部分呈多极或星状，根据细胞大小可分为两型，即Ⅰ型－神经元胞体呈圆形或椭圆形，直径约１２０～１５０μｍ；Ⅱ型－神经元胞体呈圆形或不规则形，直径６０～７０μｍ。中央核团内ＳＰ－ＩＲ阳性纤维及终末数量亦较少。下丘中央旁核ＳＰ－ＩＲ阳性细胞数量较少，但可见分布较密集的ＳＰ－ＩＲ阳性纤维及终末。免疫透射电镜发现：在下丘含有较多的ＳＰ－ＩＲ阳性的轴突终末与阴性的树突形成的轴－树突触结构，突触后膜明显增厚，后膜下可见明显的突触小体，属Ⅰ型兴奋性突触。阳性的轴突末梢内有７０ｎｍ左右的圆形清亮囊泡。研究结果表明：Ｐ物质（ＳＰ）可能是下丘听觉传入神经递质或调质。

部分去背根传入猫脊髓Ⅱ板层神经生长因子的免疫组化研究

为探讨神经生长因子（NGF）在部分去背根传入猫脊髓Ⅱ板层可塑性中的作用，本文采用成年雄猫15只，建立单侧备用根模型（即切断一侧L1～5、L7～S2节段脊髓背根，保留L6背根），术后分别存活3、5和11d，灌流固定，取L5、L6、L7脊髓冻切．用2.5sNGF抗体进行ABC法免疫组化反应．每例在7张切片上测两侧Ⅱ板层内、中、外三个固定大小对应区域的灰度值。结果：三个时间组手术例L6平面Ⅱ板层NGF的平均灰度均显著地小于非手术例（P＜0．05）；而手术侧L5、L7平面Ⅱ板层NGF的平均灰度3d时均大于非手术侧（P＜0．05），5d时无显著差异（P＞0．05），11d时小于非手术侧（P＜0．05），即手术侧L5、L7Ⅱ板层灰度值随时间推移而显著减小。结果表明，手术侧L6Ⅱ板层NGF含量在三个时间组均有增加；而L5、L7Ⅱ板层NGF含量在3d时下降，5d恢复，11d增多．这种内源性NGF含量的变化可能与部分去背根脊髓Ⅱ板层的可塑性变化有关．

猫脊髓SP可塑性终末在腰骶背根全切后板层Ⅱ的变化

目的：探讨猫单侧腰骶背根全切后SP可塑性终末的改变。方法：成年雄性猫，分为急性组和慢性组，动物深麻，经灌注固定后取脊髓腰6节段做SP光镜和电镜免疫组织化学分析。结果：SP在对照侧主要分布于背角Ⅱ板层，急性组与慢性组手术侧背角SP免疫反应均明显弱于对照侧，其中以Ⅱ板层最为突出；慢性组手术侧SP免疫反应强度下降的幅度小于急性组。结论：电镜下观察到的SP终末就是光镜下SP在慢性组回升的结构基础。

海绵窦三角的显微外科解剖

目的：了解海绵窦（Ｃａｖｅｍｏｕｓｓｉｎｕｓ，ＣＳ）有关的三角的显微解剖，为ＣＳ病变直接手术提供安全术入路。方法：２０例成人头部标本，在显微镜下对ＣＳ颅内三壁有关三角进行解剖观察和测量。结果：ＣＳ上壁内有前内侧三角、内侧三角、颈动脉三角和动眼三角；外壁内及其附近有旁内侧三角、Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ三角、Ｍｕｌａｎ三角、外侧三角、Ｇｌａｓｓｃｏｃｋ三角和Ｋａｗａｓｅ三角：后壁上有下外侧三角和下内侧三角。结论：ＣＳ三角为其病变直接手术提供既不损伤重要神经血管又能进入ＣＳ内的安全手术入路。

载脂蛋白E基因敲除及高脂饮食小鼠皮质额叶区形态学及Mortalin表达的变化

目的观察载脂蛋白E基因敲除(ApoE KO)及高脂饮食(HF)后小鼠额叶区形态学及Mortalin蛋白表达变化,以进一步探讨ApoE异常导致阿尔茨海默病及记忆损伤的可能机制。方法 10只野生型小鼠予普通饲料喂养作为对照(C)组,10只ApoE KO小鼠予普通饲料喂养作为KO组,10只ApoE KO小鼠予高脂饲料喂养作为KO-HF组。小鼠造膜成功后称重,取血检测血脂,取小鼠脑组织石蜡包埋切片,分别进行HE染色、尼氏染色、免疫组化染色及计算机图像分析。结果 KO组体质量、总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇含量与C组相比明显升高,KO-HF组升高更明显(P<0.05);KO组及KO-HF组小鼠大脑皮质额叶神经元内尼氏体平均光密度值较C组减少,Mortalin平均光密度值较C组升高(P<0.01)。结论 ApoE KO及HF可致额叶区神经元内尼氏体减少,Mortalin蛋白表达上调,该蛋白可能与ApoE异常导致阿尔茨海默症认知功能障碍有着密切的关系。

MRI评价正常人视交叉及其前间隙的解剖结构

目的通过MRI研究活体视交叉及其前间隙的立体形态,并测量相关参数。方法对160名健康志愿者行视交叉区T1W MP-RAGE、T2W TSE序列扫描;采用MPR技术测量视神经颅内段、视交叉各径线长度、各角度、视神经与垂体柄夹角。比较男女、视神经颅内段左右侧之间及各年龄段间的差异。结果视神经颅内段长度左侧为(18.23±3.12)mm,右侧为(17.27±3.31)mm(t=0.27,P>0.05);视交叉前间隙大致呈三角形,面积为(44.04±7.73)mm2;视交叉轴位前后径为(8.81±1.14)mm,横径为(13.78±1.22)mm,厚度为(3.73±0.41)mm,前、后角度数分别为(70.72±7.38)°、(76.74±8.49)°,左、右侧角度数分别为(123.03±9.42)°、(124.18±10.31)°;视交叉与垂体柄的夹角为(46.54±10.29)°。男女间测量结果差异无统计学意义(P均>0.05)。各年龄段左右视神经颅内段、视交叉前后径、横径及厚度差异有统计学意义(P均<0.05);视交叉各角、视交叉与垂体柄夹角、视交叉前间隙面积间差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 MR成像及其后处理技术可清晰显示视交叉及其前间隙的立体形态,建立正常人群相关参数的标准参考值,可为临床诊断及手术提供基本影像学依据。

视交叉前间隙的显微解剖

目的 探讨视交叉前间隙的显微结构特征及手术意义。方法 在显微镜下观测 15个尸颅的视交叉前间隙。结果 视交叉前间隙大致呈三角形 ,外后边为视神经内侧面 ,长度 1cm ;前边为蝶棱和镰状皱襞后缘 ,长度 12 .7mm。三角的高为 9.2mm。有蛛网膜结构封闭间隙开口 ,可能还与下方的纤维网相连。少数前交通动脉复合体充满该间隙 ,还可有小动脉途经间隙。结论 视交叉前间隙是鞍区手术的重要通路 ,视交叉的位置影响其大小。封闭间隙的蛛网膜更有特别意义 ,尤其在内窥镜手术中。

高碘诱导小鼠海马组织NOS阳性神经元凋亡

目的观察高碘喂养小鼠海马组织一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)阳性神经元的变化,探讨高碘对小鼠中枢神经系统损害及行为学的影响。方法选择昆明种初断乳健康小鼠50只(雌雄各25只),随机分为适碘及高碘2组,适碘组小鼠喂碘浓度为50μg/L蒸馏水,高碘组小鼠喂碘浓度为5 000μg/L的蒸馏水各180d,做Morris水迷宫行为学测试,再用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶[nicotinamide adenine dinucleotide phosphate(NADPH)-diaphorase,NADPH-d]组织化学染色法观察小鼠海马组织NOS阳性神经元的改变。结果高碘组小鼠海马组织NOS阳性神经元密度较适碘组明显降低,染色变浅;在行为学测试中,小鼠逃避潜伏期明显延长。结论高碘组小鼠海马组织NOS阳性神经元减少及染色变浅,为高碘喂养可对小鼠中枢神经系统造成损害提供了病理依据。

人胎脑组织Nestin阳性表达及其意义

目的观察人胎脑组织有无神经巢蛋白(Nestin)阳性细胞存在。方法收集胎龄为3个月左右的自愿终止妊娠引产的正常胚胎3例。应用苏木精-伊红染色和免疫组织化学方法观察人胎脑室管膜下区、海马、纹状体、丘脑、嗅球、皮质、脑干及小脑的Nestin阳性细胞。结果分别在人胎脑室管膜下区、海马、纹状体、丘脑、嗅球、皮质部位发现数量不等的Nestin阳性表达细胞,而在脑干、小脑未发现Nestin阳性细胞。结论人胎脑室管膜下区、海马、纹状体、丘脑、嗅球、皮质多个部位存在数量不等的神经干细胞。

杏仁核簇一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元的分布

采用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法，观察了ＮＯＳ阳性神经元在大国杏仁核簇内的分布和形态特征。结果表明，杏仁核簇的大部分核团都含有ＮＯＳ阳性神经元。其中，杏仁前区、杏仁基底核外侧部、杏仁基底核内侧部、杏仁外侧核后部、杏仁皮质核和杏仁内侧核均观察到较多的ＮＯＳ阳性神经元；杏仁外侧核前部和杏仁中央核也见到少量ＮＯＳ阳性神经元。

大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的观察

应用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法研究脑室系统的一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性触液神经元。结果发现，ＮＯＳ阳性触液神经元主要见于第三脑室。根据胞体所在位置，第三脑室ＮＯＳ阳性触液神经元可有３种形式：（１）室管膜内触液神经元；（２）室管膜下或远位触液神经元，其突起伸入第三脑室室管膜上皮之间，这些ＮＯＳ阳性触液神经元有的来自室旁核或室周核；（３）室管膜上触液神经元，其胞体位于室管膜表面。本文首次报道了第三脑室ＮＯＳ阳性触液神经元，这种触液神经元的分布类型基本和其他递质触液神经元相类同，并讨论了ＮＯＳ阳性触液神经元的功能。