肾脏IVIM最佳水化状态及稳定性、可重复性研究

目的探讨行肾脏体素内不相干运动成像(intravoxel incoherent motion,IVIM)检查的最佳水化状态,并分析检查结果的稳定性和可重复性。方法选取健康成年人志愿者40例,每例志愿者均分别在禁饮食12 h、禁饮食4 h及水利尿三种状态下行肾脏IVIM检查;其中36例志愿者在间隔半年后,在禁饮食4 h状态下重复行肾脏IVIM检查。结果三种不同水化状态下,肾皮质(F=1.870,P=0.163)及髓质(F=0.579,P=0.562)D值间的差异无统计学意义,肾皮质(F=0.188,P=0.829)及髓质(F=0.008,P=0.992)D*值间的差异均无统计学意义,肾皮质(F=1.317,P=0.216)及髓质(F=0.336,P=0.715)f值间的差异均无统计学意义。结论水化状态不影响肾脏IVIM的检查结果,肾脏IVIM检查有很高的稳定性和可重复性;肾脏IVIM检查可以监测正常肾脏的微循环状态及血流灌注状态。

小窝的作用机制及其影响通路

小窝(Caveolae)作为跨细胞途径的重要组成部分,在不破坏细胞稳态的基础上,实现物质的跨细胞转运。在肾脏中,血清大分子物质如白蛋白通过小窝穿越肾小球滤过屏障。白蛋白的跨细胞运输在蛋白尿的病理学中起到至关重要的作用,其中小窝的重要性也不言而喻。然而,肾脏中小窝影响白蛋白跨细胞运输的作用机制及其信号通路在很大程度上仍然未知。本文总结了近年来小窝影响白蛋白跨细胞运输的调控研究,了解其相关作用机制与影响通路可能在预防和减轻蛋白尿中提供潜在的治疗靶点。

增强CT参数在肾脏恶性肿瘤诊断及病理评估中的应用

目的 探究增强CT参数在肾脏恶性肿瘤诊断和病理评估中的应用价值。方法 以本院2019年2月至2023年2月收治的65例肾脏肿瘤患者为研究对象,回顾性分析其增强CT检查结果及病理学诊断结果,比较肾脏良恶性肿瘤患者的增强CT参数差异,建立受试者工作特征曲线(ROC),评价增强CT参数对肾脏良恶性肿瘤的诊断价值。结果 65例肾脏肿瘤患者经病理学诊断恶性55例、良性10例,分别纳入恶性组、良性组;恶性组平扫期灰度值比率、皮髓质期和实质期增强百分比显然比良性组高,排泄期肾皮质校正CT值显然比良性组低(P<0.05);ROC曲线分析显示平扫期灰度值比率、皮髓质期与实质期增强百分比、排泄期肾皮质校正CT参数于肾脏恶性肿瘤诊断中的曲线下面积(AUC)分别为0.702、0.940、0.873和0.715(均P<0,0)5,其中皮髓质期增强百分比的AUC最高,以199.86为截断值,于肾脏恶性肿瘤诊断中的灵敏性、特异性分别为98.18%、80.00。结论 在增强CT扫描图像中,平扫期灰度值比率、皮髓质期与实质期增强百分比、排泄期肾皮质校正CT参数对于肾脏恶性肿具有较好的诊断效能,尤其是皮髓质期增强百分比的效能最高,在特异性上的优势值得临床重视。

陈宝贵教授治疗味觉异常的临证思辨

味觉异常作为临床疑难病,虽不会对患者健康造成严重影响,但也困扰着人们的生活和工作,随着社会的发展和人们对健康问题的关注,味觉异常也日益受到重视。西医对味觉异常无明确的发病机制及诊断,陈宝贵教授则从五神脏理论出发,辨证寒热虚实,在治疗味觉异常上有一定的临床参考价值。

1,25(OH)_(2)VD_(3)对血管紧张素Ⅱ诱导的足细胞内质网应激的抑制作用

目的探讨1,25(OH)_(2)VD_(3)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的足细胞内质网应激的影响,为临床上应用骨化三醇治疗足细胞损伤产生的蛋白尿提供理论依据。方法体外培养小鼠足细胞系(MPC5),随机分为对照组、AngⅡ组(10^(-6)mol/L的AngⅡ)、1,25(OH)_(2)VD_(3)组[10^(-6)mmol/L的AngⅡ+10^(-8)mol/L的1,25(OH)_(2)VD_(3)]。各组均在给药处理6、12、18、24 h后收集细胞,分别应用实时定量PCR、免疫荧光技术检测不同时间点各组样本中葡萄糖调节蛋白(GRP78)及蛋白激酶样内质网激酶(PERK)的mRNA表达量和蛋白表达情况。结果与对照组比较,AngⅡ组GRP78、PERK mRNA表达量在各个时间点均显著增加(P<0.01)。与AngⅡ组比较,1,25(OH)_(2)VD_(3)组GRP78、PERK mRNA表达量在各个时间点均显著降低(P<0.01或<0.05),相应的GRP78、PERK蛋白表达均较低。AngⅡ组给药处理12 h后GRP78、PERK mRNA表达量较6 h mRNA表达量均显著增加(P<0.01);AngⅡ组给药处理18 h后GRP78、PERK mRNA表达量较12 h mRNA表达量均显著增加(P<0.01,P<0.05)。结论AngⅡ可以诱导足细胞发生内质网应激,其发生强度与药物作用时间有关,而1,25(OH)_(2)VD_(3)能通过抑制AngⅡ诱导的足细胞内质网应激,起到保护足细胞的作用。

益肾十七味丸对肾间质纤维化大鼠肾脏的保护作用及机制

目的 探讨益肾十七味丸对大鼠肾间质纤维化的改善作用及机制。方法 选取SD雄性大鼠50只,按体质量随机分为假手术组,单侧输尿管梗阻(UUO)组,益肾十七味丸小、中、大剂量组,每组10只,连续灌胃给药21 d,采用HE染色观察大鼠肾组织病理变化,测定大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、24 h尿白蛋白(ALB),测定肾组织匀浆SOD活力、MDA、HYP、COL-IV、COL-III、HA、LN、IL-6和IL-1β含量,Western Blot分析肾组织TGF-β1和Smad3蛋白的表达。结果 与假手术组相比,UUO组血清BUN、Scr、24 h尿白蛋白水平显著升高(P<0.01),肾小球形态不规则,球囊相连,肾小管融合成空洞或萎缩;肾组织匀浆外基质相关蛋白HYP、COL-IV、COL-Ⅲ、HA、LN含量显著升高(P<0.01);肾组织匀浆MDA含量明显升高、SOD活力明显降低,炎性因子IL-6和IL-1β含量明显升高;肾组织中TGF-β1和Smad3蛋白显著升高(P<0.01);与UUO组比较,益肾十七味丸各治疗组BUN、Scr、ALB降低(P<0.01),肾小球形态规则,肾小管结构较清晰,肾间质病变轻,肾组织匀浆MDA、HYP、COL-IV、HA、LN、IL-6和IL-1β含量均明显降低(P<0.05),SOD活力显著升高,TGF-β1和Smad3蛋白表达显著降低(P<0.05),且高剂量组效果优于低剂量组。结论 蒙药益肾十七味丸可明显改善大鼠肾间质纤维化,机制可能与通过调节TGF-β1-Smad3信号通路减轻氧化应激、炎症及纤维化相关蛋白有关。

白藜芦醇干预白蛋白诱导人近端肾小管上皮细胞HK-2细胞焦亡相关蛋白的表达

背景:白藜芦醇有肾脏保护作用,但其对蛋白尿负荷的肾小管上皮细胞炎性损伤的保护机制尚不明确。目的:探究白藜芦醇对白蛋白诱导的人近端管上皮细胞HK-2细胞焦亡相关蛋白表达的影响。方法:采用白蛋白诱导HK-2细胞炎性损伤,分别使用白藜芦醇、SIRT1抑制剂EX527进行预处理,MTT法检测细胞活力,Western blot检测SIRT1、NLRP3、ASC、caspase-1的蛋白表达,免疫荧光双染观察NLRP3和ASC在肾小管的共定位,Hoechst33342/PI染色法观察细胞焦亡情况,ELISA检测细胞上清中炎症因子白细胞介素1β和白细胞介素18水平。结果与结论:(1)白蛋白减低HK-2细胞活力,显著升高白细胞介素1β、白细胞介素18水平和NLRP3炎性小体蛋白表达(P <0.01),增加细胞焦亡;(2)白藜芦醇可显著提高HK-2细胞中SIRT1蛋白表达(P <0.01),显著降低NLRP3、ASC和caspase-1蛋白表达(P <0.05)及白细胞介素1β、白细胞介素18水平(P <0.01),减少细胞焦亡;(3)SIRT1抑制剂可显著提高NLRP3炎性小体的表达,增加细胞焦亡;(4)结果表明,白藜芦醇调节HK-2细胞焦亡相关蛋白改善白蛋白诱导的肾小管上皮细胞炎性损伤。

肾小管顶端膜ROMK通道的功能及调控

肾外髓钾通道(renal outer medullary potassium channel,ROMK)是内向整流钾通道超家族成员,介导肾小管上皮细胞内K+向小管腔的转运,在维持机体钾稳态方面发挥重要作用。其编码基因突变可引起肾功能受损,呈现以K+代谢紊乱为特点的II型Bartter's综合征,故ROMK通道功能状态的改变可造成机体水、电解质和血压等内环境稳态被破坏。本文旨在概述近年肾小管顶端膜ROMK通道的相关研究进展,重点阐述ROMK通道的功能及其活性调控,以期为临床离子代谢紊乱等病症的预防和治疗提供新思路。

连续性肾脏替代治疗与普通血液透析治疗慢性肾病合并心力衰竭临床作用的异同

目的:探讨连续性肾脏替代治疗(CRRT)与普通血液透析治疗慢性肾病(CKD)合并心力衰竭临床作用的异同。方法:选取2019年4月—2020年9月广州市番禺区何贤纪念医院收治的53例CKD合并心力衰竭患者,按照随机数表法将分为两组,对照组26例给予普通血液透析治疗,观察组27例给予CRRT治疗,观察两组患者心功能和肾功能。结果:治疗后,观察组6分钟步行距离(6 MWD)长于对照组,左室射血分数(LVEF)高于对照组,左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)低于对照组;尿素氮(BUN)、血肌酐(sCr)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys-C)低于对照组,差异有统计学意义(t=3.278、3.251、4.907、21.271、3.754、4.847、2.938,P<0.05)。结论:CRRT治疗CKD合并心力衰竭,可更好地调节该类患者心功能以及肾功能。

过表达APMAP减轻阿霉素肾病肾小球足细胞损伤

目的探讨脂肪细胞膜相关蛋白质(APMAP)过表达对阿霉素(ADR)肾病肾小球足细胞损伤的影响。方法采用尾静脉注射ADR构建阿霉素肾病大鼠模型,免疫组化观察肾组织中APMAP、NF-κB p65蛋白表达情况。构建APMAP基因过表达的鼠源肾小球足细胞MPC-5细胞株,并以0.5μmol/L ADR体外诱导构建足细胞损伤模型,再联合NF-κB信号通路激活剂CU-T12-9进行处理。CCK-8检测细胞增殖活性;ELISA检测乳酸脱氢酶(LDH)活性;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测NF-κB p65、p-NF-κB p65、TNF-α等蛋白表达。结果APMAP在阿霉素肾病大鼠肾组织中低表达,而NF-κB p65高表达(P<0.05)。APMAP过表达可提高ADR暴露下MPC-5细胞增殖活性,降低LDH活性及细胞凋亡率,下调NF-κB p65、p-NF-κB p65、TNF-α等蛋白表达(P<0.05);联合CU-T12-9处理可显著抑制APMAP过表达对ADR暴露下MPC-5细胞损伤的改善作用。结论过表达APMAP可抑制ADR诱导的肾小球足细胞损伤,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路激活有关。

放射性核素肾动态显像测定肾移植供体肾小球滤过率

目的评价放射性核素肾动态显像测定潜在肾移植供体(正常人)肾小球滤过率(GFR)的准确性。方法 对45名受检者行放射性核素肾动态显像和双血浆法测定肾脏GFR,以双血浆法为标准比较二者测定结果。结果 放射性核素肾动态显像测得的GFR(gGFR)与双血浆法测得的GFR(tGFR)高度相关(r=0.88,P<0.01),直线回归方程为gGFR=0.66tGFR+21.78,gGFR落在tGFR±15%、tGFR±30%和tGFR±50%范围内的受检者百分比分别为60.78%,89.56%和100%,gGFR与tGFR的偏差中位数为-1.23ml/1.73(m2.min),绝对偏差中位数分别为10.78ml/1.73(m2.min)。结论 在肾移植供体的筛选过程中,放射性核素肾动态显像可以提供准确的总肾及分肾GFR。

荧光探针法测定原代培养家兔肾脏内髓集合管细胞内pH

目的：建立稳定的原代培养肾脏内髓集合管（ Ｉｎｎｅｒ ｍ ｅｄｕｌｌａｒｙ ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｇ ｄｕｃｔ， Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ）细胞的ｐ Ｈｉ测定方法，为进一步研究 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞功能奠定基础。方法：将家兔肾脏 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞用盖玻片培养成细胞单层，制备 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞ｐ Ｈｉ标准曲线，然后测定 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞的 Ｂ Ｃ Ｅ Ｃ Ｆ／ Ａ Ｍ 的荧光强度比值（ Ｆ Ｉ Ｒ），进而将 Ｆ Ｉ Ｒ转换为 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞的ｐ Ｈｉ。结果：本实验观察到 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞的 Ｆ Ｉ Ｒ在ｐ Ｈ ６．８～７．８ 范围内呈显著正相关，回归方程为 Ｙ＝ ０．８４８±１．０８９ Ｘ（ｒ＝ ０．９８８， Ｐ ＜ ０．０１）。１５ 份标本的ｐ Ｈｉ结果为７．２５５±０．０３０，与 Ｍａｎｋｕｓ等报告的结果最接近。结论：以上结果表明 Ｂ Ｃ Ｅ Ｃ Ｆ／ Ａ Ｍ 荧光探针法测定 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞的ｐ Ｈｉ，具有简单、可靠、经济等优点， Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞ｐ Ｈｉ测定是研究 Ｉ Ｍ Ｃ Ｄ细胞功能的基础测定之一。

衰老大鼠肾脏肾素-血管紧张素系统的变化及缬沙坦的调控作用

为观察老年肾脏肾素-血管紧张素系统（RAS）随增龄的改变及长期应用血管紧张素Ⅰ1型受体拮抗剂（AT1RA）后的影响,将雄性Wistar大鼠分为青年组、老年组及缬沙坦治疗组,测定肾素、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平、AngⅡ受体AT1aR mRNA、AT1bR mRNA及AT1R mRNA的表达。结果发现,与青年组比较,老年大鼠血浆肾素、AngⅡ水平明显下降,肾组织AngⅡ则明显升高,应用缬沙坦后肾组织AngⅡ水平进一步升高;老年大鼠肾脏AT1aR mRNA、AT1bR mRNA表达下调,AT2R mRNA表达则上调,应用缬沙坦可上调AT1aRmR-NA,但对AT1bRmRNA及AT2RmRNA表达无影响。研究表明,老年大鼠肾脏局部AngⅡ水平升高,两型ATR的基因表达与青年鼠相比则发生了不同改变;缬沙坦使老年大鼠肾组织AngⅡ水平升高,同时阻断了AT1R的作用,而AT2RmRNA水平未发生改变,有利于加强AT2R的作用。

急性肾衰竭家兔脾组织形态以及髓过氧化物酶和细胞膜泵活性的变化

目的:观察急性肾功能衰竭(ARF)家兔脾组织形态以及髓过氧化物酶(MPO)和细胞膜泵(ATPase)活性的变化,探讨脾在ARF免疫功能紊乱发病学中的作用。方法:42只家兔均分为对照组、HgCl2组、甘油组。其中HgCl2组以皮下注射1%HgCl2(1.3mL/kg)、甘油组以肌肉注射50%甘油(10mL/kg)分别复制ARF模型,均分为12h、24h、48h3个亚组。在不同时点,所有动物颈总动脉插管放血备检,测定血清反映肾功能的生化指标;制备脾组织切片,观察脾组织形态;并制备10%脾组织匀浆,检测MPO和ATPase活性。结果:模型组各时点的脾组织均有不同程度的淤血、脾小梁增多。HgCl2组与甘油组各时点的脾组织匀浆MPO活性均显著高于对照组,2组24h的MPO活性高于组内12h及48h;HgCl2组与甘油组在多个时点的Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性均显著低于对照组,且随时间延长,各ATPase有逐渐降低的趋势,除甘油组的Mg2+-ATPase外,各组48h的ATPase均低于12h。结论:家兔ARF发展过程中,脾脏有组织学损伤,且存在中性粒细胞扣押、细胞膜泵活性降低,这可能是脾作为免疫器官导致ARF免疫功能紊乱的原因之一。

正常成人肾脏磁共振扩散加权成像研究

目的通过测量正常成人肾脏磁共振扩散加权成像(DWI)时的表观弥散系数(ADC)值,为肾脏病变患者在DWI成像时提供正常对照标准。资料与方法20例健康志愿者均行MRI常规平扫及DWI成像,DWI成像时b值分别采用0s/mm2、200s/mm2、500s/mm2、800s/mm2、1000s/mm2。结果不同b值下双侧肾脏皮髓质ADC值及双侧肾脏平均ADC值差异有统计学意义(F=57.863～240.324,P=0.000),双侧肾脏皮髓质ADC值及平均ADC值均高于肝、脾及胰腺ADC值。双侧肾脏皮质在不同b值下的ADC值均高于髓质,差异有统计学意义(t=8.436～20.281,P=0.000)。左侧肾脏皮、髓质ADC值及平均ADC值在b=500s/mm2、b=800s/mm2及1000s/mm2时均高于右侧,差异有统计学意义(b=800s/mm2时t=2.023,P=0.048;其余P=0.000)。b=200s/mm2时双侧肾脏皮、髓质ADC值及平均ADC值之间差异无统计学意义(t=1.739,P=0.098;t=0.704,P=0.490;t=-0.314,P=0.757)。结论正常成人肾脏ADC值在不同b值下有差异,双侧肾脏平均ADC值亦存在差异。

超声造影监测缺血再灌注损伤兔肾皮质血流动力学改变的实验研究

目的:采用超声造影(CEUS)定量分析技术动态监测肾缺血再灌注损伤(Renal ischemia reperfusion injury,RIRI)后兔肾皮质血流灌注的改变。方法:54只家兔随机分为正常对照组,肾缺血后再灌注第2 h组、第16 h组、第24 h组、第3 d组、第5 d组。行CEUS并应用时间-强度曲线测量灌注峰值时间(TTP)、曲线上升支斜率(β)、灌注峰值强度(A)、曲线下面积(AUC),观察各参数的变化并分析与病理改变的相关性。结果 :肾缺血恢复灌注后各组与对照组相比TTP值增加,β值降低,AUC增大(P<0.05);缺血再灌注组各组间TTP、β有统计学差异,其中恢复灌注后第3d的TTP的延长和β的下降最为显著(P<0.01)。A值在RIRI后第16 h,24 h,3 d较对照组降低(P<0.05),第3d最为显著(P<0.01)。结论 :CEUS定量分析技术能在缺血再灌注损伤发生后早期发现肾皮质血流灌注的异常,肾缺血再灌注损伤早期即发生肾皮质微循环障碍,在第3 d肾皮质微循环灌注受损最为严重,度过这一"危险期",肾皮质微循环受损得以改善,CEUS定量分析技术能敏感反映这一过程。

棓丙酯对糖尿病肾病肾小球内皮细胞增殖抑制的机制

目的探讨棓丙酯对糖尿病肾病肾小球病变的保护作用及其机制。方法将SD大鼠分为正常对照组、模型组和治疗组,应用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病肾病模型,治疗组腹腔注射棓丙酯溶液。PAS染色评价肾小球病理变化,免疫荧光检测肾小球内皮细胞增殖和血管增生程度,RT-PCR和Western印迹检测肾小球血管内皮生长因子(VEGF)-A的表达水平。结果模型组在肾小球内皮细胞增殖和白蛋白尿方面均较正常对照组显著增加,但在治疗组这些指标均明显好转。模型组内皮增生的程度与白蛋白尿的程度正相关。在蛋白和mRNA水平上,模型组肾小球VEGF-A的表达明显升高,而在治疗组这种升高被显著抑制。结论糖尿病肾病大鼠肾小球内内皮细胞增殖明显,内皮增生可能是蛋白尿形成的结构基础,棓丙酯可抑制这种内皮增殖从而对糖尿病肾病发挥保护作用。

肾脏固有细胞的表型转化特征及其病理生理意义

Increasing evidence has proved that phenotypic changes occured in residential renal cells during the process of renal diseases. The phenotypic change of mesangial cell plays a key role in the development of glomerular sclerosis, while the phenotypic changes of tubulo-interstitial cells have close relationship with the progress of interstitial fibrosis. Understandings of these phenotypic changes and their regulations may help us know better of the mechanism of renal diseases and find out ways to block the disease development.

CHIP调节UUO再通大鼠肾组织TGF-β1/Smads信号通路的研究

目的:利用基因芯片研究Carboxyl terminus of Hsc70-interacting protein(CHIP)对肾间质纤维化TGF-β1/Smads信号通路的抑制性调节。方法:将18只SPF级SD大鼠中6只行unilateral ureteral occlusion(UUO)模型,6只植入弹性管脂肪垫加压梗阻,7天后再通定为reverse of unilateral ureteral occlusion(RUUO)组,6只UUO在7天处死留取左肾组织,另外6只为假手术组。6只RUUO大鼠在再通7天后处死,留取左侧肾组织,运用West-ern blotting检测肾组织CHIP的表达,免疫组化检测肾组织中α-SMA、CD68的阳性表达面积,定制芯片研究TGF-β1/Smads信号通路的基因变化。结果:UUO组TGF-β1、smad2、smad3、COL1a2、JunB基因显著上调,和假手术组比较上调超过1.5倍,肾组织中的α-SMA、CD68表达面积和假手术组比较有显著统计学意义P<0.01。而RUUO组CHIP表达量较UUO组更是显著增强P<0.01,TGF-β1、smad2、smad3、COL1a2、JunB基因显著下调,和UUO组比较下调超过1.5倍,肾组织中的α-SMA、CD68表达面积减小和UUO组比较有显著统计学意义P<0.01。结论:发现CHIP的过量表达能显著降低细胞内,TGF-β1、Smad2/3、COL1a2、JunB基因水平,Western blot结果也表明CHIP蛋白表达能明显降低Smads介导的基因转录活性,进一步的基因芯片结果显示CHIP蛋白能明显下调TGF-β1所诱导的下游基因JunB的表达。结果提示CHIP蛋白能抑制性调节TGF-β1/Smads信号通路,抑制肾纤维化。