血清载脂蛋白A-1、载脂蛋白B和脂蛋白(a)与冠心病相关性的临床分析

目的研究血清载脂蛋白A-1(apoA-1)、载脂蛋白B(apoB)和脂蛋白(Lp)(a)与冠心病(CHD)的关系。方法检测血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、apoA-1、apoB和Lp(a)浓度。采用logistic回归及偏相关方法分析apoA-1、apoB和Lp(a)与CHD的关系。结果CHD组血清apoB(0.97±0.26vs0.85±0.20g/L,P<0.01)、Lp(a)(194.88±15.46vs144.56±12.07mg/L,P<0.01)。浓度和apoB/apoA-1比值(0.91±0.31vs0.76±0.22,P<0.05)显著性高于对照组,apoA-1则相反(1.11±0.20vs1.14±0.20g/L,P<0.05)。多因素Logistic回归分析提示在血脂指标中只有apoB(OR4.67,95%CI1.67-13.06,P<0.01)、TG(OR1.34,95%CI1.08-1.80,P<0.01)和Lp(a)(OR1.03,95%CI1.01-1.05,P<0.01)是CHD的独立危险因子。偏相关分析发现apoB、Lp(a)及apoB/apoA-1值与冠脉病变支数及积分正相关,而apoA-1与之无关。结论血清apoB和Lp(a)是CHD的独立危险因子,且与冠脉病变的严重程度相关,apoA-1与CHD没有相关性。

脂蛋白酯酶活化剂NO-1886的研究进展

NO 18 8 6可以促进脂肪组织、心肌和骨骼肌内脂蛋白酯酶 (lipoproteinlipase ,LPL)mRNA的表达 ,提高其LPL活性 ,从而提高小鼠的肝素后血浆LPL的活性和数量 ;同时NO 1886也能降低血浆甘油三酯 (triglyceride ,TG) ,升高血浆高密度脂蛋白胆固醇 (high densitylipoproteincholestrol,HDL C)水平 ,此外 ,NO 1886还能降低血糖 ,改善胰岛素抵抗和 β 细胞的功能障碍。因此 ,LPL活化剂NO 1886和其他类似激活LPL的制剂对治疗高TG血症、低HDL C水平。

乙醇性脂肪肝模型大鼠肝脏G蛋白表达水平的变化

目的探讨乙醇联合高脂饮食诱导大鼠肝脏早期脂肪变性的可能机制。方法高脂饮食配合乙醇灌胃,连续6周,制备大鼠脂肪肝模型。6周末取血,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C);制备石蜡及冰冻切片,进行肝脏病理学检查。Westernblot分析各组大鼠肝脏组织中抑制型G蛋白α1(Gαi1)、抑制型G蛋白α2(Gαi2)、抑制型G蛋白α3(Gαi3)、刺激型G蛋白(Gαs)表达水平的改变。结果乙醇联合高脂饮食条件下大鼠血清ALT、AST、TG、TC明显升高且伴有HDL-C的显著下降;OilRedO(油红O)染色结果显示乙醇联合高脂饮食组大鼠肝脏脂肪变明显;模型组大鼠肝组织中的Gαi1、Gαi2、Gαs表达明显下降,Gαi3的表达水平在模型组中呈增高趋势。结论乙醇联合高脂饮食能够进一步诱导大鼠肝脏的脂肪变性,病变程度与乙醇剂量呈正相关,其发病机制可能和G蛋白介导的信号传导通路的改变密切相关。

小而密低密度脂蛋白胆固醇血清水平与2型糖尿病相关性研究

目的探讨小而密低密度脂蛋白胆固醇(sdLDL-C)与2型糖尿病(2DM)发生风险的相关性。方法2DM病人723例,根据病人是否服用降脂药物分为两组:531例经降脂药物治疗(2DM-1组),192例未经降脂药物治疗(2DM-2组)。同时收集在北京大学人民医院体检者522例作为对照组,男301例,女221例。对受检者血清中血糖(GLU)、胆固醇(CHO)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、糖化血红蛋白(HbA1c)及sdLDL-C水平进行检测,并分析以上指标与糖尿病的相关性。结果 2DM组血清中sdLDL-C水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2DM-1组较2DM-2组的sdLDL-C水平明显降低(P<0.05)。当校正年龄、性别、CHO、TG、hs-CRP、GLU、HbA1c、LDL-C以及HDL-C后,与sdLDL-C最低四分位数(<0.684 mmol/L)相比,sdLDL-C最高四分位数(>0.984 mmol/L)2DM的OR值为2.88(95%CI=1.92～4.30,P<0.05)。结论 2DM病人血清中的sdLDL-C水平显著升高,与DM的发生以及严重程度具有显著相关性。

胆固醇酯转运蛋白基因-1337C/T多态与血脂异常及辛伐他汀疗效的相关性

目的探讨辛伐他汀调血脂效果与胆固醇酯转运蛋白(cholesteryl ester transfer protein,CETP)基因启动子区-1337C/T单核苷酸多态性的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测315例经辛伐他汀调脂治疗的血脂异常患者CETP基因-1337C/T多态性位点的基因型频率分布情况,并比较各项血脂水平及辛伐他汀调脂治疗效果与该多态位点基因型之间的关系。结果高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平的改变量在-1337C/T多态各基因型组间差异有显著性(F=3.767,P=0.025),CC基因型患者HDL-C升高的幅度较之CT和TT基因型患者明显多出了0.098 mmol.L-1和0.139 mmol.L-1(P<0.05,P<0.01)。结论辛伐他汀调血脂效果与CETP基因-1337C/T多态性有关联。

野黄芩素通过促进胆固醇外流途径抑制巨噬细胞泡沫化的作用机制

目的探究野黄芩素对巨噬细胞泡沫化及胆固醇外流作用的影响及潜在机制。方法使用佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(PMA)诱导THP-1细胞巨噬化,并通过MTT法检测不同浓度野黄芩素对巨噬细胞活力的影响;利用胆固醇含量检测试剂盒及NBD荧光标记胆固醇测定不同浓度野黄芩素对巨噬细胞胆固醇蓄积和外流作用的干预效果;采用分子对接、ELISA、双荧光素酶报告基因和Western blot法确定野黄芩素对PPARγ-LXRα-ABCA1信号通路的激活情况;利用siRNA干扰技术分析PPARγ基因沉默对野黄芩素增强胆固醇外流途径和抑制巨噬细胞泡沫化的影响。结果野黄芩素可剂量依赖性地抑制oxLDL诱导的胆固醇蓄积,加速胆固醇外流途径并明显提高LXRα和ABCA1蛋白表达;同时,野黄芩素可结合PPARγ,并启动其下游LXRα-ABCA1信号通路。此外,PPARγ的基因沉默不仅明显抑制了野黄芩素诱导的LXRα-ABCA1信号通路和胆固醇外流途径,还可逆转野黄芩素对巨噬细胞泡沫化的抑制作用。结论野黄芩素可激活PPARγ并通过启动下游LXR-ABCA1信号通路,促进胆固醇外流途径,进而抑制巨噬细胞泡沫化。

人载脂蛋白M野生型和突变型表达载体的构建及鉴定

目的:构建人载脂蛋白M(ApoM)野生型和突变型原核表达载体pGEX-KG-ApoM及真核表达载体pcDNA3.1(+)-ApoM。方法:Trizol法抽提HepG2细胞总RNA,RT-PCR扩增ApoM全长基因,将基因片断重组到PMD18-T质粒中构建PMD18-T-ApoM重组质粒载体,转化到大肠埃希菌JM109后筛选阳性克隆,提取质粒酶切和测序鉴定。采用Sited-directedMutagenesis定点诱变试剂盒对ApoM基因进行体外定点诱变,DNA测序鉴定定点诱变成功与否。用双酶切方法分别将ApoM野生型和突变型基因定向连接到原核表达载体pGEX-KG和真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建野生型和突变型pGEX-KG-ApoM重组体和pcDNA3.1(+)-ApoM重组体,分别转化到大肠埃希菌DH5α内,提取质粒酶切鉴定和测序鉴定。结果:成功克隆了ApoM并构建了野生型和突变型原核表达载体和真核表达载体。结论:通过RT-PCR,定点诱变及基因重组技术成功构建野生型和突变型重组表达质粒pGEX-KG-ApoM和pcDNA3.1(+)-ApoM,为进一步研究ApoM的功能奠定了基础。

健身走运动对老年人血清脂蛋白（a）的影响

目的通过对健身走运动与老年人血清脂蛋白（a）[Lp（a）]、血脂的相关性研究，观察长期规律性的中等强度健身走运动是否具有防治动脉粥样硬化（AS）和心血管疾病（CVD）的作用。方法经体检选定江苏省徐州市区60～79岁的老年人216名，随机分为对照组（C组）和健走组（S组）。对照组不进行锻炼；健走组进行12个月健身走锻炼，运动强度：以60％～80％最大心率（HRmax）对应的运动负荷为训练强度，运动时间：40～60min／次，频率：3～4次／周。实验期间研究对象的饮食和其他生活习惯无明显变化。实验前后分别抽晨血测定血清Lp（a）、总胆同醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—c）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）的浓度。结果与对照组实验后（C2组）和健走组实验前（S1组）相比，健走组实验后（S2组）TC水平分别降低8．3％和9．4％，差异有统计学意义（P〈0．05）；TG水平分别降低21．6％和20．3％，差异有统计学意义（P〈0．05）；血清LDL—c水平分别降低14．5％和15％，差异有统计学意义（P〈0．05）；HDL—c浓度分别升高20．7％和17．2％，差异具有高度统计学意义（P〈0．01）；Lp（a）中位数水平轻度上升，但差异无统计学意义。结论长期规律性的中等强度健身走运动可降低血清TC、TG及LDL-c水平，升高HDL—c含量，增强机体逆向转运胆固醇的能力，促进外周组织和血管中胆周醇的代谢，减少胆固醇在血管壁上的沉积，这对预防AS和CVD的发生发展具有重要的意义。血清Lp（a）中位数水平轻度升高，有利于血管微小损伤的修复。这种变化与其他血脂、脂蛋白的变化一起，对预防AS和CVD具有积极作用。

血清脂蛋白脂肪酶含量与帕金森病患者不同认知损伤程度的相关性分析

【目的】探讨血清脂蛋白脂肪酶（LPL）水平与帕金森病（PD）患者认知损伤程度的相关性。【方法】采用简易精神状态评价量表（MMSE）与蒙特利尔认知评估（MoCA）评价PD患者认知能力，分为无认知障碍、轻度认知障碍与重度认知障碍，检测不同PD患者血清U吃水平和血脂代谢产物水平，分析LPL水平与认知损伤程度的相关性，并与90名健康体检者相关检测指标水平对照。【结果】无认知障碍的PD患者血清LPL水平与健康体检者比较无显著性差异（P〉0．05），有认知障碍的PD患者血清LPL水平较健康对照显著性下降（P〈0．05）；轻度认知障碍与重度认知障碍患者LPL水平比较无显著性差异（P〉0．05）。不同组间血脂代谢产物水平无显著性差异（P〉0．05）。【结论】血清LPL水平的降低可能与PD患者的认知能力下降有关。

脂蛋白脂酶活化剂NO-1886的研究现状及展望

NO-1886增加脂肪组织、心肌和骨骼肌脂蛋白酯酶活性,升高血浆高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平,抑制肥胖,下调抗炎因子表达,保护胰岛细胞及肝、肾功能,改善胰岛素抵抗和糖、脂代谢紊乱,改善血管内皮功能,抑制血管平滑肌收缩,增加细胞内糖原合成,促进细胞胆固醇的流出,减少细胞内胆固醇蓄积,是NO-1886减少动脉粥样硬化及糖尿病的一个关键。另外,高甘油三酯水平与癌症发生发展的风险有关,抑制癌症发展可能将是NO-1886一个新的研究方向。

烟酸通过下调PCSK9的表达促进HepG2细胞摄取LDL-C

目的探讨烟酸对HepG2细胞摄取及代谢LDL-C的影响,寻找烟酸改善血脂异常,减缓动脉粥样硬化进程的相关分子机制,为其临床用药提供指导。方法采用油红O染色观察细胞内脂质蓄积;酶法检测细胞内胆固醇含量;荧光流式检测细胞表面LDLR丰度分布;qPCR及Western blot检测LDLR、SREBP2以及PCSK9的mRNA及蛋白含量变化。结果经烟酸处理的HepG2细胞,油红O阳性细胞数及细胞内红染脂滴增多,细胞内TC、FC水平明显增高(P<0.05);LDLR mRNA含量无差异(P>0.05),而细胞膜表面LDLR分布丰度及细胞内LDLR的含量明显增加(P<0.05);烟酸对SREBP2的表达无影响,却能明显下调PCSK9的表达。结论烟酸可能通过下调PCSK9的表达,减少PCSK9成熟体蛋白含量,使得LDLR降解减少,进而增加LDLR含量,促进HepG2细胞摄取LDL-C。

动脉粥样硬化斑块内新生血管与斑块稳定性的研究进展

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是引发心脑血管疾病的最重要的病理基础之一。传统观点认为AS斑块引起的动脉管腔狭窄是决定病情轻重的主要因素。最新研究表明,新生血管与AS斑块稳定性密切相关,AS斑块破裂而导致的急性冠脉综合征是引起重大心血管事件的主要原因之一。该文综述了AS斑块内血管新生与斑块稳定性的关联性,以及如何通过促进新生血管的成熟增强斑块稳定性。

豚鼠高脂血症模型LDL-C代谢紊乱的机制研究

目的建立豚鼠高胆固醇血症模型,并对形成机制进行探讨。方法高脂饲料诱导法建立豚鼠高胆固醇血症模型,分别于造模1、2、4周检测血清脂质的动态变化;检测肝脏脂质;酶联免疫分析法测定血清ox-LDL浓度;实时荧光定量PCR法检测肝脏CYP7A1(cholesterol 7a-hydroxylaseA1)、肝脏法尼酯X受体(hepatic farnesoid X receptor,FXR)、肝X受体α(liver X receptor,LXRα)、HMG-CoA还原酶mRNA的相对表达;Western blot法检测肝脏LDL-R的蛋白表达情况。结果豚鼠经高脂饲料诱导1周后,模型组与对照组比较血清TC、LDL-C即发生升高,随造模时间延长,血脂一直维持在较高水平。造模4周后模型组血清ox-LDL、sd-LDL浓度,肝脏TC水平比正常组升高。肝脏HMG-CoA还原酶表达下调,LDL-R蛋白表达量明显高于正常组。值得注意的是豚鼠肝脏法尼酯X受体(FXR)表达明显上调,且肝X受体α(LXRα)表达也明显上调,但二者激活水平相当,最终未改变肝脏CYP7A1mRNA的表达水平。结论高脂诱导豚鼠形成高胆固醇血症主要与外源性胆固醇和低密度脂蛋白的清除发生障碍有关。

氧化低密度脂蛋白对大鼠心肌成纤维细胞胶原的影响

目的探讨氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)对大鼠心肌成纤维细胞胶原合成的影响。方法体外培养乳鼠心肌成纤维细胞,加入ox-LDL(10、20、50、100μg/ml)干预24h,3H-胸腺嘧啶核苷掺入法观察细胞DNA合成,3H-脯氨酸掺入法观察胶原的合成,酶谱法测定基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9活性,Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白表达水平,RT-PCR检测MMP-2、MMP-9的mRNA表达。结果和对照组比较,ox-LDL作用于心肌成纤维细胞24h后,呈浓度依赖性促进细胞DNA合成,同时抑制细胞胶原合成。ox-LDL显著增加MMP-2和MMP-9活性,但各组间作用无明显区别;同时MMP-2和MMP-9蛋白表达也显著性增加,以100μg/ml组作用最强。50μg/ml ox-LDL能显著增加MMP-2和MMP-9的mRNA表达,100μg/ml组作用更强。结论ox-LDL作用于心肌成纤维细胞能减少胶原的合成并增加胶原的降解,提示其在心肌重构过程中起一定的作用。

胆固醇逆向转运过程中新靶点及其药物的研究进展

血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)拮抗动脉粥样硬化(AS)的最主要机制在于参与胆固醇逆向转运(RCT)过程。近年来,将RCT过程中几个重要蛋白质和酶类,包括apoAⅠ,ABCA1,CETP等作为新的用药靶点进行了药物干预的尝试,在调节血脂和预防AS等方面取得了良好的效果,开创了治疗该类疾病的新局面,对下一步的疾病治疗具有重要的指导作用。

氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞凋亡中前蛋白转化酶枯草溶菌素9与炎症因子的关系

目的观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡中前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与炎症因子表达的关系。方法用ox-LDL处理HUVECs 0小时、12小时、24小时、36小时、48小时,分别检测PCSK9、白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、C反应蛋白(CRP)mRNA和蛋白的表达以及核因子-κB(NF-κB)核位移。Lipofectamine 2000转染PCSK9小分子干扰RNA(PCSK9siRNA)进入HUVECs 6小时后,加入ox-LDL处理24小时,分别检测PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP的表达以及NF-κB核位移。结果随着ox-LDL处理时间的增加,PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP mRNA的表达上调、NF-κB的核位移明显增加,以24小时表达(核位移)最明显,随后表达(核位移)逐渐减少(P<0.05);细胞培养上清液中IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP蛋白的浓度随着时间的推移逐渐增加,48小时达到峰值,与0小时比较,48小时增加最明显(P<0.01)。siRNA组PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP mRNA和蛋白的表达以及NF-κB核位移较阴性转染组明显降低(P<0.01)。结论 PCSK9siRNA能够抑制ox-LDL诱导的HUVECs炎症因子的表达,PCSK9可能参与了炎症反应的调节。

硫化氢对动脉粥样硬化胆固醇代谢的调节作用

目的观察H2S对动脉粥样硬化(AS)胆固醇代谢的影响,并探究其作用机制。方法用高脂饲料结合维生素D3的方法建立AS大鼠模型,并给与腹腔注射NaHS 56μmol·kg-1.d-1,持续12周。检测血脂水平及肝胆固醇含量。HepG2细胞给与NaHS 100μmol·L-16 h后,用RT-PCR方法检测羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCoA reductase)和低密度脂蛋白受体(LDLR)mRNA表达。结果 NaHS组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-Ch)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-Ch)均较模型组降低,肝胆固醇含量下降。NaHS使HepG2细胞HMGCoA Re-ductase mRNA表达下降,LDLR mRNA表达增加。结论H2S对AS胆固醇代谢具有调节作用,能下调肝HMGCoAReductase,使胆固醇合成下降;上调肝脏LDLR表达,降低血清总胆固醇水平。

膜联蛋白A2磷酸化与功能调控研究进展

膜联蛋白A2(AnxA2)是一种多功能蛋白,通过多种翻译后修饰来调控其复杂的功能。蛋白质磷酸化是目前最受关注的AnxA2翻译后修饰方式,Ser11、Ser25和Tyr23是最主要的3个磷酸化位点。磷酸化对AnxA2功能调控的可能影响一直是热门话题。近年来研究发现在肿瘤细胞外泌体中也存在AnxA2表达,故对AnxA2及其磷酸化的研究也从细胞内拓展至细胞外。AnxA2及其磷酸化的研究在众多临床学科领域也取得了令人瞩目的成果。本文就Ser11、Ser25和Tyr23磷酸化位点对AnxA2功能调控的影响及其在外泌体中的研究进展作一综述。

载脂蛋白E在血栓相关性疾病及恶性肿瘤中的研究进展

载脂蛋白E是正常人血浆脂蛋白的重要成分,在参与脂质的转运、储存、利用及排泄中发挥重要作用。研究表明,载脂蛋白E的基因多态性与多种血栓相关疾病有密切关系,包括冠心病、糖尿病肾病、阿尔茨海默病等,同时载脂蛋白E作为一种与细胞增殖相关蛋白,其与恶性肿瘤的关系也成为目前研究的热点,本文就载脂蛋白E在上述领域中的研究进展做一综述。

载脂蛋白嵌合模拟肽对低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡的影响

目的观察模拟肽Ac-hE-18A-NH2对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的RAW264.7巨噬细胞凋亡的影响。方法50 mg.L-1oxLDL处理RAW 264.7细胞48 h后加入不同浓度的Ac-hE-18A-NH2(1、10、50、100 mg.L-1)和β-环糊精(β-CD)或布雷菲得菌素(BFA)共同孵育24 h。通过流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒检测caspase-3活性及细胞内胆固醇含量,Western blot检测细胞bcl-2蛋白的表达,液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出。结果 oxLDL诱导的RAW 264.7巨噬细胞的凋亡率随着oxLDL浓度的增加和处理时间的延长而明显提高。Ac-hE-18A-NH2(1、10、50、100mg.L-1)干预后细胞凋亡率以浓度依赖的方式减少。Ac-hE-18A-NH2呈浓度依赖性的促进细胞内胆固醇流出和降低细胞内的胆固醇含量,降低caspase-3的活性,上调bcl-2的蛋白表达。β-CD与Ac-hE-18A-NH2共同作用后胆固醇流出明显增加,细胞凋亡率相应减少。而BFA作用相反。结论Ac-hE-18A-NH2明显抑制oxLDL诱导的巨噬细胞凋亡,其作用可能与促进细胞胆固醇流出、减少细胞内胆固醇蓄积有关。