大鼠主动脉血管内皮细胞原代培养方法改良及氧化损伤模型构建

目的改良大鼠原代主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的提取和培养方法,并构建稳定的AVECs氧化损伤模型。方法采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法建立大鼠原代AVECs提取和培养方法,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧光染色法检测vW因子(vWF)进行细胞鉴定。选用2~4代的AVECs,用不同浓度的POVPC干预24 h,检测细胞增殖、细胞骨架、成管能力、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS),构建POVPC诱导的AVECs氧化损伤模型。结果植块联合胶原酶消化法提取培养的内皮细胞具有典型的“铺路石”样特性,生长状态良好,vWF免疫荧光染色阳性,阳性率占0.95,鉴定为内皮细胞。该法可缩短细胞传代时间。采用4.375~70μmol·L^(-1)的POVPC干预培养AVECs,POVPC在17.5~70μmol·L^(-1)时可明显抑制AVECs增殖(P<0.05);POVPC在8.75~70μmol·L^(-1)时,可导致细胞骨架交叉断裂堆积、解聚、结构模糊,且细胞成管能力明显降低(P<0.01),细胞内ROS水平明显升高(P<0.05)。以上改变在POVPC浓度为35μmol·L^(-1)时尤为明显。结论采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法可获得较多的内皮细胞,细胞生长状态良好,缩短了细胞的生长周期,是一种简便、可行的AVECs培养方法。17.5~705μmol·L^(-1)的POVPC可构建稳定AVECs氧化损伤模型。

青蒿素国内研究进展

青蒿素是目前治疗疟疾的特效药。本文综述了青蒿素的国内最新研究进展。包括:青蒿素的产地,药理作用,临床用药情况,提取条件,青蒿素的合成途径(青蒿素的化学合成,生物合成以及青蒿素衍生物合成),并对青蒿素的发展研究进行了展望。

医学形态学科贯穿式教学改革的研究与实践

目的：探究贯穿式教学在医学形态学科教学中的应用及效果。方法选择2011级临床医学专业本科1～8班（391人）为研究对象，分为两组：试验组（1～4班，197人）和对照组（5～8班，194人），实验组实施形态学贯穿式教学模式；对照组采用传统的不同学期组织学与病理学分开教学法，两组均由相同教师带教，教学过程结束1周内进行自我评价式问卷调查，比较两组的切片考试成绩及闭卷考试成绩。结果试验组学生对贯穿式教学模式满意度显著高于对照组（ P＜0．05）；试验组标本及理论考试成绩较对照组有明显提高（ P＜0．05）。结论医学形态学科贯穿式教学实践不仅加强了形态学科教学团队的建设，而且在教学中提高了学生对教师的授课疲劳阈值，更好的提高课堂效率。

抗氧化能力指数(ORAC)测定原理及应用

目的介绍抗氧化能力指数测定方法的原理、应用及发展前景。方法被译为抗氧化能力指数的oxygenradicalabsorbancecapacity(ORAC)方法,是目前抗氧化研究领域中为人们所关注的一个评价方法。该方法以偶氮类化合物AAPH作为过氧自由基来源,SodiumFluorescein为荧光指示剂,维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准,使用荧光微孔板分析仪进行分析。结果方法的专属性、线性、精密度、准确度及重复性等与其他抗氧化能力分析方法相比具有诸多显著的优点。结论该方法目前已成功应用于生物样品、植物或食品提取物和纯化合物等多种样品的体内外抗氧化能力分析,并有希望在研究氧化与疾病发生关系等方面发挥重要的作用。

磷酸二酯酶4研究进展

环腺苷酸(cAMP)和环鸟苷酸(cGMP)对于细胞的许多功能有重要作用。磷酸二酯酶(PDEs)催化cAMP和cGMP水解开环分别生成AMP和GMP,这是细胞内降解cAMP和cGMP的唯一途径。PDEs可分为11个家族,其中有8个家族可以水解cAMP,包括能专一性地水解cAMP的PDE家族(如PDE4),和既可水解cAMP又可水解cGMP的PDE家族。PDE4同工酶主要存于在炎症细胞中。PDE4可分为A、B、C、D 4个亚家族,根据其N端的特殊结构,有长、短和超短三种形式。PDE4催化区三维结构的阐明有助于它们功能的研究和相关药物的设计。PDE4通过与其它蛋白如抑制蛋白、A激-酶锚定蛋白(AKAP)以及活化的C激酶1受体(RACK1)等相互作用使cAMP浓度区域化,选择性地调节各种细胞功能。PDE4作为一个治疗靶点,研究其选择性抑制剂具有重要的意义,可以用于治疗由炎症引起的疾病,如哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、阿尔采末病(AD)、帕金森病(PD)和中风等由潜在的炎症引起神经元受损造成的中枢神经系统疾病。

咯利普兰对H_2O_2致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

目的探讨PDE4抑制剂咯利普兰(rolipram)对H2O2致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用及其作用机制。方法以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞存活率;碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色流式细胞术检测细胞周期变化;化学比色法测定细胞清除羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2·)的能力;以及培养上清液中的丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。Western blot和Real-time RT-PCR检测细胞内硫氧还蛋白(Trx)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果咯利普兰能明显提高H2O2损伤的PC12细胞存活率,恢复细胞增殖;提高细胞清除·OH和O2·的能力;降低MDA和NO含量,提高GSH含量和SOD活性;使Trx蛋白和mRNA表达增加,同时下调iNOS蛋白和mRNA表达。结论咯利普兰对H2O2致PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化能力相关。

肿瘤细胞内pH值改变与肿瘤多药耐药的关系

细胞内pH值(pHi)增高是许多耐药肿瘤的共同特点,其结果引起肿瘤细胞对化疗药物的敏感性下降,降低药物疗效。通过对pHi的调节,可纠正细胞内碱化,逆转肿瘤耐药。Na+-H+交换蛋白(Na+/H+exchanger,NHE)抑制剂可通过抑制NHE的活性调节pHi,为肿瘤的治疗提供了新的思路和手段。

别嘌醇研究的新进展

别嘌醇为次黄嘌呤的异构体。临床上主要用于治疗痛风 ,随着氧自由基学说研究的不断拓展 ,发现别嘌醇能减少缺血再灌注损伤中氧自由基的生成而达到抗氧化的作用 ,故许多研究者把别嘌醇用于治疗心血管、脑、肺、胃肠和肝等部位缺血再灌注的损害 ;另外 ,它还具有扩管作用为治疗慢性心衰提供了新的药物 ;

牛磺酸抑制晶状体上皮细胞凋亡的实验研究

目的 探讨牛磺酸对过氧化氢所诱发的晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用。方法取兔晶状体离体培养,分为对照组、H_2O_2氧化损伤组、氧化损伤同时加牛磺酸共3组,每组64只晶状体,分别以不同时限观察各组晶状体混浊情况,DNA缺口末端原位检测法(TUNEL法)及DNA片段分析检测各组晶状体上皮细胞凋亡情况。结果 牛磺酸组的晶状体混浊情况和晶状体上皮细胞凋亡率均明显低于H_2O_2氧化损伤组,与对照组差别无统计学意义。DNA片段琼脂糖凝胶电泳:H_2O_2组培养24、36、48及72h各时限均呈现凋亡细胞的典型梯状条带;而培养24h的对照组、牛磺酸组均未出现此变化而仅呈现正常细胞电泳条带。结论 牛磺酸可抑制H_2O_2氧化损伤所诱导的兔晶状体上皮细胞凋亡,从而延缓或减轻白内障形成。

高浓度氧对新生大鼠肺氧自由基损伤及其发育的影响

【目的】观察持续吸入高浓度氧后新生大鼠发育中肺的病理及肺组织内脂质过氧化物的变化,探讨高浓度氧对新生大鼠肺发育的影响。【方法】新生大鼠出生后分别在90%以上氧和空气中持续暴露,于d3、d7、d14、d21,动态观察肺组织病理学改变和胶原染色面积的变化以及肺组织8-异前列腺素F2α含量。【结果】与空气对照组比较,高氧组肺泡发育受阻,出现肺泡变大且结构简单化、肺泡数目减少等肺泡发育不良的慢性肺疾病病理表现,肺损伤逐渐加重,最终纤维化;胶原染色阳性面积于d7时高于对照组,随时间延长而逐渐增加;8-异前列腺素F2α含量d3时升高,d7时最高,以后下降但至d21仍高于对照。【结论】高氧对新生大鼠肺有明显损害,使其肺发育受阻,最终出现胶原增加的纤维化改变;氧化损伤可能是引起慢性高氧肺损伤的原因之一。

次声生物学效应的相关机制

次声广泛存在于环境中,达到一定强度时可以产生某些生物学效应,其基本机制是产生生物共振并引起理化效应,进一步导致机体自由基增多、脑组织谷氨酸浓度和代谢型谷氨酸受体(mGluR)变化、钙超载以及血管内皮内分泌功能改变等。本文综述了次声生物学效应的相关机制及特点,为本领域的研究提供理论参考。

隔姜灸治疗外感寒湿型泄泻178例疗效观察

目的 探讨隔姜灸治疗外感寒湿型泄泻的临床疗效.方法 选择我院2010年1月至2012年12月中医辨证为外感寒湿型泄泻患者178例,根据患者就诊先后顺序随机分为隔姜灸治疗组90例和中药对照组88例.隔姜灸治疗组选用神阙、天枢、足三里、上巨虚、大肠俞等穴,隔姜灸疗,2次/天,3d为1疗程,共1～2个疗程;中药对照组口服霍香正气散,每日1剂,水煎分2次服,3d为1疗程,共1～2个疗程.结果 治疗第1个疗程后隔姜灸治疗组痊愈率60％,总有效率91.1％;中药对照组痊愈率40％,总有效率82.9％.两者差异有统计学意义（p＜0.05）.第2疗程后隔姜灸治疗组痊愈率84％,总有效率97.8％;中药对照组痊愈率71％,总有效率92.0％.两组痊愈率差并有统计学意义（p＜0.05）,但总有效率差异无统计学意义（p＞0.05）.治疗期间均无明显不良反应.结论 隔姜灸治疗组痊愈率明显优于中药对照组,且第1疗程的差异尤为显著.

血塞通软胶囊治疗年龄相关性黄斑变性的临床观察

目的:临床观察中药血塞通软胶囊治疗老年性黄斑变性的效果。方法:将血塞通软胶囊治疗老年性黄斑变性57例与西药治疗的35例作对照。结果:治疗组有效率达83.41%,疗效优于对照组的55.68%。结论:血塞通软胶囊中成药治疗年龄相关性黄斑变性方便可靠,效果有统计学意义,希望临床进一步应用。

氧化应激对鱼藤酮PC12细胞中的毒性作用

目的探讨氧化应激在鱼藤酮多巴胺能神经元PC12细胞中的毒性作用。方法用高分化的PC12细胞作为多巴胺能神经元的细胞模型,经不同浓度的鱼藤酮处理,观察细胞形态及其超微结构,四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性和增殖抑制及细胞代谢状态,生化分析法检测SOD活力、MDA含量,特异性DCF-DA荧光探针检测细胞内ROS水平。结果经鱼藤酮处理24 h后PC12细胞突起样结构消失,细胞体积变小、形态变圆,部分细胞呈悬浮状态;细胞线粒体代谢和超微结构发生改变;PC12细胞增殖抑制,细胞活性降低;细胞内的SOD活力下降,MDA含量增高;荧光探针标记显示PC12细胞荧光强度增加,细胞内ROS含量增加。结论鱼藤酮在体外对多巴胺能神经元有毒性作用,可抑制细胞增殖,影响线粒体代谢,氧化应激可能在鱼藤酮的多巴胺神经元毒性机制中起作用。

苯扎贝特对小鼠血清屏氧酶-1活性的影响

【目的】观察苯扎贝特对小鼠血清屏氧酶-1(PON1)活性的影响,探讨苯扎贝特抗氧化作用。【方法】C57BL/6小鼠(8周龄)32只,随机分为4组,A组普通饲料饲养;B组普通饲料添加苯扎贝特50mg/(kg·d);C组普通饲料添加苯扎贝特100mg/(kg·d);D组普通饲料添加苯扎贝特150mg/(kg·d)。饲养8周后取血清,以苯乙酸作为PON1的底物,用分光光度仪测定小鼠血清PON1活性。【结果】A组血清PON1活性为[32.71±4.40nmol/(min·mL)],B组干预后小鼠血清PON1活性[33.08±5.78nmol/(min·mL)]稍有增加但差异无显著性,C组、D组小鼠血清PON1活性分别为[66.71±11.41nmol/(min·mL),P<0.01]、[120.97±39.83nmol/(min·mL),P<0.01]均显著高于A组和B组。随着苯扎贝特剂量增加高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈剂量依赖性增加,同时甘油三脂(TG)降低,并观察到血清PON1活性与HDL-C(r=0.472,P=0.02)呈正相关。【结论】苯扎贝特能增加血清PON1活性,提示苯扎贝特具有抗氧化作用,这可能与升高HDL-C相关。

基础起搏心电图解读系列讲座(7):单腔起搏器(AAI、VVI)真、假感知功能低下的心电图甄别和诊断

结合对10个图例的分析,详尽阐述了单腔起搏器感知功能的基本概念,真、假感知功能低下的心电图表现及诊断,并分析了单腔起搏器难以确定其感知功能是否真正低下的心电图表现。

运动训练对大鼠运动能力和不同类型肌纤维自由基代谢的影响

目的探讨运动训练对骨骼肌运动能力和不同类型肌纤维自由基代谢的影响。方法雄性SD大鼠随机分为3组:安静组、非训练组和训练组。训练组大鼠进行8周跑台运动(15～20m/min,60min/d,每周6d),在训练前及训练结束后24h进行运动能力测试;非训练组除了在相同时间点进行运动能力测试外,其余时间笼内自由活动;安静组大鼠笼内自由活动,未进行任何干预。非训练组和训练组大鼠在运动测试结束后24h检测3种不同类型(Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb)骨骼肌肌纤维丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性等。结果 (1)与非训练组和运动前比较,训练组最大运动距离和跑步时间明显增加(P<0.01)。(2)安静组红肌(Ⅰ、Ⅱa型)MDA含量高于白肌(Ⅱb型)(P<0.05)。力竭运动恢复期非训练组Ⅱa、Ⅱb型肌纤维MDA含量较安静组明显升高(P<0.05),训练组仅Ⅱb型肌纤维MDA含量升高(P<0.05)。(3)与安静组比较,训练组在力竭运动恢复期Ⅰ型、Ⅱa型肌纤维T-AOC明显升高(P<0.05),但Ⅱb型肌纤维T-AOC无明显变化;而非训练组在力竭运动恢复期Ⅱb型肌纤维T-AOC较安静组降低(P<0.05)。(4)与安静组比较,力竭运动恢复期训练组Ⅰ型、Ⅱa型肌纤维SOD活性升高(P<0.05),而Ⅱb型肌纤维SOD无明显改变,非训练组3种肌纤维的SOD活性在力竭运动恢复期与安静组相比均无明显变化。结论运动训练选择性增强Ⅰ、Ⅱa型肌纤维SOD活性和T-AOC,减少自由基产生,这可能是运动训练改善骨骼肌运动能力的细胞机制。

阿片类药物诱导机体氧化性损伤的研究进展

阿片类药物被广泛应用于镇痛、止咳、止泻、抗焦虑和催眠。阿片类药物在发挥其药理作用的同时 ,也会对机体产生多种毒性作用。其中对机体的氧化性损伤就是重要的毒性作用之一。一方面 ,阿片类药物可引起体内还原剂 (抗氧化剂 )谷胱甘肽浓度的下降 ,使机体容易受到氧化性损伤 ;另一方面 ,阿片类药物能够引起多种自由基浓度的升高 ,对机体多个器官和系统造成氧化性损伤。深入阐明阿片类药物诱导机体氧化性损伤的研究进展 。

可吸收高强度左旋聚丙交酯棒固定兔股骨干骨折

目的 评估固态压缩增强的高强度可吸收左旋聚丙交酯 (SC PLLA)作为接骨材料的价值。方法 SC PLLA棒植入新西兰兔股骨髓腔内 ,定期取出测量试棒的力学强度 ,观察其周围组织的反应 ;分别应用SC PLLA棒和不锈钢针 ,髓内固定股骨干横行骨折 ,比较两组的X线影像学变化。结果 植入 2 4周后 ,SC PLLA棒的弯曲强度下降 30 % ,为 180MPa;剪切强度下降 6 0 % ,为 76MPa。植入 4周后 ,试棒周围有增生活跃的骨组织 ;12周后 ,组织反应基本稳定 ,见板状骨平行于试棒排列 ,内植物—骨组织之间有一薄层的纤维组织。SC PLLA棒和不锈钢针髓内固定股骨干横向截骨均未见明显畸形 ,X线观察显示各期的骨痂量基本相当。结论 SC PLLA的强度能满足长骨干固定的需要 ,髓内固定效能与不锈钢钉相当。SC PLLA在骨内具有良好的组织相容性。

苯磺酸左旋氨氯地平片治疗高血压74例临床研究

目的观察苯磺酸左旋氨氮地平片治疗高血压的疗效。方法选择74例高血压患者，用苯磺酸左旋氨氟地平片2．5mg每天晨起口服，治疗2周疗效不满意者，可使剂量增加至5mg／d，1次／d。观察治疗前后血压变化情况。结果苯磺酸左旋氨氯地平片治疗高血压有效率达91．8％，治疗前后血压显著下降。结论苯磺酸左旋氨氯地平片对高血压有良好的疗效。