精子染色质完整性对功能的影响及其检测方法研究进展

精子染色质不仅携带父系DNA等遗传信息,还携带有结构蛋白、表观遗传信息、高级染色质结构(如基质附着区和端粒)等众多信息,这些信息在胚胎发育过程中均发挥着重要作用。本文主要综述了精子染色质携带的这些不同信息对精子功能和胚胎发育的影响及其相关检测方法的研究进展,以期为临床不育、胚胎停育和反复流产的病因筛查提供理论依据和科学的诊疗策略,改善自然受孕和辅助生殖助孕的妊娠结局。

VEGF对小鼠卵巢类固醇合成相关基因表达的影响及其机制

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对小鼠卵巢类固醇合成相关基因表达的影响及其机制。方法利用四环素可逆调节VEGF表达的转基因小鼠模型,采用聚合酶链反应(PCR)法鉴定小鼠基因型,通过喂食强力霉素将20只小鼠分为VEGF表达正常组(Dox+)与VEGF表达抑制组(Dox-)(n=10)。采用Western blotting检测卵巢组织中VEGF蛋白的表达情况;荧光定量PCR检测VEGF、VEGF受体2(KDR)及已知在卵泡发育中发挥作用的基因卵泡刺激素(FSH)、抑制素B(INHBB)mRNA的表达情况。HE染色观察卵巢组织的变化。取小鼠卵巢组织提取总RNA进行转录组测序,并通过FPKM、log2FC值分析相关差异基因。结果与Dox+组比较,Dox-组VEGF mRNA和蛋白水平明显降低,KDR mRNA水平明显降低(P<0.05)。HE染色结果显示,与Dox+组比较,Dox-组卵泡发育障碍,并出现闭锁卵泡。根据测序结果分析筛选出两组小鼠的卵泡发育相关基因、类固醇合成相关基因具有明显差异(P<0.05);富集分析发现小鼠卵巢中VEGF主要参与调控卵巢类固醇生成等通路。荧光定量PCR结果显示,与Dox+组相比,Dox-组小鼠卵巢组织中卵泡发育相关基因(INHBB、FSHR)明显上调(P<0.05),类固醇合成的关键基因(StAR、CYP11A1、3β-HSD)明显下调(P<0.05),定量结果与测序结果基本一致。结论VEGF抑制可使小鼠卵泡发育障碍,其可能的机制是通过下调卵巢类固醇合成相关基因FSH、INHBB的表达从而阻碍胆固醇代谢来实现的。

CREM基因在miR-199b-5p敲除小鼠精液和睾丸中的表达研究

目的:探讨miR-199b-5p基因敲除对雄性小鼠精液和睾丸中CREM表达水平的影响。方法:选miR-199b-5p基因敲除(KO)雄性小鼠和野生型(WT)雄性C57BL/6小鼠。观察2组小鼠体重和睾丸指数。HE染色观察睾丸结构变化。显微镜下观察精子形态及计数精子浓度。数据库预测CREM与miR-199b-5p的靶向关系。RT-qPCR和Western印迹法分别检测2组小鼠睾丸中CREM mRNA和蛋白表达水平变化。结果:两组之间小鼠体重和睾丸指数无明显变化;与WT组比较,KO组小鼠精液精子计数稍下降,但无统计学差异(P>0.05);精液涂片示KO组精子浓度较WT组稀疏,但无统计学差异(P>0.05);睾丸病理示:与WT组比较,KO组睾丸体积较小,睾丸组织正常,生精小管可见各级生精细胞和支持细胞,生精小管界膜、管径无明显异常;数据库预测CREM基因是miR-199b-5p的靶基因;RT-qPCR结果示:与WT组比较,KO组雄鼠精液和睾丸组织中CREM mRNA表达水平均明显下降(P<0.05),差异有统计学意义。Western印迹结果显示:与WT组比较,KO组雄鼠睾丸组织中CREM蛋白表达水平明显下降(P<0.05),差异有统计学意义。随访半年,统计两组雄性小鼠出生数,发现KO组雄鼠的出生数较WT组明显下降(P<0.05)。结论:miR-199b-5p敲除小鼠精液和睾丸中CREM基因表达下调,推测miR-199b-5p可能靶向作用于CREM基因进而影响雄性小鼠的生育功能。

1059名济南市育龄男性体育锻炼情况与精液质量的相关分析

目的探究体育锻炼对精液质量的影响,为男性生殖健康的提高提供基础数据及理论依据。方法采用横断面研究方法,以到山东省妇幼保健院生殖中心就诊和体检的1059名男性作为研究对象,采用问卷调查人口学资料和体育锻炼等资料。采用计算机辅助分析技术分析精子总数、精子浓度、总精子活动率、前向运动以及精子正常形态百分率,采用Logistic回归模型和多重线性回归模型分析体育锻炼对精液质量的影响。结果校正年龄、体质量指数、饮酒和吸烟等混杂因素后,Logistic回归分析发现:体育锻炼强度为中等和大强度持久者精液质量异常的发生风险增高(OR值分别为2.103和2.229);与每次体育活动时间10 min以下相比,每次体育活动时间为20 min以上者精液质量异常的发生风险降低(体育活动>20~30 min、>30~60 min、>60 min者的OR值分别为0.357、0.256和0.289);体育活动频率与精液质量异常与否之间差异无统计学意义(P>0.05)。锻炼情况较好者精液质量异常的发生风险低,OR值为0.711。多重线性回归分析发现:体育活动频率(β=7.474,95%CI:4.800~10.149)是精子浓度的影响因素(P<0.05);每次体育活动时间(β=20.632,95%CI:7.634~33.629)是精子总数的影响因素(P<0.05);体育锻炼强度(β=-1.461,95%CI:-2.392,-0.530)和每次体育活动时间(β=2.608,95%CI:1.404,3.812)是前向运动精子百分率的影响因素(P<0.05);体育锻炼强度(β=-1.934,95%CI:-3.238~-0.630)、每次体育活动时间(β=4.211,95%CI:2.525~5.897)和体育活动频率(β=-2.008,95%CI:-3.480~-0.536)是精子总活动率的影响因素(P<0.05)。结论体育锻炼可能影响精液质量,较大强度的体育锻炼可能是精液质量异常的危险因素,较长体育运动时间可能提高精液质量。适当的体育锻炼情况有助于提高精液质量。

邻苯二甲酸酯对男性(雄性)生殖损伤的研究进展

邻苯二甲酸酯是日常生活中常接触到的塑化剂,与我们的生活密切相关,普遍存在于空气、土壤和水中。研究发现接触邻苯二甲酸酯类化合物与男性(雄性)生殖损伤相关,当邻苯二甲酸酯在体内达到一定浓度时,可导致精子数量减少、精子活力降低、生殖系统损伤与器官畸形等影响男性(雄性)生育能力。本文就邻苯二甲酸酯在人体内代谢途径,对男性(雄性)生殖系统的损伤机制以及针对邻苯二甲酸酯的拮抗作用的研究进展进行总结和展望。

人参皂苷Rg1减轻热应激致小鼠睾丸损伤的机制研究

目的探讨人参皂苷Rg1减轻热应激致小鼠睾丸损伤的机制。方法20只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为4组,每组5只。对照组(Control组)和热应激组(HS组)小鼠腹腔注射0.9%生理盐水[10 mL/(kg·d)×14 d],热应激+人参皂苷Rg1组(HS+Rg1组)和人参皂苷Rg1组(Rg1组)小鼠腹腔注射人参皂苷Rg1[20 mg/(kg·d)×14 d]。HS组与HS+Rg1组小鼠在给药第7天时,将麻醉后小鼠下腹部置于43℃水浴中单次热应激30 min。小鼠精母细胞GC-2spd(ts)分为4组:对照组(Control组)细胞常规培养48 h;热应激组(HS组)细胞常规培养36 h,置于43℃水浴中单次热应激30 min,继续培养12 h;热应激+Rg1组(HS+Rg1组)在细胞培养体系中加入Rg1(终浓度50μmol/L),热应激处理同HS组;Rg1组不给予热应激处理,其余同HS+Rg1组。建模完成后1 d采集眼球血,ELISA法检测血清睾酮水平;摘取睾丸观察形态并称量,计算睾丸指数,HE染色观察睾丸组织病理学形态;制备睾丸组织匀浆检测过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;取附睾精子,计算机辅助精子分析(CASA)系统分析小鼠精子浓度和活力;TUNEL染色检测GC-2spd(ts)细胞凋亡情况;Western blot检测GC-2spd(ts)细胞Nrf2、Keap1、HO-1、Bax、Bcl-2和Caspase3蛋白表达量;RT-qPCR检测GC-2spd(ts)细胞Nrf2蛋白靶基因GCLC、GCLM和NQO1相对表达量。结果Rg1可阻止热应激所致睾丸质量和睾丸指数下降,减轻睾丸组织结构损伤,阻止精子浓度和活力下降,拮抗热应激所致睾丸间质细胞数量减少和血清睾酮水平下降,降低睾丸组织中MDA累积,提高抗氧化酶CAT和SOD的活性。Rg1还可减轻GC-2spd(ts)细胞凋亡,下调Bax、Caspase3和Keap1蛋白表达,增强Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达量,增强Nrf2蛋白靶基因GCLC、GCLM和NQO1相对表达量。结论Rg1对正常小鼠睾丸结构和功能影响不显著,但可有效提高小鼠睾丸抗热应激损伤能力,其机制可能与Rg1激活Nrf2信号通路,提高抗氧化酶活性,减少生精细胞凋亡有关。

敲低锌转运蛋白ZIP7抑制小鼠睾丸支持细胞增殖的研究

目的探讨敲低锌转运蛋白ZIP7对小鼠睾丸支持细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法使用小鼠睾丸支持细胞系(TM4细胞)进行实验,TM4细胞培养后采用细胞免疫荧光染色法观察ZIP7在TM4细胞中的亚细胞定位;将TM4细胞分为对照组和ZIP7 siRNA组(采用siRNA转染敲低TM4细胞中ZIP7表达),采用CCK8法检测两组细胞的增殖能力,使用DHE荧光探针检测两组细胞内活性氧(ROS)的水平,实时荧光定量PCR(qPCR)检测两组细胞内ZIP7 mRNA的相对表达量,Western blot法检测两组细胞内ZIP7、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、细胞外信号调节激酶(ERK)及磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达水平。结果细胞免疫荧光染色法结果显示ZIP7定位于TM4细胞的内质网上。siRNA干扰使得ZIP7 siRNA组细胞中ZIP7的mRNA和蛋白表达显著低于对照组(P<0.05);siRNA转染敲低TM4细胞内ZIP7的表达后,ZIP7 siRNA组细胞增殖能力显著低于对照组(P<0.001),细胞内ROS水平显著高于对照组(P<0.001)。与对照组比较,ZIP7 siRNA组细胞的p-ERK/ERK蛋白表达无显著差异(P>0.05),而p-JNK/JNK蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论敲低ZIP7可以明显抑制TM4细胞增殖,该过程可能通过细胞内ROS水平的升高及JNK磷酸化的激活介导。

维生素D对辛酸高脂饮食引起的前列腺癌小鼠骨转移的影响

目的研究维生素D治疗对辛酸高脂饮食引起的前列腺癌小鼠骨转移的影响。方法建立前列腺癌小鼠骨转移模型,将其分为正常喂养的Control组、高脂饲料喂养的High fat组、添加辛酸的高脂饲料喂养的Bitter组以及维生素D治疗的辛酸高脂饲料喂养的Vitamin D组。研究结束后,取3组小鼠外周血检测总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、钙和25羟维生素D(25-OH-D)含量,检测各组小鼠骨转移程度及肿瘤组织E-cadherin和p38蛋白表达情况,体外使用Transwell小鼠研究维生素D对辛酸影响的RM-1细胞侵袭迁移能力的影响。结果与Control组相比,High fat组和Bitter组小鼠血液中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白及钙、^(18)F-NaF PET-CT检测结果中SUV_(min)、SUV_(max)和SUV_(mean)均显著升高(P<0.05);并且Bitter组显著高于High fat组(P<0.05),而Vitamin D组显著低于Bitter组(P<0.05)。在体外,辛酸处理显著提高RM-1细胞的侵袭和迁移能力,但维生素D可抑制辛酸促进的RM-1细胞的侵袭和迁移能力。在体内,辛酸可显著提高高脂饮食前列腺癌骨转移小鼠肿瘤组织中E-cadherin和p-p38/p38蛋白表达,但维生素D可显著降低辛酸增加的E-cadherin和p-p38/p38蛋白表达水平。结论维生素D治疗抑制辛酸高脂饮食促进的前列腺癌小鼠骨转移,其机制可能与增加血清25-OH-D含量和抑制癌细胞中E-cadherin、p-p38/p38蛋白表达有关。

小鼠附睾小体特异性mRNA传递入N2a和TM4细胞的研究

目的:研究小鼠附睾小体特异性mRNA能否递入Neuro-2a(N2a)及TM4细胞中,为探讨附睾小体mRNA功能提供实验依据。方法:通过RT-PCR检测附睾特异性基因(Adam7、Crisp1、Defb22、Wfdc2、Wfdc9)在成年雄性BALB/c小鼠睾丸、附睾、附睾小体和精子中,以及在人睾丸、精浆小体和精子中的存在情况。通过低速离心、过滤、超速离心方法分离BALB/c小鼠附睾小体,通过PKH26进行荧光标记,与饥饿培养24 h的N2a和TM4细胞共孵育1 h,分别以未标记PKH26的附睾小体组、无附睾小体的加PKH26染料组、未加附睾小体和PKH26染料阴性组作为对照,观察附睾小体是否与N2a和TM4细胞融合并被摄取。通过RT-PCR对共孵育1 h后N2a和TM4细胞进行附睾特异性基因的检测。结果:Adam7和Crisp1在小鼠附睾、附睾小体和精子中存在,睾丸中无表达,在人精浆小体和精子中存在,睾丸中无表达。PKH26和hoechst33258荧光双标结果显示小鼠附睾小体与N2a和TM4细胞融合并被摄取,RT-PCR结果表明共孵育1 h后N2a和TM4细胞可以检测到Adam7和Crisp1基因的mRNA。Western印迹结果显示与附睾小体孵育后的N2a和TM4细胞可以检测到CRISP1蛋白。结论:附睾小体可传递附睾特异性mRNA Adam7和Crisp1进入到细胞中,其中Crisp1可能被翻译成蛋白,其功能和意义有待进一步研究。

精母细胞来源外泌体中的piR-1207/2107靶向调控精囊上皮细胞精囊凝胶蛋白1基因表达的体外实验研究

目的探究精母细胞来源外泌体中的piR-1207/2107对精囊上皮细胞(HSVEpiC)精囊凝胶蛋白1(SEMG1)基因表达影响。方法采用超高速离心法提取精母细胞上清液中的外泌体,运用透射电镜、纳米激光粒度分析仪、外泌体表征蛋白鉴定精母细胞来源的外泌体;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外泌体中piR-1207/2107的表达情况;采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测精母细胞来源的外泌体中PIWIL1蛋白的表达情况;通过生物信息学软件RNAhybrid预测piR-1207和piR-2107可共同调控的潜在靶基因。在HSVEpiC中分别转染piR-1207/2107模拟物(piR-NC-mimic、piR-1207-mimic、piR-2107-mimic)或piR-1207/2107抑制剂(Anti-piR-NC、Anti-piR-1207、Anti-piR-2107),Western blot检测转染后各组SEMG1蛋白的表达情况。在精母细胞中分别转染Anti-piR-NC、Anti-piR-1207、Anti-piR-2107,提取外泌体与HSVEpiC共培养24 h,采用qRT-PCR检测各组piR-1207/2107的表达情况,并采用Western blot检测SEMG1蛋白的表达情况。结果透射电子显微镜结果显示,精母细胞来源外泌体呈圆形或椭圆形膜性小囊泡;纳米激光粒度分析仪检测结果显示,外泌体的直径主要分布在100~200 nm之间。qRT-PCR检测结果显示,精母细胞来源的外泌体含有piR-1207/2107;Western blot检测结果显示,精母细胞来源的外泌体中未检测到PIWIL1蛋白。应用生物信息学软件RNAhybrid预测结果显示,piR-1207和piR-2107可以共同靶向结合SEMG1 mRNA的CDS区。HSVEpiC转染piR-1207/2107模拟物后,与piR-NC相比,piR-1207/2107表达量显著升高(P<0.001),而SEMG1蛋白表达水平显著降低(P<0.01);HSVEpiC转染piR-1207/2107抑制剂后,与Anti-piR-NC相比,piR-1207/2107表达量显著降低(P<0.001),而SEMG1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。精母细胞转染Anti-piRNAs后提取外泌体与HSVEpiC共培养,piR-1207/2107表达量显著降低,而SEMG1蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。结论精母细胞来源外泌体中的piR-1207/2107可调控HSVEpiC中SEMG1的表达。

镉暴露大鼠睾丸支持细胞金属硫蛋白表达的时相研究

啮齿目动物的睾丸较肝脏对镉毒性更为敏感 .为阐明不同组织细胞的镉毒性分子机制 ,对镉暴露大鼠睾丸支持细胞与肝脏金属硫蛋白基因 (MT )的表达及镉蓄积进行了时相研究 .成年雄性SD大鼠低剂量镉(4 0 μmol/kg)皮下注射后 ,立即进行睾丸支持细胞和肝脏组织的分离 .采用RT PCR技术分析mRNA ,并用光密度扫描作半定量分析 ,蛋白质定量用ELISA方法 ,原子分光光度吸收法测定镉浓度 .结果显示 :镉暴露 1h后肝脏MTmRNA即有明显的诱导表达 ,3h达高峰 ;支持细胞也有明显的诱导表达 ,6h达高峰 .镉暴露后肝脏MT有明显的诱导表达 ,但睾丸支持细胞不但未见MT增加而且还稍有下降 .提示 :a 镉对MTmRNA的诱导表达具有时间依赖性和组织特异性 .b 镉虽然能诱导睾丸MT的转录 ,但没有促进其MT的合成 。

精液液化影响因素研究进展

人类精液具有凝固并在短时间液化的特点。精囊分泌的Semenogelin和纤维连结蛋白是精液凝胶的主要成分 ,前列腺特异抗原及一些蛋白酶类与精液液化有关。纤溶系统中的某些成分 ,如组织型纤溶酶原激活物、尿激酶型纤溶酶原激活物。

用荧光探针JC-1检测氧化应激对精子线粒体膜电位的影响

目的:利用荧光探针JC-1观察氧化应激对精子线粒体膜电位的变化。方法:用FeSO4/H2O2体系诱导精子氧化损伤模型,利用新型荧光探针JC-1标记精子线粒体,在FACS Calibur流式细胞仪上检测JC-1荧光强度的变化。结果:正常精子线粒体维持较高的膜电位,JC-1在线粒体内形成聚合物,红色荧光占主导地位。FeSO4/H2O2体系导致线粒体膜电位下降,JC-1聚合物分解成单体,红色荧光强度减弱。结论:氧化应激导致精子线粒体膜电位下降;JC-1结合流式细胞仪是一种理想的检测线粒体膜电位的手段。

人精子甘露糖受体的胶体金标记电镜观察

本文首次报道人精子甘露糖受体（ＭＲ）的电镜标记技术和初步观察。采用甘露糖化牛血清白蛋白（ＤＭＡ，Ｓｉｇｍａ，Ａ８３０３）结合１０ｎｍ胶体金制备探针，标记获能前后精子和甲醇处理或Ａ２３１８７诱导顶体反应（ＡＲ）的精子。结果表明，甲醇处理后ＭＲ表达于顶体区质膜表面，活精子在ＡＲ过程中以不同方式表达ＭＲ活性；ＭＲ定位于：１．ＡＲ早期的精子顶体区质膜表面；２．ＡＲ期间精子的顶体小泡表面、顶体内膜及顶体基质；３．ＡＲ后精子的赤道带顶体内膜和顶体后区质膜；４．ＡＲ后精子的顶体后区质膜。作者认为ＭＲ原来存在于顶体内，大部分可能是膜结合蛋白。在精子发生ＡＲ的过程中ＭＲ才得以暴露并于ＡＲ后逐渐转移至赤道带和顶体后区，可能在精－卵膜融合中发挥介导作用。

切除颌下腺对小鼠睾丸、精子计数和血清睾丸酮的影响

切除颌下腺对小鼠睾丸、精子计数和血清睾丸酮的影响范莉英，冷双英，赵春芳，赵岩（河北医科大学组织胚胎学教研室，石家庄，０５００１７）小鼠颌下腺是分泌表皮生长因子（Ｅｐｉｄｅｒ－ｍａｌＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）的主要器官，也是血清中ＥＧＦ的主要来...

2450MHz微波辐照对雄性小鼠生殖系统的影响

目的探讨微波对生殖系统的作用特点。方法用频率为2450MHz、功率密度为10mW/cm2的微波(连续辐照6、12、18d,30、6和90min/d)辐照小鼠,动物采用自由体位;观察体重、睾体比、精子数量和精子畸变率等指标的改变。结果辐照组(30min和90min,连续12d组)小鼠体重较平行对照组(0min组)明显下降(P<0.05);各辐照组的精子畸形率均较平行对照组明显增加,以60min,连续12d组最为显著(P<0.01)。结论10mW/cm2、2450MHz微波对受照小鼠精子畸变率有明显的升高作用。

人精子中尿激酶型纤溶酶原激活因子及其受体的分布

本文采用免疫组化和免疫电镜法研究了正常健康男子精子中尿激酶型纤溶酶原激活因子（ｕＰＡ）及其受体（ｕＰＡＲ）的分布。结果表明ｕＰＡ主要分布在顶体内外膜和头部浆膜上；精子尾部浆膜也含有ｕＰＡ；在ｕＰＡ出现的部位同时也发现有ｕＰＡＲ存在。推测结合在精子受体膜上的ｕＰＡ可能在精子的运行、精液的液化和受精过程中发挥重要的作用。

中国人附睾功能指标—精浆肉毒碱研究

精浆肉毒碱90%左右来源于附睾,是附睾的功能性指标。有关实验证明附睾分泌的肉毒碱是精子在附睾中成熟的重要因素,因此是精子在附睾中成熟的重要功能性指标。本文测定了156例中国正常生育力男子精浆中的肉毒碱,并研讨了精浆肉毒碱与精液其他指标的关系。156例精液的几个主要指标: 精子存活率63.36±18.18%;精子密度111.06±90.83×10~6/ml;精子活动度:均在Ⅱ级及Ⅲ级以上;精液体积3.239±0.532ml; 精浆肉毒碱含量: 每毫升精浆肉毒碱量:239.56±105.59nmol/ml 精浆中肉毒碱总量:757.34±471.72nmol 精浆肉毒碱与精子存活率,精子密度及活动度均有相关性。

γ－氨基丁酸诱发人精子顶体反应及其对若干离子转运影响的研究

本文用Ｌｅｃｔｉｎ染色法、原子吸收光谱法和电化学法研究了γ－氨基丁酸对人类精子顶体反应的诱导作用，以及它对Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋和Ｃｌ－在顶体反应时的转运情况的影响。结果表明：１．γ－氨基丁酸可明显地诱发人精子顶体反应（Ｐ＜０．０５）。２．γ－氨基丁酸可引起Ｎａ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋内流，Ｋ＋外流和Ｃｌ－先外流再内流。因此，γ－氨基丁酸对人精子具有调控作用。

饮酒对小鼠睾丸生精小管一氧化氮合酶、增殖细胞核抗原表达及细胞凋亡影响的研究

目的 探讨酒精对小鼠睾丸的组织结构、内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)、增殖细胞核抗原 (PCNA)及细胞凋亡的影响。 方法 用 5 %、10 %及 15 % 3种不同浓度的酒精作用于 2 2d龄小鼠 ,取睾丸做石蜡切片、HE染色 ;用免疫组织化学方法检测睾丸eNOS、细胞增殖的变化 ;TUNEL法检测细胞凋亡的变化 ,并进行统计学分析。 结果 随着酒精浓度的增大 ,睾丸组织结构发生明显改变 ,生精小管的直径逐渐减小 ,eNOS阳性细胞面积密度逐渐增大 ,单位面积内PCNA阳性细胞和凋亡细胞数目增加 ,高浓度酒精组与其他组差异极显著 (P <0 0 1)。 结论 酒精可使生精小管的直径变小 ,eNOS及PCNA表达增强 ,凋亡细胞增加并随酒精浓度的增大而变化加重。这可能是过量饮酒导致生精细胞减少 ,生殖能力降低的重要因素。