白喉毒素-(Gly_4 Ser)_2-α促黑素重组蛋白的研究

白喉毒素(DT)是由白喉棒状杆菌所产生的分子量为58 kD的外毒素,它在胰蛋白酶的作用下可降解为A和B两个片段, B片段能与敏感宿主细胞的特异受体结合并能将A片段转位到胞浆,A片段具有核糖体依赖的酶活性,它通过灭活真核细胞的肽链延长因子Ⅱ来阻断细胞蛋白合成.

白喉杆菌异染颗粒Neisser法染色的新探讨

目的提高教学质量,探讨如何增强异染颗粒染色,提高标本的清晰度。方法按常规接种白喉杆菌于甘油鸡蛋或吕氏培养基上。用传统的奈瑟法(Neisser)及改进法(吕氏美兰+俾褐麦斯),染色步骤、时间按常规。用普通显微镜观察两种方法每张标本的染色情况及异染颗粒。用德国KONTRONIBAS2.0全自动图像分析仪随机抽查两种方法染色标本的异染颗粒数目。结果传统奈瑟法的异染颗粒数目相对少些,着色浅。改进法染色的标本涂片均可见明显异染颗粒,数目相对比传统奈瑟法多,着色深。结论用改进的奈瑟(Neisser)染色法染色白喉棒状杆菌,异染颗粒数量多,染色效果优于传统奈瑟法。

15例类鼻疽菌病例临床用药分析

目的了解我院类鼻疽病的临床特征，探讨早期诊断及其临床用药。方法采用回顾性分析2002年1月-2007年11月期间收治的15例类鼻疽病患者进行类鼻疽伯霍尔德杆菌细菌学检测和药敏试验。结果患者以外伤或治疗基础疾病时起病，多以畏寒、高热、肺部感染、败血症以及脏器损害和细菌毒素引起的全身反应为主要表现，伯霍尔德杆菌对亚胺培南西司他丁钠、头孢他啶、头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林及其酶抑制剂、复方新诺明敏感率达100％。结论类鼻疽菌病治疗用药最好根据其药敏试验，如无条件可参考本文提供的经验应用抗菌药物。

蜂胶对白喉杆菌的抑菌试验

目的探讨河南蜂胶对白喉杆菌的抑菌效果。方法采用琼脂平板扩散法,以白喉杆菌为实验菌种,设置不同pH平板实验组和不同的蜂胶浓度组,每组3次重复,每张滤纸片(直径6mm)加样7μl,记录24h的抑菌效果。结果河南蜂胶在pH5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0和8.5不同条件下对白喉杆菌的抑菌环直径(mm)分别为:14.50±0.50、10.83±0.76、10.66±0.29、10.42±1.38、9.92±0.14、9.83±0.29和9.92±0.14。蜂胶浓度从15.50%倍比稀释至0.50%时对白喉杆菌的抑菌环直径(mm)依次为:12.50±1.00、11.50±0.87、11.33±0.76、9.67±0.29、9.17±0.58和7.75±0.25,≤0.25%浓度组和空白对照组均无抑菌环。结论随pH增高,河南蜂胶对白喉杆菌的抑菌活性减弱。随着蜂胶浓度降低,对白喉杆菌的抑菌活力减弱,最低抑菌浓度为0.50%。

用实验室常备染液显示白喉杆菌异染颗粒

异染颗粒是白喉杆菌染色性一大特征,在鉴别该菌上有重要价值。目前所用的白喉杆菌异染颗粒染色法有:奈瑟法、阿勃脱(Alben)法、史氏法及美兰染色法等。前两种方法染色结果,异染颗粒与菌体对比清晰;后两种方法虽然比较简单,但异染颗粒与菌体对比度差。上述诸方法中除美兰染色外,染色时染液需临时配制,给实验室工作常带来不便。为了解决这个问题,作者采用实验室常备的革兰氏染液来显示白喉杆菌异染颗粒,效果良好,报道如下。

细胞壁缺陷白喉棒状杆菌致病作用的观察及其毒力基因检测

目的比较白喉棒状杆菌亲代细菌型及其稳定L型动物致病性的差异,了解白喉棒状杆菌稳定L型变异的特点,探讨其变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。方法用氨苄青霉素在非高渗培养基内人工诱导产毒性白喉棒状杆菌为稳定L型。采用白喉棒状杆菌稳定L型纯培养物及其代谢产物皮内感染家兔,观察局部感染部位皮肤或全身的病理改变。采用微量法提取白喉棒状杆菌稳定L型的染色体DNA,用Tox基因特异性引物进行PCR扩增以检测毒素蛋白结构基因,并进行序列测定和分析。结果白喉棒状杆菌在氨苄青霉素作用下可发生细胞壁缺陷而成为L型,白喉棒状杆菌稳定L型不能引起动物局部或全身发生异常表现,该稳定L型的传代培养物可仍然保留同其亲代细菌型一致的Tox基因及其核苷酸序列。结论提示细胞壁缺失将导致白喉棒状杆菌与产生毒素蛋白有关结构基因在宿主菌细胞内的表达受到抑制,以致使白喉棒状杆菌稳定L型丧失了产生外毒素致病的作用。

细胞壁缺陷对白喉棒状杆菌Tox基因影响

目的探讨细胞壁缺陷对白喉棒状杆菌毒力基因及其表达的影响。方法以非高渗分离培养法诱导并获得产毒性白喉棒状杆菌稳定L型纯培养物,提取白喉棒状杆菌稳定L型的染色体DNA,用Tox基因特异性引物进行PCR扩增,并进行序列测定和分析。分别采用对流免疫电泳(CIEP)和十二烷基磺酸钠-不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测白喉棒状杆菌稳定L型可溶性代谢产物中的白喉毒素蛋白质。结果白喉棒状杆菌在氨苄青霉素作用下可发生细胞壁缺陷而成为L型,该稳定L型的传代培养物可仍然保留同其亲代细菌型一致的Tox基因及其核苷酸序列;但在其可溶性代谢产物中并未检测到白喉毒素蛋白质。结论白喉棒状杆菌稳定L型虽然保留了Tox基因但并不能表达白喉毒素蛋白质,提示细胞壁缺陷可影响Tox基因在宿主菌细胞内的表达。

妇女卫生用品棒状杆菌污染监测状况

除了白喉棒状杆菌之外,常见的棒状杆菌有溃疡棒状杆菌、假白喉棒状杆菌、化脓棒状杆菌、溶血棒状杆菌等多种,可以寄生于人或动物的鼻腔、咽喉部、外耳道、眼结膜、外阴部和皮肤等处.

118株棒状杆菌所致感染性疾病及耐药性分析

近几十年来．抗生素的使用促使感染性疾病的病原菌种类不断发生变化，条件致病菌有明显增多的趋势。一直以来人们对于棒状杆菌属多只重视白喉棒状杆菌．而忽视了该属其中一些条件致病菌。为了解临床上病原菌的致病性及耐药情况。现对本院2005年1月至2006年12月期间分离的118株棒状杆菌分析。现报道如下。

短小棒状杆菌对小鼠实体瘤及免疫功能的影响

目的研究短小棒状杆菌对H22荷瘤小鼠及其免役功能的影响。方法采用抑瘤实验、小鼠碳廓清实验、MTT法观察短小棒状杆菌对小鼠实体瘤和免疫功能的影响。结果短小棒状杆菌可使荷瘤小鼠的碳廓清指数、胸腺指数、脾脏指数升高,并由刀豆蛋白(ConA)、脂多糖(LPS)诱导体外小鼠T、B淋巴细胞增殖,能够抑制小鼠实体瘤生长。结论短小棒状杆菌能够增强小鼠机体免疫功能,并有抑瘤作用。

白喉毒素越膜机理研究进展

白喉毒素与细胞膜上的受体结合后,在受体个导的内吞作用下进入胞内体。综述了20世纪90年代后期至今,有关白喉毒素在胞内体的酸性环境中的特性研究。在酸性环境下,白喉毒素发生变构,T区疏水基团暴露并插入膜中,形成粘性孔道。T区形成的粘性孔道与白喉毒素结合,象分子伴侣一样,保持C区的线性结构,并使C区进入细胞膜。由于对白喉毒素作用机理的理解深入,逐渐产生一些新的应用前景。

细胞壁缺陷对白喉棒状杆菌致病性影响的研究

检测白喉棒状杆菌稳定L型对动物的致病性,探讨细胞壁缺陷对白喉棒状杆菌致病性的影响及其可能的分子机制。采用氨苄青霉素在非高渗培养基内诱导并获得产毒性白喉棒状杆菌稳定L型纯培养物。收集白喉棒状杆菌稳定L型纯培养物及其代谢产物,将收集的高于细菌型10 000倍浓度的白喉棒状杆菌稳定L型纯培养物及其代谢产物皮内注射家兔,观察局部注射部位皮肤或全身的病理改变。分别采用对流免疫电泳(CIEP)和SDS-不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测白喉棒状杆菌稳定L型可溶性代谢产物中的白喉毒素蛋白质。结果显示,白喉棒状杆菌稳定L型不能引起动物局部或全身发生异常表现,在其可溶性代谢产物中并未检测到白喉毒素蛋白质。提示细胞壁缺陷变异可影响白喉棒状杆菌产生白喉毒素蛋白质,从而使其丧失了产生外毒素致病的作用。

抗菌疗法杀灭类白喉杆菌治疗腋臭的临床观察

抗菌疗法杀灭类白喉杆菌治疗腋臭的临床观察大连医科大学临床药学系大连１１６０２７田舸大连医科大学附属二院皮肤科高玉雪大连友谊医院药剂科惠芳腋臭（ｂｒｏｍｉｄｒｏｓｉｓａｘｉｌｌａｅ）俗称狐臭，为人体腋下发出的特殊气味，天热多汗时更为明、显。虽然腋臭对人...

白喉毒素无毒变异体CRM_(197)的表达及其载体作用

目的表达白喉毒素无毒变异体CRM197,并考察其载体作用。方法利用基因工程技术在大肠杆菌BL21(DE3)中表达CRM197,用金属镍离子亲和层析纯化;以重组CRM197为蛋白载体,在EDAC的作用下,与活化的A群脑膜炎球菌荚膜多糖(GAMP)结合,制备GAMP-rCRM197结合物,免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法测定血清中A群脑膜炎球菌多糖特异性IgG抗体,并分析其免疫原性。结果重组CRM197在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的25%左右;Western blot证明重组CRM197具有良好的反应原性;各针接种后,结合物诱生的多糖特异性IgG水平均显著高于GAMP组和GAMP+rCRM197混合物组,具有较强的免疫原性;多次接种产生了免疫增强效应,重组CRM197具有载体蛋白的作用。结论已在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了重组CRM197,以纯化的重组CRM197作为载体制备的GAMP-rCRM197结合物具有良好的免疫原性,为以重组CRM197为蛋白载体制备其他结合疫苗奠定了实验基础。

一例无毒力白喉棒状杆菌携带者的临床特征和病原学诊断分析

目的对上海市某医院收治的1例携带白喉棒状杆菌的病例进行病原学诊断分析,为白喉的感控提供临床依据。方法采集患者痰液进行培养及质谱鉴定、涂片染色鉴定、宏基因组测序(metagenomic sequencing,mNGS),纯培养物行16S rDNA基因测序进行病原学诊断,同时采用PCR方法检测白喉棒状杆菌毒力基因toxA和toxB表达情况。结果患者痰液培养48h后分离到单一灰白色菌落,经质谱鉴定、涂片镜下及16S rDNA鉴定均提示为白喉棒状杆菌,mNGS提示白喉棒状杆菌较高序列数,PCR结果显示toxA和toxB毒力基因为阴性。结论该病例为白喉棒状杆菌携带患者,虽为无毒力感染者,仍当引起重视。

青少年健康人群抗白喉杆菌抗体水平调查

目的了解青少年人群抗白喉杆菌抗体水平,为预防控制白喉提供依据.方法采用随机抽样方法抽取调查点和被测人群,用间接血凝试验(IHA)检测抗白喉毒素抗体,结果分析采用χ2检验和F检验.结果青少年健康人群白喉抗体阳性率为80.32%(151/188),平均抗体滴度(GMT)为1:12.2236,抗毒素平均含量(ATC)为0 0599 IU/ml.抗体水平比较分析,年龄组中最高者是9～11岁组,96.67%,最低者是12～14岁组,48.78%;城关(95.45%)高于农村(72.13%);男女性别间无差异.结论岳阳市健康青少年人群的抗白喉抗体水平较高,能够有效防止白喉流行.

棒状杆菌属分离鉴定及抗生素敏感性试验

目的 :棒状杆菌属系统生理、生化特性及抗生素敏感性试验研究。方法 :对临床分离的85株棒状杆菌首选葡萄糖OF和硝酸盐还原两个试验将该属细菌初步分为4组 ,再用API方法鉴定到种。K -B法做药敏试验。结果 :85株棒状杆菌属经鉴定得4组7种 ,药敏试验棒状杆菌属对万古霉素均敏感。结论 :棒状杆菌鉴定API法是一种理想、简便、快速、准确的方法。JK菌群棒状杆菌耐药率最高 ,仅对万古霉素敏感 ,其他棒状杆菌属种对头孢唑啉、头孢哌酮。

棒状杆菌的分离鉴定及抗生素敏感性

棒状杆菌的分离鉴定及抗生素敏感性李金钟刘利平段雄波相青珍赵卿（新乐市医院，河北新乐０５０７００）关键词棒状杆菌药物敏感试验近年来，棒状杆菌属的分类经历了很大变化，除植物棒状杆菌外，在伯杰系统细菌手册中列出了３０个种。长期以来，多重视白喉棒状杆菌的培养...