舒洛地特失活YAP减轻大鼠动静脉瘘新生内膜增生

目的研究舒洛地特(sulodexide,SDX)对慢性肾脏疾病(chronic kidney disease,CKD)大鼠动静脉瘘(arteriovenous fistula,AVF)新生内膜增生的作用及调节机制。方法选取体质量(300±50)g雄性大鼠18只,随机分为3组(n=6):AVF组,对正常大鼠进行AVF手术;慢性肾病组(CKD+AVF),大鼠经诱导慢性肾病后进行AVF手术+生理盐水灌胃2月;舒洛地特组(CKD+AVF+SDX),大鼠经诱导慢性肾病后进行AVF手术+8 mg/(kg·d)SDX灌胃2月。HE染色检测血管内膜增生程度,免疫荧光检测Hippo信号通路相关分子YAP、pYAP、YAP下游靶蛋白间充质细胞标志分子(connective tissue growth factor,CTGF)表达情况。以不同浓度SDX(0、2.5、5、10、20、40μg/mL)处理人脐静脉细胞融合细胞(EAHy926),并以2.5μg/mL SDX分别处理细胞24、48、72 h,用CCK-8法检测细胞存活率。进一步利用CKD大鼠血清处理细胞,并在此基础上用SDX及YAP阻断剂维替泊芬处理,通过Western blot实验检测YAP、pYAP、CTGF及内皮细胞标志分子CD31表达。结果HE染色及免疫荧光结果表明,与AVF组大鼠相比,慢性肾病组大鼠瘘口处内膜严重增生(P<0.05),pYAP表达微弱而CTGF表达增强,舒洛地特组经SDX灌胃处理后内膜增生减轻,pYAP表达增强,CTGF表达水平降低(P<0.05)。CCK-8结果表明,随SDX浓度及处理时间的增加,细胞存活率降低(P<0.05)。Western blot结果发现,SDX促进EAHy926细胞pYAP及CD31的表达,抑制了CTGF的表达(P<0.05),与维替泊芬处理效果一致。结论舒洛地特通过阻止CKD引起的YAP激活,减轻了AVF血管内膜增生。

血液中NLR、PLR及SII与儿童腺样体肥大程度的关系

目的 探讨血液中中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)、血小板淋巴细胞比值(PLR)及全身免疫炎症指数(SII)与腺样体肥大患儿腺样体肥大程度的关系。方法 选取2020年2月—2021年2月就诊于我院耳鼻咽喉头颈外科,经电子纤维喉镜确诊为腺样体肥大患儿181例。根据腺样体肥大分型及分度将患儿分为病理性腺样体肥大(Ⅲ~Ⅳ度肥大)组和生理性腺样体肥大(Ⅰ~Ⅱ度肥大)组(A组),进一步将病理性腺样体肥大组患儿分为Ⅲ度肥大组(B组)和Ⅳ度肥大组(C组)。比较各组间血浆NLR、PLR、SII差异,并分析上述指标对患儿腺样体肥大程度的影响。结果 三组患儿间血浆NLR及SII比较差异有显著性(F=27.346、22.533,P<0.001),血浆PLR水平比较则无显著差异(P>0.05),C组患儿血浆NLR、SII显著高于A、B组(P<0.05),B组患儿血浆NLR、SII显著高于A组(P<0.05)。ROC曲线显示血浆NLR、SII诊断病理性腺样体肥大曲线下面积分别为0.809和0.763,NLR诊断病理性腺样体肥大的灵敏度、特异度分别为93.85%和52.94%,SII诊断的灵敏度、特异度分别为42.31%和98.04%;当血浆NLR≥0.57和(或)SII≥356.41时,提示病理性腺样体肥大(Ⅲ度及以上肥大)可能性较大。结论血浆NLR和SII与儿童腺样体肥大程度具有相关性,且可作为初步预测病理性腺样体肥大的简易参考指标。

260例子宫切口瘢痕妊娠不同治疗方法的临床效果对比分析

目的比较子宫切口瘢痕妊娠不同治疗方法的临床疗效。方法回顾性分析云南省第二人民医院妇科2010年1月至2014年12月期间收治的子宫切口瘢痕妊娠患者260例的临床资料,将260例患者按照不同的治疗方式分为3组:1甲氨蝶呤及孕囊穿刺组(A组,n=112),2甲氨蝶呤及子宫动脉栓塞术组(B组,n=82),3经阴道子宫切口瘢痕妊娠病灶切除术组(C组,n=66),比较3组患者治疗后成功率、1周后β-HCG下降比例、β-HCG转阴时间、包块消失时间及住院时间。结果 B和C组患者的治疗成功率明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。B组和C组患者β-HCG下降比例均高于A组患者(P<0.05),且B组和C组β-HCG转阴时间及住院时间均短于A组(P<0.05),另外,C组患者β-HCG转阴时间及β-HCG下降比例优于B组,差异有统计学意义(P<0.05),B组患者住院时间短于C组(P<0.05)。结论子宫动脉栓塞联合甲氨蝶呤治疗成功率高,能缩短住院时间和β-HCG转阴时间,并促进β-HCG下降比例,是安全、有效的子宫切口瘢痕妊娠治疗方法。

G蛋白、蛋白激酶C和Na^+-H^+交换在内皮素-1诱导培养心肌细胞肥大反应中的作用

内皮系-1（ET-1）是一种强的生长因子，并诱导心肌细胞肥大反应。在本实验中，我们探讨了G蛋白、蛋白激酶C（PKC）和Na＋－H＋交换在ET-1诱导的培养新生大鼠心肌细胞肥大反应中的作用。ET-1（10－10～10－7mol／L）促进3H－亮氨酸掺入，增加细胞蛋白质的含量和心肌细胞的表面积，且呈剂量依赖性，它们的EC50分别为5．2×10-10，5．2×10－10和7．3×10－10mol／L。用蛋白激酶C（PKC）抑制剂，Staurosporin（2nmol／L）预处理心肌细胞，可完全阻断ET-1诱导的心肌细胞的这些肥大反应，而蛋白激酶C激动剂，佛波酸酯（PMA）（10－8～10－6mol／L）呈剂量依赖性促进心肌细胞的肥大反应。用Na＋－H＋交换抑制剂，氨氯毗咪（10-4mol／L）预处理心肌细胞，可抑制ET－1诱导的心肌细胞肥大反应，但不影响PMA诱导的心肌细胞肥大反应。百日咳毒素（150ng／ml）预处理心肌细胞，可明显抑制ET－1诱导的心肌细胞肥大反应。这些结果提示，ET-1诱导的培养新生大鼠心肌细胞肥大反应是与百日咳毒素敏感的G蛋白相耦联，蛋白激酶C和Na＋．H＋交换可能在ET-1诱导的心肌细胞肥大反应中是重要的细胞内信使转导途径。

血管紧张素Ⅱ激活巨噬细胞株p38MAPK信号通路并诱导其增殖

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)激活巨噬细胞p38MAPK信号通路的模式变化及其对巨噬细胞株增殖的影响。方法:用Westernblot测定细胞p38MAPK磷酸化表达;用细胞免疫组化观察细胞p38MAPK激活后核移位;用MTT法观察细胞增殖。结果:AngⅡ(1μmol/L)可诱导RAW264.7细胞p38MAPK磷酸化表达,15-30分钟达到高峰,随时间呈峰形变化。AngⅡ呈剂量依赖性诱导RAW264.7细胞p38MAPK磷酸化。p38MAPK特异性抑制剂SB202190可显著抑制RAW264.7细胞p38MAPK磷酸化,并呈剂量依赖性。AngⅡ可诱导RAW264.7细胞增殖,SB202190可显著抑制AngⅡ诱导的RAW264.7细胞增殖。结论:AngⅡ可激活RAW264.7巨噬细胞株p38MAPK信号通路,并通过p38MAPK信号通路调控RAW264.7细胞增殖。

乳腺增生发病机制的研究进展

乳腺增生病(HDBA)为女性常见的以周期性乳房疼痛为主要特征的非炎症、非肿瘤的慢性乳房疾病。目前认为雌激素与孕激素的比例失调为HDBA主要病因,乳腺中的胆固醇及其氧化产物胆固醇环氧化物等均可诱发乳腺上皮细胞增生;催乳素亦与乳腺增生的发生、发展有关;一些特异性基因在乳腺增生病中也有不同程度的表达,最终导致乳房纤维组织增生、纤维囊性增生和纤维腺瘤的形成等一系列病理改变。

血管紧张素在培养乳鼠心肌细胞肥大发生中的作用

本实验观察到血管紧张素Ⅰ、Ⅱ(AngⅠ、AngⅡ)均可促进培养的乳鼠心肌细胞(MC)DNA、RNA和蛋白质的合成。并发现随着AngⅠ和AngⅡ作用时间的延长,对MC的RNA和蛋白质合成的促进作用也逐渐增强,而对其DNA合成的促进作用则有一定的时间界限。此外,还发现在AngⅠ和AngⅡ长期作用下可使MC体积增大。当AngⅠ和血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂同时加入培养基,则无上述结果发生。这提示血管紧张素可能在心肌肥大的发生中起一定作用,而且AngⅠ是通过MC本身的ACE将其转化为AngⅡ后才起作用的。

MKP-1在血管紧张素Ⅱ导致心肌肥大反应中的调控作用

本研究主要从丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 1(MKP 1)角度 ,研究丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号途径在血管紧张素Ⅱ介导的新生大鼠心肌细胞肥大反应中的作用及调控机制。实验以心肌细胞蛋白合成速率、蛋白含量及细胞表面积作为心肌肥大反应的指标 ,以凝胶内MBP原位磷酸化测定MAPK活性 ,以免疫印迹法 (Westernboltting)分别测定MKP 1及磷酸化p44MAPK、p42MAPK蛋白表达。结果发现 :(1)AngⅡ (10 -7mol/L)处理 48h ,心肌细胞 3H 亮氨酸掺入率、蛋白含量及细胞表面积明显增加 ,AngⅡ增加 3H 亮氨酸掺入的作用可被血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1受体 )拮抗剂CV11974(10 -6mol/L)明显抑制 (抑制 85 % ) ,被MAPK激酶 (MEK)特异性抑制剂PD0 980 5 9(5× 10 -5mol/L)部分抑制 (抑制 32 5 % ) ;(2 )CV11974或PD0 980 5 9可明显抑制AngⅡ介导的磷酸化MAPK蛋白表达及MAPK酶活性 (以γ 32 P ATP掺入表示 ) ;(3)以磷酸化MAPK蛋白表达反映MAPK活性 ,可见AngⅡ处理心肌细胞5min ,MAPK活性即开始增加 ,30min左右达到高峰 ,2h后基本恢复正常 ;而MKP 1蛋白表达 30min即见增加 ,持续 2h以上 ;(4 )用放线菌素D (actinomycinD)处理心肌细胞 30min可明显抑制MKP 1的表达 ,同时使AngⅡ致磷酸化MAPK蛋白表达时间延长至 2h以上。

丹参素对氧化低密度脂蛋白致血管平滑肌细胞增殖的影响和机制

目的:探讨丹参素(DSS)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)致血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响和机制。方法:采用反复贴块法培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞原代培养成功后,采用第3-10代细胞应用于实验。分4组:对照组,ox-LDL(50mg/L)组,ox-LDL(50mg/L)+DSS(50mg/L)组,ox-LDL(50mg/L)+DSS(100mg/L)组;用单个核细胞直接细胞毒性测定(MTT)法检测吸光度(A值),观察DSS对ox-LDL致VSMCs增殖的影响;RT-PCR法观察丹参素对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)表达的影响。结果:丹参素可明显降低ox-LDL引起的A值升高,丹参素可降低ox-LDL引起的PDGF-BB表达水平的升高。结论:丹参素可对抗ox-LDL致血管平滑肌细胞的增殖,其可能通过降低ox-LDL引起的PDGF-BB表达水平升高而发挥作用。

转化生长因子-β_1及其胞内信号通路SMADs在大鼠心肌肥厚中的作用

目的研究SMADs信号通路在大鼠心肌肥厚中的作用。方法结扎大鼠腹主动脉复制心肌肥厚模型,检测术后不同时间点的大鼠左心室重量指数(LVMI),RT-PCR法检测肥厚左室心肌中转化生长因子β1(TGF-β1)及Smad2、3、7的mRNA表达。结果与对照组比较,手术组术后3dLVMI开始上升并持续至4周,心肌组织中TGF-β1及Smad2、3的mRNA表达术后3d也开始上升并持续至4周,术后第2周为表达的高峰(P<001)。Smad7mRNA术后3d上升,1周时为其高峰,2周后表达下降。结论信号蛋白Smad2、3、7参与了腹主动脉结扎诱导的大鼠心肌肥厚病理过程。

信号蛋白Smad3在大鼠心肌肥厚过程中的表达

目的研究信号蛋白Smad3在大鼠心肌肥厚中的表达变化。方法结扎大鼠腹主动脉复制心肌肥厚模型,在不同时间点检测左心室重量指数(LVMI),RTPCR法检测肥大心肌组织中TGFβ1、Smad3的mRNA表达,Westernblotting以及免疫组化法检测Smad3蛋白的表达。结果术后3dLVMI开始上升并持续至28d,肥大心肌组织中TGFβ1、Smad3mRNA及蛋白表达术后3d开始上升,持续至28d,术后14d为表达高峰。结论信号蛋白Smad3参与了腹主动脉结扎诱导的大鼠心肌肥厚病理过程。

瘢痕疙瘩的治疗研究进展

瘢痕疙瘩是一种过多胶原沉积导致的纤维增生性疾病，它常在易感人群中发生，为一种超过损伤边界的皮肤或角膜瘢痕。至今为止，瘢痕疙瘩的治疗仍很复杂和困难。目前认为，多种治疗方法的联合应用是最有效和最安全的治疗策略。本文即对瘢痕疙瘩的治疗研究进展综述如下。

丹参酮ⅡA对肥厚心肌细胞核因子-κB的影响

目的 探讨丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )诱导的心肌细胞肥大的影响。 方法 利用体外细胞培养技术 ,用AngⅡ刺激新生大鼠心肌细胞肥大 ,通过免疫组织化学方法观察丹参酮ⅡA对肥大心肌细胞核因子 (NF κB)表达的影响。 结果 与正常细胞相比 ,AngⅡ组细胞直径明显增加 ,细胞核NF κB呈强表达。加入丹参酮ⅡA干预后 ,心肌细胞直径明显减小 ,NF κB表达减弱 (P <0 0 1)。 结论 丹参酮ⅡA具有保护心肌 ,防止心肌肥厚作用 ,其抑制心肌细胞肥厚的机制可能与抑制NF

介导心肌肥大的一条新的信号通路——Calcineurin通路

心肌肥大是心肌细胞对外界刺激 ,如工作负荷、神经体液因子及内在心肌蛋白遗传突变的一种基本应答。已知胞内Ca2 +浓度升高在各种刺激诱导心肌肥大的信号传递中起重要作用 ,但对Ca2 +信号下游的传递机制一直不甚清楚。新近研究证实 ,由Ca2 +活化的钙调神经磷酸酶 (CaN)在心肌肥大的信号传递中起重要作用 ,其可能是Ca2 +信号致肥大基因活化的偶联环节。抑制CaN活性可阻滞各种因素诱导的心肌肥大的发生与发展 ,提示Ca2 + CaN依赖的信号通路可能是介导心肌肥大的一条新的。

窦性组织细胞增生症伴类风湿关节炎、强直性脊柱炎1例

窦性组织细胞增生伴巨大淋巴结肿大（sinus histiocytosis with massive lymphadenopathy,SHML）,简称为窦性组织细胞增生症,是一类少见的组织细胞增生性疾病,易误诊为其他良性和恶性组织细胞增生症。我科收治1例窦性组织细胞增生症患者,同时伴有类风湿关节炎及强直性脊柱炎,现报告如下。

皮肤原发性窦性组织细胞增生症1例

报告1例原发于皮肤的窦性组织细胞增生症。患者女,32岁。左面颊和右鼻旁分别有一肿块隆起7个月和4个月。 各项实验室检查均正常。临床无特异性。组织学检查可见特殊的组织细胞,这类细胞胞质内可见吞噬的淋巴细胞、中性粒细胞、 浆细胞等。免疫组化显示,该类组织细胞S-100、MAC-387和CD68阳性,而CD1a阴性。

来氟米特抑制结缔组织生长因子诱导的肾间质成纤维细胞增殖和胶原合成的研究

目的探讨来氟米特(LEF)对人肾间质成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法在体外培养的人肾间质成纤维细胞中,加入不同浓度来氟米特活性代谢产物A771726和重组人结缔组织生长因子(rhCT-GF),MTT法测定两者单独及同时干预下细胞增殖情况;ELISA法测定细胞合成I、IV型胶原的含量。结果经不同浓度的rhCTGF刺激,成纤维细胞增殖和细胞合呈I型、IV型胶原均成剂量依赖性增加(P<0.01);而来氟米特作用细胞后,细胞增殖及胶原合成均呈剂量依赖性减少(P<0.01);在来氟米特与结缔组织生长因子(CTGF)共同作用下,细胞的增殖和胶原的合成较单用同剂量的CTGF时减少(P<0.05)。结论rhCTGF能够促进人肾间质成纤维细胞的增殖及I、IV型胶原合成;来氟米特则抑制细胞的增殖及细胞合成I、IV型胶原;来氟米特对rhCTGF诱导的胶原合成增加有一定的拮抗作用。

血管紧张素Ⅱ受体在压力超负荷致左室肥大中的作用

目的 :探讨血管紧张素Ⅱ受体 (ATRs)在压力超负荷致左室肥大中的作用。方法 :采用大鼠腹主动脉缩窄模型 ,通过放免法测心肌组织血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )含量 ,放射性配基结合分析法检测心肌组织ATRs及其亚型的变化。结果 :手术组AngⅡ含量显著增高 ,与左室重量指数 (LVMI)呈正相关 (r=0 80 66,P <0 .0 1)。ATRs最大结合容量 (Bmax)显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,但两组之间的平衡解离常数 (kd)、血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1R)和血管紧张素Ⅱ 2型受体 (AT2 R)之间的比例无显著差异。非肽类AT1R拮抗剂Irbesartan可显著抑制AngⅡ的升高和左室肥大 ,非肽类AT2 R拮抗剂CGP4 2 112A则无此作用。结论 :压力超负荷时心肌组织ATRs上调 ,AngⅡ致左室肥大的作用主要由AT1R介导。

心血管疾病中血管平滑肌细胞增殖与药物开发

血管平滑肌细胞增殖在高血压、动脉粥样硬化、再狭窄等心血管疾病的发生、发展中起着重要的作用。本文对血管平滑肌细胞胞外调控因素、胞内信号传导、细胞周期的研究现状及基于此三方面的药物研发进行综述。

瘢痕疙瘩病理机制研究进展

瘢痕疙瘩是一种皮肤纤维增生性疾病,病理实质是过度纤维化引起的创面过度愈合。其病理机制错综复杂且尚不明确。目前认为,瘢痕疙瘩细胞机制方面主要涉及炎症细胞和纤维化相关细胞,以及生长因子、白细胞介素、肿瘤坏死因子、基质金属蛋白酶等细胞因子;分子机制主要涉及TGF-β/Smad通路、NF-κB通路、STAT3信号通路、MAPK信号通路、黏着斑激酶等分子机制。该文从细胞、细胞因子和分子信号通路多个角度就瘢痕疙瘩病理机制的最新研究进展做一综述。