孔雀绿比色法测定巨噬细胞吞噬功能的研究

测定巨噬细胞(Mφ)吞噬功能是了解机体免疫功能的试验。本文利用无色孔雀绿测定血浆中微量的血红蛋白含量,对用孔雀绿比色法测定小鼠Mφ的吞噬功能进行了研究。实验结果表明小鼠腹腔细胞贴壁2小时,效靶细胞比例1∶100、吞噬时间1小时为该方法的最佳条件。同时,还用本法进行了胸腺素和氢化可的松对体外Mφ吞噬功能影响的测定,结果胸腺素组OD值明显高于对照组,而氢化可的松组OD值明显低于对照组,该方法操作简单,孔雀绿呈色稳定,是定量测定Mφ吞噬功能较满意的试验方法。

电解损毁大鼠弓状核对机体免疫功能的影响

本文应用电解损毁的方法,探讨大鼠下丘脑弓状核的免疫调节功能。结果表明,损毁后,大鼠皮肤迟发性超敏反应、脾抗体形成细胞的溶血反应均受到抑制,脾淋巴细胞的自然转化率以及对丝裂原ConA、PHA的反应性降低。说明下丘脑弓状核在免疫调节中具有重要的作用。

免疫反应对糖皮质激素受体的调控及其意义

本文采用绵羊红细胞(SRBC)经腹腔注入C_(57)BL小鼠作为免疫反应模型,观察小鼠在免疫反应中脾脏细胞糖皮质激素受体(GCR)数的变化,发现自SRBC致敏后第五天始小鼠脾脏细胞GCR数明显高于对照组(P<0.005),第七天达高峰,第十一天恢复至正常水平。地塞米松对致敏组和对照组小鼠脾脏细胞由PHA诱导的淋巴细胞转化抑制程度的明显差异可能与脾脏细胞GCR数变化有关。本文还用上述方法研究了妊娠小鼠,发现妊娠小鼠脾脏细胞GCR数明显高于未妊娠小鼠(P<0.05),这在调节母胎免疫反应中具有重要意义。

用^3H—TdR掺入法检测小鼠LAK细胞活性

本文用~3H-TdR掺入法检测小鼠淋巴因子活化性杀伤细胞(LAK细胞)的活性。结果表明它对4种肿瘤细胞均呈现极高的细胞毒活性,对正常细胞却不表现细胞毒。淋巴器官中脾脏LAK细胞活性最高,淋巴结次之,胸腺则不表现活性。比较3种不同品系小鼠的LAK细胞,它们的活性也不一致,存在明显差异。

IgE及其介导的免疫反应与乙型肝炎

随着免疫学技术和理论的不断发展,国内外对乙型肝炎发病机理的研究取得了很大进展。大量的研究工作证实,乙型肝炎病毒(HBV)本身虽能感染肝细胞,但它在体内的存在与肝损伤不完全相关。HBV 感染后不仅影响机体的免疫平衡,还可引起损伤性的免疫应答。过去多数学者认为,除Ⅰ型变态反应外,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型变态反应在肝损伤的免疫机制中起一定作用。最近,有些学者观察了乙型肝炎患者的与Ⅰ型变态反应有关的各种试验以后认为,IgE 及其介导的免疫反应可能与乙型肝炎的发病机理有关。

应用ELISA方法检测抗呼吸道合胞病毒免疫核糖核酸免疫活性的研究

本文报导在小鼠模型系统中,应用ELISA方法对兔抗呼吸道合胞病毒(RSV)免疫核糖核酸(i-RNA)诱生血清特异性抗体及抗体生成的动态进行观察。实验结果表明:抗呼吸道台胞病毒免疫核糖核酸(RSV-i-RNA)在小鼠体内具有诱生血清特异性抗体能力。RSV-i-RNA常规致敏后24h抗体水平明显增高,72h达高峰,11天左右降至正常水平,RNase处理使RSV-i-RNA诱生血清特异性抗体能力明显减低,而DNase、Pronase对其则无明显影响。

胸腺——神经内分泌网络的研究

60年代以前当人们对胸腺功能尚未真正了解时,就发现它与其它内分泌器官的活动互有影响。在胸腺的免疫功能和内分泌功能明确以后,又有许多学者观察胸腺与神经内分泌系统的相互关系,如发现新生期去胸腺小鼠的神经内分泌系统功能紊乱等。1977年Besedovsky 提出神经内分泌免疫网络学说后,受到广泛的重视,已有大量资料表明免疫系统与神经内分泌系统之间存在双向调节的关系。胸腺作为免疫系统中枢器官和内分泌器官的双重角色在神经内分泌免疫网络中有特殊重要地位。近年来。

神经系统和免疫系统间的相互作用

神经系统可协调和综合机体内各种细胞,组织及器官的活动,因此,神经系统和免疫系统间存在功能联系是不足为奇的。早在本世纪初,就有学者发现下丘脑具有免疫调节作用。此后,关于神经系统、内分泌系统和免疫系统之间相互联系、相互作用的文章陆续发表。近十余年来,这方面的研究日益受到重视,进展较快,已形成了神经免疫学这门新的学科。神经系统和免疫系统间的相互作用,即神经系统调节免疫系统的功能,而免疫系统影响神经系统的活动,它们以神经递质和内分泌激素为媒介。

胶体金探针及其在受体测定上的应用

胶体金是近年来发展起来的一种新的免疫组化标记物,在各种酶类、放射性同位素、铁蛋白等标记物被采用的同时,胶体金标记法正越来越受到重视.胶体金标记的概述胶体金标记技术的应用仅十余年,十多年来,它的应用从电镜到光镜;从细胞表面物质的定位到细胞内抗原的定位,从单标记到多标记,从标记物的定位、定性研究到定量研究都取得了很大的进展。胶体金标记的原理是:氯化金水溶液在还原剂的作用下形成聚合的金颗粒。

一种免疫负调节细胞——MHC-Ⅱ类抗原约束性CTL

MHC约束性是普遍存在的免疫学现象。大多数细胞毒性T细胞(CTL)杀伤靶细时须识别MHC的I类抗原,辅助T细胞(TH)免疫提呈时识别Ⅱ类抗原。但是,一些CTL却是通过识别Ⅱ类抗原而完成杀伤功能的。Braakman等人认为后一类细胞(本文称ⅡCTL)

低分子量(7s)免疫球蛋白(IgM)的生物学性状和临床意义

低分子量IgM(Low molecular weightIgM,LMW IgM)是自然出现并存于低等脊椎动物和新生儿血中的一种单体IgM。在健康成人,LMWIgM仅存在B淋巴细胞浆内和胞膜上。胞浆内LMWIgM是五聚体IgM的组成亚单位之一,在B淋巴细胞分泌IgM之前五个单体IgM与J链合成五聚体形式,分泌至血循环中。五聚体IgM的分子量约10Kd,沉降系数为19s,其理化特性及生物学功能已较清楚。胞膜上的LMWIgM是淋巴细胞的受体之一,可接受各种抗原的刺激,是特异性免疫反应的基础。自1963年Killander等在成人血清中发现LMWIgM以来,LMWlgM的研究进展也较快。本文拟就近些年来这些方面的研究综述如下。

实时定量PCR分析CML患者胸腺近期输出功能

目的 了解慢性粒细胞白血病 (CML)患者CD3+ 、CD4 + 和CD8+ 细胞中T细胞受体重排删除DNA环 (TRECs)的含量 ,从而推测CML患者的胸腺近期输出功能。方法 利用实时定量PCR(Taq Man)方法检测 8例CML患者外周血单个核细胞、3例CML患者CD4 + 和CD8+ 细胞中TRECs的水平。并根据外周血中CD3阳性率计算CD3+ 细胞中TRECs水平。 9例正常人外周血作为对照。结果 CML患者中TRECs含量为 0 .1± 0 .2 2 / 10 0 0T细胞 ,明显低于正常人TRECs水平 (6 .84± 4 .71/ 10 0 0T细胞 ,P <0 .0 1)。其中 5例患者外周血单个核细胞中未能检测到TRECs ,经分选CD4 + 和CD8+ 细胞后 ,2例可以检测到低水平的TRECs。结论 本研究首先报道了CML患者TRECs水平情况 。

抗T细胞免疫毒素的T细胞清除效率及其对造血细胞的影响

抗T细胞免疫毒素主要用于同种异体骨髓移植中清除T细胞,减轻移植物抗宿主反应(GVHD),提高移植成功率,也可用于白血病自体骨髓移植中清除残留白血病细胞,减少移植后白血病复发的可能性。本实验结果表明抗T细胞免疫毒素在10^(-8)M浓度对靶细胞的杀伤达3.0log以上,即可清除99.99%的靶细胞,并可有效地抑制周血T细胞转化功能和骨髓T细胞分泌IL—2的功能,同时对骨髓粒单系和红系造血细胞的增殖无明显的抑制作用。

NB4和HL-60细胞诱导的脐血T细胞TCR Vβ基因谱系分析

目的:了解经NB4细胞和HL-60细胞体外诱导后脐血T细胞的TCR Vβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况。方法:采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,用经丝裂霉素灭活的NB4细胞和HL-60细胞体外诱导脐血T细胞增殖,利用RT-PCR分析经MLTC前后T细胞的24个TCR Vβ亚家族的利用情况,并用基因扫描分析其克隆性特点。结果:诱导前脐血T细胞表达20个TCR Vβ亚家族,诱导后的T细胞所表达的TCR Vβ亚家族随培养时间增加而逐渐减少,且诱导组呈现出克隆趋势或寡克隆增殖特点。两种细胞诱导后10 d均可见Vβ1的克隆增殖出现变化,此外,NB4诱导的T细胞出现Vβ15,而HL-60诱导的T细胞则出现Vβ23的克隆增殖情况。结论:NB4细胞和HL-60细胞可诱导脐血TCR VβT细胞克隆性增殖,此优势表达的克隆性T细胞可能与特异性抗原介导的细胞免疫反应有关。

AML患者外周血中TCR Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1 sjTRECs的检测

目的:检测急性髓性白血病(AML)患者外周血中TCR Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1sjTRECs的存在情况。方法:利用半巢式PCR扩增31例不同亚型AML患者外周血单个核细胞DNA中TCRβ基因重排时形成的T细胞受体DNA删除环(sjTRECs)中的Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1sjTRECs,10例正常人外周血作为对照。结果:TCR Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1 sjTRECs在正常人和AML患者中均可检测到,AML患者三者的检出率分别为45.16%、41.94%和32.26%,均略低于正常人,但差别未显示出统计学意义。≤30岁的AML患者3种VβsjTRECs的检出率均高于30岁以上的患者,以Vβ2-Dβ1 sjTRECs最明显。结论:率先提供AML患者外周血T细胞中TCR Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1 sjTRECs的存在情况,为研究AML患者胸腺近期各Vβ亚家族幼稚(na ve)T细胞的输出情况提供资料。

超抗原SEA联合PML-RARα对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响

目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖T细胞TCRVβ亚家族的利用和克隆性增殖的特点。结果单纯SEA诱导后,T细胞表达了11个TCR Vβ亚家族,且仍为多克隆增殖。单纯PML-RARα多肽诱导后,T细胞限制性表达8个Vβ亚家族,其中Vβ13、Vβ14表现出寡克隆或寡克隆趋势。PML-RARα多肽联合SEA共同诱导,其T细胞表达TCR Vβ亚家族依然呈明显的限制性,且Vβ13、Vβ14亚家族呈寡克隆、双克隆及寡克隆趋势。结论SEA能协同PML-RARα多肽诱导的T细胞克隆性活化与增殖。

B-ALL病人TCR Vβ基因谱系和克隆性分析

目的 了解B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。 方法 利用RT PCR方法扩增 13例初发未治B ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 3(CDR3) ,PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果 13例B ALL病人分别表达 2～ 18个Vβ亚家族。 13例病人均存在 1个或多个Vβ亚家族的克隆增殖T细胞 ,增殖形式包括寡克隆及寡克隆增殖趋势、双克隆和单克隆。Vβ2 1和Vβ2 3亚家族出现克隆增殖性T细胞的频率较高。结论 B ALL病人外周血T细胞的TCRVβ谱系呈现优势利用的特点 ,并存在克隆性增殖的T细胞 ,这可能是机体对白血病相关抗原产生的特异性免疫反应 ;Vβ2 1和Vβ2 3亚家族T细胞发生克隆增殖改变的趋向性比较明显 ,可能与B

CML患者CD4^+和CD8^+ T细胞的TCR Vβ基因谱系和克隆性分析

目的:了解慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)患者外周血CD4+和CD8+T细胞中TCRVβ亚家族T细胞的基因表达和克隆性。方法:利用RT-PCR分别扩增19例CML-CP患者外周血单个核细胞(PBMCs)、CD4+和CD8+细胞TCRVβ亚家族基因的CDR3,阳性产物进一步经基因扫描分析其克隆性。结果:CML患者外周血CD4+和CD8+细胞分别表达部分(1～21个)Vβ亚家族,均以Vβ13的表达率最高,其次为Vβ9,多数患者的一些Vβ亚家族T细胞呈克隆性增殖,主要出现于CD8+细胞中,分别以Vβ21(CD4+)和Vβ11(CD8+)亚家族的克隆性增殖多见。结论:CML患者外周血CD4+和CD8+细胞的TCRVβ谱系均存在限制性分布,患者存在的克隆性增殖CD4+和CD8+T细胞可能与宿主抗CML抗原反应有关,它们可能在抗CML效应中起主要作用。

正常人外周血和脐血中TCRVβ亚家族sjTRECs的检测情况

目的:检测TCR23个Vβ亚家族sjTRECs在正常人外周血中的存在特点,从而进一步了解正常人胸腺近期各Vβ亚家族初始T细胞的输出情况。方法:采用半巢式PCR对4例胸腺、10例脐血和10例正常人外周血分别在2×105、5×104、1×104和1×103个单个核细胞中的23个Vβ亚家族sjTRECs进行扩增。结果:在细胞数相同的情况下,各Vβ-Dβ1sjTRECs的检出率胸腺细胞最高,其次是脐血,正常人最低。当细胞数为2×105、5×104和1×104时,正常人Vβ2、Vβ4、Vβ7、Vβ11和Vβ19亚家族sjTRECs的检出率以及检出sjTRECs的亚家族数量均显著低于脐血。当细胞数为2×105和5×104时,正常人可检测到绝大多数Vβ亚家族的sjTRECs,随着细胞数的降低,部分Vβ亚家族的sjTRECs则检测不到,而少部分Vβ亚家族的sjTRECs则在1000个细胞时仍能检测到。结论:成功建立了半定量检测23个Vβ亚家族sjTRECs的检测方法;在2×105细胞中约可以检测到80%左右的Vβ亚家族初始T细胞,而在5×104细胞中约有半数的Vβ亚家族初始T细胞可检测到,提示不同Vβ亚家族初始T细胞的出现频率有所差异。