乙型肝炎病毒标志检验诊断的进展和评价

20余年来乙型肝炎病毒(HBV)的血清标志物的检测方法已陆续建立,逐渐用于临床诊断、病情和预后判断,然而,对于HBV感染的复杂的血清学表现的认识远未臻完善。近年来病毒分子生物学的进展,有助于阐明感染和慢性化的血清学现象。本文简述当前的研究结果。

应用酶联免疫吸附试验检测不同类型乙型肝炎中激活补体类HBsAg循环免疫复合物

本文以抗人C_(?)的羊IgG为包被抗体,以HRP-HBs抗体为指示抗体,建立了可检测激活补体类HBsAg循环免疫复合物(HBsAg/C3-CIC)的C_3捕捉法酶联免疫吸附试验。检测了236例六种类型临床诊断为乙型肝炎的病人血清标本,其阳性率分别为:无症状携带者(ASC)12.9％(4/31),急性肝炎(AH)36.7％(22/60),慢性迁延性肝炎(CPH)33.3％(7/21),慢性活动性肝炎(CAH)59.6％(34/57),重型肝炎(SH)77.8％(14/18),肝炎后肝硬化(PLC)67.3％(33/49),阳性率与肝损严重程度明显相关(P<0.01)。认为HBs-Ag/C3-CIC可能在乙型肝炎病毒引起的慢性活动性肝炎、重型肝炎和肝炎后肝硬化的发病过程中起重要作用,并可作为乙型肝炎的诊断、临床分型和预后判断的指标之一。

有关“e”抗原的某些新观念

近年来随着分子生物学研究的进展,对HBV基因结构及其表达的了解越来越清楚,对e抗原系统认识越来越精细,并更新了过去对e系统某些观念,现将这方面进展综述如下: 一、e抗原的分子结构及与HBcAg的关系1.前C区（pre—C）区的发现已经证明HBV含有四个开读框架,分别称为S、C、X、P编码区。其中C区编码核衣壳蛋白（HBcAg）P22或P22P19多肽。现发现C区含有两个起动编码（AUG）信号,分别位于第1814与1901位。如将第1901位置的AuG作为合成的起动信号,那么可把第1814与1901间区域称为前C区。

甲型肝炎病毒H2减毒株的某些生物学性质

猕猴试验表明,甲型肝炎病毒H2M20K5是一株减毒株。本文研究了该株在KMB17人胚肺二倍体细胞中的增殖动态、繁殖部位、病毒颗粒在氯化铯(CsCl)溶液中的浮力密度,以及该病毒的耐温性等生物学性质。 一、H2减毒株在KMB17细胞内的增殖动态 取50μl相当于7log感染滴度(荧光检测法)的H2减毒株,用适量含有2％新生牛血清的细胞培养液稀释,感染长成单层的KMB17细胞(4.5×10cm培养方瓶),35℃恒温培养,在不同培养天数(0,3,7,10,14,21,28天)各收获10瓶细胞。

乙肝病毒母婴传播及其预防

一、HBV的母婴传播乙型肝炎是危害人体较严重的常见多发病,传染力强、传播范围广、不分年龄性别、职业及地区,尤其在发展中国家较为严重,部分病人变成慢性肝炎、肝硬化或肝癌等。亚洲携带数字约高达1亿6千多万人,孕妇HBsAg阳性率最高者为太平洋的岛国高达50%,最低者为大洋洲国家,低至0.1%。

大通湖农场影响HBV感染及转归的多因素分析

对785份血清标本检测 HBsAg、抗-HBs、抗-HBc、HBeAg、抗-HBe和HBV-DNA,同时收集有关危险因素资料,采用多因素分析。逐步回归分析结果提示:年龄与HBsAg滴度呈负相关(b_2=-0.2672),其次影响HBsAg滴度的因素是全程HBV疫苗注射(b_(20)=-0.1462)、性别(b_1=0.0941)、针刺史(b_1=0.0725)和既往肝炎史(b_(17)=0.0695)。典型相关分析结果提示:反应感染状况的第一典型变量主要由综合指数(a=0.8414)所决定,反映影响因素的第二个典型变量主要由年龄(b=-0.8917)和HBV疫苗使用史(b~=-0.4175)所决定。

甲型肝炎病毒感染2BS细胞后培养液中甲肝病毒的研究

将5株甲型肝炎病毒(HAV)分别感染人胚肺二倍体细胞,在各株病毒的细胞培养液中,用cDAN—RNA杂交法可测到HAV RNA,但用ELISA法不能测到病毒抗原,培养液中HAV的TCID50/ml略低于细胞内的病毒滴度。PEG免疫电镜观察到,培养液内的病毒几乎全部是实心颗粒。实验表明,在不同株HAV的培养液内均可测出病毒及病毒RNA,但各株测出的时间不同,讨论了HAV的释放机制。

甲型肝炎病毒研究及实验诊断的进展

甲肝病毒(HAV)特性方面的研究表明HAV是一种小而无外壳的RNA病毒,已于1982年作为肠病毒属第72型列入小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)。HAV呈球形,系对称的二十面体,直径约27nm。HAV含有三个主要的结构性多肽(VP1～VP3),分子量从33 000～22 000dalton,新近已证实尚有第4个多肽(VP4),约2 500dalton。这些多肽形成紧密的蛋白质衣壳,并含有HAV的RNA。RNA基因组是单股的。

乙型肝炎病毒ayw亚型基因文库的构建

将乙型肝炎病毒(HBV)ayw亚型基因组DNA克隆在质粒pBR322的EeoRI位点,组成重组DNA分子,转化到E.coli HB101细胞中,获得转化子。经电泳、dot blot和Southem blot杂交证实,阳性重组体含有HBV DNA,组成了HBV基因文库。在E.coli细胞中,插进质粒中的HBV DNA能扩增并表达HBV抗原。

蚊虫在乙型肝炎传播中的作用

1970年Prince通过对不同地理区域血清肝炎(即现时的乙型肝炎)相关抗原流行情况进行研究之后,提出节肢动物在热带地区血清肝炎的传播中可能起一定作用的假说。自从那时起,为了证实这一假说,各国学者进行了较多的研究。研究着重以下两方面进行:一是检测捕获自然种群蚊体携带乙型肝炎病毒(HBV)或乙肝表面抗原(HBsAg)的情况;二是通过在实验室内感染某些蚊种,研究HBV或HBsAg在蚊体的转归,并进行动物实验。

MT-5细胞表达HBsAg的进一步研究

进一步观察了基因工程转化细胞株MT-5中HBsAg的表达,结果表明,HBsAg的表达分泌稳定,培养48小时收获,产率最佳;培养基中的小牛血清以10％为最适,通过建立多个单细胞亚克隆株证明,MT-5细胞中HBsAg的表达存在不均一性,亚株的HBsAg表达不受糖皮质激素的诱导,但受Cd^(2+)和Zn^(2+)的诱导,且细胞能够耐受较高浓度的ZnCl_2,Cd^(2+)和Zn^(2+)的最佳诱导浓度分别为1μM和100μM,最高诱导效率为350％,最高诱导产量达2.5mg/l。 MT-5培养上清中的HBsAg经亲和层析初步纯化后,SDS-PAGE呈现两条特异性多肽,分子量为23k和27k,它们代表HBsAg的主要多肽及其糖基化产品,DNA杂交结果不但确证重组S基因存在于MT-5细胞中,而且揭示重组DNA以游离体状态存在,似乎不进行整合和重排,不同亚系细胞中重组DNA的拷贝数估算为11～27个/细胞,拷贝数与HBsAg表达量有正相关关系。

国产Bio-dUTP和^(35)SdATP标记HBVDNA探针用于分子杂交初步报告

生物素(Bio)探针用于分子杂交于1983年Leary等已有报告。目前,BRL公司有试剂供应,但在国内尚未广泛应用。本所用国产Bio—dUTP,^(35)SdATP标记探针用于分子杂交,并与BRL Bio—DNA试剂盒和~3H、^(32)P探针杂交进行比较。

应用组织培养的甲型肝炎病毒抗原作为酶联免疫诊断试剂

用2BS细胞培养甲型肝炎病毒(HAV)TZ84株,一次性加维持液,仅培养8～10天即能稳定地大量地生产甲型肝炎病毒抗原(HAAg),可用于制备甲型肝炎酶联免疫诊断试剂。采用竞争法检测HAV抗体仅需10μl血清,1～2小时即可得出结果,与Abbott试剂相比,符合率为95％,无假阳性出现。方法简便、快速,适用于人群甲型肝炎病毒感染状况的调查,采用抗体捕捉法测抗-HAV IgM,与Abbott试剂相比,符合率为96.98％,无假阳性出现,适用于甲型肝炎的早期诊断,用于临床和流行病学调查,表明所研制的甲型肝炎诊断试剂可靠实用。

慢性乙型肝炎病毒感染HBeAg清除相关因素的初步探讨

本文对住院的181例慢性乙型肝炎病人,进行了一系列HBeAg/抗HBe的动态观察,对与HBeAg清除的相关因素进行了初步探讨。材料和方法研究对象为住院的慢性乙型肝炎病人共181例,初检HBsAg及HBeAg均为阳性,ALT异常,均经肝活组织检查,证实为慢活肝(CAH)109例、慢迁肝(CPH)72例。

从抗体阳性的甲型肝炎接触者粪便中分离出一株甲型肝炎病毒

几年来,国内外已相继用组织培养法分离多株甲型肝炎病毒(HAV),并已证实了甲型肝炎患者及亚临床型感染在传染本病中的重要性。但HAV在流行点的正常人群中存在短期携带的问题还尚未见报道。本文采用人胚肺二倍体细胞(2BS)从甲型肝炎接触者粪便中分离出一株HAV,并经免疫电镜、免疫荧光及参比血清鉴定等证实。现将结果报告如下。

乙肝病毒感染中e系统的转化规律及临床意义

在乙肝病毒(HBV)感染后,e系统的检测对乙型肝炎的诊断、传染性的判定和预后的估计有着重要意义。鉴于对HBeAg的本质有了较清楚的认识,因而对它的转化规律(即动态变化)及临床意义在国内外进行了大量的研究,现简要综述如下: 一。

D型肝炎病毒及其研究进展

D型肝炎病毒(HDV)是第一个被认为是具有环状RNA基因组的动物病毒,自1977年Rizztto发现δ因子以来,日益受到人们的重视。本文对HDV的结构特性、蛋白结构及功能、复制、致病机理以及HDV-RNA的基因结构、克隆片段的应用与临床意义等作了综合介绍。

乙型肝炎病毒DNA的结构研究

本文用末端终止法测定的HBV adr NC-1 DNA全顺序与其它五株HBV DNA进行了比较,发现一些共同的结构特点,在DNA中有多处与原核生物启动子核心相同或相似的顺序和二元对称结构,二者紧密相连或相重叠,在框架后有ATAA,在adrNC-1s基因前有增强子核心顺序,将框架及其前后的调控顺序作为转录单元,对可能存在的新框架进行了讨论。

从动物模型看乙型病毒性肝炎致病机制的研究进展

乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是通过血液和体液传播的嗜肝DNA病毒,尽管有有效的预防疫苗,乙型病毒性肝炎仍是我国乃至全球人类健康的重大威胁。HBV的易感宿主只局限于人以及黑猩猩等灵长类动物,HBV感染性疾病的研究遇到很大困难。多种小动物研究模型的建立,使我们对HBV感染致病机制的认识有了很大进步,包括:分子病毒学特征、在感染细胞中生命周期、机体的抗病毒免疫反应、肝脏病变的免疫病理机制等。但是,由于已有动物模型的种种限制,我们对HBV感染及乙型肝炎发生和发展的认识还远远不够,目前除了抗病毒治疗外,还没有有效地治疗慢性乙肝的方法。建立能够真实反映临床HBV感染、乙肝发生和进展过程的纯系小鼠模型,对于我们全面深入地理解HBV感染的侵入机制、宿主和病毒之间相互作用,以及发展预防和治疗HBV感染的新方法都具有非常重要的意义。