丽水地区变应性鼻炎患者变应原sIgE抗体检测分析

目的探讨丽水地区变应性鼻炎(AR)患者吸入性变应原及食入性变应原谱的分布特征,为临床诊疗和预防提供依据。方法收集2020年1月至2022年12月在丽水市中心医院耳鼻咽喉门诊就诊的1610例疑似AR患者的血清变应原sIgE抗体检测资料,并进一步分析AR患者各类变应原谱的分布特征。结果共计1020例患者诊断为AR,血清变应原阳性率为63.35%。其中男性AR患者阳性率(66.59%)高于女性(59.48%),差异具有统计学意义(P<0.01)。丽水地区AR患者中主要的变应原是户尘螨,吸入性变应原前5位分别为户尘螨(77.94%)、混合霉菌(10.20%)、猫毛皮屑(9.22%)、树木花粉(5.88%)、狗毛皮屑(3.43%);食入性变应原前5位分别为牛奶(23.33%)、蟹(7.75%)、腰果(6.67%)、虾(4.41%)、鸡蛋白(3.33%)。在食入性变应原中,牛奶、蟹、虾的阳性率在男性中显著高于女性,差异具有统计学意义(P均<0.05)。按年龄分组比较,吸入性变应原中的户尘螨、桑树、蟑螂、树木花粉、草木花粉阳性率差异均有统计学意义(P均<0.05);食入性变应原中的鸡蛋白、牛奶、蟹、苋阳性率差异均有统计学意义(P均<0.05)。吸入性变应原中的户尘螨、桑树、混合霉菌、树木花粉、草木花粉阳性率存在季节差异(P均<0.05)。结论丽水地区AR患者的致敏变应原具有多样性和复杂性,且受到性别、年龄和季节等因素的影响。

猫犬主要过敏原蛋白的最新研究进展

猫犬过敏原可引发症状严重程度不一的过敏反应,诱发人类鼻炎和哮喘等,危害严重。在犬猫的皮屑、毛发、唾液、舌下腺等提取物中发现有多种致敏原。在很多公共场所(如医院、学校、办公室等)检测到的过敏原浓度足以引发过敏性疾病或者使症状加重,这些症状困扰着爱猫犬人士。目前,针对猫犬过敏最有效的治疗方法依然是过敏原特异性免疫疗法。本综述主要对当前犬猫过敏原的种类、异源表达、治疗方法的研究进展进行总结,并对过敏制剂的应用进行了展望,这为解决犬猫过敏症这一难题提供了新的思路。

尘螨诱导特应性皮炎小鼠模型和哮喘小鼠模型的构建

旨在构建尘螨诱导的特应性皮炎(atopic dermatitis, AD)小鼠模型和哮喘小鼠模型。本研究利用3种主要尘螨螨种(屋尘螨、粉尘螨、热带无爪螨)的主要变应原Der p 1、Der f 1、Blo t 5等比混合,分别诱导AD小鼠模型和哮喘小鼠模型,并通过皮肤及肺组织的相关炎症细胞因子水平(IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-17A)、血清总IgE水平等指标对AD小鼠的过敏程度进行评估;通过IgE水平、耳朵点刺试验、肺部组织苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining, HE)等指标评估哮喘小鼠模型。结果表明,AD模型中致敏区域皮肤出现破损后结痂现象,皮肤及肺组织中细胞因子水平的变化表明小鼠体内反应偏向Th2反应,IgE水平较正常组显著升高;哮喘模型组小鼠血清总IgE水平显著升高,变应原激发后模型小鼠体温下降明显,且90 min后仍未恢复初始温度,耳朵点刺试验中,抗原的攻击使模型组小鼠耳朵染料渗漏增加,肺组织HE染色显示模型组小鼠炎症细胞浸润增加。本研究成功诱导尘螨AD小鼠模型和尘螨哮喘小鼠模型。

层状双氢氧化物-rFel d 1-Can f 1融合变应原对小鼠模型过敏反应的预防效果分析

旨在预防猫、犬诱导的过敏反应,本研究将猫主要变应原Fel d 1与犬主要变应原Can f 1融合原核表达,纯化制备了rFel d 1-Can f 1融合变应原。将层状双氢氧化物(layered double hydroxides,LDH)与rFel d 1-Can f 1混合,制备LDH-rFel d 1-Can f 1,皮下注射法免疫BALB/c小鼠,随后利用rFel d 1-Can f 1融合变应原诱导过敏小鼠模型,通过检测小鼠应激性过敏反应的体温变化、耳朵点刺试验、肺部组织切片HE染色、血清IgE水平等指标评价LDH-rFel d 1-Can f 1对猫犬诱发过敏反应的预防效果。研究表明,LDH与rFel d 1-Can f 1质量比为7∶1时,LDH可以完全吸附rFel d 1-Can f 1融合蛋白。LDH-rFel d 1-Can f 1可以有效缓解应激性过敏反应引起的小鼠体温下降,显著减少过敏导致的染料渗透面积。肺部组织切片HE染色结果显示,LDH-rFel d 1-Can f 1可以缓解过敏引起的炎症细胞浸润。此外,LDH-rFel d 1-Can f 1免疫后可以诱导小鼠产生较高水平IgG,这为开发抑制宠物猫犬诱发过敏反应的疫苗奠定基础。

基于生物信息学方法筛选特应性皮炎关键基因和相关药物预测

目的筛选特应性皮炎皮损区的关键基因及对潜在的治疗药物的预测。方法从GEO数据库中获得GSE193309高通量测序数据,运用R语言进行差异表达基因筛选、GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,并通过String网站进行蛋白互作网络(PPI)的构建;用Cytoscape软件中的插件MCODE进行模块分析,筛选出特应性皮炎皮损区的关键基因;基于CIBERSORT算法,对特应性皮炎皮损区与非皮损区的皮肤之间的免疫细胞进行差异分析,最后利用Connectivity Map预测可以减轻特应性皮炎皮损症状的潜在小分子化合物。结果本研究共筛选出1847个差异表达基因和11个关键基因PI3、SPRR2B、LCE3C、LCE3E、SPRR1A、LCE3A、SPRR2A、SPRR2F、SPRR1B、LCE3D和LCE5A。GO分析共富集962个功能,包括免疫系统过程、白细胞的激活、防御反应等;KEGG分析共富集64条通路,差异表达基因与细胞因子-细胞因子受体相互作用最相关。未活化的树突状细胞、M2巨噬细胞和未活化的肥大细胞在表皮免疫微环境中占比最高。预测出小分子化合物埃博霉素、苯甲酰喹、茚地那韦、KU-0063794、PI-103、头孢雷特、氨氯地平、PI-828可作为减轻特应性皮炎局部皮损的潜在药物。结论PI3、SPRR2B、LCE3C、LCE3E、SPRR1A、LCE3A、SPRR2A、SPRR2F、SPRR1B、LCE3D和LCE5A可能是特应性皮炎皮损发生相关的关键基因,预测的8个小分子化合物可为后续的药物研发提供理论参考。

食物过敏的膳食危险因素及其调控作用机制研究进展

当前,食物过敏的发病率在全球范围内逐渐升高,食物过敏已经成为人们日益关注的食品安全和公共卫生问题。除遗传因素外,膳食因素是导致食物过敏风险升高的重要因素,而肠道菌群在膳食和免疫系统之间起着重要的中介作用。鉴于此,本文系统综述了近年来针对食物过敏膳食危险因素的相关研究,针对不同危险因素的免疫学作用机理、人群队列研究以及干预实验的结果进行了汇总,并对其中肠道菌群发挥的作用进行了深入探讨。本文可为食物过敏的预防和控制,以及以肠道菌群为靶点的食物过敏机制研究与调控策略提供借鉴和新思路。

呼吸道过敏性疾病与呼吸道感染性疾病儿童血清过敏原sIgE抗体情况分析

目的分析呼吸道过敏性疾病与呼吸道感染性疾病患儿血清过敏原分布情况,为儿童呼吸道过敏性疾病与感染性疾病的预防及治疗提供依据。方法根据病历资料回顾性纳入2019年4月至2022年6月就诊于中国医科大学附属盛京医院门诊或住院部且经临床确诊为呼吸道过敏性疾病以及呼吸道感染性疾病的1~14岁(中位数5岁)患儿2334例,采用Phadia 250全自动荧光酶免疫检测系统及其配套检测试剂检测患儿血清中各种过敏原的表达水平,并使用GraphPad Prism 8.0软件进行统计学分析。结果在呼吸道过敏性疾病(1151例)患儿中过敏原sIgE阳性率为75.85%,在呼吸道感染性疾病(1183例)患儿中为47.68%;哮喘组过敏原主要为尘螨混合(44.18%),其次为霉菌混合(40.64%),过敏性鼻炎组主要为尘螨混合与杂草花粉混合,均为52.51%;呼吸道感染性疾病常见过敏原为霉菌混合(27.81%),其次为尘螨混合(24.77%);在不同年龄组中,<7岁的患儿过敏原主要为霉菌混合(33.31%),随着年龄的增加,不同组合过敏原的阳性率均增加;≥7岁组尘螨混合、毛屑混合、杂草花粉混合过敏原sIgE的阳性率均显著高于≤3岁组和4~6岁组(P均<0.0001);男性患儿过敏原sIgE阳性率为64.33%,高于女性患儿的56.33%,差异有统计学意义(χ^(2)=14.29,P=0.0002);在各疾病组中,尘螨混合与杂草花粉混合过敏原阳性患儿sIgE水平在1~6级别均有分布,6级水平在过敏性鼻炎组分布率最高;各疾病组均以1种过敏原或2种过敏原组合为主,且随着过敏原组合数的增多,阳性比率逐渐降低;过敏性鼻炎组tIgE水平显著高于哮喘组、上呼吸道感染组和下呼吸道感染组(P均<0.005)。结论尘螨混合、霉菌混合是哮喘患儿常见的过敏原,杂草花粉混合、尘螨混合是过敏性鼻炎患儿常见的过敏原。随着年龄的增长,患儿对尘螨、霉菌、毛屑、杂草花粉过敏均越来越多。

碘造影剂过敏样反应相关机制及防治措施的研究进展

碘造影剂是一种广泛应用于医学影像学的重要工具,然而,由于个体差异和特定情况,部分患者在接受碘造影剂后可能会出现过敏样反应。虽然这种反应较为罕见,但其可能带来的严重并发症需要引起医学界的高度重视。为了降低碘造影剂过敏样反应的发生率,医学界进行了广泛的研究和实践,探索了多种防治措施。本论文综述了碘造影剂过敏样反应的研究进展,包括过敏样反应的临床表现与分类、发生机制、危险因素、预防措施以及治疗策略,旨在为临床医生提供更为有效的指导,保障患者安全。

基于纳米抗体的猫皮屑特异性IgE抗体超敏检测方法的建立和性能评估

目的:通过噬菌体展示技术制备抗人IgE纳米抗体,将其用于磁微粒化学发光平台建立一种猫皮屑特异性IgE抗体超敏检测方法。方法:在WHO/IUIS过敏原数据库中检索猫致敏蛋白信息,合成序列后在原核表达系统中表达和纯化猫皮屑致敏蛋白Fel d 1。使用人源IgE免疫新疆单峰驼提取淋巴细胞中的RNA建立噬菌体展示纳米抗体库,分析库容、多样性和插入率,通过筛选和鉴定获得抗人IgE纳米抗体。使用重组过敏原偶联磁微粒和吖啶酯标记纳米抗体,建立磁微粒化学法猫皮屑特异性IgE抗体检测方法。结果:噬菌体展示库的库容为1.88×108 cfu/ml,插入率为93.6%,纳米抗体纯度>95%。检测方法的线性范围为0.1~100 U/ml,与ImmunoCAP检测系统临床对比有较好的一致性。结论:成功建立了基于纳米抗体的猫皮屑特异性IgE抗体超敏检测方法,为猫过敏性疾病辅助诊断提供了技术基础。

过敏性鼻炎和哮喘患者外周血及致敏小鼠血液或肺组织B细胞中TLR9的表达研究

目的探究过敏性鼻炎(allergy rhinitis,AR)、过敏性哮喘(allergy asthma,AA)、AR合并AA(AR combined with AA,ARA)患者外周血和致敏小鼠血液或肺组织B淋巴细胞(B细胞)中Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)的表达及过敏原对其表达的影响。方法招募来自锦州医科大学附属第一医院门诊和发作急性期住院的100例志愿者,包括点刺实验阴性的19例健康对照(health control,HC)志愿者、点刺实验阳性的40例AR患者、26例AA患者、15例ARA患者。流式分析仪检测经屋尘螨过敏原提取物(home dust mite allergen extract,HDME)、大籽蒿过敏原提取物(Artemisia sieversiana wild allergen extract,ASWE)、梧桐过敏原提取物(Platanus pollen allergen extract,PPE)刺激前后患者外周血B细胞中TLR9的表达;并采用野生(WT)小鼠和FcεRI基因敲除(FcεRI-KO)小鼠建立AR和AA致敏模型,检测过敏原以及FcεRI对B细胞中TLR9表达的影响。结果AR、AA、ARA患者外周血B细胞中TLR9的表达和平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)均较HC组有所增高;过敏原激发后,AR、AA患者血液B细胞中TLR9的表达和MFI升高(P<0.05)。WT小鼠和FcεRI-KO小鼠与NS对照组相比,过敏原激发后,AR、AA小鼠外周血B细胞TLR9^(+)高表达,但差异无统计学意义,而几乎每组MFI均升高;与NS对照组相比,过敏原激发后FcεRI基因敲除的AA小鼠肺组织中TLR9^(+)B细胞表达差异无统计学意义,但其MFI升高。FcεRI-KO小鼠与WT小鼠相比,过敏原激发后B细胞中TLR9^(+)MFI较低。结论B细胞中TLR9可能参与AR、AA的发生,检测B细胞中TLR9的表达可能成为诊断AR、AA的新方向。

过敏原对过敏性鼻炎患者外周血CD4^(+)Th1 IL-18、IL-18BPa和IL-18Rα表达的影响

目的探讨过敏原对健康人(healthy control,HC)和过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者外周血CD4^(+)Th1细胞表达IL-18、IL-18BPa和IL-18Rα蛋白水平及mRNA水平的影响。方法收集皮肤点刺试验阴性的鼻炎(AR^(-))、皮肤点刺试验阳性的鼻炎(AR^(+))患者和HC的外周血标本。流式细胞术检测过敏原对CD4^(+)Th1细胞表达IL-18、IL-18BPa和IL-18Rα蛋白水平的影响;qPCR检测过敏原对CD4^(+)T细胞表达IL-18、IL-18BPa和IL-18RαmRNA水平的影响。结果与HC相比,AR^(-)和AR^(+)患者外周血Th1细胞中IL-18蛋白的表达增加,IL-18BPa蛋白的表达减少;AR^(+)患者外周血Th1细胞中IL-18Rα蛋白的表达增加;过敏原可增强HC Th1细胞IL-18Rα蛋白的表达,并诱导AR^(+)患者和HC CD4^(+)T细胞IL-18、IL-18BPa和IL-18RαmRNA的表达。结论过敏原极可能通过促进外周血CD4^(+)Th1细胞表达IL-18和IL-18Rα进而参与AR发病。

苹果过敏原组分蛋白致敏的致敏特征及护理干预研究

目的我国苹果过敏的致敏情况研究非常缺乏。本研究拟分析苹果过敏原的组分蛋白的致敏情况,并对苹果过敏的护理干预效果进行研究。方法40例可疑苹果过敏受试者纳入研究,分为苹果耐受组(n=19)和过敏组(n=21)。所有受试者均接受ImmunoCAP过敏原sIgE检测,评估苹果及其主要致敏蛋白组分(Mal d 1和Mal d 3),以及Bet v 2的sIgE水平。分析不同组分在苹果过敏组和耐受组的差异,并对苹果过敏组进行护理干预。结果苹果sIgE阳性率为70%,Mal d 1的阳性率为85%,Mal d 3为20%,Bet v 2的阳性率为35.0%。97.5%的患者至少1种苹果过敏原组分阳性。60%的患者仅对1种苹果过敏原组分过敏,35%对2种组分过敏,2.5%的患者对所有3种组分均过敏。其中50%对Mal d 1单一过敏,而10%对Bet v 2单一过敏。Mal d 3与苹果过敏原sIgE呈正相关(r=0.944,P<0.001)。与耐受组相比,苹果过敏组中Mal d 1的sIgE水平显著升高(P<0.001),Bet v 2 sIgE水平显著降低(P=0.036)。ROC分析显示,Mal d 1 sIgE水平在诊断苹果过敏时的曲线下面积(AUC)为0.902,95%CI 0.789~1.000,P<0.001,cut-off值为1.61kUA/L(灵敏度为93.8%,特异性为75.0%)。对苹果过敏组21例患者进行充分护理教育后,患者病情知晓率达100%,必要忌口联合对症治疗后症状控制率达到90.4%(19/21),目前所有患者在长期随访中。结论Mal d 1是苹果过敏的主要组分,是诊断苹果过敏的最佳指标,苹果、Mal d 3和Bet v 2的sIgE对诊断苹果过敏的价值并不显著。对苹果过敏患者进行有效的护理干预可以提高治疗效果。

IgA缺乏型过敏性输血反应及防治策略

IgA缺乏型过敏性输血反应(allergic transfusion reactions,ATRs)常发生于产生抗-IgA的IgA缺乏症患者,当这些患者输注含有IgA的血液产品时,可导致过敏性输血反应,严重者可致死。我们对IgA缺乏症(immunoglobulin A deficiency,IgAD)的临床表现及影响因素,以及IgA缺乏导致的过敏性输血反应发病机制、实验室检测和防治策略进行综述,从而提高医务工作者对IgA缺乏型过敏性输血反应的认识和防范意识。

试从“卫气津营血精神”七纲论治过敏性紫癜

“卫气津营血精神”七纲理论由四川省十大名中医吴康衡教授在“卫气营血”理论基础上提出,系统总结了外感温热类疾病各个阶段的诊治方药。过敏性紫癜是儿科常见疾病之一,临床常表现出类似于温病的证候特点。本文探讨了以“卫气津营血精神”七纲理论治疗过敏性紫癜的方法,依据过敏性紫癜各个阶段的临床表现,将过敏性紫癜治法分为解表透卫、清热泻脾、凉润生津、清热透营、清热凉血、滋阴生精、补气养神七类,常用木贼宣痹汤、泻黄散、竹叶石膏汤、清营汤、五草五炭汤、加减复脉汤、清心莲子饮等方剂加减,进一步丰富“卫气津营血精神”七纲理论的临床应用。

糖蛋白过敏原N-糖链与过敏的相关性研究

糖蛋白是一种含有寡糖链的蛋白质,糖链与蛋白质之间以共价键相连。N-糖蛋白为常见过敏原之一,主要来源于食物、吸入物、昆虫毒素等,能够引起过敏反应。N-糖蛋白过敏原的N-糖链结构影响过敏原与IgE的结合,影响抗原提呈细胞(APC)对过敏原的识别和提呈。本文在介绍与过敏相关的N-糖蛋白、常见N-糖蛋白过敏原的N-糖链结构及与过敏相关的糖基化酶的基础上,进一步分析过敏原N-糖链影响过敏的机制,为临床预防与治疗过敏性疾病提供新的思路。

橘红桔梗植物饮品对小鼠急性肺损伤和支气管哮喘的预防作用研究

目的:观察橘红桔梗植物饮品(TPC)对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)和卵清蛋白诱导的小鼠支气管哮喘的影响,并分析其作用机制。方法:(1)将48只雄性C57BL/6小鼠随机分成空白对照组、ALI组及低、中、高剂量(0.8、1.6和3.2 mL/d)TPC组,灌胃给药,每日1次,持续1周及地塞米松阳性对照组。采用脂多糖气管内滴注建立小鼠ALI模型。采用HE染色法观察肺组织病理变化;流式细胞分析仪检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞比例;ELISA检测BALF中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和IL-10含量;同时检测肺组织匀浆中的髓过氧化物酶(MPO)活性及肺组织中I-κBα和NF-κB的蛋白含量。(2)将48只雌性C57BL/6小鼠随机分成空白对照组、支气管哮喘组及低、中、高剂量(0.8、1.6和3.2 mL/d)TPC组,灌胃给药,每日1次,持续1周及地塞米松组。采用卵清蛋白腹腔注射致敏和鼻内刺激建立支气管哮喘小鼠模型。采用HE染色和甲苯胺蓝染色法观察肺组织病理变化;ELISA检测小鼠血清中IgE、IL-5和IL-13含量。结果:与空白对照组相比,ALI组小鼠肺组织病理学显示明显炎症细胞浸润;BALF中的中性粒细胞比例、MPO活性及TNF-α、IL-1β和IL-6含量显著升高(P<0.05),IL-10含量降低(P<0.05);Western blot结果显示肺组织中I-κBα蛋白含量降低,磷酸化NF-κB的蛋白含量升高(P<0.05)。与ALI组比较,高剂量TPC组和地塞米松组小鼠肺组织病理炎症明显减轻;BALF中的中性粒细胞比例、髓过氧化物酶活性及TNF-α、IL-1β和IL-6含量明显降低(P<0.05),IL-10含量升高(P<0.05);肺组织中I-κBα蛋白含量升高,磷酸化NF-κB的蛋白含量降低(P<0.05)。与空白对照组比较,支气管哮喘组小鼠肺组织病理有明显的炎症细胞及肥大细胞浸润;小鼠血清中的IgE和IL-13含量升高(P<0.05)。与支气管哮喘组相比,高剂量TPC组和地塞米松组小鼠肺组织病理炎症细胞及肥大细胞减少;小鼠血清中的IgE含量下降(P<0.05)。地塞米松组小鼠IL-13含量下降(P<0.05)。结论:TPC能在一定程度上预防脂多糖诱导的小鼠ALI,减轻支气管哮喘模型小鼠的过敏反应,其机制与抑制炎症反应、减少肥大细胞浸润和IgE生成有关。

人参皂苷Rd通过下调DRP1介导的线粒体分裂缓解哮喘

目的:探讨人参皂苷Rd通过发动蛋白相关蛋白1(DRP1)介导的线粒体分裂缓解蟑螂提取物(CRE)诱导的哮喘小鼠气道炎症的分子机制。方法:动物(BALB/c小鼠)和细胞(人气道上皮BEAS-2B细胞)实验均设置对照组、模型组(CRE组)、CRE+低剂量人参皂苷Rd组、CRE+高剂量人参皂苷Rd组和CRE+地塞米松组。利用HE染色法观察肺组织病理改变;ELISA及流式细胞术检测辅助性T细胞(Th1/Th2)因子水平;Western blot和荧光染色法检测活性氧(ROS)产生、线粒体分裂蛋白及线粒体形态。结果:人参皂苷Rd显著减轻CRE诱导的小鼠气道周围炎症细胞浸润,降低血清总免疫球蛋白E(IgE)和CRE特异性IgE水平(P<0.05),以及支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞比例(P<0.05),纠正Th1/Th2失衡(P<0.05)。人参皂苷Rd还可降低模型小鼠肺组织和CRE诱导的BEAS-2B细胞中DRP1、p-DRP1(Ser616)和线粒体分裂蛋白1(FIS1)水平(P<0.05),改善线粒体形态,抑制ROS产生。结论:人参皂苷Rd通过下调DRP1介导的线粒体分裂,减轻CRE诱导的哮喘气道炎症。本研究对人参皂苷Rd在哮喘模型中的免疫药理作用提出了新的见解。

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-活性氧氧化应激信号通路在过敏反应中的作用及抗氧化剂干预实验研究

目的:探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(Noxs)-活性氧(ROS)氧化应激通路在过敏反应中的作用,并考察抗氧化剂对过敏反应的影响。方法:体外建立肥大细胞脱颗粒模型,将细胞分为空白组、阳性对照组[培养基中含有Compound48/80 (C48/80) 100μmol/L]和抗氧化剂组[培养基中含有C48/80 100μmol/L+二苯基氯化碘盐(DPI) 5μmol/L]。利用酶联免疫吸附试剂盒检测各组细胞胞内β氨基己糖苷酶(β-Hex)、组胺、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物(LPO)及炎症介质白细胞介素-4(IL-4)和IL-6水平。利用荧光染色及流式细胞仪检测胞内活性氧(ROS)水平。采用Western blot检测三组细胞中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1、2、3、4(Nox1、Nox2、Nox3、Nox4)蛋白表达情况。结果:C48/80诱导大鼠原代嗜碱性白血病细胞(RBL-2H3)释放β-Hex、组胺及炎症介质IL-4、IL-6,RBL-2H3细胞脱颗粒过程中胞内的SOD含量呈下降趋势,而LPO及ROS浓度升高。利用DPI处理脱颗粒的RBL-2H3细胞后,可以抑制胞内ROS水平,同时升高胞内SOD含量,降低LPO浓度,并且抑制了β-Hex、组胺、IL-4及IL-6的释放。当肥大细胞脱颗粒时,Nox1-4的蛋白表达均呈上升趋势,抗氧化剂DPI可以抑制这一反应。结论:阻断Noxs-ROS信号通路可以抑制过敏反应,抗氧化剂的应用为抗过敏提供了新的治疗思路。

番茄红素调节AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路对过敏性结膜炎小鼠的治疗作用

目的基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨番茄红素(LYC)减轻过敏性结膜炎小鼠炎症的作用机制。方法利用卵清蛋白(OVA)致敏建立AC小鼠模型。将BALB/c小鼠分为正常组(NC组)、模型组(AC组)、LYC低组(5 mg/kg)、LYC中组(10 mg/kg)、LYC高组(20 mg/kg),LYC高+AMPK抑制剂(CC)组(0.2 mg/kg)。观察小鼠眼周情况,采用苏木精-伊红染色观察结膜组织病理学变化,采用流式细胞仪检测脾脏中Th17、Treg细胞比例,采用酶联免疫吸附试验试剂盒检测血清中炎症因子、免疫球蛋白(Ig)E、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)水平,采用蛋白质印迹法检测结膜组织AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路蛋白水平。结果与NC组比较,AC组小鼠眼部出现结膜充血、红肿、溢泪等现象,结膜组织嗜酸性粒细胞较多,Th17细胞比例、白细胞介素(IL)-17、IL-6、IgE、TSLP、磷酸化AMPK(p-AMPK)、核NF-κB p65水平升高,Treg细胞比例、IL-10、转化生长因子(TGF)-β、SIRT1水平降低(P<0.05)。与AC组比较,LYC中、高组小鼠眼部结膜充血、水肿、溢泪等明显减轻,结膜组织嗜酸性粒细胞较少,脾脏中Th17/Treg细胞比例趋向平衡,IL-17、IL-6、IgE、TSLP、核NF-κB p65水平降低,IL-10、TGF-β、p-AMPK、SIRT1水平升高(P<0.05)。CC可抵消LYC对AC小鼠的上述保护作用。结论LYC可减轻AC小鼠的过敏和炎症反应,维护机体免疫平衡,其机制可能与促进AMPK/SIRT1通路活化,抑制NF-κB通路活化有关。

UC-BSCs来源的外泌体对系统性红斑狼疮患者Th17/Treg平衡的影响

目的探究脐带血间充质干细胞(UC-MSC)来源的外泌体对系统性红斑狼疮(SLE)的免疫调节作用及其机制。方法分离SLE患者和健康对照人群外周血中的外周血单个核细胞(PBMC),使用UC-BSCs来源的外泌体处理SLE来源的PBMC,通过qRT-PCR分析不同处理后细胞中相应因子的mRNA水平,通过流式细胞术分析Th17/Treg含量,通过体外实验和生物信息学分析鉴定miR-19b与KLF13的靶向结合。结果相较于对照组人群,SLE患者来源的PBMC细胞中Th17亚群比例升高,同时Treg亚群比例降低,miR-19b水平明显降低且与KLF13水平负相关;体外实验显示,UC-BSC来源的外泌体处理可以调节Th17/Treg平衡,抑制炎症因子的表达。UC-BSC来源的外泌体能提高miR-19b水平进而靶向抑制KLF13表达。结论在SLE患者中,miR-19b与KLF13表达失调,而UC-BSC外泌体可以调节SLE患者Th17/Treg细胞平衡和炎症因子表达,这一过程可能与miR-19b/KLF13的相互作用有关。