“杓型”与“非杓型”高血压患者的静息-活动和睡眠-觉醒昼夜节律

目的研究不同血压节律的高血压患者的静息活动、睡眠觉醒昼夜节律情况。方法对42例高血压患者和21例健康志愿者进行研究,所有受试者同时佩戴动态血压监测仪和静息活动监测仪进行动态血压和静息活动监测,动态血压监测24h,而静息活动监测48h。结果本次研究发现,非杓型高血压患者夜间活动水平(L5)显著增高(P<0·05),睡眠效益(SE)显著下降(P<0·05),夜间觉醒点数(WB)显著增多(P<0·05),睡眠觉醒破碎指数(FI)显著增高(P<0·05)。结论与杓型高血压患者相比,非杓型高血压患者的静息活动、睡眠觉醒昼夜节律发生了变化,即夜间活动增多,睡眠效益下降,夜间觉醒点数和睡眠节律破碎性增加,活动与睡眠可能是影响血压昼夜节律的两个重要因素。

次声刺激诱导大鼠延髓内儿茶酚胺能神经元FOS的表达

实验用抗ＦＯＳ蛋白和酪氨酸羟化酶（ＴＨ）的免疫组织化学方法，观察大鼠暴露于８Ｈｚ，１２０ｄＢ的次声２ｈ后，延髓ＦＯＳ的表达情况及其与儿茶酚胺能神经元的关系。结果显示，在延髓内出现大量ＦＯＳ样免疫反应阳性神经元（ＦＬＮ），主要分布在延髓中尾段的孤束核、腹外侧区以及两者之间的网状结构内；在抗ＦＯＳ和抗ＴＨ的双重免疫染色切片上，见到大约５０％的ＴＨ阳性神经元的胞核同时呈ＦＯＳ样免疫反应阳性，主要分布在腹外侧网状核和孤束核内侧亚核，说明在延髓内脏带有半数儿茶酚胺能神经元参与对次声刺激的反应。

脊髓NMDA受体对心包内注射缓激肽诱发大鼠心脏-躯体运动反射的调节作用

目的:观察鞘内注射N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体激动剂NMDA及拮抗剂5-甲基-二氢-丙环庚烯-亚胺马来酸(MK801)对心包内注射缓激肽(BK)诱发大鼠心脏-躯体运动反射(CMR)的影响,探讨脊髓水平的谷氨酸受体亚型-NMDA对心脏伤害性感受的调节作用。方法:26只雄性SD大鼠随机分为BK组(n=8)、BK+NMDA组(n=6)、BK+MK801组(n=6)及BK+MK801+NMDA组(n=6),观察大鼠心包内注射BK诱发的CMR及鞘内注射药物后CMR的变化,CMR以背斜方肌肌电(EMG)反应为观测指标。结果:心包内间隔40min重复4次注射BK诱发的CMR无明显改变(P>0.05);鞘内注射NMDA后EMG由基础对照的100%增加到(149.86±8.54)%,注射前后EMG比较差异有统计学意义(P<0.05);鞘内注射MK801后EMG由基础对照的100%减少到(96.22±2.31)%,但注射前后EMG比较差异无统计学意义(P>0.05);鞘内联合注射MK801和NMDA,EMG由基础对照的100%增加到(103.09±4.13)%,但注射前后EMG比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:心包内注射BK诱发的CMR具有可靠的重复性,脊髓水平的NMDA受体参与了CMR的调节。

一氧化氮对谷氨酸诱发的大鼠海马脑片CA1区神经元活动的抑制

用细胞外记录单位放电技术，在大鼠海马脑片上观察了L-精氨酸（L-arg）、N-硝基L-精氨酸（L-NNA）及SIN-1对谷氨酸（glutamate，Glu）诱发的CA1区神经元放电的影响。旨在了解L-精氨酸：NO通路在谷氨酸诱发的海马放电中的作用及其可能的机制。结果如下：（1）用Gln（0.5mmol／L）灌流海马脑片1min，12个放电单位放电频率明显增加，表现为癫痛样放电；（2）预先用含Glu（0．5mmol／L）的人工脑脊液（ACSF）灌流脑片，继而应用L-arg（10mmol／L）灌流海马脑片2min，10个放电单位放电频率均明显降低；（3）预先用含Gln（0．5mmol／L）的ACSF灌流脑片，再用一氧化氮供体SIN－1（5mmol／L）灌流海马脑片1min，12个放电单位放电频率明显减少；（4）在预先用含Glu（0．5mmol／L）的ACSF灌流脑片基础上，应用L-NNA（0．15mmol／L）灌流脑片2min，12个放电单位放电频率均明显增加，并有一些神经元最终突然停止放电。综合上述结果，似可以认为，Glu与海马神经元上的NMDA受体结合后，不仅引发神经元放电明显增加，而且激活L-arg：NO通路而生成NO，再通过负反馈机制对神经元起保护作用。

L－NNA及NO供体对延髓腹外侧头端区神经元自发放电的影响

在麻醉大鼠观察了静注ＮＯ合成酶抑制剂Ｎ－硝基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）和ＮＯ供体──硝普钠（ＳＮＰ）和ＳＩＮ－Ｉ对血压、心率和延髓腹外侧头端区（ＲＶＬＭ）神经元自发放电活动的影响，旨在探讨Ｌ－ａｒｇ：ＮＯ通路对动脉血压调节的中枢作用部位。所得结果如下：（１）静注Ｌ－ＮＮＡ后，平均动脉压（ＭＡＰ）升高，心率（ＨＲ）加快，１１个ＲＶＬＭ神经元自发放电频率增加。这些变化发生于给药后５ｍｉｎ，持续时间达３０ｍｉｎ以上。（２）静注ＳＮＰ后，ＭＡＰ降低，ＨＲ加快，２３个ＲＶＬＭ神经元自发放电频率降低，且有剂量依赖性。ＳＮＰ作用发生快，持续时间短。为了排除脑缺血的影响，还特意向一侧颈动脉内注射相同剂量ＳＮＰ，结果引起ＭＡＰ轻度降低，而ＨＲ无明显改变，但ＲＶＬＭ神经元自发放电频率仍显著降低。（３）静注另一ＮＯ供体ＳＩＮ－Ｉ后，ＭＡＰ降低，１１个ＲＶＬＭ神经元自发放电频率降低．与ＳＮＰ的效应基本一致。以上结果提示，ＲＶＬＭ是Ｌ－ａｒｇ：ＮＯ通路实现动脉血压调节的一个中枢作用部位。

延髓腹外侧区微量注射L－NNA和SNP对大鼠血压、心率和肾交感神经活动的影响

在麻醉大鼠观察了向延髓腹外侧区微量注射ＮＯ合成酶抑制剂Ｎ－硝基左旋精氨酸（ＬＮＮＡ）和硝普钢（ＳＮＰ）对血压、心率和肾交感神经活动的影响，旨在探讨中枢左旋精氨酸－ＮＯ通路在动脉血压调节中的作用及其机制。实验结果如下：（１）向延髓腹外侧头端区（ＲＶＬＭ）注射Ｌ－ＮＮＡ后，平均动脉压（ＭＡＰ）升高，肾交感神经活动（ＲＳＮＡ）增强；心率（ＨＲ）减慢，但无统计学意义。ＭＡＰ和ＲＳＮＡ的变化持续３０ｍｉｎ以上；此效应可被预先静注左旋精氨酸所逆转。（２）向ＲＶＬＭ微量注射ＳＮＰ，ＭＡＰ降低，ＲＳＮＡ减弱；但ＨＲ的变化无统计学意义。（３）向延髓腹外侧尾端区（ＣＶＬＭ）注射Ｌ－ＮＮＡ，ＭＡＰ降低，ＨＲ减慢，ＲＳＮＡ减弱。（４）向ＣＶＬＭ微量注射ＳＮＰ，ＭＡＰ升高，ＲＳＮＡ增强，而心率无明显变化。以上结果表明，中枢左旋精氨酸－ＮＯ通路对延髓腹外侧部的神经元活动有调变作用。

PGE2及其EP3受体在PAG脑区参与炎性疼痛的调节

目的检测炎性疼痛大鼠PAG脑区PGE2浓度及EP3受体的表达。方法大鼠左后爪注射CFA诱导炎性疼痛模型,微量透析技术收集PAG脑区透析液,应用酶联免疫试剂盒检测透析液PGE2浓度,免疫组化结合抗体荧光标记观察EP3受体表达。结果炎性疼痛组PAG脑区透析液PGE2浓度较对照组高四倍,免疫组化见EP3受体表达明显增强。结论PAG脑区PGE2及其EP3受体参与炎性疼痛的调节。

雌二醇对去卵巢大鼠延髓毛细血管超微结构的影响

目的 :观察雌激素对去卵巢大鼠延髓毛细血管超微结构的影响。 方法 :30只雌性成年SD大鼠随机分为去卵巢组 (A组 )、雌二醇组 (B组 )和假手术对照组 (C组 )。A组和B组大鼠卵巢切除后 10天起 ,分别皮下注射等渗盐水 0 .1ml/d、17 β雌二醇 2 0 μg/ (kg·d) ;C组只剖开腹膜 ,不切除卵巢。手术后 10天起 ,皮下注射等渗盐水0 .1ml/d。各组动物连续用药 6周后观察结果。 结果 :①血清雌二醇的浓度 :A组明显低于C组 (P <0 .0 1) ,B组明显高于A组 (P <0 .0 1) ,而B组和C组比较无统计学意义。②电镜观察 :A组延髓毛细血管有明显的损伤表现 ,内皮细胞肿胀变形 ,线粒体明显肿胀、嵴断裂 ,血管内皮外基膜增厚 ,部分结构不完整 ;B组的毛细血管损伤明显减轻 ;C组延髓毛细血管形态正常。 结论 :雌激素对去卵巢大鼠延髓毛细血管有明显的保护作用。

小鼠胚胎中脑区神经干细胞体外分离培养的特征

目的:在已成功分离培养皮质神经干细胞的基础上,体外分离培养鼠胚中脑区的神经干细胞,并进行鉴定,为中脑神经干细胞的基础与应用研究建立细胞培养平台。方法:实验于2005-11/2006-07在武汉工业学院完成。①选取孕12～13d昆明小鼠1只,处死后无菌条件下分离胚胎腹侧中脑,胰酶消化和机械吹打制成单细胞悬液,在碱性成纤维生长因子和B27存在的无血清培养基中培养扩增,机械分离法传代,观察细胞生长状况。②将传至第2代的神经球以20～30个/cm2接种于置有预先经左旋多聚赖氨酸包被盖玻片的24孔培养板中,加入含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM/F12(不加任何生长因子)诱导分化。③采用免疫细胞化学染色方法鉴定神经干细胞及其传代细胞的分化方向。结果:①孕12～13d的鼠胚中脑细胞体外培养36h后,可见2～5个细胞的团块;48h后有明显球状团块产生,胞间界限不很清楚,出现神经细胞球;培养6d后传代,少部分单细胞于传代2d后出现分裂相,随后渐形成细胞团及神经球,生长性状基本同原代。②将培养的神经细胞球转入有血清培养时,约1周球体可完全分化为神经细胞和胶质细胞。免疫荧光染色显示神经球细胞表达巢蛋白,且神经元特异性烯醇化酶染色和胶质纤维酸性蛋白染色均呈阳性。结论:孕12～13d鼠胚胎腹侧中脑区存在神经干细胞,这些细胞在B27和碱性成纤维生长因子存在的无血清培养基中能够成功的在体外培养和传代。

耳针对兔急性实验性高血压的降压作用及机制的研究

目的观察耳针对兔急性实验性高血压的降压作用,并进一步探讨其可能的中枢机制.方法于股静脉匀速注射去甲肾上腺素(NE)制作急性实验性高血压模型,针刺耳廓"胸肺区"(TPA),观察是否有降压作用,采用中枢双侧旁巨细胞外侧核(PGL)微量注射阿片受体阻断剂纳络酮,探讨其可能的中枢机制.结果(1)股静脉匀速注射去甲肾上腺素后,可造成稳定的高血压状态;(2)双侧旁巨细胞外侧核内分别微量注射生理盐水(NS)、阿片受体阻断剂纳络酮(NAL),对急性实验性高血压无明显影响;(3)耳针TPA对急性实验性高血压具有显著的降压效应,mAP、mLVSP显著下降,HR有所下降.而PGL内微量注射纳络酮后耳针TPA能显著削弱耳针TPA引起的降压作用,使耳针后mAP、mLVSP及下降幅度显著减小,但不能完全阻断耳针TPA引起的降压作用.结论耳针兔耳廓"胸肺区"对急性实验性高血压具有降压效应,这种调整作用可能与包括PGL在内的头端延髓腹外侧区心血管中枢神经元内阿片肽的介导有密切关系.

大鼠中央灰质Fos蛋白与甲啡肽的共存

用免疫组织化学方法观察福尔马林脚掌皮下注射和足三里穴电针后清醒大鼠中脑导水管周围灰质（ＰＡＧ）中快速反应基因ｃ－ｆｏｓ在含甲啡肽神经元中的表达。实验中看到福尔马林注射组和电针刺激组动物的ＰＡＧ内均有Ｆｏｓ样免疫阳性反应（ＦＬＩ）标记神经元及ＦＬＩ与甲啡肽样免疫阳性反应（ＭＥＬＩ）双标记神经元，它们在ＰＡＧ的腹侧腹外侧部分布较多，对照动物ＦＬＩ标记神经元很少，共存现象极为少见。实验组与对照组神经无计数经统计处理差异非常显著。这一结果表明，福尔马林致痛和电针都能诱导ＰＡＧ中含脑啡肽神经元内（ｃ－ｆｏｓ的表达，提示伤害性刺激及针刺均可激活ＰＡＧ的腹侧腹外侧部这一重要的中枢镇痛部位。神经元中ＦＬＩ与ＭＥＬＩ的并存提示ＰＡＧ中Ｆｏｓ可能对前脑啡肽原基因表达有调控作用。

纳洛酮在延髓腹外侧加压区加强P物质引起的升压效应

目的：探讨Ｐ物质（ＳＰ）在延髓腹外侧加压区（ＶＳＭｐ）的升压效应是否与内源性阿片样物质有关。方法：氨基甲酸乙酯麻醉、人工呼吸，暴露延髓腹侧面，ＶＳＭｐ 敷贴ＳＰ等药物。结果：ＶＳＭｐ 敷贴ＳＰ可使血压呈剂量效应关系的明显增高，但心率无明显变化；在ＶＳＭｐ 给纳洛酮进行预处理，可显著增强ＳＰ的升压效应；应用神经元细胞体兴奋剂Ｌ谷氨酸钠到ＶＳＭｐ 可使血压显著升高。结论：ＳＰ 在ＶＳＭｐ 具有明显的升压作用，内源性阿片样物质在ＶＳＭｐ 对ＳＰ升压效应起拮抗作用，ＳＰ的升压效应可能是兴奋ＶＳＭｐ

颈动脉注射17β-雌二醇对去缓冲神经大鼠延髓腹外侧头端区神经元放电活动的影响(英文)

本研究旨在观察 17β 雌二醇 (E2 )对雄性大鼠延髓腹外侧头端区 (RVLM)神经元自发放电活动的影响。在切断双侧缓冲神经的麻醉雄性Sprague Dawley大鼠上 ,同步记录血压、心率和RVLM神经元的自发放电活动。颈动脉内注射E2 ( 10ng/kg) ,3 0个RVLM神经元自发放电单位中有 2 5个单位的放电频率由 14 4 6± 0 4 7降至 9 73± 0 3 3spikes/s (P <0 0 5 ) ,与此同时血压和心率无明显改变。E2 的抑制效应在 1min内起效 ,持续时间长于 5min。雌激素受体拮抗剂tamoxifen ( 5mg/kg)不能阻断E2 的抑制效应。预先给予一氧化氮 (NO)合酶阻断剂L NAME ( 2 7μg/kg)能明显阻断E2 的抑制效应。应用NO供体SIN 1( 0 5 μg/kg)可增强E2 的抑制效应。以上结果提示 ,E2 可通过非基因组效应激活RVLM神经元的NOS而引发NO释放 。

损毁中缝大核对大鼠胃酸排出量及血清胃泌素水平的影响

本实验观察了损毁中缝大核对大鼠胃酸排出量和血清胃泌素水平的影响。实验表明:损毁中缝大核可增加胃酸排出量和血清胃泌素水平。切断双侧膈下迷走神经干可以消除这种作用,去除腹腔交感神经节及肠系膜上交感神经节只能部分减弱这种作用。

微量注射L-精氨酸及L-NMMA至延髓头端腹外侧区对血压、心率的影响

微量注射一氧化氮（NO）前体L-精氨酸至用乌拉坦和氯醛糖混合麻醉的雄性SD大鼠的延髓头端腹外侧区（rVLM），可引起血压（BP）和心率（HR）的快速明显下降．电刺激中脑中央导水管周围灰质背侧部（dPAG）诱发的防御性升压反应受到明显抑制。相反，微量注射NO合成抑制剂L-NG-单甲基-L-精氨酸（L—NMMA）至rVLM，则引起BP和HR的快速明显升高，电刺激dPAG诱发的防御性升压反应明显增强。结果提示，NO参与rVLM神经元调节心血管活动的信息传递过程，并在其中起抑制性作用。

雌激素对去卵巢大鼠中脑黑质多巴胺神经元的保护作用

目的:观察不同剂量雌激素对去卵巢大鼠中脑黑 质多巴胺能神经元的作用,探讨雌激素的量对帕金森病防治 效果的差异.方法:对成年雌性大鼠行卵巢切除术并分组,给 予不同剂量的雌激素,分别测量各组大鼠血液的雌激素水平; 并应用立体定向技术注射6 羟基多巴胺(6 OHDA)于大鼠中 脑黑质,30d后对中脑进行切片,采用免疫组织化学的方法对 黑质TH阳性神经元进行标记、记数.结果:在给予不同剂量 雌激素的去卵巢大鼠各组间,达到生理剂量雌激素的大鼠中 脑黑质TH阳性神经元数目均没有显著差别;而在生理剂量 以下的大鼠组与其他各组比较,中脑黑质TH阳性神经元数 目明显减少(减少-87±6,P<0.01).结论:雌激素对雌性 大鼠中脑黑质多巴胺能神经元具有保护作用,达到生理剂量 后没有明显的差异;低于生理剂量则保护作用减弱.

大鼠孤束核内谷氨酸受体亚型对心脏伤害性感受信息的调控作用

目的:探讨大鼠孤束核(NTS)内谷氨酸受体亚型对心包内注射辣椒素诱发的心脏-躯体运动反射(CMR)的影响,阐明NTS对心脏伤害性信息调控的作用机制。方法:SD大鼠60只随机分为鹅膏蕈氨酸(IBO)组、谷氨酸组、5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸(MK-801)组、α-甲基,4-羧基苯丙氨酸(MCPG)组、MCPG联合MK-801组和6,7-二硝基喹喔啉-2,3-二酮(DNQX)组;各组大鼠孤束核内分别微量注射13mmol·L-1 IBO100nL,100、200、500mmol·L-1谷氨酸100nL,NMDA受体拮抗剂40和60mmol·100-1 MK-801 100nL,代谢型谷氨酸受体拮抗剂25和50mmol·L-1 MCPG 100nL,25mmol·L-1 MCPG 50nL联合40mmol·L-1MK-801 50nL,非NMDA受体拮抗剂20和50 mmol·L-1 DNQX 100nL;观察各组大鼠CMR的变化。结果:与对照组比较,IBO组大鼠CMR减少(P<0.05);谷氨酸组随着谷氨酸浓度的增加,大鼠CMR不断增加(P<0.05);MK-801和MCPG组CMR均减少(P<0.05);MCPG联合MK-801组CMR减少(P<0.05);DNQX组CMR无明显变化(P>0.05)。结论:NTS对心脏伤害性感受信息有易化调控作用,这种易化调节作用主要由NMDA和mGluRs受体介导。

猫延髓嘴侧腹外侧区微量注射内皮素－1对心血管和肾交感神经活动的影响

采用脑立体定向和脑内微量注射技术研究了猫延髓嘴侧腹外侧区（ｒＶＬＭ）微量注射内皮素－１（ＥＴ－１），对平均动脉压（ＭＡＰ）、心率（ＨＲ）和肾交感神经活动（ＲＮＡ）的影响。结果表明：ｒＶＬＭ内微量注射ＥＴ－１（２ｐｍｏｌ，０．５μｌ），可显著升高平均动脉压、增加心率和增强肾交感神经活动，并存在量－效间的正相关关系。双侧颈部迷走神经切断后，不影响上述结果。静脉预先给与α－受体阻断剂（Ｒｅｇｉｔｉｎｅ，５ｍｇ／ｋｇ），能显著抑制ＥＴ－１的上述升压作用。放射免疫观察到，ｒＶＬＭ内微量注射ＥＴ－１后，血浆精氨酸升压素（ＡＶＰ）含量显著升高，其变化与血压变化呈显著一致。以上结果提示，（１）ｒＶＬＭ内ＥＴ－１参与心血管活动的中枢调节，并显示有部位特异性；（２）该调节作用主要通过改变交感神经传出活动实现，而与迷走神经活动无关；（３）ｒＶＬＭ内ＥＴ－１还可能激动下丘脑室旁核及视上核的升压素能神经元，从而参与心血管活动的调节。

延髓中缝核5-羟色胺对清醒大鼠胃运动的影响

本工作采用应力传感器记录胃窦的运动,观察向清醒大鼠延髓中缝核注射1微升生理盐水中含6.25μg、12.5μg和25μg三种不同剂量的5-羟色胺(5HT)以及腹腔注射对氯苯丙氨酸(pCPA)或延髓中缝核注射5,6-双羟色胺(5,6DHT)以减少内源性5HT对胃运动的影响。实验结果表明:6.25μg 5HT有兴奋胃窦运动的趋势,12.5μg和25μg 5HT使胃窦收缩活动加强。将上述三种剂量的5HT注入外周静脉均不影响胃的运动。腹腔注射pCPA后第四天和延髓中缝核注射5,6DHT后第五天,抑制大鼠胃运动。此时,颈髓、延髓、中桥脑、间脑5HT含量均明显下降。提示延髓中缝核5HT参与胃运动的中枢性调节。