碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌分子生物学特征及对头孢他啶-阿维巴坦耐药机制的初步研究

目的 研究碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的分子生物学特征及对头孢他啶-阿维巴坦耐药机制,为CRKP的医院感染控制及临床用药提供理论参考。方法 对广东省阳江市人民医院2020年1月至2021年12月临床收集、分离的128株非重复CRKP,采用微量肉汤稀释法检测临床常用抗生素对CRKP的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);采用改良碳青霉烯灭活试验(modified carbapenem inactivation method,mCIM)联合EDTA-改良碳青霉烯灭活试验(EDTA modified carbapenem inactivation method,eCIM)方法检测128株CRKP的产碳青霉烯酶型;通过PCR扩增并进一步测序确定菌株的多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、毒力基因、荚膜血清型和耐药基因突变位点。结果 CRKP菌株对多黏菌素B、替加环素和头孢他啶-阿维巴坦的耐药率分别为1.6%、3.9%和19.5%。97.7%的CRKP菌株mCIM结果阳性。其中,87.5%产丝氨酸碳青霉烯酶;10.2%产金属β-内酰胺酶。CRKP菌株的MLST型分别为ST11(占47.7%)、ST15(占18.0%)和ST23(占14.8%);携带碳青霉烯酶主要为肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(Klebsiella pneumoniae carbapenemase,KPC),占85.9%;携带毒力基因主要为iutA占82.8%、fimH占73.4%、rmpA2占36.7%、rmpA占33.6%。高毒力碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(hypervirulent carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,hv-CRKP)检出率为9.4%。在头孢他啶-阿维巴坦耐药CRKP菌株中发现KPC蛋白D179Y或OmpK36蛋白T193I的点突变。结论 本研究中CRKP主要产KPC型碳青霉烯酶,以ST11为优势克隆群,存在hv-CRKP播散的风险,亟需重视院内感染的防控及警惕感染的暴发和流行。