粒细胞集落刺激因子对内皮前体细胞的动员

目的:研究重组人粒细胞集落刺激因子(GCSF)在不同时相对内皮前体细胞(EPC)的动员作用。方法:将16只体重为2～2.5kg的雄性新西兰兔随机分为两组,即正常对照组和GCSF组,每组8只。用药后1、2、3和4周测量外周血EPC含量。采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养瓶、板中,培养3d收集贴壁细胞,用流式细胞仪计数EPC,PECD34/FITCCD133双阳性细胞为EPC;荧光显微镜鉴定FITCUEA1/DilacLDL双染色阳性细胞为EPC。用药第3周测血清一氧化氮(NO)、血脂。结果:用药1、2、3和4周两组外周血EPC曲线:正常对照组为一低水平基线;GCSF组持续稳定于高水平,两组间差异有显著性意义(P<0.01)。第3周检测血清NO及血脂,两组血脂均在正常范围内,NO亦无显著性差异。结论:GCSF对EPC有显著而持续的动员作用,该作用与血清NO无关。

缝隙连接的血管生物学作用及与心脑血管疾病关系的研究进展

缝隙连接(gap junction,GJ)是介导相邻细胞间直接通讯的特殊膜通道,由连接蛋白(connexin,Cx)构成的半通道再相互锚定组成,其功能主要是在细胞间起代谢耦联和电耦联作用。血管结构中存在丰富的GJ,广泛参与血管的各项生理功能。近年来的大量研究表明,Cx表达的改变所致的GJ细胞间通讯功能障碍与高血压、动脉粥样硬化等疾病的血管病变密切相关。本文就GJ在血管生物学中的作用及与心脑血管疾病关系的研究进展作一综述。

occludin的RNA干扰慢病毒载体的构建及其在紧密连接中的功能研究

目的:体外分析occludin在紧密连接中的作用。方法:构建RNA干扰慢病毒载体,转染TM4细胞后,用RT-PCR和Western blot检测其对occuldin的抑制能力,用体外TJ细胞模型分析occuldin在TJ中功能。结果:测序结果表明pLenti 6.3-EGFP-occludin-miR表达载体已经成功构建;RT-PCR结果显示pLenti 6.3-EGFP-occludin-miR-3能够显著抑制occludin的表达(P<0.05);Western印检测分析发现pLenti 6.3-EGFP-occludin-miR-3转染组occuldin的表达值为0.7534±0.089,经ANOVA比较,较空白对照组和pLenti 6.3-EGFP转染组(1.056±0.025)都低,差异显著(P<0.05)。体外细胞TJ模型结果表明pLenti 6.3-EGFP-occludin-miR-3转染组中,TM4表达的occludin的表达受到抑制,紧密连接的紧密程度下降。结论:pLenti 6.3-EGFP-occludin-miR表达载体已经成功构建;occludin是维持紧密连接的功能蛋白之一。