骨折内固定术后感染金黄色葡萄球菌患者的耐药监测及临床分析

目的 分析金黄色葡萄球菌在骨折内固定术后感染患者中的耐药情况。方法 回顾性分析四川省骨科医院2016年1月至2020年12月骨折内固定术后确诊为金黄色葡萄球菌感染的临床病例,共收集金黄色葡萄球菌467株。根据药物敏感性实验分为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)组(145株)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)组(322株),分析比较2组对常见抗菌药物的耐药情况。统计2016—2020年万古霉素对MRSA最低抑菌浓度(MIC)。结果 金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率达94.9%(443/467),对红霉素、克林霉素、苯唑西林、四环素耐药率较高,对左氧氟沙星、利福平、复方磺胺甲噁唑片、莫西沙星的耐药率较低[8.4%(39/467)、5.8%(27/467)、3.6%(17/467)、3.0%(14/467)],未发现对万古霉素、利奈唑胺、达托霉素耐药的菌株,万古霉素中介3株。MRSA组和MSSA组对克林霉素、苯唑西林、红霉素、左氧氟沙星、莫西沙星、青霉素、利福平、复方磺胺甲噁唑片、四环素的耐药率比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。万古霉素对MRSA的MIC为2 mg/L的比例较高。结论 金黄色葡菌球菌引起的骨折内固定术后感染MRSA检出率较高,万古霉素MIC=2 mg/L的比例较高,降低了万古霉素治疗骨折内固定术后感染的达标率,且万古霉素骨组织渗透率不高,增加了临床治疗难度。因此万古霉素骨水泥植入,联合万古霉素静脉用药,或万古霉素静脉用药与利福平、喹诺酮类、磺胺类、利奈唑胺等联合用药可能是治疗骨折内固定术后感染的较好选择。

N-乙酰半胱氨酸联合万古霉素对耐甲氧金黄色葡萄球菌及其生物膜的清除作用研究

目的探究N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)联合万古霉素(Vancomycin,VA)对体外建立的耐甲氧金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)生物膜的影响。方法(1)以实验室标准菌株耐甲氧金黄色葡萄球菌(BAA-1556,ATCC)作为研究对象,通过结晶紫染色法,确定其最大面积生物膜生成时间。(2)建立实验分组,分别为空白对照组、万古霉素组、乙酰半胱氨酸组、万古霉素+乙酰半胱氨酸低剂量组、万古霉素+乙酰半胱氨酸高剂量组。通过结晶紫染色法评价生物膜相对面积大小。通过LB-琼脂培养板计数法测算生物膜内残余细菌数量。通过扫描电镜以及激光共聚焦显微镜下观察不同组MRSA细菌生物膜形态变化。结果(1)MRSA菌在48 h可形成成熟的生物膜结构。(2)MRSA菌在各分组载体表面形成生物膜的半定量结果(波长=590 nm)分别为空白对照组1.32±0.60,万古霉素组1.05±0.15,乙酰半胱氨酸组0.53±0.20,万古霉素+乙酰半胱氨酸低剂量组0.35±0.11,万古霉素+乙酰半胱氨酸高剂量组0.29±0.10。证实NAC可显著减少生物膜面积。(3)24、48、72 h时间段生物膜内残余细菌量为空白对照组>乙酰半胱氨酸组>万古霉素组>万古霉素+乙酰半胱氨酸低剂量组>万古霉素+乙酰半胱氨酸高剂量组,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。证实VA与NAC联合应用可以提高生物膜内细菌的清除率。(4)空白对照组存在大量活/死细菌共同构成的细菌生物膜;乙酰半胱氨酸组虽有较多活菌分布,但死菌黏附以及生物膜面积明显减少;万古霉素组存在着大量死菌黏附于载体表面,构成生物膜,与部分活菌共存;万古霉素+乙酰半胱氨酸低剂量组活/死细菌分布明显减少;万古霉素+乙酰半胱氨酸高剂量组生物膜面积极少,仅有少量活菌黏附于载体表面,且呈单个分布。结论NAC对体外生成的MRSA菌生物膜有着清除作用,与VA联合应用可显著提升对生物膜内细菌的清除率。

ICU与非ICU病房致病细菌谱及耐药分析

目的了解重症监护病房(ICU)与非ICU病房菌谱情况,对其革兰阴性杆菌耐药率进行比较,为不同病区使用抗菌药物提供实验室依据。方法用VITEK-2和细菌鉴定(API)系统对细菌进行鉴定;采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,用WHONET 5.3软件进行数据分析,SPSS 11.5软件进行统计学分析。结果ICU病房排在前5位的细菌分别是铜绿假单胞菌(128株,占22.1%)、洋葱伯克霍尔德菌(59株,占10.2%)、凝固酶阴性葡萄球菌(50株,占8.6%)、金黄色葡萄球菌(39株,占6.7%)、白色念珠菌(37株,占6.4%);非ICU病房排在前5位的分别是大肠埃希菌(358株,占16.4%)、铜绿假单胞菌(296株,占13.6%)、凝固酶阴性葡萄球菌(194株,占8.9%)、肺炎克雷伯菌(188株,占8.6%)、金黄色葡萄球菌(184株,占8.5%);ICU病房铜绿假单胞菌、大肠埃希菌的耐药率明显高于非ICU病房。结论ICU病房以条件致病菌非发酵革兰阴性杆菌为主,且耐药程度明显高于非ICU病房,对ICU病房应该单独进行细菌耐药性监测。

贵阳市花溪区幽门螺旋杆菌流行病学调查研究

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）自1983年被Marshau和Warren成功分离后,目前研究表明,Hp感染是世界上感染率最高细菌之一[1],是慢性胃炎与十二指肠溃疡的致病因素。

嗜肺军团菌主要外膜蛋白DNA疫苗的免疫保护性研究

目的观察m ompS基因DNA疫苗对嗜肺军团菌感染的免疫保护作用。方法将18只BALB/c雌性小鼠随机分为3组,pcDNA 3.1-m ompS实验组股四头肌肌肉接种pcDNA 3.1-m om opS质粒100μg,两周后加强免疫1次,2个对照组分别肌肉注射等体积的生理盐水和空质粒,加强免疫后3周小鼠鼻腔滴注嗜肺军团菌L 1型菌液进行攻击感染,感染4周后,检查小鼠肺组织带菌量,观察肺组织病理形态学改变。结果pcDNA 3.1-m ompS免疫组肺组织带菌量少于生理盐水对照组和空质粒对照组(P<0.01);与生理盐水对照组和空质粒对照组比较,pcDNA 3.1-m ompS免疫组肺组织病理改变轻微。结论由m ompS基因构建的嗜肺军团菌DNA疫苗能诱导小鼠产生保护性免疫。

30株不同来源的金黄色葡萄球菌耐药性及分型分析

目的 分析不同来源的金黄色葡萄球菌(SAU)的耐药性及分型,为临床科学用药提供指导。方法 对2021-2022年荣昌区各级医疗机构细菌耐药监测点送检的分泌物、脓液、血液、鼻咽部、尿液样本368份,按照规范方法开展SAU的分离、鉴定和培养,采用梅里埃全自动微生物鉴定及药敏分析系统进行药敏实验,采用脉冲场凝胶电泳进行SAU的分型及聚类分析。结果 共检测出SAU 30株,检出率为8.15%(30/368),菌株主要来自痰液(53.33%),其次是分泌物(20.00%)和脓液(13.33%)。SAU对青霉素耐药率为100.00%,对红霉素(60.00%)、克林霉素(40.00%)、四环素(36.67%)、头孢西丁(30.00%)、苯唑西林(26.67%)、左氧氟沙星(16.67%)、庆大霉素(13.33%)、呋喃妥因(3.33%)、利福平(3.33%)均产生一定程度的耐药性;未检出对替考拉宁、万古霉素、达托霉素、复方磺胺甲噁唑、利奈唑胺、红霉素/克林霉素复合物的耐药菌株。结论 荣昌区SAU检出率相对较低,应进一步加强对SAU耐药性的监测,动态掌握SAU耐药性的变化。

肱骨近端锁定钢板治疗肱骨近端骨折的临床分析

目的了解肱骨近端锁定钢板治疗肱骨近端骨折的临床效果。方法以随机法将方便选取2014年1月—2017年12月该院接收的60例肱骨近端骨折分成2组:30例实验组选肱骨近端加压锁定钢板治疗,30例对照组选传统钢板治疗,对2组治疗效果展开对照。比较两组优良率、骨折愈合时间及并发症情况。结果实验组治疗优良率96.67%,与对照组76.67%相比,差异有统计学意义(χ2=4.745,P<0.05);骨折愈合时长(12.50±2.65)周,比对照组(15.89±2.47)周短(t=5.822,P<0.05);实验组2例发生并发症,对照组8例发生(χ2=4.172,P<0.05)。结论对肱骨近端骨折选肱骨近端锁定钢板治疗,效果比传统钢板更显著,可明显提升治疗优良率,促进骨折快速愈合,有效防治并发症。

霍乱肠毒素基因DNA疫苗的构建和体外表达

目的构建霍乱弧菌ctxAB融合基因分子佐剂DNA疫苗,并在NIH3T3细胞中进行表达。方法用限制性核酸内切酶从原核表达重组质粒pET32a-ctxAB上切下ctxAB基因,导入真核表达载体pcDNA3.1(+),重组子经限制性酶切分析、PCR鉴定正确后,命名为pcDNA3.1-ctxAB。用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-ctxAB转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法和Western blot对pcDNA3.1-ctxAB的瞬时表达产物和稳定表达产物进行鉴定。结果真核表达重组质粒pcDNA3.1-ctxAB成功转入NIH3T3细胞,利用免疫荧光技术检测到其在细胞膜和细胞浆中获得瞬时表达,对稳定转染细胞用Western blot分析,发现在约40.5kDa处有阳性杂交信号。结论成功构建霍乱弧菌ctxAB基因分子佐剂DNA疫苗,并在NIH3T3细胞中获得表达。

不同地区铜绿假单胞菌第一类整合子和整合子相关基因盒的分布

目的对石家庄、昆明两地分离的铜绿假单胞菌临床菌株进行第一类整合子的分布及整合子相关基因盒携带率的比较分析,探讨第一类整合子在两地菌株分布的差别。方法采用PCR方法筛选检测64株石家庄、昆明两地临床分离的铜绿假单胞菌第一类整合子和及其所携带的整合子相关基因盒。结果64株铜绿假单胞菌临床菌中共有43株为第一类整合子阳性菌(阳性率67.2%);其中石家庄菌株和昆明菌株阳性率分别为71.4%和64.3%,两地铜绿假单胞菌第一类整合子阳性率无显著性差异。第一类整合子阳性铜绿假单胞菌中,石家庄菌株和昆明菌株携带一类整合子相关基因盒的阳性率分别为80.0%和38.%,两地第一类整合子阳性菌中整合子相关基因盒的携带率具有显著性差异(P<0.01);两地菌株携带的基因盒大小不同。结论第一类整合子在铜绿假单胞菌临床菌株中广泛分布,环境的选择压力影响细菌整合子相关基因盒的分布。

整合子及相关基因盒在临床分离铜绿假单胞菌中的分布

目的检测Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合子及Ⅰ类整合子相关基因盒在铜绿假单胞菌临床分离株中的分布,分析整合子对细菌耐药性的影响。方法用纸片法对62株临床分离铜绿假单胞菌进行药敏试验;应用多重PCR法检测62株铜绿假单胞菌Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合子;对Ⅰ类整合子阳性菌进行整合子相关基因盒检测。结果62株菌中有40株(64.5%)含有Ⅰ类整合子,1株(1.6%)含有Ⅱ类整合子;没有检测到Ⅲ类整合子阳性菌。在Ⅰ类整合子阳性菌中,有26株携带Ⅰ类整合子相关基因盒(65.0%);分离自同一科室的部分菌株携带大小相同的基因盒;Ⅰ类整合子阳性菌株的耐药率高于整合子阴性的菌株。结论Ⅰ类整合子及整合子相关基因盒在铜绿假单胞菌临床菌株中分布广泛,整合子在细菌耐药中发挥作用。

定量分析铜绿假单胞菌第一类整合酶基因的表达

目的整合子是具有整合和表达外来耐药性基因盒能力的基因元件,在细菌耐药性基因的积累和传递中起重要作用。本研究通过定量分析第一类整合子整合酶基因(intI1)在细菌不同生存状态的表达水平,探讨整合子的作用机制。方法培养和提取两株第一类整合子阳性铜绿假单胞菌的液相培养菌、生物被膜菌、被膜脱落菌等三种生长状态的总RNA,采用竞争RTP-CR方法定量检测菌体在以上三种状态下intI1m RNA的表达水平。结果铜绿假单胞菌的液相培养菌、生物被膜菌和被膜脱落菌都有intI1m RNA表达;两株菌在三种状态下intI1m RNA的表达量不同,其中生物被膜菌表达最高,被膜脱落菌次之,液相培养菌最低;生物被膜菌intI1m RNA的量较液相培养物高约15倍,较被膜脱落菌高约4倍。结论铜绿假单胞菌intI1在生物被膜中m RNA表达上调,随着菌体从被膜脱落以及菌体持续的液相培养intI1表达下调。提示整合子在生物被膜菌中可进行活跃的基因盒的捕获、移动和积累,有利于细菌耐药性的提高及扩散。

山东部分生猪屠宰场屠宰环节沙门氏菌污染状况分析

[目的 ]初步调查分析山东部分地区生猪屠宰环节沙门氏菌污染状况和血清型分布,了解生猪屠宰环节沙门氏菌的动态变化。[方法 ]采集鲁东部、东北部、中部、西部和西南部地区不同规模屠宰场生猪屠宰环节样品共1012份,分离疑似沙门氏菌并利用PCR方法和血清凝集反应进行鉴定,单因子血清进一步进行血清型分析。[结果 ]共分离鉴定沙门氏菌202株;鲁东、东北、中部、西部和西南部地区的沙门氏菌污染率分别为27.2%、12.6%、34.6%、12%和13.5%;沙门氏菌分离株共有9种血清型,以德尔卑(S.derby)、鼠伤寒(S.typhimurium)、汤卜逊(S.thompson)为主。[结论 ]山东地区部分屠宰场生猪屠宰环节存在较严重的沙门氏菌污染现象,应加强屠宰环节致病菌监测,并在屠宰全程严格执行良好生产规范。

布鲁氏菌分种分型研究进展

布鲁氏菌的分型技术有表型技术和基因型技术两种,其中表型技术主要是利用生物分型,噬菌体和细菌素分型,血清分型,药物敏感分型,细菌菌体组分分型;基因型技术主要是利用限制性片段长度多态性分型,PCR及其衍生物技术分型,DNA同源性和染色体大小分型。但没有一种方法能完全反映布鲁氏菌的进化关系和分类地位,在临床和流行病学上又具有现实意义,寻找一种更好的分型方法或者是多种方法的联合运用,可能会更好地解决布鲁氏菌的分种分型问题。

广州地区2004年淋球菌对5种抗生素耐药性的监测

目的:了解2004年淋球菌对5种抗生素的耐药性及PPNG(四环素高度耐药性)和TRNG(四环素MIG大于等于16MG-L)的流行状况。方法:用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)以及用纸片碘量法检测β-内酰胺酶。结果:127株淋球菌检出PPNG37株(29.1%)、TRNG 65株(51.2%)、环丙沙星耐药率达99.2%,青霉素耐药率达89.8%,头孢曲松、壮观霉素没有发现耐药菌株,且抗菌活性最强。结论:持续监测淋球菌的耐药性十分重要。

布鲁菌S_2株诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡及免疫激活的研究

目的:研究猪布鲁菌S2株诱导巨噬细胞(Mφ)的凋亡、活化及对T淋巴细胞的激活作用。方法:用猪布鲁菌S2株体外感染Mφ,并以大肠埃希菌作为对照,采用瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态学变化;流式细胞仪测定感染后24小时Mφ的凋亡率;ELISA法检测感染后不同时间点Mφ培养上清中IL-12和TNF-α及感染后Mφ与T细胞共培养上清中IFN-γ的含量的变化。结果:瑞氏-姬姆萨染色显示布鲁菌S2株感染Mφ后1小时体积明显增大,突起增多,胞浆内可见大量布鲁菌;6小时细胞内细菌减少,但胞膜仍完整;至12小时细胞核固缩,胞膜失去完整性。流式细胞仪检测结果显示,感染后24小时Mφ的凋亡率均明显高于正常对照组及大肠埃希菌感染组(P<0.05)。ELISA结果显示S2株感染Mφ12、24、48小时的上清中IL-12和TNF-α含量均明显高于正常对照组(P<0.01),S2株感染后Mφ与T细胞共培养24、48、72小时产生的IFN-γ量高于正常对照组(P<0.05),但低于大肠埃希菌感染组(P<0.01)。结论:S2株可以引起Mφ的凋亡,同时可诱导Mφ活化,产生IL-12和TNF-α;布鲁菌感染后的Mφ可诱导T细胞活化,产生IFN-γ免疫应答。

夫西地酸乳膏治疗儿童脓疱疮疗效观察

目的观察夫西地酸乳膏治疗儿童脓疱疮的疗效和安全性。方法将2007年6月～2008年6月就诊的100例脓疱疮患儿分为2组,治疗组50例,外搽2%夫西地酸乳膏3次/d,对照组50例,外搽2%莫匹罗星软膏3次/d,疗程均为7天。结果治疗组有效率为94.00%,对照组为92.00%,两组有效率比较,差异无显著性意义(P>0.05),治疗期间均未出现不良反应。结论2%夫西地酸乳膏治疗儿童脓疱疮有效,安全性高。

结核分枝杆菌耐药机制研究进展

结核分枝杆菌（M.tuberculosis,MTB）是结核病的病原菌,是一种抗酸阳性棒状杆菌,主要包括人型、牛型、非洲型和鼠型,其中对人致病的主要是人型[1]。本菌可侵犯全身各组织器官,但以肺部感染最多见。随着抗结核药物的不断发展和卫生生活状况的改善,结核病的发病率和死亡率曾一度大幅下降,但近10年来,全球结核病疫情死灰复燃。

下呼吸道肺炎克雷伯菌的耐药性研究

目的了解下呼吸道标本中肺炎克雷伯菌耐药特点及产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的检出率、基因型特点。方法收集下呼吸道标本中分离出的肺炎克雷伯菌,微量稀释法检测细菌药敏情况,确证试验检测产ESBLs菌,并使用对CTX-M型ESBLs基因特异的引物,PCR扩增产酶菌的ESBLs基因。结果下呼吸道产ESBLs肺炎克雷伯菌占25%。ESBLs阳性细菌对12种抗生素的耐药性远远高于ES-BLs阴性菌。35株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,16株携带CTX-M型基因。结论该院下呼吸道标本肺炎克雷伯菌中ESBLs的检出率、耐药性高,CTX-M型基因的出现应引起临床医生的足够重视。