种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物对大鼠坐骨神经缺损的修复作用

目的观察种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物,桥接大鼠坐骨神经缺损后的神经再生。方法应用酶反复消化法与差速贴壁法体外分离培养乳鼠施万细胞;显微注射法将施万细胞种植到脱细胞同种异体神经移植物内;再应用种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经10 mm缺损。光镜、透射电镜和扫描电镜观察再生神经的形态结构、有髓神经纤维数量、平均髓鞘厚度并进行统计学分析。结果光、电镜观察到实验组(SCs+ARSN)的施万细胞在再生神经纤维中互相连结纵行排列成类似Büngner带样细胞链,对照组(ARSN)未见到施万细胞的链状排列。实验组再生有髓神经纤维的髓鞘厚度较对照组均匀且较厚,有髓神经纤维数量和平均髓鞘厚度明显多于对照组(P<0.05)。结论种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物对缺损的坐骨神经再生有更加有效的促进作用。

内脏伤害性传入信息向三叉神经脊束间质核的投射

舌咽、迷走神经向三叉神经脊束间质核的投射纤维除传递非伤害性内脏信息者外是否也含内脏伤害性传入？尚未见报道。本文综合应用：（1）福尔马林刺激舌咽、迷走神经支配的一些内脏诱导FOS蛋白表达；（2）抽除外周神经节观察三叉神经脊束间质核内一些与伤害性信息传递有关的神经递质的变化；（3）运用荧光金逆行追踪与免疫组化相结合的双重反应等方法，对大鼠投射至三叉神经脊束间质核的舌烟、迷走神经初级传入纤维中是否含传递伤害性刺激信息的成分进行了研究。结果证明：(1)2％福尔马林刺激大鼠软腭、咽、食道和胃后，三叉神经脊束间质核内有大量FOS阳性神经元表达，这些阳性神经元与舌咽、迷走神经初级传入分布区基本一致。（2）抽除一侧舌咽、谈走神经报及其神经节后，术侧三叉神经脊束间质核内SP、CGRP等和痛传递有关的神经肽及BSI-B_4阳性终末与对侧比较明显减少。（3）荧光金微量注入三叉神经脊束间质核后，在舌咽、迷走神经节的下节内发现被荧光金逆标的细胞中分别有10％和12％呈SP、CGRP阳性，此两种双重阳性细胞分别占SP、CGRP阳性细胞的33．3%和278％。以上结果提示，三叉神经脊束间质核接受舌咽、迷走神经的传入纤维中有一部分传递内脏伤害性信息。

大鼠尺神经功能储备的实验研究

目的研究尺神经部分束支切取后主干功能变化,提出"周围神经功能储备"的概念,探讨其功能储备量。方法取3月龄SD大鼠220只,雌雄各半,体重300～350g。随机分为实验组和对照组(n=110),再根据尺神经切取比例将实验组分为1/8组、1/4组、1/3组、1/2组和2/3组(n=22)。根据分组情况,各实验组在10倍手术显微镜下,用微细玻璃针交叉定位的方法切取相应比例尺神经束;对照组于相同平面仅分离神经束。观察术后大鼠一般情况,于术后1、2周及2个月检测脊髓前角α运动神经元;术后2周,2、3及4个月,行电生理学及支配肌功能学检测。结果术后大鼠均存活至实验完成,切口无感染,肢端无明显溃疡。各实验组间脊髓前角α运动神经元数量无明显变化(P>0.05)。1/2组和2/3组于术后1周及2周的超微结构变化明显,其他各组变化不明显;术后2个月后各组均恢复正常。术后各时间点,各实验组诱发电位潜伏期与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);各实验组同组术后2、3及4个月诱发电位潜伏期与术后2周比较,差异有统计学意义(P<0.05),其余各时间点间差异无统计学意义(P>0.05)。术后各时间点,各实验组诱发电位波幅、支配肌最大强直收缩力波幅和持续时间分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);各实验组同组术后2、3及4个月分别与术后2周比较,差异有统计学意义(P<0.05);其余各时间点间差异无统计学意义(P>0.05)。结论尺神经功能良好代偿的功能储备量为其主干直径的1/3。

精神分裂症患者工作记忆的研究

目的探讨精神分裂症患者和正常人群的工作记忆的差异以及精神分裂症患者的症状与工作记忆成绩的关系。方法采用字母版n-back实验范式中的2-back测试分别对40名精神分裂症患者和40名健康成年人进行工作记忆测试,比较两组2-back任务成绩的差异;同时对精神分裂症患者进行阳性与阴性症状量表(PANSS)评分。结果精神分裂症患者组工作记忆的成绩正确率(0·67±0·1)和反应时(0·97s±0·12s)与正常对照相比(分别为0·86±0·08、0·75s±0·07s)差异均有显著性(P<0·01)。精神分裂症患者的工作记忆成绩正确率与精神症状之间不相关;而反应时与PANSS总分、妄想症状评分、幻觉症状评分、一般精神症状评分、阳性症状评分以及阴性症状评分之间的相关性有统计学意义(分别为r=0·847,P<0·001;r=0·797,P<0·001;r=0·826,P<0·001;r=0·809,P<0·001;r=0·501,P=0·001;r=0·366,P=0·028)。结论精神分裂症患者的工作记忆明显受损;精神症状对精神分裂症患者工作记忆的加工可能有一定的影响。

中枢去甲肾上腺素通路和前列腺素参与IL-6、TNFα对大鼠下丘脑室旁核神经元的兴奋作用

应用免疫组织化学方法研究了６羟多巴胺化学性损毁中枢去甲肾上腺素通路和中枢引入前列腺素合成抑制剂消炎痛对脑室注射白细胞介素６、肿瘤坏死因子α诱导下丘脑室旁核小细胞Ｆｏｓ表达的影响。结果显示，这两种处理均可使Ｆｏｓ表达细胞数目明显减少，说明白细胞介素６、肿瘤坏死因子诱导室旁核小细胞神经元Ｆｏｓ表达的作用与中枢去甲肾上腺素通路和中枢前列腺素有关。

皮质酮快速抑制PC12细胞乙酰胆碱诱发电流影响及机制探讨

目的和方法：本研究采用全细胞膜片箝技术，观察皮质酮（Ｂ）对ＰＣ１２细胞上乙酰胆碱诱发电流（ＩＡＣｈ）的快速作用并初步探讨其可能机制。结果：ＰＣ１２细胞上ＩＡＣｈ是通过烟碱受体（ｎＡＣｈＲ）引起的。箝制电压为－８０ｍＶ时，ＡＣｈ（３０μｍｏｌ／Ｌ）诱发一内向电流；细胞外灌流同时给予ＡＣｈ和Ｂ（１０－５ｍｏｌ／Ｌ）时，Ｂ对ＩＡＣｈ的抑制作用较弱；用Ｂ（１０－５ｍｏｌ／Ｌ）对细胞进行预处理，可提高Ｂ对ＩＡＣｈ峰值的抑制率，作用呈可逆性、浓度依赖性和非电压依赖性；细胞外用ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ（４×１０－５～４×１０－３ｍｏｌ／Ｌ）或蛋白合成抑制剂放线菌酮（１０－４～１０－３ｍｏｌ／Ｌ）孵育细胞１～２ｈ阻断基因机制，但均不影响Ｂ对ＩＡＣｈ的快速抑制作用。结论：Ｂ对ＰＣ１２细胞上ＩＡＣｈ有快速抑制作用，此作用可能是由非基因组机制介导的。

大鼠胼胝体神经元含谷氨酸和γ-氨基丁酸的免疫细胞化学证据

本文采用HRP逆行示踪与谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)免疫细胞化学结合法对Wistar大鼠额叶和枕叶皮质内胼胝体神经元的化学性质进行了研究。结果显示,含Glu的胼胝体神经元为大、中型锥体细胞,主要分布于皮质Ⅱ/Ⅲ、Ⅴ和Ⅵ层,并有成群分布的倾向。同时发现含GABA的胼胝体神经元。它们为中等大小的非锥体细胞,胞体为圓形、椭圆形或梭形,绝大部分位于皮质Ⅴ和Ⅵ层,也有成群分布的倾向。含GABA的胼胝体神经元的百分比(在额叶和枕叶皮质分别约为8％在和10％)比含Glu的胼胝体神经元的百分比(在额叶和枕叶皮质分别约为17％和29％)少得多。本文从形态学上进一步证实相当一部分胼胝体神经元使用Glu作为兴奋性递质;首次证实一些胼胝体神经元含抑制性递质GABA。此外,含GABA的胼胝体神经元的存在提示,至少在大鼠大脑皮质内,一些含GABA神经元有比局部回路神经元较长的投射。结合本文和其他作者的实验结果,我们认为胼胝体系统是一个多递质系统,胼胝体系统中神经递质以及它们之间的相互作用的多样化可能是胼胝体系统具有复杂和高级神经机能的神经解剖学基础之一。

NTN/几丁质涂层的PGLA导管对兔面神经再生的影响

目的:探讨含神经营养因子NTN的几丁质涂层的PGLA神经导管在修复兔面神经缺损中的作用。方法:将24只新西兰雄兔的两侧面神经下颊支分别造成10 mm的缺损,右侧用管腔内注入NTN的几丁质涂层的PGLA导管修复,左侧用自体神经移植修复作对照。术后5、10、14周,分别对兔进行大体观察、电生理检测、组织学观察。结果:术后5周,实验侧神经传导速度未测出;术后10周和14周实验侧和对照侧的神经传导速度无显著性差异(P>0.05)。实验侧术后10周,再生神经中有髓和无髓神经纤维排列整齐,术后14周,再生神经中有髓和无髓神经纤维数量增加,形态接近正常神经。结论:含NTN的几丁质涂层的PGLA导管可为兔面神经缺损提供良好的修复环境。

大鼠骶髓后连合核神经元兴奋性氨基酸诱导的反应

应用制霉菌素穿孔全细胞电压钳技术，研究急性分离的大鼠骶髓后连合核（ＳＤＣＮ）神经元对谷氨酸受体激动剂的反应。钳制电压为－４０ｍＶ的条件下，Ｌ－谷氨酸（Ｇｌｕ），Ｎ－甲基－Ｄ－门冬氨酸（ＮＭＤＡ），使君子酸（ＱＡ），α－氨基－３－羟基－５－甲基异倾阶－４－丙酸（ＡＭＰＡ）和红藻氨酸（ＫＡ）均诱导产生内向电流。随着激动剂浓度的增高，这些电流的量效关系曲线呈典型的Ｓ型。ＥＣ５０值分别是Ｇｌｕ３．３×１０－５Ｍ，ＮＭＤＡ９．０×１０－ＳＭ，ＱＡ６．４×１０７Ｍ，ＡＭＰＡ１．３×１０－４及ＫＡｇ．６×ｕ１０－５Ｍ。Ｎｉｌｌ系数分别是Ｇｌｕ０．７４，ＮＭＤＡ０．８３，ＱＡ１．３，ＡＭＰＡ１．１和ＫＡ１．３。代谢型谷氨酸受体激动剂ｔＡＣＰＤ（１０－３Ｍ）未能诱导出电流．Ｃｙｃｌｏｔｈｉａｚｉｄｅ显著增强ＫＡ和ＡＭＰＡ诱导的反应。相反，伴刀豆球蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）对ＫＡ和ＡＭＰＡ反应作用甚微，提示ＳＤＣＮ神经元主要表达ＡＭＰＡ型非ＮＭＤＡ受体。

稀土元素对突触传递的影响

稀土元素是化学元素周期表中镧系元素、钪和钇等化学元素的总称,它们在自然界密切共生、理化性质非常相似。自1910年Mines首先发现镧对蛙心收缩的抑制效应以来,国外对稀土元素的生物效应开展了多方面的研究。1965年美国的Haley在大量动物实验的基础上阐述了稀土元素的药理及毒理作用;1974年发表的镧的细胞药理学综述,概括了镧对神经、骨胳肌、心肌、平滑肌和内分泌腺等器官和组织的药理作用。70年代以来国内也开展了这方面的研究工作。

碱性成纤维生长因子对HIBD新生大鼠脑组织VEGF表达的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对新生大鼠缺氧缺血脑损伤(HIBD)后血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及其意义。方法72只新生7日龄SD大鼠分为三组,每组24只,(1)假手术组(2)缺氧缺血组(3)bFGF干预组。制备大鼠HIBD模型后分别于即刻、3小时、12小时、24小时、3天、7天将动物处死(N=4)。采用SABC免疫组化方法检测VEGF蛋白的表达。结果假手术组海马和皮质VEGF不表达。VEGF蛋白在大鼠缺氧缺血脑损伤后的表达增强,即刻有增加,12小时达高峰持续至24小时后下降。经bFGF干预后VEGF蛋白表达较缺氧缺血组增高,VEGF蛋白表达bFGF干预组与缺氧缺血组相比3小时有统计学差异,持续至3天(p<0.05)。结论外源性bFGF能明显增加新生大鼠缺氧缺血后脑组织VEGF表达,在缺氧缺血脑损伤再生与修复中发挥一定保护作用。

电刺激尾核头部对隐神经A类和C类纤维传入诱发体感皮层电反应的影响

实验用猫，在氯醛糖麻醉、三碘季铵酚制动下，用方波电脉冲刺激隐神经，配合极化电流阻断技术分别引起隐神经Ａ和Ｃ类纤维兴奋，在对侧大脑皮层ＳⅠ区和ＳⅡ区记录平均诱发电位（分别同称为Ａ－ＳⅠＥＰ、Ａ－ＳⅡＥＰ、Ｃ－ＳⅠＥＰ、Ｃ－ＳⅡＥＰ）。用双极同心圆电极刺激尾核头部不同部位。实验结果表明，只有刺激同侧尾核头部内侧浅表部位，才对Ｃ－ＳⅠＥＰ，Ｃ－ＳⅡＥＰ，Ａ－ＳⅡＥＰ有抑制作用，提示尾核头部对大脑皮层不同躯体感觉代表区有不同的调制作用，对ＳⅠ区Ｃ类纤维传入信息有独特的抑制作用。

Schwann细胞在髓鞘形成过程中的极性调控

周围神经系统髓鞘形成依赖Schwann细胞和神经元之间复杂的相互作用。细胞极性分子蛋白Par-3在Schwann细胞与轴突接触面密集分布,为BDNF/p75NTR介导的启动成髓提供分子支架。然而,Par-3在该界面聚集并呈不对称性分布的机制仍是一个谜。不少研究发现,JAM和nectin等细胞粘附分子与Par-3不对称性分布有关。另外,通过改变轴突信号如神经营养因子和神经素的水平,也能影响Schwann髓鞘的形成。本文综述和阐释在髓鞘形成过程中,Schwann细胞极性是如何被调控的。

无髓鞘神经纤维兴奋后传导速度的变化

目的：观察Ｃ纤维兴奋后传导速度是否变化及其变化规律．方法：在麻醉大鼠的尾神经上剥制细束，引导单根Ｃ纤维的传入放电，以单次或不同频率的方形脉冲刺激皮肤感受野或尾神经外周端，测定Ｃ纤维在不同条件刺激兴奋后动作电位传导速度的变化．结果：Ｃ纤维兴奋后的一定时间内传导速度发生变化，大部分平均减慢（７．２６±２．９９）％，小部分平均增快（１．６９±１．２０）％，并且可经一定静息的时间恢复至初始传导速度．随着刺激频率的增加或刺激时间的延长，变速期逐渐延长．结论：Ｃ纤维兴奋后传导速度经历一个变速期。

成人周围神经传导速度参考值研究

本文研究了成人周围神经传导速度的参考值。选择159名正常健康成人为测试对象,其中男性85名,女性74名。所有受检者均测定右上肢肘-腕段正中神经、尺神经运动传导速度及正中神经感觉传导速度。测定表明:NCV在男女性别之间无明显差别,潜伏期男性明显长于女性,年龄对NCV有一定影响,低年龄组NCV略高于高年龄组。结果提示:用潜伏期作指标应考虑到各组性别构成。另外,如各组年龄相差过大,有时可导致错误结论。

吲哚类神经递质在妇女血浆与脑脊液中的相关性

作者采用高效液相色谱(HPLC)-荧光检测器测量16例妇女外周血浆与脑脊液(CSF)中吲哚类神经递质含量.结果表明:血浆与脑脊液中色氨酸(TRP)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)有明显正相关(TRPr=0.6400,P<0.01;5-HIAA:r=0.8158,P<0.01).提示外周血浆可以间接反映脑脊液中吲哚类神经递质的含量变化.

大鼠周围神经端侧吻合后再生纤维来源和状况的研究

目的 :探索周围神经端侧吻合后再生纤维的来源及状况。方法 :SD雄性大鼠 2 0只 ,随机分为端侧吻合 (E S)组和端端吻合 (E E)组 ,E S组右侧建立胫腓神经端侧吻合模型 ,E E组右侧建立腓神经端端吻合模型 ,术后 3个月 ,行透射电镜、电生理检查及辣根过氧化物酶 (horseradishperoxidase ,HRP)标记神经元。 结果 :潜伏期运动神经传导速度 (MNCV)及混合神经传导速度 (CNCV)E E组均优于E S组 ,E S组脊髓前角内侧及脊神经节均可观察到HRP标记的阳性细胞 ,吻合口远端有髓神经纤维再生。结论 :腓神经远端的再生纤维来源于胫神经 ,再生纤维中感觉纤维和运动纤维均有 ;尽管端端吻合再生纤维质量优于端侧吻合 ,但端侧吻合仍不失为神经修复的一种选择。

支配肺血管的脊髓交感神经中枢定位

在大鼠毁髓模型上,对由脊髓C_7～T_(10)节段发出的交感节前纤维逐节进行电刺激时,发现肺循环阻力(PVR)均有不同程度的升高,但在刺激脊髓C_7～T_4节段时PVR升高最为显著(对照值的28%),明显高于其余各节段电刺激后PVR增加的水平。刺激的脊髓节段愈高,△PVR/△SVR比值也愈大。体循环阻力(SVR)的升高则以低位脊髓节段的电刺激时更明显。提示在大鼠脊髓C_7～T_4节段存在支配肺血管运动的交感神经中枢。

STAT3ER慢病毒表达载体的构建及体外对神经元再生作用的研究

目的构建携带信号转导和转录激活蛋白STAT3和基因突变的雌激素受体ER的慢病毒载体,并转染受损的大鼠背根神经节神经元,研究其对神经元突起再生的作用。方法运用基因重组技术,将STAT3、ER和核糖体介导的绿色荧光蛋白(IRES-GFP)片段插入慢病毒载体pRRL-MCS+的PmeI位点构建慢病毒载体pRRL-STAT3ER-IRES-GFP,经RT-PCR、Western blotting和测序分析加以鉴定其正确性。将慢病毒载体3质粒细胞包装系统(主体质粒pRRL-STAT3ER-IRES-GFP、包装质粒pCMVdeltaR8.74和包膜质粒VSV-G)共转染293T细胞,包装慢病毒载体并测定滴度。切断大鼠左L5近神经节的神经根,摘取L5背根神经节做分离神经元培养,将pRRL-STAT3ER-IRES-GFP感染神经元细胞并观察神经元细胞核转运和突起的长度。结果构建的慢病毒载体pRRL-STAT3ER-IRES-GFP经RT-PCR和Western blotting鉴定正确,测序分析与Genbank报道的STAT3基因序列完全一致。3质粒共转染293T细胞后,测定慢病毒滴度为1010-11TU/ml。转染pRRL-STAT3ER-IRES-GFP的神经元经4-羟基三苯氧胺(4HT)激活,STAT3ER有明显的核转运,并增强突起的生长,经χ2检验与对照组有显著性差异。结论成功构建了表达小鼠STAT3ER基因的慢病毒载体并证实STAT3信号转导有利于轴突生长。

应激与中枢神经递质及HPA轴功能调节

应激状态下ＨＰＡ轴功能亢进与中枢神经系统有着十分密切的联系，一方面，应激反应可促进中枢儿茶酚胺（ＣＡ）和兴奋性氨基酸（ＥＡＡＳ）的释放，另一方面下丘脑去甲肾上腺素（ＮＡ）和ＥＡＡＳ可提高ＨＰＡ轴兴奋性。