黄芪多糖对大鼠肌组织能量代谢的影响

目的观察黄芪多糖(APS)对游泳大鼠糖代谢相关酶的影响,探讨APS对大鼠能量代谢影响的作用机制。方法采用实验法检测腹腔注射APS大鼠(APS组)游泳力竭时间和不同状态下骨骼肌琥珀酸脱氢酶(SDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及乳酸水平的动态变化,并与腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液的大鼠(对照组)进行比较。结果(1)对照组(24只)和APS组(24只)大鼠游泳力竭时间分别为(6.1±1.8)h和(9.3±2.9)h,差异有统计学意义(t=2.35,P<0.05)。(2)对照组大鼠安静状态下骨骼肌SDH活性(12.2±2.8)U/mgprot、MDH活性(0.56±0.05)U/mgprot及力竭即刻骨骼肌乳酸水平(0.74±0.21)mmol/gprot与ASP组分别为(15.7±2.9)U/mgprot、(0.77±0.10)U/mgprot和(0.42±0.09)mmol/gprot比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)对照组大鼠游泳力竭即刻SDH活性(9.3±1.1)U/mgprot、运动1h时MDH活性(0.68±0.11)U/mgprot、力竭即刻MDH活性(0.44±0.04)U/mgprot、力竭即刻LDH活性(191±22)U/100gprot与安静状态下SDH、MDH、LDH活性分别为(12.2±2.8)U/mgprot、(0.56±0.05)U/mgprot和(258±50)U/100gprot比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论APS可以提高大鼠机体有氧代谢酶SDH、MDH的活性,使能源物质得到充分利用的同时减少了对机体有危害的代谢产物的生成,从而维持更长时间的运动;APS对骨骼肌LDH活性、LD水平影响不明显,但有利于代谢产物乳酸的清除,从而可以延缓疲劳的产生。

催产素对能量平衡的作用机制

肥胖症是一种高度复杂的代谢紊乱疾病,其机制牵涉到调控食物摄入和能量支出的中枢机制。虽然导致肥胖的基本发病机制尚不清楚,但是催产素(oxytocin,OT)在体质量的调控中无疑发挥了重要作用。以前的研究表明,中枢或外周给予OT产生厌食作用。但近来,有研究表明OT或其受体缺乏的啮齿类动物发展为迟发性肥胖,而总的食物摄入量却没有变化,这表明OT对能量代谢的调节具有重要的作用。本文对OT在能量平衡调控中的作用进行了详细论述,侧重于阐明OT在食欲调控、体温调节及能量代谢中的作用。

HPO205与COX6B1蛋白之间的相互作用

目的以酵母双杂交(Y2H)和GST融合蛋白沉降技术(GST-Pull down)来探讨肝细胞生成素205(HPO205)与细胞色素C氧化酶(COX)6B1间存在的相互作用,为研究HPO205的功能提供依据。方法聚合酶链式反应(PCR)扩增HPO205和COX6B1的编码基因,分别构建至pDBLeu和pPC86的重组Y2H质粒载体。然后将二者的重组质粒共转染酵母MaV203进行Y2H鉴定,并用GST-Pull down技术对其验证。结果成功克隆HPO205和COX6B1编码基因至Y2H载体和相应表达载体。经过Y2H鉴定发现,pDBLeu-GRER和pPC86-COX6B1共转后能激活Ura、LacZ、His 3个报告基因;GST-Pull down实验显示,GST-COX6B1能沉淀HPO205。结论 HPO205可能通过与COX6B1相互作用影响线粒体氧化磷酸化过程。

色氨酸-2,3-双加氧酶2上调介导犬尿氨酸代谢在大鼠佐剂性关节炎中的作用研究

目的探究色氨酸-2,3-双加氧酶2(TDO2)表达及其介导的犬尿氨酸(Kyn)代谢在大鼠佐剂性关节炎(AA)不同炎症阶段(包括初期、高峰期、缓解期)变化特点。方法建立大鼠AA模型,各炎症阶段处死AA大鼠,HE染色观察关节滑膜和肝脏病理学变化;免疫组化法检测关节滑膜组织和肝脏组织中TDO2表达;高效液相色谱法检测血清和肝脏中色氨酸(Trp)、Kyn水平。结果与正常组比较,AA大鼠显示出与RA类似的临床表现和病理学特征。高峰期和缓解期大鼠关节滑膜和肝脏组织TDO2表达升高(P<0.05)。各炎症阶段AA大鼠血清Trp水平降低,初期Kyn水平升高(P<0.01);高峰期大鼠肝脏组织中Trp水平降低、Kyn水平升高,Kyn/Trp比值升高(P<0.01)。结论TDO2可能在AA高峰期发挥重要作用,介导Kyn代谢参与RA发生和发展。

小牛血去蛋白提取物对小鼠能量代谢的影响

目的观察小牛血去蛋白提取物在改善小鼠大脑和心肌能量代谢的作用。方法应用葡萄糖氧化酶法测定小鼠血糖、心肌和大脑皮层葡萄糖含量。制备小鼠急性缺氧性脑缺血模型,应用紫外分光光度法测定小鼠血液和大脑皮层中的乳酸含量。结果小牛血去蛋白提取物可降低血糖浓度,同时升高心肌内葡萄糖含量。小鼠急性缺氧性脑缺血后,血液和皮层中乳酸浓度显著升高,小牛血去蛋白提取物可降低乳酸浓度。结论小牛血去蛋白提取物能够改善小鼠大脑和心肌能量代谢,对于治疗缺氧性缺血疾病有一定的意义。

小鼠ATP酶β亚单位真核表达载体的构建和细胞内定位研究

目的构建小鼠ATP酶β亚单位(ATPaseβ)真核表达载体,并观察其在哺乳动物细胞中的表达定位情况。方法取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,反转录为cDNA,以cDNA为模板PCR扩增得到ATPaseβ编码序列,将其连接到pMD18-T载体上,然后以pMD18-ATPaseβ为模板扩增得到ATPaseβ编码序列,再将其克隆到真核表达载体pcDNA3/HA上。采用脂质体转染法转染NIH 3T3细胞及293细胞,在荧光显微镜下观察结果。结果 PCR、双酶切和测序结果表明,重组质粒pcDNA3/HA-ATPaseβ构建正确;转染实验发现,该质粒能够在NIH 3T3细胞中表达,表达产物主要定位于细胞质,细胞膜上也有表达,而在293细胞中只表达于细胞质。结论成功构建了带有HA标签的小鼠ATPaseβ真核表达载体,该载体能够在哺乳动物NIH 3T3及293细胞中有效表达并正确定位,为进一步研究ATPaseβ的细胞内生物学功能提供了一个重要的工具。

肥胖青少年静息能量代谢研究

目的了解肥胖青少年静息能量代谢的特点,探讨影响RMR的因素和测试时间对RMR的影响。方法结合体质量指数（BMI）和体脂,选取20名12-15岁的重度肥胖青少年,并在餐后禁食2 h以上,用便携式气体代谢分析仪Cosmed K4b2,对肥胖青少年进行30 min静息能量消耗测量,根据Weir公式计算静息能量消耗。结果肥胖青少年每天静息能量消耗为（10 831.0±3 097.71）kJ,RMR实测值均高于各公式预测值。RMR的实测值和公式预测误差与年龄、体重、身高、BMI、FAT%和FFM等因素均不存在相关（P值均〉0.05）。Shizgal-Rosa、Owen、WHO（1985）和Schofield等预测方程的预测值与实测值的误差百分比分别为15.0%±18.0%,21.5%±16.6%,1.1%±21.0%和2.2%±20.7%。不同测试时间的静息能量消耗之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论预测公式可能会低估肥胖青少年的RMR。相对而言WHO（1985）和Schofield预测公式更适合12-15岁肥胖青少年RMR的预测,不足30 min的RMR测试模式可以准确测量RMR。