邻苯二甲酸二异丁酯——新型的ANO2通道开放剂

目的筛选ANO2的特异性配体药物,为医药行业开发靶向ANO2新药提供先导化合物的结构信息。方法构建ANO2过表达的HEK293细胞株,应用共聚焦显微镜-膜片钳全细胞记录模式技术筛选ANO2的特异性配体。结果在胞内外钳制电压100 mV及含1μmol·L^(-1)钙离子电极内液的记录条件下,邻苯二甲酸二异丁酯(diisobutyl phthalate,DIBP)给药前ANO2介导的氯电流密度为(14.67±2.87)pA/pF,给药后ANO2介导的氯电流电导为(28.75±4.05)pA/pF,差异具有统计学意义(P<0.01);钙荧光成像实验结果表明DIBP无调节胞内游离钙信号的作用;在0μmol·L^(-1)钙离子条件下,DIBP对静息状态的ANO2通道不具有直接的激活作用。结论DIBP通过直接作用增强已活化ANO2通道的电导,其作为一种新型的促ANO2通道开放剂为开发靶向ANO2的药物提供结构信息,同时也为研究其他邻苯二甲酸酯类物质的毒理作用提供一定的理论基础。

线粒体相关内质网膜及其在心肌缺血/再灌注损伤中作用的研究进展

一直以来,细胞器被认为具有各自特异的组成和结构,独立发挥作用。现在越来越多研究表明,相邻的不同细胞器之间可以通过蛋白-蛋白或蛋白-脂质形成膜接触点,从而发生相互作用。线粒体相关内质网膜(mitochondria-associated endoplasmic reticulum membranes,MAMs)是线粒体与内质网之间相互接触的膜结构,多种蛋白富集在MAMs上,对内质网和线粒体之间的物质交流及二者的功能,起严格的调控作用。在心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)中,MAMs参与线粒体分裂、线粒体自噬、氧化应激、钙失衡等一系列关键的病理进程,对病情的发展、转归起着极为重要的作用,是一个很有希望的治疗靶点。该文着重于MAMs的结构、功能和其对MIRI进程调控方面的研究进展,进行一个详细的综述。

映山红花总黄酮促进大鼠脑血管内皮细胞体外形成血管作用及与VEGFR_(2)和神经源性H_(2)S的关系

目的探讨映山红花总黄酮(total flavones of rhododendra,TFR)促大鼠脑血管内皮细胞体外形成血管作用及与VEGFR_(2)和神经源性硫化氢(H_(2)S)的关系。方法采用大鼠脑血管内皮细胞单独培养及和与海马神经元共培养,分别采用不同的实验方法检测细胞增殖、迁移、成管及H_(2)S含量和钙离子荧光强度,包括CCK-8法、细胞划痕法、Transwell法、基质胶成管、H_(2)S试剂盒及钙离子荧光探针法。结果在单独培养的大鼠脑血管内皮细胞上,H_(2)S供体NaHS(200μmol·L^(-1))和TFR(90、270、810 mg·L^(-1))对大鼠脑血管内皮细胞的增殖、迁移、成管及[Ca^(2+)]i荧光强度都有明显的促进作用。而VEGFR_(2)阻断剂SU5416(10μmol·L^(-1))可抑制TFR的促进内皮细胞增殖、迁移和形成血管及[Ca^(2+)]i荧光强度;在与海马神经元共培养的大鼠脑血管内皮细胞上,TFR显著地升高共培养中H_(2)S含量,并被CBS抑制剂AOAA(200μmol·L^(-1))抑制。与此同时,TFR明显地促进共培养中大鼠脑血管内皮细胞的形成血管作用,并可被AOAA和VEGFR_(2)阻断剂SU5416显著地抑制。结论TFR在体外可通过VEGFR_(2)升高[Ca^(2+)]i来促进脑血管内皮细胞形成血管,并可通过诱导神经元中CBS生成H_(2)S作用于大鼠脑血管内皮细胞的VEGFR_(2)来促进血管形成。

替米沙坦通过直接抑制Kv2.1通道促进离体大鼠的胰岛素分泌

目的研究替米沙坦促进大鼠胰岛素分泌作用相关的信号通路。方法(1)分离成年Wistar大鼠胰腺获得胰岛和胰岛细胞,通过胰岛素分泌实验观察药物对胰岛素分泌的影响,通过钙成像实验和全细胞膜片钳技术观察药物对β细胞内Ca^(2+)浓度的变化和对离子通道的作用。(2)使用过表达电压门控性钾(voltage-gated potassium channel,Kv)通道2.1亚型(Kv2.1)的慢病毒转染中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞构建CHO-Kv2.1细胞系,使用膜片钳技术观察替米沙坦对Kv2.1通道的直接作用。结果缬沙坦和厄贝沙坦无类似替米沙坦的高糖浓度下促胰岛素分泌、升高β细胞内Ca^(2+)浓度和抑制β细胞的Kv通道等作用。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)阻断剂GW9662亦未阻断替米沙坦的上述作用。而替米沙坦可以浓度依赖性地抑制CHO-Kv2.1细胞的Kv2.1通道电流。结论替米沙坦的促胰岛素分泌作用可能与血管紧张素Ⅱ-1型(angiotensin II type 1,AT-1)受体和PPARγ无关,但至少与对Kv2.1通道的直接抑制作用有关。

铁死亡在骨代谢中的调控机制

铁死亡是一种新型的细胞死亡方式,以细胞内铁过载和脂质过氧化物过度积累为特征,与多种骨科疾病的发生密切相关。骨质疏松是以骨密度降低为主要病理表现的慢性代谢性骨病,近年来随着研究的不断深入,发现铁死亡对骨代谢着重要的影响,而通过对铁死亡的调节以维持骨稳态,在骨质疏松的防治领域取得了一定的突破,展现出了良好的应用前景。该文阐述了铁死亡的发生机制和调节途径,梳理了铁死亡对骨代谢的调控机制,并总结了铁死亡在骨质疏松症发病及治疗中的研究进展,以期拓宽骨代谢的研究思路。

基于Ca^(2+)-CaMKⅡ信号通路的济川煎治疗阳虚便秘的作用及分子机制

目的基于Ca^(2+)-CaMKⅡ通路观察济川煎对阳虚便秘大鼠的治疗作用及分子机制。方法采用白醋+活性炭冰水联合复方地芬诺酯片复制阳虚便秘大鼠模型。将模型成功大鼠随机分为5组,即模型组、莫沙必利组(1.88 mg·kg^(-1))、济川煎高(8.26 g·kg^(-1))、中(4.31 g·kg^(-1))、低(2.16 g·kg^(-1))剂量组,灌胃给药每日1次,连续7 d。末次给药,记录大鼠状态并评分,进行排便功能测定;分离模型大鼠结肠平滑肌细胞并鉴定,FCM检测结肠平滑肌细胞内Ca^(2+)浓度变化;采用ELISA法检测大鼠血清中cAMP、cGMP含量及其比值;采用RT-PCR及Western blot法检测大鼠结肠平滑肌细胞CaM、CaMKⅡ亚型的表达情况。结果济川煎可明显缓解模型大鼠腹胀,摄食、饮水量、排便减少及体质量降低的症状(P<0.05),评分明显升高(P<0.01);能明显缩短首粒排便时间(P<0.01),增加排便粒数(P<0.05);济川煎还可明显增加模型大鼠血清中cAMP含量(P<0.05),减少cGMP含量(P<0.01),cAMP/cGMP比值明显增加(P<0.01);明显降低大鼠结肠平滑肌细胞内Ca^(2+)浓度(P<0.01);PCR及Western blot检测结果显示,济川煎可明显降低CaM及CaMKⅡβ、γ、δ亚型蛋白表达(P<0.01)。结论济川煎对阳虚便秘具有明显的治疗作用,可能与其调节Ca^(2+)-CaMKⅡ信号通路有关。

高盐饮食上调跨膜蛋白16A致C57BL/6J小鼠脑动脉重构的机制

目的探讨高盐上调跨膜蛋白16A(transmembrane protein 16A,TMEM16A)致小鼠脑动脉重构的机制。方法40只C57BL/6J小鼠随机分为4组(10只/组,模型制备8周),空白对照组(正常饮水、摄食)、低盐组(2%高盐饲料)、中盐组(4%高盐饲料)和高盐组(8%高盐饲料)。HE染色观察脑动脉形态学变化;血管渗透性实验比较脑组织颜色及吸光度值;免疫荧光检测脑动脉TMEM16A的表达;PCR和Western blot检测脑动脉TMEM16A的mRNA和蛋白表达;离体肌张力检测脑动脉舒缩反应;膜片钳记录脑动脉平滑肌细胞钙激活氯通道(calcium-activated chloride channels,CaCC)电流。结果与空白对照组相比,2%、4%和8%高盐饮食可浓度依赖性引起脑动脉管壁逐渐增厚、管腔狭窄;注射埃文斯兰后,4%和8%高盐组脑组织逐渐变蓝,且吸光度值明显增加;2%、4%和8%高盐组脑动脉对60 mmol·L^(-1) KCl的收缩反应逐渐增强,对10-5 mol·L^(-1)乙酰胆碱的舒张反应逐渐减弱;TMEM16A阻断剂可抑制脑动脉对60 mmol·L^(-1)KCl的收缩反应;高盐组脑动脉TMEM16A不仅荧光表达逐渐增强,且mRNA和蛋白表达逐渐增多,脑动脉平滑肌细胞的CaCC电流逐渐增大。结论高盐可致C57BL/6J小鼠脑动脉重构,其机制与上调TMEM16A表达和/功能有关。

间苯三酚对泌尿平滑肌痉挛的调控作用机制

目的探讨间苯三酚对膀胱平滑肌痉挛的调控作用及其机制。方法体外水平上,采用膀胱肌条实验验证间苯三酚对不同药物刺激下膀胱痉挛的缓解作用;同时,RT-qPCR和Western blot检测间苯三酚解痉挛作用对膀胱组织中钙离子信号通路相关基因和蛋白的表达水平。转录组学分析间苯三酚在解除膀胱痉挛时对其他相关通路基因的影响,用RT-qPCR来验证相关基因的表达情况。结果间苯三酚能够缓解不同药物刺激引起的膀胱痉挛,且解痉作用随浓度增高而增强,组织细胞中Calponin 1和MYLK3的表达水平升高,PKCα表达水平降低。RT-qPCR检测结果显示间苯三酚作用时,小鼠膀胱组织中Gprc5bG、Ppp2r5a、Chpt1、Prkar2b、Abcd2、Rasd1基因的表达水平均明显降低,与RNA-seq的测序结果一致。结论间苯三酚具有缓解膀胱平滑肌痉挛的作用,其作用机制与钙离子信号通路相关。间苯三酚作用于膀胱平滑肌后,抑制了细胞外Ca^(2+)内流,结合于细胞中的钙调蛋白4Ca^(2+)CaM复合物减少,导致游离的Calponin 1含量升高。钙调蛋白使得MLCK活化程度下降,MLC磷酸化减少,抑制了Mg^(2+)-ATP酶的作用,肌球蛋白横桥与细肌丝肌动蛋白分离,肌肉舒张。同时,间苯三酚还抑制Rasd1基因的表达,提示其在作用于膀胱平滑肌时还可能与细胞周期、蛋白磷酸化、胆碱代谢、ATP合成以及肿瘤信号通路相关。

芪归银方联合左氧氟沙星对铜绿假单胞菌体外抑菌及血清药理学试验

目的基于中药提取物和含药血清两个层次研究芪归银方(Qiguiyin decoction,QGYD)对铜绿假单胞菌(seudomonas aeruginosa,PA)标准菌株和耐药菌株的抑制作用及OGYD增强左氧氟沙星(levofloxacin,LEV)抗菌活性的作用,为中药联合抗生素防治耐药菌的临床用药提供参考。方法采用肉汤稀释法测定LEV、QGYD对PA的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);微量棋盘稀释法测定两药联合的MIC,计算抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI);制备LEV组、QGYD组、LEV+QGYD组和空白对照组血清,用MHB肉汤将各组血清均稀释成10%~90%12种浓度干预PA,测定血清的抑菌率、MIC_(90)和MBC。结果LEV联用QGYD后药液对PA(标准/耐药)的MIC明显降低,0.5<FICI≤1;各组10%~90%含药血清对PA(标准/耐药)具有一定程度的抑制作用,且呈现随着血清比例的增加抑菌率逐渐升高的趋势;与空白对照组血清相比,QGYD组含药血清的抑菌作用明显增强;LEV组血清对PA标准菌株MIC_(90)为15%,联合QGYD后MIC_(90)下降到10%,MBC均为15%。对PA耐药菌株的MIC_(90)为55%,联合QGYD后MIC_(90)为45%,降低了10%。结论QGYD提取物和QGYD含药血清均能有效抑制PA;LEV联合QGYD后药液和含药血清对PA的MIC或MIC_(90)均明显降低,抗菌活性增强。

姜黄素对黑素的抑制作用及机制

目的姜黄素调节B16F10细胞微环境影响黑素合成的机制研究。方法(1)不同浓度姜黄素分别作用于B16F10及HaCaT细胞,MTT法检测该两种细胞活力;NaOH裂解法检测B16F10细胞黑素含量;L-DOPA氧化法检测B16F10细胞酪氨酸酶活性;Western blot法检测B16F10细胞黑素生成(gp100、Mitf、GPNMB、Tyr、TRP2)及转运(Rab27a)关键蛋白表达水平;HaCaT细胞:ISG15蛋白表达水平。(2)不同浓度ISG15作用于B16F10细胞,NaOH裂解法检测黑素含量;L-DOPA氧化法检测酪氨酸酶活性;结果姜黄素在一定浓度范围内,直接抑制酪氨酸酶活性及黑素生成,且抑制黑素细胞迁移;ISG15蛋白作用于黑素细胞,明显促进gp100蛋白表达,酪氨酸酶活力,黑素含量。姜黄素抑制HaCaT细胞ISG15蛋白表达,改变黑素细胞微环境,通过ISG15间接发挥抑制黑素合成作用。结论姜黄素除直接抑制黑素合成外,还可以通过抑制ISG15蛋白的表达,改变黑素细胞微环境,间接发挥抑制黑素合成作用。

TRPV1受体T704位点突变对其糖基化及功能的影响

瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)是一种非选择性阳离子通道,尤其对钙离子有高渗透性,在辣椒素、热刺激(>43℃)、酸性pH和内源性代谢物质等伤害性刺激下被激活[1],是镇痛药物研发的关键靶向分子。TRPV1通道C-端的TRP结构域中,T704位点是重要的磷酸化位点之一,影响TRPV1对伤害性刺激的敏感性[2]。本研究利用F11细胞,通过构建和转染大鼠TRPV1定点突变质粒TRPV1 T704A与TRPV1 T704E,探讨TRPV1受体T704位点突变对TRPV1蛋白表达、糖基化修饰、膜转运和细胞钙内流的影响。

氢分子医学研究进展

过去人们对氢气的生物学效应认识存在误解。最近研究发现,氢气是一种良好的选择性抗氧化物质,对许多疾病具有显著治疗作用,本文就相关研究最新进展进行综述,并对将来研究方向进行展望。

超短脉冲Er:YAG激光对提高牙本质粘结强度最佳脉冲宽度的研究

目的探究超短脉冲Er:YAG激光对提高牙本质粘结强度的最佳脉冲宽度。方法选取50颗离体的第三磨牙在颈部按楔状缺损形态制备,取冠向面,将样本随机分为5组,G0组为空白对照组,G1~G4组,使用30 MJ,20 Hz Er:YAG激光处理,脉冲宽度分别设置为30、40、50、60μs。扫描电子显微镜(SEM)观察各组牙本质表面的形态学改变,并通过能量色散X射线光谱(EDX)检测各组钙磷比。通过冷热循环实验,以万能力学试验机测试各组剪切粘结强度(SBS)及体式显微镜下的断裂形式。评价不同脉宽值对提高牙本质粘结强度的影响。结果SEM观察牙本质表面经不同脉冲宽度激光处理后玷污层均去除,牙本质小管有不同程度的开放,经激光处理后牙本质表面钙磷比均上升,G2组激光处理前后的钙磷比值变化差异有统计学意义(P<0.05)。冷热循环实验后SBS平均值:G2>G3>G1>G4>G0,G2组与G0组、G1组、G3组和G4组组间差异有统计学意义(P<0.05);G0组与G1组、G2组、G3组和G4组组间差异有统计学意义(P<0.05)。各组断裂形式主要为类型1和类型3。结论30 MJ,20 Hz Er:YAG激光脉冲宽度设置为40μs可显著提高牙本质的粘结强度。

鬼针草总黄酮部分化学成分研究

目的对鬼针草中的化学成分进行分离纯化,并筛选出具有抗肝纤维化活性的单体化合物。方法采用大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、MCI小孔树脂、十八烷基硅烷键合硅胶柱等柱层析的方法进行分离纯化,并利用波谱技术进行化合物的鉴定。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测单体化合物对肝星状细胞T6(HSC-T6)的抑制作用。结果从鬼针草中分离鉴定的化合物为3-羟基乙酰基吲哚(1)、山奈酚(2)、6,7,3',4'-四羟基橙酮(3)、槲皮素(4)、奥卡宁(5)、松脂素(6)、1,2,13-三羟基-3,11(E)-十三二烯-5,7,9-三炔(7)、异奥卡宁(8)、邻苯二甲酸-双(2'-乙基庚基)酯(9)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(10)、(2S/2R)-异奥卡宁-7-O-β-D-(2″,4″,6″-三乙酰基)吡喃葡糖苷(11/12)、2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-1,13-二羟基-3,11(E)十三二烯-5,7,9-三炔(13)。结论化合物6,9为首次从鬼针草种属中分离得到。其中黄酮类化合物2,4具有较强的体外抑制HSC-T6细胞的增殖作用。

氢气医学研究的进展、争议和挑战

氢气是一种无色、无味、具有生物活性的还原性小分子气体,可与机体内的活性氧发生反应。目前认为氢气具有抗氧化、抗炎、抗凋亡等生物学作用,且氢气具有极高生物安全性。近年来氢气相关研究的范围不断扩大,氢气应用的模型从急性病到慢性病、从良性病到恶性病都有所涉及。此外,氢气应用的手段也在逐渐丰富,包括氢气吸入、氢水饮用、含氢溶液静脉注射或局部使用以及含氢透析液透析等。与此同时逐渐增多的临床研究也进一步证明,氢气在疾病治疗方面的重要作用和独特优势。然而,氢气生物学效应的分子机制目前仍未阐明,许多学者和普通大众对氢气生物学效应的研究进展缺乏了解,这限制了氢气医学的发展及相关产品的研发,氢气医学的研究和普及依然任重而道远。

膀胱移行细胞癌中促红细胞生成素及其受体的表达

目的探讨促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)在膀胱移行细胞癌(TCC)组织中的表达,并探讨其临床意义。方法应用免疫组织化学方法、RT-PCR方法检测70例膀胱TCC组织、15例癌旁组织、10例正常膀胱组织中EPO和EPOR的蛋白和 mRNA的表达。结果70例膀胱TCC组织有44例(62.9%)EPO蛋白阳性表达,有29例(41.4%)EPOR蛋白阳性表达;15例膀胱TCC癌旁组织及10例正常膀胱组织均未见EPO、EPOR蛋白的表达。EPO蛋白表达强度与膀胱TCC的组织学分级相关(rs=0.329,P<0.05),而与临床分期则无明显的相关性。膀胱癌组织中EPO与EPOR表达具有相关性(rs=0.346,P<0.01)。RT-PCR检测发现膀胱移行细胞癌组织中EPO及其受体 mRNA的表达明显高于正常膀胱组织、癌旁组织中EPO及其受体 mRNA的表达(P<0.01)。结论EPO、EPOR在膀胱TCC组织中过表达,提示EPO、EPOR在膀胱TCC的发生、发展过程中可能起重要作用;EPO蛋白表达强度与膀胱TCC的组织学分级有明显相关性,可能成为膀胱TCC不良预后的指标之一。

鬼针草乙醇提取物化学成分及其生物活性研究

目的对鬼针草乙醇提取物化学成分进行分离纯化鉴定,并初步筛选出具有较好生物活性的单体。方法用HPD 100型大孔吸附树脂、小孔树脂凝胶MCI、Sephadex LH-20凝胶、硅胶等柱层析方法分离纯化,经核磁解析并与文献比对鉴定结构。体外培养HSC-T6肝星状细胞和RAW264.7腹腔巨噬细胞,不同浓度(6.25、12.5、25、50、100μmol/L)单体化合物刺激后,MTT法观察单体化合物对细胞增殖的影响,ELISA法测定单体化合物对RAW264.7细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF)-α的影响。结果本研究中共得到12个单体化合物,分别为:咖啡酸乙酯(1)、异奥卡宁(2)、苏式-二羟基脱氢二松柏醇(3)、正二十八烷(4)、橙皮苷(5)、柚皮素(6)、芹菜素(7)、山奈酚-3-O-α-l-鼠李糖苷(8)、木犀草素(9)、麦芽糖(10)、没食子酸(11)、金丝桃苷(12),其中化合物1、3为首次从该植物中分离得到。化合物9、11(6.25~100μmol/L)可抑制HSC-T6细胞增殖反应,并显著减少RAW264.7细胞培养上清液中的TNF-α浓度。结论本研究从鬼针草乙醇提取物中分离12个单体化合物,其中2个为首次分离得到。化合物9和11具有一定的体外抑制HSC-T6细胞增殖和RAW264.7细胞分泌TNF-α的作用。

成骨细胞钾、钙离子通道的研究进展

骨质疏松的发病率呈现逐年上升的趋势,患者生活质量下降,其所带来的危害已引起全世界的广泛关注。骨质疏松的发病机制复杂,涉及因素较多,但成骨细胞功能障碍处于中心环节。研究发现成骨细胞表达多种离子通道,本文将对钾离子和钙离子通道进行综述分析。

白藜芦醇通过Zn^(2+)促进自噬发挥心肌细胞保护作用

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)是否通过锌离子(Zinc,Zn^(2+))促进自噬,抑制内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),发挥心肌细胞保护作用及可能的信号机制。方法常规培养H9c2细胞,2-脱氧葡萄糖(2-deoxyglucose,2-DG)建立ERS模型。随机分为Control组、2-DG组、Res+2-DG组、锌离子螯合剂TPEN+Res+2-DG组、自噬抑制剂3-MA+Res+2-DG组。MTT和CCK-8法检测细胞活性;Western blot法检测ERS分子伴侣蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94)和自噬蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、p-AMPK的表达水平;免疫荧光检测LC3蛋白的表达;激光扫描共聚焦显微镜检测线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)和细胞内Zn^(2+)水平。结果与Control组相比,2-DG使细胞活性降低,Res抑制2-DG引起的变化,此作用被TPEN所逆转;2-DG使GRP78、GRP94表达明显增多,Res抑制2-DG引起的变化,此作用被TPEN逆转;2-DG使LC3Ⅱ/Ⅰ、p-AMPK表达增多,p62表达减少,Res促进2-DG引起的变化,此作用被TPEN逆转;2-DG使LC3的荧光强度升高,Res增强2-DG的作用,此作用被TPEN和3-MA所逆转;2-DG使线粒体TMRE红色荧光及细胞内Zn^(2+)的绿色荧光强度明显降低,Res抑制2-DG引起的荧光强度变化,这些作用同样被TPEN和3-MA所逆转。以上结果差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论Res通过增加细胞内Zn^(2+)促进自噬,抑制ERS进而阻止mPTP的开放,发挥心肌细胞保护作用。

TRPM8通道激活剂薄荷醇对肺动脉高压大鼠的治疗作用

目的 探讨瞬时受体电位M8(transient receptor potential melastatin-8,TRPM8)通道激活剂薄荷醇(menthol)对野百合碱(monocrotaline, MCT)诱导的肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension, PAH)大鼠的治疗作用。方法 SPF级雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为6组:正常对照组、MCT组、MCT+menthol(1 mg·kg^(-1)·d^(-1))治疗组、MCT+menthol(2 mg·kg^(-1)·d^(-1))治疗组、MCT+menthol(5 mg·kg^(-1)·d^(-1))治疗组、MCT+menthol(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))治疗组。腹腔注射MCT(50 mg·kg^(-1))构建PAH大鼠模型。造模1周后治疗组分别给予不同剂量的menthol灌胃治疗,持续2周。通过血流动力学检测、肺组织病理学染色、分子生物学技术,观察menthol对PAH大鼠右心室收缩压(RVSP)、右心室肥厚、肺小动脉(sPA)增殖重塑及钙通道蛋白(TRPM8、TRPC1、TRPC6)基因表达的影响。结果 与正常组相比,MCT组RVSP和右心质量指数(RVMI)明显升高,sPA(管腔直径50~150μm)管壁增厚,肺动脉中TRPM8表达明显降低,而TRPC1、TRPC6、心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide, ANP)和脑钠肽(brain natriuretic peptide, BNP)表达明显上调,表明PAH大鼠造模成功;不同剂量menthol治疗均可明显降低PAH大鼠的RVSP和RVMI,改善sPA增生情况,上调TRPM8的表达,同时明显降低TRPC1、TRPC6、ANP及BNP的表达。结论 Menthol通过抑制TRPC1、TRPC6、ANP和BNP的表达,明显减轻MCT诱导的PAH和右心室肥大。