MDCK-MDR1细胞药物体外吸收模型的建立及验证

目的构建MDCK-MDR1细胞体外吸收模型并进行验证,以用于口服药物吸收和转运机制的研究。方法将不同浓度组(1.0×10^(8)/L的L组、2.5×10^(8)/L的M组、5.0×10^(8)/L的H组)MDCK-MDR1细胞接种于24孔Transwell培养板上,培养1~7 d,通过吸光度值绘制MDCK-MDR1细胞生长曲线,观察不同培养时间点细胞的形态,测定不同时间点的跨膜电阻(TEER)值,确定形成单层膜结构的最佳细胞接种浓度和培养时间。通过荧光黄转运实验对不同浓度和时间点形成的单细胞膜结构进行验证。结果L组、M组和H组分别在接种后第5、3、1天形成单层膜结构,分别在第5、4、3天时吸光度值达到峰值。L组在接种第5天时TEER值达到300Ω·cm^(2),第5~7天趋于稳定,故确定形成单层膜结构的最佳细胞接种浓度为1.0×10^(8)/L,最佳培养时间为5 d。荧光黄转运实验验证显示,该单层膜结构的荧光黄表观渗透系数为4.27×10^(-7)cm/s,低于通透性试验规定的5.0×10^(-7)cm/s。结论本研究构建的MDCK-MDR1细胞模型单层膜结构完整性和通透性均通过验证,可作为模拟口服药物吸收和转运机制研究的体外模型。

潜在药物发现新靶点水通道蛋白

水通道蛋白(aquaporin,AQP)属于小分子疏水性内在膜蛋白家族,目前发现有13种。近年来研究表明,AQPs参与了哺乳动物的一些重要的生理病理学过程,如尿浓缩、脑水肿的形成、眼内压的调节、脂肪代谢、外分泌腺分泌、肿瘤血管发生等。调节AQPs表达的药物具有广阔的治疗应用前景。尽管目前还没有发现有效的AQPs调节剂,该蛋白仍是一个潜在的药物靶点,特别是高通量筛选等方法学的发展为证明该靶点的作用带来了希望。

远端创伤预处理对心肌内向整流钾通道Kir6．2表达的影响

目的观察远端创伤预处理后心肌细胞内向整流K^＋通道Kit6．2在不同时点的表达变化。方法SD大鼠腹部做一长2cm的横切口后，分别于15min、4h、24h时间点取大鼠左心室心肌，检测其内向整流K^＋通道Kit6．2的蛋白表达的变化。结果远端创伤预处理后，随时间的推移心肌细胞内向整流K^＋通道Kit6．2的蛋白表达量逐渐增加。结论远端创伤预处理可以上调心肌细胞内向整流K^＋通道Kit6．2的表达，这可能参与了远端创伤预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。