神经分泌素对体外培养血管平滑肌细胞VCAM、MCP-1和Ki67表达的影响

目的观察神经分泌素(Secretoneurin,SN)对体外培养血管平滑肌细胞(vascular smoothmuscle cells,VSMC)粘附分子(VCAM)、单核细胞趋化因子(MCP-1)和Ki67(细胞增殖标记物)表达的影响。方法将体外培养的成年大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞随机分成正常对照组和SN实验组,应用免疫荧光细胞化学技术检测VCAM、MCP-1和Ki67的表达,Nikon共聚焦显微镜观察并拍照,图片用EZ-C1 3.70 FreeViewer进行处理。结果免疫荧光显示,正常对照组VCAM和MCP-1表达微弱,Ki67阳性细胞很少;SN作用24 h后,VCAM、MCP-1的表达和Ki67的阳性细胞数目明显增多。其中VCAM-1、MCP-1的免疫细胞荧光强度和Ki67的阳性细胞率在两组间差异有显著性(P<0.05)。结论SN可上调粘附分子和单核趋化因子的表达,同时促进血管平滑肌细胞的增殖。

大鼠肝微血管内皮功能的测定

目的探索建立测定大鼠肝微血管内皮功能的方法。方法取健康雄性Wistar大鼠24只随机分为假手术组(Sham)、肝缺血1 h、2 h和3 h组(OPT 1 h,OPT 2 h,OPT 3 h),于再灌注后不同时间分别测定各组大鼠肝微循环血流变化,以局部加热刺激试验和阻断后反应性充血(post occlusive reactive hyperemia,PORH)试验分别评价肝微血管内皮功能。结果正常大鼠肝微循环血流基线值为(198.30±8.98)PU,局部加热刺激后血流增加至(239.30±9.84)PU;PORH试验的基线、阻断后和反应性充血后的微循环血流值分别为(204.40±11.80)PU、(94.43±29.26)PU和(268.90±22.16)PU。大鼠肝经历不同时间的缺血和再灌注后,OPT 1 h、OPT 2 h和OPT 3 h组的加热刺激试验各血流值均显著低于Sham组(P<0.05),且OPT 3h组显著低于OPT 1 h组(P<0.01)和OPT 2 h组(P<0.05)。计算各组各时间点加热后的血流增加量?PU,结果表明OPT1 h组在再灌注60 min和90 min时的?PU值分别为(57.33±4.63)PU和(50.30±1.76)PU,明显高于Sham组的(31.40±4.80)PU和(30.00±4.41)PU(P<0.05)。OPT 3 h组在再灌注60 min时的?PU为(18.00±4.66)PU,明显低于Sham组和OPT 1 h组(P<0.05)。Sham、OPT 1 h、OPT 2 h和OPT 3 h组PORH试验的PF-BZ值分别为(187.32±15.00)PU、(144.90±9.94)PU、(91.31±4.48)PU和(26.92±9.43)PU,其中OPT 2 h组和OPT 3 h组的PF-BZ值显著低于Sham组和OPT 1 h组的相应值(P<0.05),且OPT 3 h组低于OPT 2 h组的相应值(P<0.05)。结论大鼠肝微血管具有对局部加热刺激和PORH作出反应的能力;严重的肝缺血再灌注损伤可导致肝微血管内皮功能障碍,而局部加热刺激试验和PORH试验可以用于评价肝微血管内皮功能。